大肠埃希氏菌疫苗生产用菌种种子批的建立与鉴定

为了研制仔猪大肠杆菌病三价(K88+K99+987P)灭活疫苗,以大肠埃希氏菌生产菌种C83549(k88)第2代和C83644(k99)、C83710(987p)第3代基础种子作为原始种子,建立了用于仔猪大肠杆菌病疫苗生产的大肠埃希氏菌基础种子批,分别对种子批的F1、F5、F10、F13代进行了全面鉴定。结果表明,各代种子的培养特性、生化特性均符合大肠埃希氏菌特征,抗原结构分别为C83549(O149∶K88)、C83644(O68∶K99)和C83710(O9∶987P);各代次菌株的菌毛抗原RIHA单位≥800,菌种免疫原性鉴定合格;各菌株经口服途径灌服1.5×10^(10)CFU/头,可引起仔猪100%发病。因此,3个菌株均可用作仔猪大肠杆菌病三价(K88+K99+987P)灭活疫苗生产的菌种。

猪链球菌MnmE蛋白功能的初步研究

为了解析猪链球菌中MnmE蛋白的生物学功能,通过同源重组技术获得了mnmE基因缺失菌株,采用活菌计数、高效液相色谱、质谱分析、荧光定量PCR等技术,鉴定MnmE蛋白在猪链球菌中的主要功能。结果显示,与野生菌株(SC19)相比,mnmE基因缺失菌株(△mnmE)在酸性条件pH 4.5下的存活能力显著下降;氨基酸靶向代谢组学共检测到23种氨基酸及其衍生物,其中△mnmE缺失菌株中有17种氨基酸具有显著差异(P<0.05,倍数差异>1.2),尤其是精氨酸上调4.8倍,丝氨酸上调2.9倍。荧光定量PCR发现△mnmE缺失菌株中与环境适应性相关的精氨酸分解代谢基因ArcA下调表达显著,丝氨酸合成酶SerB上调表达显著。初步鉴定了MnmE蛋白与猪链球菌对酸性环境适应性相关,MnmE蛋白缺失后,精氨酸分解代谢基因下调表达导致精氨酸在菌体里积累,不能被分解成CO_(2)、ATP、NH_(3),使得细菌代谢紊乱、适应性减弱。

焦棓酸对猪链球菌体外抑菌效果试验

研究焦棓酸对猪链球菌的体外抗菌活性及对生物被膜的抑制作用,并初步探讨其抑菌机制。采用96孔微量稀释法测定常用抗菌药物及焦棓酸对猪链球菌的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度;平板活菌计数法和分光光度计测定焦棓酸对猪链球菌作用的时间-杀菌曲线;采用结晶紫染色法检测焦棓酸对猪链球菌生物被膜形成的影响;通过荧光定量PCR从转录水平分析焦棓酸对猪链球菌生长与生物被膜形成相关基因表达的情况。结果显示,猪链球菌2型HB菌株对磺胺异恶唑、磺胺甲恶唑耐药严重,焦棓酸对猪链球菌2型HB菌株的最小抑菌浓度为32μg/mL,最小杀菌浓度为64μg/mL,并且焦棓酸对猪链球菌的抑制作用呈剂量依赖性;焦棓酸在16μg/mL能显著抑制猪链球菌2型HB菌株生物被膜形成的能力;另外,经焦棓酸处理后,发现猪链球菌的生长、生物被膜形成、毒力相关基因ftsZ、stK、mrp、fbps、gapdh、ccpA、luxS下调表达。综上所述,焦棓酸可为耐药猪链球菌在临床上感染的治疗提供新思路。

可持续发展理念下的节水创新设计实践

设计说明:公共水资源的浪费在今天仍然较为严峻,尤其在公园、洗手间、各种城市公共场所。为实现全球公共环境节水设计行动的效率提升,设计开发了此款自动感应水龙头产品。设计师在水龙头底部增加了声波传感器和红外传感器两个电子感应装置。用户开启接水模式后,声波传感器通过发送和接收声波来检测接水容器与水龙头之间的纵向距离,然后自动出水。同时,红外距离传感器检测水位高度,当容器内的水快满时自动关闭水源,达到节约用水的目的。该设计的亮点在于它可以容纳多种不同类型的水容器,旨在实现水龙头的可持续设计,同时方便用户使用。

两种稻飞虱对杀虫剂的敏感性比较

分别于 2 0 0 0年和 2 0 0 1年测定了桂林、安庆和东台 3地区褐飞虱、白背飞虱对 10种杀虫剂的敏感性 ,并分析了两种飞虱对杀虫剂的敏感性差异。结果表明 ,在年度间和地区间 ,其敏感性差异不显著 ,而药剂间的差异显著。吡虫啉和醚菊酯是毒力最高的两个药剂 ,但吡虫啉的个体一致性较差 ,明显低于醚菊酯。合理利用这两个药剂 ,可以作为避免单一药剂长期使用、延缓抗性发展和延长药剂使用寿命的良策。

褐飞虱对吡虫啉的抗性机理和靶标分子毒理学

褐飞虱Nilaparvata lugens是水稻最重要的害虫之一,长期依赖化学防治导致了该害虫对不同类型杀虫剂抗性的产生,对新烟碱类杀虫剂吡虫啉高水平抗性的产生更是造成了巨大的粮食生产损失。近年来在褐飞虱对吡虫啉抗性机理,以及在抗药性机理研究推动下吡虫啉作用靶标褐飞虱神经系统烟碱型乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptors,nAChRs)毒理学等方面取得了许多研究进展。nAChRs是昆虫神经系统中最重要的神经递质受体,是几类重要杀虫剂的作用靶标,其中以新烟碱类杀虫剂为代表。通过对比敏感品系和室内连续筛选获得的高抗吡虫啉品系,在褐飞虱两个nAChRs亚基Nlα1和Nlα3中均发现了抗性相关点突变Y151S,该突变导致了受体与吡虫啉结合亲和力的显著下降,而对内源神经递质乙酰胆碱的亲和力影响很小。Nlα1与褐飞虱另外两个亚基Nlα2和Nlβ1共聚成一个受体,构成吡虫啉低亲和力结合位点;Nlα3与褐飞虱另外两个亚基Nlα8和Nlβ1共聚成一个受体,构成吡虫啉高亲和力结合位点。不仅褐飞虱nAChRs与吡虫啉抗性相关,某些nAChRs附属蛋白也直接影响褐飞虱对吡虫啉的抗性,如Lynx蛋白。关于褐飞虱nAChRs组成、抗药性相关变异、受体附属蛋白对抗药性的影响等方面的研究,均为国内外前沿报道,不仅有助于对新烟碱类杀虫剂抗性机理的理解,对昆虫nAChRs毒理学同样具有很大的推动作用。

解毒酶系在褐飞虱对马拉硫磷的抗性发展中的作用

室内抗性筛选结果表明 ,褐飞虱对马拉硫磷抗性的上升呈“S”形。酯酶的变化在抗性上升中起到重要作用 ,与抗性上升存在很好的相关性 ;而多功能氧化酶和谷胱甘肽转移酶只在抗性发展的最初阶段发挥一定的作用。

褐飞虱抗有机磷品系的交互抗性及适合度研究

测定了褐飞虱敏感品系和两个实验室选育的抗有机磷品系的交互抗性。结果表明 :有机磷杀虫剂和氨基甲酸酯杀虫剂之间存在交互抗性 ;两个抗性品系对拟除虫菊酯类和吡虫啉均无明显的交互抗性。通过建立两个抗性品系和敏感品系的生命表 ,发现抗性品系适合度显著下降 ,低龄若虫存活率和羽化率低 ,成虫寿命缩短 ,卵历期延长 ;在繁殖上均表现为交配率、产卵量和孵化率下降 ;马拉硫磷抗性品系还表现为若虫历期延长。用种群数量趋势指数 (I)来确定两个抗性品系的相对生物适合度 ,发现与敏感品系相比 ,甲胺磷抗性品系和马拉硫磷抗性品系的相对适合度仅分别为 0 4 9和0 19。认为

稻飞虱饲养与抗药性筛选的方法研究

就几种新鲜稻苗对褐飞虱和白背飞虱生长发育和繁殖的影响进行了比较 ,发现 2 0～ 2 5℃下无土培育的幼苗最适合室内稻飞虱生长、发育和繁殖 ,适合室内飞虱的大批量饲养。通过不同筛选方法对褐飞虱和白背飞虱进行抗性筛选 ,比较不同方法的筛选效果 ,发现稻苗和飞虱同时喷雾的方法操作方便、抗性发展快 。

求职行为的心理学研究

心理学家将有效的求职行为看作成功就业的前提。求职行为是一个复杂的动态过程,求职行为的测量可分为三个维度:频率-强度,内容-性质,短期-长期。求职行为的预测因素研究很多,研究结果也多种多样。关于求职结果的测量指标最近有了新的进展,即不再简单地将就业状态二分为就业和未就业,而是考虑到了各种不充分就业状态。文章最后讨论了求职行为研究的现代特点及可能远景。

计划行为理论在求职领域的应用与评价(综述)

计划行为理论是社会行为研究中最有影响力的理论模型之一。在求职行为研究领域,计划行为理论的预测力在西方国家的一些研究中得到了验证,但仍存在着改进的余地。针对主体规范与行为意向之间较弱的关系,有研究者建议,在原有预测变量的基础上增加示范性规范,可以显著提高模型的预测力;文化价值观也值得给予更多的重视;感知到的行为控制力的概念有完善的必要;将执行意向作为目标意向与行为的中介变量可以提高意向对行为的方差解释率。这些探索为求职行为的研究带来若干启示。

褐飞虱抗吡虫啉品系生物适合度研究

毒力测定结果显示 ,虽然褐飞虱NilaparvatalugensSt l田间品系对吡虫啉还没有表现出明显的抗性 ,但室内筛选品系已经出现了一定水平的抗性 ,抗性品系 1 (R1)和抗性品系 2 (R2 )的抗性倍数分别为 2 5 3 8和 68 92。通过建立抗性品系、田间种群和敏感品系的生命表 ,发现抗性品系适合度显著下降 ,而且R2 品系下降的幅度明显大于R1品系。存在显著变化的因素有低龄若虫存活率、成虫羽化率、交配率、产卵量和孵化率下降 ,雌虫寿命缩短 ;R2 品系还表现为卵历期延长 ,3龄若虫至 5龄若虫存活率下降。R2 品系产卵高峰期迟 ,高峰期日虫量显著低于敏感品系和田间种群。用种群数量趋势指数 (I)来确定抗性品系的相对生物适合度 ,发现与敏感性品系相比 ,R1品系和R2 品系的相对适合度分别为0 60 9和 0 2 45。

青少年早期职业不确定性及其影响因素

本文首先总结了国外有关青少年早期职业不确定性的研究进展,包括职业不确定性的认知和情感成分、早期职业不确定性与有效求职行为之间的联系;其次,进一步分析了影响青少年早期职业不确定性的各种主要因素,如个性差异、职业兴趣、人口学变量、早期工作经验和家庭环境;最后,对未来有关早期职业不确定性的研究方向提出展望。

高阻硅上RF-MEMS共面波导设计及测量研究

设计并实现了基于高阻硅RF MEMS(射频微机电系统)共面波导传输线(CWP), 并测量和分析了不同偏压下的特征阻抗值。利用部分电容法和保角变换法得到的分析公式确定了特征阻抗为50Ω的共面波导的几何结构尺寸,采用MEMS准平面加工工艺在高阻硅衬底上实现了2.5μm厚的金共面波导结构。在施加不同直流偏压的情况下对所设计的共面波导进行了S参数测量。计算了Winkel多项式中所有系数的具体表达式,运用该多项式获得了共面波导的特征阻抗,并与传统的特征阻抗提取方法进行了结果比较。实验数据表明,在中心信号线上施加的直流偏压对S参数的影响很小,而对共面波导特征阻抗的影响较为明显,当施加的直流偏压从0 V变为38 V时,特征阻抗的实部会增加,变化幅度小于1.2Ω,虚部会减小,变化幅度小于0.8Ω。

竞争性PCR定量检测鸡传染性贫血病毒核酸

将删除33个碱基序列的CAVDNA克隆进质粒pSBII,提取质粒DNA,经过纯化、定量后作为竞争性模板,建立了一种定量检测鸡传染性贫血病毒核酸方法。该方法能够检测出的最低CAVDNA为103.5Molecules/μL,其精确度可达到100.5Molecules/μL。该方法与传统方法相比,具有节省时间、节约试剂和受其它因素干扰小等特点。

抗吡虫啉褐飞虱品系中扑虱灵、仲丁威对吡虫啉的增效作用

室内筛选获得了一个高抗吡虫啉的褐飞虱品系 ,对吡虫啉的抗性倍数达到 72 83倍 ,属于高抗水平。交互抗性研究发现 ,该高抗品系对马拉硫磷、甲胺磷、仲丁威、甲萘威和扑虱灵都不表现出显著的交互抗性。研究扑虱灵和仲丁威在田间品系和抗性品系中对吡虫啉的增效作用 ,结果表明两个药剂在两个品系中对吡虫啉都存在很好的增效作用 ,而且在抗性品系中的增效作用更为显著。

仔猪大肠杆菌病、C型产气荚膜梭菌病二联灭活疫苗的研制与应用

为了研制仔猪大肠杆菌病、C型产气荚膜梭菌病二联灭活疫苗,将大肠埃希菌C83549(K88)、C83644(K99)、C83710(987P)菌株和C型产气荚膜梭菌C59-2菌株分别接种适宜培养基,提取大肠埃希菌纤毛和C型产气荚膜梭菌外毒素,灭活和脱毒后加入冻干保护剂,冷冻干燥制成冻干灭活疫苗。该疫苗性状为类白色海绵状疏松团块,无菌检验合格,疫苗对仔猪和怀孕母猪安全,怀孕母猪免疫该疫苗后所产仔猪对大肠埃希菌和C型产气荚膜梭菌的攻毒保护率均在80%以上。临床应用结果表明,该疫苗能明显提高免疫母猪的窝平仔猪成活数。

新生仔猪红黄痢二联灭活疫苗的研制与应用Ⅰ——C型魏氏梭菌生物学特性研究

[目的]研究C型魏氏梭菌C59-2菌株的生物学特性。[方法]将该菌株接种于适宜培养基,进行毒素致死性试验和免疫原性试验。[结果]C型魏氏梭菌C59-2菌株在厌气肉肝汤和血液琼脂平板上生长良好,生化特性与魏氏梭菌一致;该菌在厌气肉肝汤中培养物的上清液0.0001ml静脉注射可致小鼠100%死亡,0.2ml静脉注射可使家兔全部死亡;免疫原性试验表明,该菌株制备成疫苗后免疫家兔,攻毒保护率可达75%。[结论]C型魏氏梭菌C59-2毒株适合于疫苗生产。

安庆地区褐飞虱、白背飞虱抗药性监测

对安庆地区 2 0 0 0和 2 0 0 1年 2种飞虱的抗药性监测 ,结果表明 :2种飞虱抗药性年度间变化不大。褐飞虱和白背飞虱对甲胺磷和醚菊酯都比较敏感 ,而且白背飞虱对杀螟松的抗性也很低 ;2种飞虱对吡虫啉的抗性都接近中等水平 。

羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶在褐飞虱对甲胺磷抗性发展中的作用

室内抗药性筛选表明 ,褐飞虱对甲胺磷的抗性呈“快 -慢 -快”的发展趋势 :第 1到第 4代抗性上升缓慢 ;第 5代到第 15代迅速上升 ,其中又呈现 2个发展阶段 ,以第 9代为拐点 ;第 15代后抗性上升变慢。羧酸酯酶在抗药性上升中可能起到十分重要的作用 ,与 L D50 变化存在很高的相关性 ,达到极显著水平 ,相关系数为 0 .990 6。乙酰胆碱酯酶不敏感性在抗性发展后期变化很大 ,第 8代到第16代间 ,与 L D50 变化存在极显著相关性 ,相关系数为 0 .970 1。由此可见 ,羧酸酯酶可能在褐飞虱对甲胺磷抗性的持续发展中起十分重要的作用 。