抗旋毛形线虫单克隆抗体的制备和抗原定位研究

作者用旋毛形线虫感染期幼虫免疫的BALB/c小鼠脾细胞,与SP2/0骨髓癌细胞进行杂交。融合率92.1％,抗体阳性率16.6％,通过克隆化已初步建立分泌抗幼虫可溶性抗原的单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞18株。采用间接过氧化物酶法,以证实能特异地识别此虫感染期幼虫抗原组分的3株McAb定位抗原,揭示相关抗原组分主要位于幼虫的角度层、杆状体,其次为肠道。

“互联网+”背景下高校创客文化培育路径探析

"创客"、"互联网+"等词进入政府工作报告后,创业氛围日益浓郁,但当前高校的创新创业教育在氛围营造、师资团队、课程体系等方面仍存在较多问题。创客文化与创新创业教育在目标定位、教学模式、校园文化等方面高度一致,结合互联网思维,加强"互联网+"背景下的创客文化培育已成为当务之急。高校应从构建载体、完善机制、优化课程、增强师资等方面入手加强创客文化的培育。

党内民主建设视角下的高职院校党务公开长效机制探索

实施党务公开,推进高职院校党内民主,探索建立高职院校党务公开的长效机制,是高职院校党组织永葆生机活力的重要举措。本文以浙江旅游职业学院为具体实践案例,分析了高职院校在党务公开中的主要做法和面临的问题,并提出了建立高职院校党务公开长效机制的对策。

以学生活动为载体推进学生党建工作——浙江旅游职业学院烹饪系建设基层服务型党组织的探索与实践

随着政府职能逐渐转变,地方各级党组织也不断探索,在坚持党的领导地位前提下,积极拓展党组织新的关怀、激励、服务功能。高校作为党和国家培养社会主义事业建设者和接班人的前沿阵地,也应引入服务型党组织的理念,构建高校党的基层组织服务平台,充分发挥其服务党员、服务师生的作用。文章以浙江旅游职业学院烹饪系学生党支部为例,以学生活动为载体,对建设高校基层服务型党组织进行了探索与实践。

犬弓首线虫幼虫培养、排泄分泌抗原的制备和分析

本文报道犬弓首线虫幼虫体外培养、排泄分泌抗原(TES抗原)的制备和分析结果。采用自行研制的幼虫分离器分离人工孵化的犬弓首线虫第二期幼虫,用Eagle's基础培养基培养幼虫,并用饱和硫酸铵盐析法从培养液中提取TES抗原均取得满意结果。用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析显示此抗原,可见到7条蛋白质区带。免疫双扩散表明本抗原与本虫感染的免血清(1:32)作用呈阳性反应。免疫电泳显示至少含有四条沉淀线。转移电泳免疫识别显示本抗原含有5～7个血清学抗原成份。

对小区公用配电设施产权的思考

随着国家电网公司一户一表工作的深入开展，目前城市里的新建小区业主几乎都要求实行一户一表，而对于小区修建过程中由开发商新建的小区公用部分的配电设施，国家在以前一直都没有明确的规定，地方上的做法很多都是由政府下文件明确规定；由开发商将新建小区公用部分的配电设施无偿移交给供电企业。这种做法在《物权法》没有出台之前，完全是一种政府行为，

供电安全管理的法律风险防范

2005年10月2日下午，龙某与朋友一起到重庆永川市双石镇某村李某承包的鱼塘钓鱼时，鱼杆触及跨过鱼塘的产权属于重庆市电力公司永川供电局所有的10千伏高压线，经抢救无效死亡。事故发生后，其家属诉至永川市人民法院要求永川供电局、鱼塘老板李某赔偿龙某死亡的各项费用合计6万元。

基于行政文化视角的行政效率提升路径研究

行政文化是行政管理研究的重要内容和独特视角。在我国,大力推进行政文化建设,将会从价值观念、行政思想、行政意识、行政道德等层面有效提升行政队伍的整体素质,从而进一步改进政府管理方式,转变政府职能,提高行政效率和执政水平,推动我国行政改革健康、有序发展,促进我国经济的持续发展和社会的繁荣、稳定。

旋毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物中特异性抗原的分析

用胃蛋白酶消化旋毛虫感染鼠肌肉，获得肌肉期幼虫。３７℃，用ＲＰＭＩ１６４０培养基培养幼虫，控制虫体死亡率低于５％。每２４ｈｒ收集上清培养液，即为分泌排泄抗原（ＥＳＡ）。共获１０天次ＥＳＡ（ＥＳＡ＿（１ｄ～１０ｄ））。应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及氨银染色技术进行蛋白组份分析显示：各天次ＥＳＡ的主要蛋白区带数及位置基本相同，分子量范围在９６～１４ｋｄ，主带３条，分别为４８，５３和５８ｋＤ蛋白组份。应用Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ技术进行免疫识别分析显示：旋毛虫病人血清对各天次ＥＳＡ的免疫识别结果相似，识别的抗原组份有７～８条区带，均有上述３条主带。正常人、蛔虫病人和囊虫病人血清均未能识别任何区带。肺吸虫病人血清能识别２～３条抗原区带，但其分子量位于２４～１４ｋＤ之间。血吸虫病人血清也能识别２～３条抗原区带，其分子量位于１８～１４ｋＤ之间。结果表明：在严格控制死亡虫体抗原污染条件下，较长期内培养肌肉期幼虫获得的各天次ＥＳＡ，其成份和免疫识别效果基本无改变，各天次ＥＳＡ中的４６～５８ｋＤ蛋白均具有良好的特异性。

钩虫感染的免疫

钩虫感染的免疫张仁刚川北医学院寄生虫学教研室南充６３７００７冯瑞元华西医科大院寄生虫教研室成都６１００４１钩虫感染引起的贫血是一些非洲和亚洲国家的主要公共卫生问题。我国经过多年的积极防治，１９９１年调查南方各省区农村人体钩虫感染仍高达２４．３－７７．...

旋毛虫新生蚴免疫研究概况

随着寄生虫免疫学的进展,对旋毛虫肌肉期幼虫及成虫的免疫研究的不断深入,开展对新生蚴的免疫研究已成为寄生虫学者广泛关注的课题。在1970年Dennis 建立体外培养成虫获得了大量新生蚴的方法以来的近十多年里,大量的研究表明,新生蚴在宿主体内诱导对旋毛虫的免疫反应中起了重要的作用。Murrell 认为对新生蚴的免疫比对肠期成虫的免疫更为重要。本文就新生蚴的免疫研究综述如下。

兔抗旋毛虫抗体动态的研究

对旋毛虫感染后宿主体内抗体产生及消长规律的认识,有助于解决免疫试验能否对旋毛虫病作出早期诊断及判断是否现症感染。目前对抗肌肉期幼虫虫体可溶性抗原和抗旋毛虫表面抗原抗体出现的时间过程,国内外均有报道,但对三期虫体可溶性抗原的抗体动态观察还未查见有关资料。本文采用比 ELISA 敏感4～16倍的 ABC—ELISA,对抗旋毛虫各期的抗体动态进行了实验研究。

旋毛虫幼虫排泄分泌抗原中48kD蛋白的化学及免疫化学分析

用生理盐水培养旋毛虫肌肉期幼虫，２４小时后收集上清，从中获得排泄分泌抗原（ＴｓＬ－ＥＳＡ）．经用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ，过碘酸银染，Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ，单克隆抗体２Ｇ８Ｂ１０Ａ３、２Ｅ５Ｆ１１Ａ３识别和酶免疫组化定位等方法分析ＥＳＡ中４８ｋＤ蛋白组份．结果显示该蛋白为糖蛋白，能被２Ｅ５Ｆ１１Ａ３及２Ｇ８Ｂ１０Ａ３所识别，并定位于旋毛虫肌肉期幼虫角皮和杆状体．而２Ｅ５Ｆ１１Ａ３及２Ｇ８Ｂ１０Ａ３均不能识别犬弓首线虫幼虫、人钩蚴、蛔虫幼虫可溶性抗原及肺吸虫、姜片虫、血吸虫成虫可溶性抗原．实验表明４８ｋＤ蛋白组份为旋毛虫特有，是一种特异性较强的抗原．

旋毛虫新生蚴抗原的化学及免疫化学分析

作者采用SDS-PAGE分离旋毛虫新生蚴虫体可溶性抗原,然后分别用戊二醛-氨银、过碘酸-氨银、耐尔氏蓝液等染色,分析该抗原蛋白质性质和测定分子量;用免疫印迹试验分析抗原的免疫化学性质。结果显示:旋毛虫新生蚴虫体可溶性抗原至少含40个蛋白质组分,其中28个为糖蛋白,9个为脂蛋白;有6个靶抗原组分,均为糖蛋白,其中分子量41.5、40、29.5、25、11kd组分及18kd组分分别为旋毛虫虫种及新生蚴期特异的靶抗原。

旋毛虫幼虫排泄分泌抗原用于诊断人旋毛虫病的可行性探讨

作者将自行分离制备的旋毛虫肌肉期幼虫２４小时排泄分泌抗原，用间接ＥＬＩＳＡ共检测３４份旋毛虫病人血清，３２份为阳性，阳性率９４％．而８２份正常人血清均为阴性反应。且不与蛔虫病人、囊虫病人血清发生交叉反应，但与肺吸虫及血吸虫病人血清发生交叉反应。经用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及铵银染色后显示，该抗原含有１１种蛋白组份，分子量介于９６ｋＤ－１７．６ｋＤ之间。有３条主带，分子量分别为４０、４８、５３ｋＤ。酶联免疫印迹试验表明旋毛虫病人血清能特异识别分子量为４８ｋＤ蛋白。而肺吸虫及血吸虫病人血清所能识别的区带均小于４０ｋＤ。该结果表明４８ｋＤ蛋白抗原组分在人旋毛虫病上具有潜在诊断价值，而酶联免疫印迹试验不失为一种可行的人旋毛虫病的诊断方法。

旋毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物中46-58kD蛋白的纯化及其在诊断中的应用

本研究以常规ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和电洗脱技术相结合，分离纯化旅毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物（ＴＳＬＩ－ＥＳ）中４６－５８ｋＤ的蛋白组份，并用于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断旋毛虫病．检测结果：旋毛虫病人血清３４份，阳性３２份，阳性反应率为９４．１２％；正常人血精１００份未发现假阳性；对蛔虫病人（１２份）、囊虫病人（１５份）、血吸虫病人（１５份）及肺吸虫病人（２０份）血清亦无交叉叵应出现；建立的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ易于操作．重复性和稳定性较好。用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ比较纯化抗原和ＴｓＬ１－ＥＳ的诊断效果，结果经卡方检验后显示：用纯化抗原和用ＴｓＬ１－ＥＳ检测的敏感性无显著差异，但纯化抗原的特异性显著优于ＴｓＬ１－ＥＳ。

人旋毛虫病血清与诊断抗原的检测方法的比较研究

以旋毛虫肌肉期幼虫的分泌排泄抗原（ES）和纯化ES中46～58KD抗原（P－ES）为诊断抗原，用Dot－ELISA同时检测34份旋毛虫病人血清，阳性检出率分别为91．18％和94．12％（P＞0．05）．而100份正常人血清均为阴性；检测其它4种蠕虫病人血清62份，交叉反应率分别为29．3％和0％，P－ES的特异性明显优于ES（P＜0．05）。另外，以P-ES为珍断抗原，比较Dot-ELISA和间接ELISA用于诊断旋毛虫病人的检测效果，实验表明：Dot-ELISA不仅有间接ELISA相似的敏感性和特异性，而且简便、快速、经济，更适合于推广应用。

体外培养获取旋毛虫新生蚴的方法

本文报道体外培养旋毛虫成虫,获取大量新生蚴的简便方法.作者从实验感染小鼠分离感染期幼虫感染大鼠,而后从大鼠小肠收集成虫,置于盛M_(109)的组织培养瓶内,平放CO_2孵箱(37℃、6％CO_2)培养15～20小时,经过滤、离心及清洗收集新生蚴。所得成虫和新生蚴的活动度及蚴虫量表明,该法效果好,并具有经济、减少细菌污染及可从培养液提取成虫及新生蚴ES抗原的优点。

抗旋毛虫单克隆抗体的制备及应用

抗旋毛虫单克隆抗体的制备及应用华西医科大学寄生虫学教研室胡少良，冯瑞元七十年代中期以来，单克隆抗体以其突出特点被迅速地推广到包括寄生虫学在内的许多领域。１９８４年，Ｏｒｔｅｇａ－Ｐｉｅｒｒｅｓ等［１］以及其他学者率先制备了抗旋毛虫单克隆抗体并开始着手...

抗旋毛虫单克隆抗体竞争酶联免疫吸附试验的建立及初步应用

作者选用1株高特异性抗旋毛虫单克隆抗体2G_8B_(10)H_2,建立了单克隆抗体竞争酶联免疫吸附试验(competitive ELISA,简称cELISA),并进行了初步应用。结果表明:20只日本大耳兔在感染旋毛虫后17天有35％呈现阳性,31天全部阳性.对其中5只感染兔的血清终点滴度观察了142天,了解特异性抗体的变化规律.该规律为病程估计提供了线索。另外,其他蠕虫感染兔血清29份无1例假阳性发生。可以认为,单克隆抗体cELISA是一种灵敏、特异的旋毛虫病免疫诊断方法。