目的:探讨一种更加优化的体外培养海马神经元及进行形态学观察的方法,为阿尔茨海默病(A D )神经突触的研究奠定基础。方法选择新出生后0~1 d的C57BL/6J小鼠,断头取双侧海马,采用低浓度胰酶消化加机械分离的方法,使用无血清培养...目的:探讨一种更加优化的体外培养海马神经元及进行形态学观察的方法,为阿尔茨海默病(A D )神经突触的研究奠定基础。方法选择新出生后0~1 d的C57BL/6J小鼠,断头取双侧海马,采用低浓度胰酶消化加机械分离的方法,使用无血清培养基进行神经元原代培养,培养17 d后利用磷酸钙共沉淀法进行绿色荧光蛋白(GFP )的转染,于荧光显微镜下观察海马神经元和树突棘形态特征。结果采用此方法进行的海马神经元原代细胞培养,神经元生长良好,转染GFP后可以看到清晰的轴突/树突和树突棘突等典型的神经细胞结构特征。结论此技术方法所培养的海马神经元生长良好,磷酸钙共沉淀法转染GFP后能够更加清晰地观察到神经元及树突棘的形态特征。展开更多