区别clade 2.3.2.1和clade 2.3.4.4 H5亚型禽流感病毒实时荧光定量PCR方法的建立与应用

禽流感(Avian influneza,AI)是由正粘病毒科的禽流感病毒(AIV)引起的,疫苗接种策略是控制高致病性禽流感的有效手段,而疫苗接种策略成功的关键在于有与流行毒株相匹配的疫苗株。本试验根据clade 2.3.2.1和clade 2.3.4.4 H5 AIV血凝素(HA)基因所存在的特征性核苷酸序列差异来设计1对引物,利用实时荧光定量PCR反应后生成熔解曲线的Tm值与其GC含量正相关的特点,通过观察实时荧光定量PCR扩增反应后熔解曲线Tm值差异,即可精确对clade 2.3.2.1和clade 2.3.4.4 H5AIV感染情况进行准确鉴别诊断,为H5 AIV疫苗使用提供科学数据。

共享仪器设备授权使用管理系统的建设

本文探讨共享仪器设备授权使用系统的建设,通过信息技术避免共享科研设备不约而用、约而不用、约而乱用的现象,同时也助力科研人员“诚信守时”习惯的养成。

鸡传染性法氏囊病病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

RT-PCR扩增IBDV的VP5基因保守片段,将其克隆到pMD18-T载体,经测序鉴定得到阳性质粒。以阳性质粒为标准品,建立SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR的标准曲线和溶解曲线。结果表明,IBDV荧光定量PCR的标准曲线Ct值与3.29×10~3.29×108之间的病毒基因拷贝数呈现良好的线性关系。该方法灵敏度可达33拷贝,且特异性和重复性好。SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR方法可用于IBDV的病原诊断和病毒的定量分析。

禽腺病毒4型的分离与初步鉴定

从疑似心包积液综合征的病死鸡组织中分离获得1株病毒,该病毒无血凝活性,提取其核酸经禽流感病毒、新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒、禽脑脊髓炎病毒、禽白血病病毒、传染性法氏囊病毒、禽偏肺病毒和包涵体肝炎病毒特异引物扩增均为阴性,而经禽腺病毒4型特异性引物检测为阳性,则将其暂命名为禽腺病毒4型FJ1674株。将其扩增产物回收后克隆,经序列测定分析表明该株病毒与国内外禽腺病毒4型毒株的同源率为99.4%~100%;经遗传进化分析表明,其与禽腺病毒4型关系密切,共处同一分支。

鸭腺病毒3型LAMP快速检测方法的建立

鸭腺病毒3型(DAdV-3)是我国鸭群中出现的一种新型腺病毒,属于腺病毒科禽腺病毒属成员。为建立DAdV-3的快速检测方法,本研究根据DAdV-3的fiber2基因,设计特异性的LAMP检测引物,构建重组质粒标准品pT-DAdV-3,经各反应条件优化,建立了DAdV-3 LAMP快速检测方法。结果显示,建立的LAMP检测方法最佳反应条件为64℃40 min;该方法仅对DAdV-3呈阳性反应,与番鸭细小病毒、鸭圆环病毒、鸭源减蛋综合征病毒等其他常见鸭源传染病病原均无交叉反应,特异性强。该方法对重组质粒标准品的最低检测限为50拷贝/μL;利用本研究建立的LAMP方法、前期建立的PCR方法和基于MGB探针的荧光定量PCR方法对临床收集的66份鸭组织病料样品进行检测,结果显示阳性率分别为13.63%(9/66)、13.63%(9/66)和15.15%(10/66);且LAMP检测的阳性样品经PCR方法检测和荧光定量PCR方法检测均为阳性,符合率为100%。本研究首次建立了检测DAdV-3的LAMP方法,该方法快速敏感、特异性强,为该病的流行病学调查提供技术支撑。

鸡J亚型白血病病毒荧光定量PT-PCR检测方法的建立

运用实时荧光定量PCR技术,针对鸡J亚型白血病的gp85基因设计特异性引物,建立了一种快速准确诊断鸡J亚型白血病病毒(ALV-J)的荧光定量PT-PCR方法。通过重复性、特异性和灵敏度等验证表明,该方法适用于ALV-J的临床检测,为ALV-J引起的鸡肿瘤性疾病的快速诊断及采取相应的治疗措施提供了重要的技术支撑。

传染性支气管炎病毒和大肠杆菌混合感染三黄鸡的诊断

传染性支气管炎病毒和大肠杆菌是严重危害养鸡业的2种传染病原。2011年春夏之交,福州闽候某养鸡场饲养一批三黄鸡突然发病,经症状观察、病理剖检、病原分离鉴定确诊为传染性支气管炎病毒和O78型大肠杆菌混合感染。对传染性支气管炎病毒分离株FJ/11/05 M基因测序后分析表明,分离株FJ/11/05与M41株(美国呼吸型)、美国分离株Beaudette的亲缘关系较近;而与疫苗株H120、D41遗传进化关系较远。

H9亚型禽流感病毒的分离及初步鉴定

2011年从福建省2个肉鸡场分离到2株病毒,分别为FZ-04株和FZ-11株。血凝试验结果表明,分离株尿囊液可凝集1%鸡红细胞。血凝抑制试验结果表明,分离株尿囊液只被抗禽流感病毒H9亚型标准阳性血清特异性抑制。采用RT-PCR法对分离株M基因和H9亚型HA基因保守片段进行扩增,分别扩增出229bp和732bp特异性目的片段。结果表明,分离株为A型H9亚型禽流感病毒。HA基因遗传进化分析结果表明,分离株与代表株CK/FJ/G9/09亲缘关系最近,属于国内常见的CK/BJ/1/94群系。

福建省蛋鸡血管瘤型J亚群白血病的分子生物学诊断

针对福建省某鸡场的蛋鸡群发生产蛋下降和部分死亡,病鸡脚趾明显呈现血管瘤特征,运用实时荧光定量PCR方法对病鸡组织和血液样品进行检测,检出了J亚群白血病病毒(ALV-J);通过基因序列的比较分析,发现其氨基酸序列与国外及国内其他省份报导的ALV-J有很高的同源性,从病原分子生物学诊断角度证实福建省蛋鸡群中ALV-J的存在。

我国大陆火龙果引种栽培与利用现状

文章综述了从台湾引进的火龙果在大陆的栽培与研究现状,并对火龙果的种植开发前景进行了分析。

中国鸭源H5N6 AIV血凝素和神经氨酸酶基因特征及遗传进化分析

为明确中国鸭源H5N6 AIV的HA和NA基因特征及其遗传变异情况,研究选取了NCBI流感病毒资源库里的32株具有完整ORF编码区的中国鸭源H5N6 AIV的HA和NA基因序列,利用分子生物学软件分析其HA和NA基因特征及其遗传进化情况。结果显示,中国鸭源H5N6 AIV的HA裂解位点有REKRRKR↓G、RERRRKR↓G和KEKRRKR↓G三种类型,HA有6个潜在的N-糖基化位点,其中第182、222、224位氨基酸依次为N、Q、G,具有与禽源唾液酸α-2,3受体结合的特性,然而HA发生了S123P/T、T156A、S223R氨基酸位点突变,部分毒株发生了I151T氨基酸位点突变;HA基因核苷酸遗传进化分析显示,中国鸭源H5N6 AIV遗传进化上均处于clade2.3.4.4分支,并进一步进化出Ⅰ和Ⅱ两个亚分支。部分中国鸭源H5N6 AIV NA第59~69位缺失11个氨基酸,中国鸭源H5N6 AIV NA基因遗传进化上分为两个大的分支,分别对应NA基因颈部缺失型和完整型两种类型;NA颈部完整型的NA有6个潜在的N-糖基化位点,NA颈部缺失型的NA由于第59~69位氨基酸的缺失,导致其第67位丢失了一个N-糖基化位点。研究为中国鸭源H5N6 AIV的生物学特性和遗传进化特征研究奠定基础。

福州市鸡群网状内皮增生症病毒血清学调查与初步分析

应用ELISA抗体检测试剂盒,对福州市9个养殖场鸡群进行网状内皮增生症病毒（Reticuloendotheliosis Virus,REV）抗体检测。共采集了鸡血清样品427份。结果表明,被检样品总的阳性率为29.51%（126/427）,阳性的鸡场数占鸡场总数的77.78%（7/9）,养殖场个体阳性率在0~98.36%之间。经比较不同品种REV抗体阳性率,发现肉鸡的感染率最高（61.18%）,蛋鸡次之（15.48%）,种鸡最低（6.60%）。不同日龄段不同品种的鸡群REV抗体阳性率呈散在分布。

致蛋鸡输卵管炎的大肠杆菌分离及特性分析

2015年从福建省某蛋鸡场病死鸡的肝脏分离到一株细菌,命名FQ-180。为进一步了解其生物学特性,经革兰氏染色、电镜检测等方法初步鉴定为大肠杆菌;分离株O血清型鉴定分属于O78型;药敏试验结果表明菌株FQ-180仅对阿莫西林、氟苯尼考、头孢氨苄、头孢唑啉高度敏感。采用PCR法对分离株16S r DNA基因序列进行了扩增,扩增出长度为1470 bp左右特异性目的片段,进一步鉴定为大肠杆菌。

H9N2亚型禽流感安徽分离株CK/AH/1/10的分子特征

为了了解H9N2亚型禽流感病毒安徽分离株CK/AH/1/10基因组的分子特征,本研究采用RT-PCR方法扩增了CK/AH/1/10分离株8个片段的基因,克隆测序后进行同源性比较及遗传进化分析。结果显示:分离株CK/AH/1/10 HA蛋白的裂解位点为低致病性禽流感病毒,参照Guan等[4]对H9亚型禽流感病毒HA基因的分类标准,可将CK/AH/1/10株归属于欧亚系G9-like亚分支。

浅谈我国设施农业发展状况

生态型农业、可持续型农业与现代农业最佳的结合方式是设施农业,大力发展设施农业有助于推进传统农业结构的战略性调整,是实现农业现代化的重要举措。该文综述了设施农业的主要应用领域及支撑技术,分析了我国设施农业发展过程中存在的不足,并提出一些可行性建议。

禽坦布苏病毒及其蛋白功能研究进展

本文围绕禽坦布苏病毒的分类与基因组结构、结构蛋白与功能、非结构蛋白与功能的最新研究进展进行综述,旨在为禽坦布苏病毒病的防控提供科学依据。

论无人机在农业喷药领域的应用

无人机作为一种新型的农药喷洒技术手段,已经成为农机行业增长的亮点和热点。其喷药技术的快速发展、应用普及为农业可持续发展提供了重要保障,大大节约了水资源,减少了对环境的污染,实现了高效、环保的要求。较为详细地分析了无人机用于农药喷洒的优点,并与传统的农药喷药手段进行了对比,对该行业的发展进行了展望。

福建省动物疫病防治技术信息化服务系统的构建

随着科学技术的发展，以及网络化、信息化、数字化的普及，通过网络与各种现代化通信手段，可及时准确地为人们传递关心的数据与信息，为生产和生活提供了有力的保障。福建省动物疫病防治技术信息化是农业信息化的重要内容．该信息服务系统的构建弥补了福建省动物疫病防治技术推广体系的不足，不仅是全面建设小康社会的需要，同时也是“数字福建”、“数字农业”的重要组成部分。

浅谈“互联网+”技术在畜牧业中的应用

"互联网+"技术作为先进生产力发展的重要标志,对畜牧业业发展产生了十分深远的影响。较系统地叙述了"互联网+"技术在畜牧业中应用的现状,并对其未来的发展进行了讨论。

论人工智能在农业中的应用

人工智能已成为自动化、电气化和信息化之后新一轮工业革命的基石,目前已广泛应用于工业、教育、医疗、金融等领域,产生了许多革命性的技术创新。以农业领域为背景,阐述了人工智能技术在农业领域的应用,并对其发展进行了探讨。