MTT比色法评价掺锶羟磷灰石固溶体细胞毒性

利用 MTT比色法评价掺锶羟磷灰石固溶体 (简称锶磷灰石 )的细胞毒性。对自行合成含锶量克分子数比例分别为 1%、5 %、10 %、10 0 %的掺锶羟磷灰石用 MTT比色法进行细胞毒性测试。结果表明不同含锶量锶磷灰石的细胞毒性评级均为 1级。提示锶磷灰石无明显细胞毒性 。

锶磷灰石体外细胞毒性研究

目的评价锶磷灰石的细胞毒性。方法用增殖度法、MTT比色法、流式细胞仪法评价锶磷灰石的细胞毒性,锶磷灰石掺锶量分别为0%、1%、5%、10%、100%。结果所有不同掺锶量锶磷灰石均无明显细胞毒性表现,但随着掺锶量的增加细胞毒性有逐渐明显的趋势。流式细胞仪检测表明,1%、5%锶磷灰石的细胞毒性与纯羟磷灰石无明显差异。结论锶磷灰石具有良好的细胞亲和性;掺锶量为10%、100%的锶磷灰石具有弱细胞毒性。

电脑比色仪在特殊色牙患者烤瓷修复中的应用

目的:评价ShadeEye-NCC电脑比色仪在特殊色牙患者烤瓷修复中的作用。方法:选择合适病例用电脑比色仪测色,控制加工过程中的其他影响因素,由医师和患者分别对修复效果进行主观评价。结果:患者和医师对修复体的满意率分别为83.7%和81.4%,无显著差异。结论:电脑比色仪可以为烤瓷修复提供良好的底色参照。

掺锶对羟磷灰石细胞毒性的影响

探讨掺锶对羟磷灰石细胞毒性的影响。合成含锶量分别为1%、5%、10%、100%的锶磷灰石陶瓷,应用MTT法及流式细胞仪法评价其细胞毒性,以纯羟磷灰石和空白培养液作对照。各实验组细胞毒性评级均为0级或1级,无明显细胞毒性,但随着掺锶量的增加细胞毒性有增大趋势;流式细胞仪法证实,锶羟磷灰石无显著细胞毒性。锶磷灰石没有明显细胞毒性,掺锶对羟磷灰石细胞毒性影响较小,锶磷灰石可能具有良好的生物相容性。

猪牙乳头细胞的体外培养及生物学特性研究

目的:培养新生猪的牙乳头细胞,探讨其传代细胞的生物学特性。方法:选择刚出生1￣3d的新生猪,取出磨牙胚,分离牙乳头,用酶消化法培养猪牙乳头细胞,并用波形丝蛋白和细胞角蛋白鉴定细胞来源。观察细胞的生长规律,通过免疫组化染色检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、牙本质涎蛋白(DSP)等的表达情况。结果:猪牙乳头细胞在体外培养时生长良好,波形丝蛋白染色阳性而细胞角蛋白染色阴性,细胞中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、DSP呈阳性表达。结论:通过酶消化法,可以体外扩增培养猪牙乳头细胞,细胞为间充质来源,其传代细胞在合成胶原及DSP的能力上与体内牙乳头细胞相似,提示猪牙乳头细胞可能具备作为牙髓-牙本质复合体再生研究种子细胞的潜能。

流式细胞仪法评价锶磷灰石细胞毒性

目的 尝试用流式细胞仪法探讨锶磷灰石的细胞毒性。方法 用流式细胞仪测定锶磷灰石浸提液作用细胞后细胞群落的DNA增殖指数。结果 增殖指数随着材料掺锶量的增加而增大 ,其中含锶10 0 %的纯锶磷灰石增殖指数最大、1%锶磷灰石的增殖指数最小。结论 随掺锶量增加后锶磷灰石的细胞毒性也略增大。

钟状期牙胚来源的猪牙乳头细胞培养

目的观察新生猪牙胚的发育情况并培养猪牙乳头细胞,对传代细胞的生物学特性进行研究。方法选择3日龄新生猪,分离牙胚,通过组织学、免疫组化等研究牙胚的发育情况。分离牙乳头组织,酶消化法培养牙乳头细胞并鉴定;观察细胞生长特性,通过牙本质涎蛋白、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原免疫组化染色比较体内外细胞的生物学性状。结果新生猪磨牙尚未萌出,其中第二磨牙为典型的钟状期牙胚。分离培养的牙乳头细胞在体外生长良好,经鉴定细胞来源于间充质组织,免疫组化表明,牙本质涎蛋白和Ⅰ型胶原表达阳性,Ⅲ型胶原表达阴性。结论新生猪可以提供处于钟状期的牙胚,通过酶消化法可成功培养猪牙乳头细胞,第3代细胞的生物学特性与体内细胞有一定相似性,可用于进一步深入研究。

连续培养猪牙乳头细胞的免疫组化分析

目的探讨连续培养的牙乳头细胞的功能学特征。方法连续培养钟状期猪牙乳头细胞,应用间接法免疫组化检测各代细胞的牙本质涎蛋白(DSP)、核心结合因子1(Cbfa1)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)、骨桥蛋白(OPN)、骨粘蛋白(ON)、骨钙蛋白(OCN)等的表达情况,并以第4代猪骨髓基质细胞及人成纤维细胞作为对照组。结果免疫组化结果可见连续培养的各代猪牙乳头细胞均表达DSP、ColⅠ及ON,所有各代猪牙乳头细胞均未见OCN表达,ColⅢ只在第1代的少量细胞中有表达,Cbfa1及OPN在各代细胞中均有表达。结论体外培养的猪牙乳头细胞具有旺盛的分泌能力,可能具有形成钙化组织的潜能和形成牙本质样结构的可能性。

牙齿组织工程种子细胞的研究现状

牙齿发育形成的机理复杂,其调控机理是一个由许多基因、细胞因子共同参与的非常复杂、精细的分子网络。随着近年来组织工程学的飞速发展,牙齿组织工程的研究也逐渐起步,目前进行牙齿组织工程研究多数局限于牙齿部分组织。寻找形成牙齿的前体细胞,获得稳定可靠的种子细胞来源是组织工程重建牙齿的先决条件。牙胚,牙乳头,牙髓,甚至脱落的乳牙里都存在形成牙齿的前体细胞。

纳米载银无机抗菌剂对义齿基托树脂细胞毒性的影响

目的研究纳米载银无机抗菌剂对义齿基托树脂细胞毒性的影响。方法纳米载银无机抗菌剂FUMAT T200-4，按0％（对照组）、1％、2％、3％、4％、5％、7％、10％（V／V）比例添加在加热固化型义齿基托树脂中并分组，采用MTT法检测各组基托树脂对传代培养的小鼠成纤维细胞L-929的细胞毒性，比较抗菌剂添加比例对基托树脂细胞毒性的影响。结果作用于小鼠成纤维细胞后2、4、7d，各抗菌剂添加比例组基托树脂毒性反应为0级或1级，小鼠成纤维细胞相对增殖率分别为93．4％～105．9％、114．2％～147．1％和131．8％～148．8％。结论添加低浓度纳米载银无机抗菌剂FUMAT T200-4（添加比例≤10％）的基托树脂，无明显细胞毒性，具有较好的生物安全性。

猪牙乳头细胞与β-磷酸三钙支架构建牙髓牙本质复合体样结构

目的:牙乳头细胞是牙髓细胞、牙本质细胞的前体细胞,应用组织工程方法探讨以猪牙乳头细胞为种子细胞构建牙髓牙本质复合体的可行性。方法:实验于2004-03/2005-11在上海市口腔医学重点实验室完成。以第1代猪牙乳头细胞为种子细胞与β-磷酸三钙为支架材料复合后接种在裸鼠皮下。移植在裸鼠皮下的β-磷酸三钙支架与牙乳头细胞复合物为实验组,同期移植牙胚作为阳性对照组,同期植入的空白β-磷酸三钙支架材料作阴性对照组。每组3个样本,在同一裸鼠皮下植入。8周后取材进行组织学(苏木精-伊红染色及Goldner'三色法染色)、牙本质涎蛋白免疫组织化学及透射电镜检测。结果:①移植物组织学切片显示在支架材料孔隙内形成了牙髓牙本质复合体样结构,由牙本质基质样物质、前期牙本质样物质及牙髓样组织组成。在牙本质样物质内部可见少量牙本质小管,牙髓样组织外层细胞较为密集且单层排列,表现出成牙本质细胞样细胞的特征。②免疫组织化学染色显示,在邻近成牙本质细胞样细胞周围的前期牙本质内牙本质涎蛋白呈阳性表达。③透射电镜结果显示,实验组局部可见牙本质小管样结构。结论:以猪牙乳头细胞为种子细胞、β-磷酸三钙为支架材料,成功构建出牙髓牙本质复合体样结构。

不同含锶量的掺锶羟磷灰石陶瓷细胞毒性评价

目的 研究不同含锶量的掺锶羟磷灰石陶瓷的细胞毒性。方法 通过溶液反应方法制备含不同浓度锶元素的羟磷灰石陶瓷 ,采用细胞相对增殖率法和细胞形态直接观察法测定细胞与材料作用后的生长情况。结果 不同含锶量的陶瓷材料其细胞相对增殖率均在 94 %～ 10 2 %之间 ,细胞毒性级为 0级或 1级 ;随着材料中掺锶量的增加其细胞毒性存在略微增大的趋势。

掺锶羟磷灰石固溶体含锶量对骨组织融合能力的影响

评价不同掺锶量羟磷灰石固溶体材料锶含量与生物降解性和骨组织融合能力之间的影响关系.5组掺锶羟磷灰石固溶体材料锶克分子含量分别取:0%,1%,5%,10%和100%,烧结体植入部位为家兔胫骨;手术后分不同时段处死动物,通过四环素荧光标记和电镜扫描方法考察植入材料与骨组织界面的生物反应状况.实验结果表明5组试样材料都显示了良好的组织相容性和骨结合性,其中锶含量为5%组和10%组试样显示较强的骨引导作用,呈现出很明亮的四环素荧光带以及明显的降解现象.这说明在羟磷灰石晶体中掺入适量的锶元素可以明显改善材料的生物相容性、骨引导性、生物降解性以及骨融合性;掺锶羟磷灰石固溶体不仅可以增强新骨的生成能力,而且可以延长新骨的生成时间和增加新骨的生成量.

体外培养人骨髓基质干细胞诱导为成骨细胞的超微结构变化

目的通过透射电子显微镜对体外培养过程中不同代次的人骨髓基质干细胞的超微结构的观察分析,进一步了解骨髓基质干细胞向成骨细胞分化的过程。方法将临床自愿捐献骨髓的无血液系统疾病患者的骨髓体外分离培养诱导,分别在原代,1代,2代,3代细胞达到融合后,2.5%戊二醛4℃原位固定1h后,送透射电子显微镜检测,观察细胞内细胞器、细胞间质及钙盐沉积状况,免疫组化检测Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶染色及VonKossa染色,放免法测定骨钙素分泌情况。结果透射电镜显示,1代、2代、3代的骨髓基质干细胞超微结构有明显变化,第1代细胞内出现大量的溶酶体;第2代细胞内粗面内质网、高尔基体、线粒体增多;第3代细胞外基质中出现排列规律的胶原纤维以及初期和成熟的钙化基质。免疫组化I型胶原表达第3代细胞达到最强;碱性磷酸酶染色第2、3代ALP染色蓝紫色颗粒加深、增多;放免法测定骨钙素分泌第3代细胞达到最强。结论骨髓基质干细胞经过体外培养诱导从原代到第3代逐步向成骨细胞方向分化,具备成骨细胞的特征。由透射电镜反映出的细胞器及细胞外间质的变化为进一步探讨骨髓基质干细胞的分化机制提供了一定的实验依据。

不同含锶量的掺锶羟磷灰石固溶体机械性能评价

目的 研究不同含锶量的掺锶羟磷灰石固溶体的机械性能。方法 通过溶液反应方法制备五种含不同克分子锶元素浓度 (Sr/ (Sr+Ca) =0 ,1% ,5 % ,10 % ,10 0 % )的羟磷灰石固溶体 ,高温烧结 ;测定压缩强度、间接拉伸强度和努氏显微硬度。结果 与纯羟磷灰石相比 ,含 5 %克分子锶元素浓度的固溶体材料机械性能的提高最为显著 ,特别是显微硬度约提高 92 %。结论 锶元素的掺入可以提高羟磷灰石材料的机械性能 ,尤其在硬度方面的提高更为明显。

97例CAD/CAM氧化锆基底冠桥修复体制作效果评价

目的评价运用CAD/CAM技术制成的氧化锆修复体的制作效果,探讨影响效果的相关因素。方法选择97例CAD/CAM氧化锆冠桥基底修复的临床病例,观察修复体制作的过程,分析其边缘适合性、颜色、固位、折断或破损情况,综合评价制作效果。以70例贵金属烤瓷冠作为对照组进行研究。结果 97例修复体的制作过程中,发现有1例在切削加工时从包埋蜡中脱落,1例上前牙4单位桥在完成烧结后有小幅度翘动,1例上前牙3单位桥体在切削过程中破裂,上述3例修复体通过返工重做解决问题。所有制作的氧化锆支架,通过饰面瓷的堆塑可使修复体获得较好的美观效果。两种修复方式在边缘适合性、固位和破损率上均无统计学差异(P>0.05),而CAD/CAM氧化锆基底冠的颜色良好率要优于贵金属基底冠(P<0.05)。结论高强度氧化锆全瓷修复体的制作效果能符合临床要求,可以考虑用于全瓷修复。

异种脱钙骨兔体内成骨能力的实验研究

目的制备猪脱钙骨,将兔骨髓间质干细胞与猪脱钙骨支架形成细胞-生物材料复合物,回植入兔皮下观察该材料体内成骨能力。方法梯度离心法分离兔骨髓基质干细胞,向成骨细胞方向诱导培养。将猪颅骨用氯仿丙酮及过氧化氢处理后冻干保存,钴60照射消毒待用。制备细胞-生物材料复合物后植入兔皮下,分别在4w,8w,12w取材,同期大体观察及组织学检测,切片HE染色。结果倒置相差显微镜下见细胞在材料孔隙间大量生长增殖、交叠覆盖;扫描电镜观察细胞贴附于材料表面并向孔隙内生长。组织学检测4w实验组见多数骨小梁表面有细胞被覆,有较多小血管形成。8w、12w实验组见新生骨小梁有新生骨组织形成,见成骨细胞和破骨细胞并存。结论兔骨髓间质干细胞与猪脱钙骨有良好的生物相容性,在该支架材料上细胞增殖分化并具有一定的体内成骨能力。

可摘局部义齿支架用钴铬合金的腐蚀相关因素

可摘局部义齿是牙列缺损的重要修复方式,钴铬合金作为临床上应用最广泛的可摘局部义齿支架材料,其生物安全性也引起临床医师和患者的关注。本文归纳了用于可摘局部义齿支架的钴铬合金腐蚀所涉及的相关因素、机制,探讨并分析提高其耐腐蚀性和生物相容性的可行性,使之更好地服务于临床。