兔结膜重建中羊膜细胞外基质、保存羊膜及自体结膜的比较

目的:研究羊膜细胞外基质(amnion extracellular matrix,AECM)在兔结膜重建中的作用。方法:将36只新西兰白兔随机分为3组,均右眼实施手术,羊膜细胞外基质(AECM)组12眼,保存羊膜(frozen amnion membrane,FZAM)组12眼,自体结膜(autologous conjunctiva,AC)组12眼。术后对各组进行密切的跟踪观察,分别在术后1,2,4,8wk对术眼行印迹细胞学及病理学检查。结果:所有术眼均愈合良好,无瘢痕化及睑球粘连等并发症。术后2wkFZAM、AC组炎症细胞浸润高于AECM组,AECM溶解时间长于FZAM。杯状细胞分化方面:术后2wk,AECM组与AC组比较无统计学差异(P>0.05);FZAM组与AECM、AC组比较统计学差异显著(FZAM组vsAECM组P<0.01,FZAM组vsAC组P<0.01)。术后4,8wk,3组比较均有统计学差异(FZAM组vsAECM组P<0.05,FZAM组vsAC组P<0.05,AC组vsAECM组P<0.05)。结论:羊膜细胞外基质和保存羊膜作为结膜替代物有效,而羊膜细胞外基质比保存羊膜有更长的存活周期,自体结膜是修复结膜缺损最理想的替代物。

胬肉切除联合颞下方角膜缘干细胞移植治疗伴有浅前房翼状胬肉26例疗效观察

角膜缘干细胞移植是目前治疗翼状胬肉最常用的手术方式，多数医生喜欢选择手术切口在12：00位或颞上方球结膜，却忽视了有些伴浅前房的青光眼患者在青光眼发作后需行引流手术时，上方球结膜瘢痕可影响其创口愈合。2009年7月～2012年12月，我院对26例（26眼）伴有浅前房的翼状胬肉患者采用胬肉切除联合颞下方角膜缘干细胞移植治疗，取得较好疗效。现报告如下。

抗VEGF注射治疗对息肉状脉络膜血管病变患者脉络膜新生血管的抑制作用观察

目的观察抗血管内皮生长因子(VEGF)注射治疗对息肉状脉络膜血管病变(PCV)患者脉络膜新生血管的远期抑制作用。方法选取2017年3月至2018年12月于连云港市第一人民医院眼科接受治疗的200例(216只眼)PCV患者为研究对象,均接受玻璃体腔抗VEGF注射治疗,行最佳矫正视力(BCVA)检查、间接检眼镜检查、眼压检查、吲哚菁绿血管造影(ICGA)检查、荧光素眼底血管造影(FFA)检查及黄斑前膜多焦视网膜电图(mfERG)检查。观察比较治疗前及治疗后不同时间段最小分辨角对数视力(logMAR)、眼压、中心凹视网膜厚度(CFT)、黄斑中心凹视网膜厚度(CRT)、BCVA及mfERG值。结果患者治疗后7 d、3个月、1年logMAR值明显低于治疗前。治疗后3个月、1年logMAR值明显低于治疗后7 d,治疗后1年logMAR值明显低于治疗后3个月,差异有统计学意义(P<0.05);治疗前后眼压比较差异无统计学意义(P>0.05);患者治疗7 d、3个月、1年CFT及CRT明显低于治疗前。治疗后3个月、1年CFT及CRT明显低于治疗后7 d,且治疗后CFT及CRT明显低于治疗后3个月,差异有统计学意义(P<0.05)。病程2周~6个月患者治疗前CRT明显高于病程6个月~2年患者,BCVA低于病程6个月~2年患者。治疗后CRT低于病程6个月~2年患者,BCVA低于病程6个月~2年患者,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后7 d的Ring1、Ring2、Ring4、Ring5值及治疗后3个月和1年的Ring1、Ring2、Ring3、Ring4、Ring5值明显高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后1年的Ring1、Ring2、Ring3、Ring4、Ring5值明显高于治疗后7 d和3个月,差异有统计学意义(P<0.05)。结论抗VEGF注射治疗能有效恢复PCV患者视力,且对PCV患者脉络膜新生血管具有较强的抑制作用。

手术治疗增殖性糖尿病视网膜病变远期并发症严重黄斑裂孔疗效及预后影响因素分析

目的 探讨针对2型糖尿病患者增殖性糖尿病视网膜病变远期并发症严重黄斑裂孔进行手术治疗的疗效,并分析其预后影响因素。方法 选取自2018年8月至2021年12月收治的发生增殖性视网膜病变并有严重黄斑裂孔并发症的2型糖尿病患者240例,所有患者均为Ⅱ~Ⅲ期黄斑裂孔,且黄斑裂孔发病时间>1年。检测患者在接受黄斑裂孔手术治疗前、后视网膜神经纤维层厚度。记录患者年龄、糖尿病病程、糖化血红蛋白水平、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、近视、远视、散光、眼压等临床资料,评估患者预后,并分析患者预后影响因素。结果 手术治疗前、后环形区域视网膜神经纤维层厚度的总平均值(T-TA)、下方120°范围视网膜神经纤维层厚度的平均值(IA)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。手术治疗后,上方120°范围视网膜神经纤维层厚度的平均值(SA)大于手术治疗前,环形区域的神经纤维指数值(NFI)小于手术治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归模型分析显示,糖尿病病程>5年、糖化血红蛋白>6.56%、眼压>21 mmHg为影响手术治疗糖尿病视网膜病变发生严重黄斑裂孔患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论 手术治疗2型糖尿病患者增殖性糖尿病视网膜病变远期并发症严重黄斑裂孔的疗效理想,糖尿病病程>5年、糖化血红蛋白>6.56%、眼压>21 mmHg为影响手术治疗预后的独立危险因素。

结膜替代物

结膜是眼表不可缺少的一部分,暴露于外易受到损伤,同时结膜自身也可能因肿瘤、变性以及自身免疫疾病而引起正常结构改变。因此需要有一种替代材料取代病变组织。目前临床上可选择的材料有很多,包括：自体或异体结膜、各种粘膜、Tenon's膜、polytef异物膜、羊膜、细胞外基质以及羊膜联合结膜上皮细胞等,它们各具优、缺点。本文就近年来应用于临床或处于实验阶段的结膜替代材料做一综述。

角膜组织工程支架壳聚糖-胶原复合膜的性能

制备了壳聚糖-胶原角膜组织工程支架,考察了复合膜支架的光学性能、力学强度、结晶性、吸水率、亲水性、微观形貌及细胞亲和性,发现支架内胶原与壳聚糖两种分子间存在较强的相互作用,且具有良好的相容性,支架表面平滑均一,内部呈现层状有序结构.壳聚糖-胶原复合膜具有优异的透光率和适宜的湿态力学强度.细胞培养实验中,人角膜缘上皮细胞能在支架上较好地粘附和增殖分化,显示复合膜支架具有良好的细胞亲和性.结果表明壳聚糖-胶原复合膜有望成为一种性能良好的角膜组织工程支架.

铁死亡在空气污染导致相关疾病中的作用机制研究进展

流行病学研究证实,大气污染物暴露会导致人体不良健康结局,但具体的生物学机制尚不明确。空气污染暴露后,氧化应激已被证实是影响健康的经典调控机制。近年来研究发现,氧化应激导致的脂质过氧化与铁累积共同作用,可诱导调节性细胞死亡,被称为“铁死亡”。因此,铁死亡可能是空气污染物引发不良健康结局的重要机制。为了探究空气污染引发不良健康结局的铁死亡机制,基于已有研究成果,梳理了铁死亡在空气污染导致不良健康结局中的作用靶点,详细探讨了空气污染物诱导铁死亡的调控机制。系统综述结果表明:细颗粒物(PM_(2.5))、臭氧(ozone,O_(3))、香烟烟雾(cigarette smoke,CS)均可通过影响铁代谢和脂质过氧化途径中的关键基因诱发铁死亡;大气污染物对铁死亡的调控过程主要是通过引发氧化应激降低机体抗氧化能力,从而降低铁死亡的抗性。本综述结果进一步补充了空气污染诱导疾病的发生机制,可为潜在的疾病治疗策略提供理论支持。

MMC的PTMC-F127-PTMC温敏型水凝胶缓释剂对兔小梁切除术后滤过泡瘢痕化的调控作用

背景 难治性青光眼患者抗青光眼术中单次应用丝裂霉素C（MMC）并不能满足术后抗滤过区瘢痕化的需求.构建MMC载药缓释系统可维持术区MMC的有效药物浓度和持续抗瘢痕化作用,同时减少药物对眼组织的不良反应,对青光眼滤过术后瘢痕化的调控具有重要意义. 目的 探讨使用聚三亚甲基碳酸酯（PTMC）-F127-PTMC温敏型水凝胶作为MMC的药物载体对兔眼小梁切除术后瘢痕的抑制作用. 方法 将10 ～ 14周龄的新西兰白兔60只行小梁切除术,然后按随机数字表法分成单纯小梁切除术组,术后注射含0.05、0.10、0.20 g/L MMC的PTMC-F127-PTMC组以及空白PTMC-F127-PTMC组,均注射0.1ml.于术后第3天、第7天随机选取0.05、0.10、0.20 g/L MMC的PTMC-F127-PTMC组实验兔各2只眼,用30 G针头从角膜缘进针,取0.1 ml房水送至广州市分析测试中心进行高效液相色谱法-质谱联用分析（HPLC-MS）检测房水内MMC质量浓度;于术后第1、3、5、7、10、14、28天用卡尺测量滤过泡的宽度和长度,半定量估测滤过泡的高度以及用Tonopen眼压计测量实验眼眼压,术前和术后28 d用角膜内皮计数仪进行角膜内皮细胞计数;上述检查后处死动物并摘除眼球,制备眼球组织切片进行苏木精-伊红染色,光学显微镜下检查眼球组织的组织病理学改变.结果 PTMC-F127-PTMC水凝胶在体外可缓释MMC达20 d以上.术后单纯小梁切除术组,空白PTMC-F127-PTMC组,0.05、0.10、0.20 g/L MMC缓释组兔眼滤过泡平均生存时间分别为（5.3±0.4）、（5.5±0.4）、（12.2±1.0）、（25.1±0.9）、（26.7±0.7）d,各组间差异有统计学意义（F=123.200,P=0.000）.0.05g/LMMC PTMC-F127-PTMC组的滤过泡生存时间长于单纯小梁切除术组和空白PTMC-F127-PTMC组（均P=0.000）.0.10 g/L MMC和0.20 g/L MMC的PTMC-F127-PTMC组滤过泡的生存时间长于其余各组,差异均有统计意义（均P=0.000）,此两组术后眼压降低趋势与其余各组的差异有统计意义（F=53 010.000,P＜0.01）,但两组之间差异无统计意义（P＞0.05）.各组间术后28 d角膜内皮数目的改变差异均无统计意义（P＞0.05）,各组房水内均未检测到MMC.组织病理学检查发现,3个MMC缓释组炎症反应及纤维化程度比单纯小梁切除术组和空白PTMC-F127-PTMC组轻,而抑制增生作用更强. 结论 PTMC-F127-PTMC水凝胶可作为缓释载体,负载并缓释不同质量浓度的MMC.MMC缓释组能够在较低毒性作用下有效延长滤过泡的生存时间,调控兔眼小梁手术后的瘢痕化.

组织工程化角膜基质的构建与移植实验

目的探讨以可降解高分子材料聚羟基乙醇(PLGA)为支架体外构建组织工程化角膜基质的可行性.方法将培养的角膜基质细胞接种于具微孔的可降解高分子材料PLGA内,构建成组织工程化细胞-PLGA复合物,将该复合物移植到兔眼角膜基质层间.分别于移植后1、2周,1、2、3、4个月取材,光学显微镜、电镜观察细胞与PLGA材料的结合情况.裂隙灯显微镜和组织切片检查组织工程化角膜基质的透明性、可降解性以及生物反应性.结果角膜基质细胞能与PLGA高分子材料较好地结合,移植到兔眼角膜层间的组织工程化角膜基质7 d后呈半透明,2周见新生血管从角膜缘向植片方向生长,1个月开始材料降解,3～4个月时大部分材料降解,且新生血管减少,但是移植物呈半透明状.结论PLGA虽然具有组织相容性好、无毒、无免疫性和可降解的特性,但不适合作为构建要求具有很好透明性的角膜组织的支架材料.

HSV-tk/GCV系统对人Tenon囊成纤维细胞的旁观者效应及其机制研究

目的观察HSV-tk/GCV系统对人Tenon囊成纤维细胞(HTFs)的旁观者效应并研究其作用机制。方法将转HSV-tk基因HTFs(HTFs-tk)与正常HTFs于两种接种密度下以不同比例混合,加入5μg/m l更昔洛韦作用5 d,MTT法检测对HTFs的杀伤作用;染料传输法观察HTFs细胞间隙连接细胞间通讯(G JIC)的能力;免疫细胞化学检测Cx43分布;RT-PCR及W estern b lot检测Cx43表达。结果旁观者效应随HTFs-tk/HTFs比例增加而增强,高细胞接种密度组明显强于低密度组;染料通过G JIC传输6级以上;Cx43主要分布于HTFs细胞膜并检测到其mRNA与蛋白表达。结论旁观者效应需要细胞间密切接触,Cx43介导G JIC可能是HSV-TK/GCV系统对HTFs产生旁观者效应的主要机制,HTFs表达Cx43可能在结膜伤口愈合反应中发挥重要作用。

徐长卿治疗窦房传导阻滞一得

徐长卿乃一味祛风镇痛、清热解毒、杀虫止痒药物。临床用于风湿疼痛、皮肤瘙痒、痈肿疮毒之症居多。然以徐长卿治疗心悸,笔者所见尚无记载。余从一病案中偶然发现,并经验证,其对窦房阻滞具有较好功效。兹举验例1则如下。

不同加载模式煤体爆炸荷载作用下损伤和裂隙演化研究

为研究不同开采深度自重地应力对煤体爆炸荷载作用下损伤和裂纹演化的影响,针对煤层中深孔控制爆破技术的特点,在实验室搭建了爆破模拟试验系统,设计了不加载、加载为5t和10t三组模型。利用相似材料配比加工制备爆破实验模型试件,通过超动态应变仪监测煤体的应变信号,利用高像素数码相机记录爆破后模型试件表面宏观裂纹的变化规律,利用电法仪CT反演爆破前后及爆破后一定时间内电阻率变化规律。根据不同加载煤体爆炸荷载作用下的实验结果,对比分析了其损伤和裂纹演化的特征。结果表明:煤体在爆炸荷载作用下损伤和裂纹演化主要是由爆炸应力波、卸载波和控制孔形成的拉伸波等共同作用形成的,近炮孔区,压缩波形成放射状的压剪裂纹;远炮孔区,压缩波和卸载波共同作用下产生拉剪裂纹;加载对煤体爆炸荷载作用下损伤和裂纹演化的抑制作用。

音猬因子诱导恒河猴间充质干细胞向神经样细胞的分化

背景:骨髓间充质干细胞诱导分化为神经细胞,是神经系统疾病细胞治疗的有效手段,但目前的时效尚不完善。目的:应用神经发育音猬因子诱导恒河猴骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化。方法:应用经典的维甲酸方案与音猬因子方案两种方法诱导恒河猴骨髓间充质干细胞分化为神经样细胞,采用密度梯度离心法分离培养恒河猴骨髓间充质干细胞,倒置相差显微镜观察生长情况,MTT法测定细胞生长曲线,流式细胞仪鉴定细胞表型,免疫组织化学鉴定分化细胞标志,透射电镜和扫描电镜观察分化细胞超微结构。结果与结论:体外分离培养的恒河猴骨髓间充质干细胞,经流式细胞仪表型鉴定,具有较高均一性。通过音猬因子诱导方案诱导处理7d后,分化细胞多数表现为NSE、NF-M、Tau和Nestin染色阳性,经图像统计分析发现经音猬因子诱导方案神经干细胞标志物Nestin阳性率显著高于维甲酸诱导方案(P<0.01),另一方面经维甲酸诱导方案诱导的细胞表现GFAP阳性率高于音猬因子诱导方案,差异具有显著性意义(P<0.05)。提示音猬因子诱导方案是一种诱导恒河猴骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化的有效途径。

糯玉米保鲜加工储藏试验研究

以糯玉米杂交种垦粘1号为供试品种，对其吐丝后23天采收的新鲜果穗进行保鲜、漂烫、速冻与储藏试验。结果表明：收获后当天进行加工，漂烫时间为10～15min，-35℃速冻12h或-45℃单冻机速冻1．5h后于-18℃下可安全储藏9～12个月，实现周年市场供应。

音猬因子诱导恒河猴骨髓间质干细胞向神经元样细胞的分化与维甲酸方案比较其信号分子表达变化的意义

背景:近来研究发现在神经发育过程中,神经干细胞的分化受到来自周围微环境中诸多调控因子的作用,其中音猬因子是神经胚胎发育过程中关键性的诱导信号,有望作为一种有效的诱导剂调节神经细胞的分化。目的:探讨音猬因子诱导恒河猴骨髓间质干细胞向神经元样细胞分化过程中的信号分子表达变化。方法:常规密度梯度离心法分离培养恒河猴骨髓间质干细胞,诱导组加入含FGF2、B27、胎牛血清的L-DMEM预诱导24h撤离血清后,分别加入含0.5μmol/L维甲酸或400μmol/L音猬因子的DMEM诱导8d,以未诱导的细胞作为对照组。经神经元烯醇化酶荧光标记后,流式细胞仪筛选阳性细胞,应用RT-PCR与Western-blot法检测音猬因子和维甲酸诱导的细胞膜受体、细胞内信号蛋白的变化。结果与结论:音猬因子特异性膜受体Ptc、维甲酸特异性受体RARα、信号蛋白分子ptch1及Smad在正常细胞均有表达。经音猬因子诱导的细胞其Ptc表达上调,且随着诱导时间延长持续高表达,明显强于维甲酸诱导组及对照组(P<0.01);其细胞内ptch1蛋白分子表达与此趋势一致,但不能引起RARα表达上调。经维甲酸刺激的细胞在诱导过程中没有激活Ptc通路,诱导4d后RARα表达出现小幅上调并持续至6d,但这一结果差异不具有显著性意义,ptch1的表达无明显变化。经音猬因子、维甲酸诱导的细胞Smad分子表达均上调,但无明显差异。证实音猬因子诱导方案通过持续激活其特异性受体途径参与细胞诱导分化过程,而维甲酸诱导方案和音猬因子诱导方案之间没有显著受体途径交叉。

多种沟渠衬砌技术在应用中的比较

沟渠衬砌技术近年来发展较快,类型较多,是节约用地、节省用水、增加产量、方便管理、提高灌溉效益的有效途径;相对土渠而言,显示出防渗效果好、糙率小、允许流速大、强度高、使用年限长等多方面的优越性,靖江属通南地区,土质偏沙,易被冲刷,且地少人多,因此,应用和推广沟渠衬砌十分适宜且很有必要。从1991年开始,靖江市先后在19个乡镇试验和推广沟渠衬砌,累计实施长度105km,控制灌溉面积1.4hm^2,取得了良好的社会效益和经济效益,结合实践,本文就主要几种类型沟渠衬砌的设计。

马兰矿水力压裂切顶卸压技术应用研究

针对煤矿顶板难垮难落问题,通过现场实践对水力压裂切顶卸压技术进行研究,给出了水力压裂切顶卸压的机理及具体钻孔布置及压裂过程施工步骤,通过对压裂后巷道围岩变形情况进行分析,发现设定的3个监测站所的巷道围岩变形量均偏小,且由于巷道右帮为混凝土墙,所以其变形量几乎可以忽略不计,通过工业化试验验证了水力压裂切顶方案的可行性,为马兰矿巷道维护提供一定的参考。

浅谈提高工程建设质量的几个重要环节

水利工程质量的形成是一个系统工程,它是工程投资决策、工程设计、工程施工和竣工验收各阶段质量的综合反映,从工程项目质量的形成过程可知,要控制工程项目的质量,就必须按照建设过程的程序依次控制各阶段的工程质量.

靖江市城区河道现状及治理对策研究

一、基本情况 靖江城区面积21.54km2,区内地势平坦,地面真高3.5～4.0m(废黄河零点,下同),地势西高东低,现有河道54条,其中东西横向37条,南北纵向17条,全长71400m.河道总体布局为防汛排涝创造了一定的基础条件,但与现代化城市建设和人民群众的要求相比,还有一定差距. 二、存在问题 城区河道除了有引、排、蓄三大主要功能外,还应担负美化城市环境、调节城市小气候等特殊功能.对照以上要求,靖江城区河道存在的问题主要表现在以下几个方面:

息肉状脉络膜血管病变继发玻璃体积血的治疗及预后

息肉状脉络膜血管病变(polypoidal choroidal vasculopathy,PCV)是亚洲人中常见的眼底致盲性疾病,当PCV合并视网膜下出血或玻璃体积血(vitreous hemorrhage,VH)时,患者视力骤然下降,视力预后差异大。但目前聚焦于PCV合并VH的相关文献较少,因此研究和阐明PCV继发VH的治疗方法及预后具有重要的临床意义。目前临床上常选择手术干预,玻璃体切除术(pars plana vitrectomy,PPV)是临床上最常选择的一种术式。其他治疗方式包括玻璃体内注射抗血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、眼内气体或硅油填充、眼内注射组织纤溶酶原激活剂(tissue plasminogen activator,tPA)和光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)。PCV合并VH患者的视力预后决定因素是黄斑视功能的保留程度,也与年龄、术前视力、PCV病变部位、视网膜下出血量、视网膜脱离范围、基线黄斑中心厚度(central macular thickness,CMT)、是否出现术后并发症以及是否形成视网膜瘢痕等因素相关,目前也有研究发现视力预后与单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)相关。本文就PCV继发VH的临床特点、治疗及预后进行综述。