丙烯酰胺诱导人白血病HL-60和NB_4细胞hprt基因的分子突变谱

为了研究丙烯酰胺的遗传毒理作用 ,采用单细胞克隆培养 ,双向筛选计数 ,多重PCR扩增与电泳分析 ,研究了诱导HL 6 0和NB4 两种细胞hprt基因突变率及分子突变谱 .发现只有丙烯酰胺高剂量组 (70 0mg·L- 1)才对两种细胞有明确的致hprt基因突变作用 ;丙烯酰胺诱发突变主要由点突变和缺失两部分组成 (40 .0 %～ 6 6 .7% ,33.3%～ 6 0 .0 % ) ,而自发突变几乎全是点突变 (90 .0 %以上 ) ,两种细胞均无全基因缺失型 ;缺失突变可以发生于hprt基因上的每个外显子 (除外显子 7/ 8以外 ) ,较集中于基因的 3′末端 ,且诱发突变中绝大多数是点突变与单个外显子缺失 (93.3% ,86 .1% ) ,两种细胞情况类似 .结果提示 ,丙烯酰胺具有较弱的诱导hprt基因突变的作用 ,且诱发突变与自发突变的分子图谱不一样 。

昆明山海棠对人白血病细胞HPRT位点的影响

目的：研究昆明山海棠对人白血病细胞ＨＬ－６０ＨＰＲＴ位点的影响。方法：用ＴＨＨ水溶液对ＨＬ－６０细胞进行浓度梯度染毒，不同时间点进行单细胞微孔接种，计数阳性克隆，测定接种存活率、克隆效率和突变频率。结果：ＴＨＨ染毒细胞的突变频率，在处理剂量３．３５～２０．１０ｍｇ／ｍｌ范围内，具有明显的剂量－反应关系。但随着ＴＨＨ的浓度增高至３３．５０ｍｇ／ｍｌ组，由于细胞存活率太低，细胞数不够最后接种要求，不能继续进行。这一现象可能与ＴＨＨ的细胞毒性有关。结论：ＴＨＨ对ＨＬ－６０细胞具有肯定的致突变性。

γ－射线诱发人淋巴细胞微核形成与细胞周期关系的初步研究

本研究用γ－射线诱发人外周血淋巴细胞微核（ＭＮ），使用细胞周期控制、ＢｒｄＵ免疫荧光染色、松胞素Ｂ（ＣＢ）阻滞胞质分裂等技术，研究人淋巴细胞微核形成与细胞周期间的定量关系。结果：①Ｇ０期和Ｇ１期淋巴细胞照射组和对照组相比，微核率（ＭＮＦ）和微核细胞率（ＭＮＣＦ）均无明显变化（Ｐ＞０．０５）。②Ｓ期和Ｇ２期淋巴细胞照射组和对照组相比，ＭＮＣＦ均明显增加（Ｐ＜０．０１）。（３）Ｍ期淋巴细胞照射组与对照组相比，ＭＮＦ与ＭＮＣＦ分别增加９０多倍和７０多倍。结论：在人淋巴细胞周期中Ｓ期和Ｇ２期可形成ＭＮ，但Ｍ期是形成ＭＮ的主要阶段。

昆明山海棠诱导人白血病细胞HPRT基因突变的研究

为研究昆明山海棠(THH)的遗传毒性和药理作用，采用单细胞克隆培养,双向筛选计数，多重PCR扩增与电泳分析，研究了THH诱导HL－60细胞HPRT基因突变率及分子突变谱。发现随着染毒剂量的增加，细胞接种存活率逐渐下降，突变频率明显升高；THH诱发突变主要由缺失和点突变两部分组成(46.6％和53.4％)，而自发突变几乎全是点突变(92.3％)；HPRT基因突变位点在各个外显子的分布较集中于基因的3′末端，且外显子1缺失只出现于全基因缺失中，外显子7/8与9多表现为连锁缺失(71.4％)。结果提示，THH具有明确的诱导HPRT基因突变的作用，且诱发突变与自发突变的分子图谱不一样，这可能与其作用机制有关。上述发现有助于阐明THH遗传毒性作用机理。

昆明山海棠总生物碱诱导小鼠淋巴瘤细胞tk基因突变的研究

目的 :研究昆明山海棠 (THH)总生物碱对小鼠淋巴瘤L5 178Y细胞tk基因的影响。方法 :用抽提的THH总生物碱对L5 178Y细胞进行浓度梯度染毒 ,不同时间点进行单细胞微孔接种 ,计数阳性集落 ,测定细胞接种效率、相对存活率、相对悬浮增长率和突变频率。结果 :随着THH总生物碱作用剂量的增加 ,L5 178Y细胞相对存活率和相对悬浮增长率均明显下降 ;在 0 .1～ 2 .0 g·L-1范围内可诱导细胞tk位点的突变 ,诱发突变频率是自发突变频率的 2～ 9倍。在tk位点诱发了两种不同表型的突变集落 ,即大集落与小集落 ,但以大集落为主 ,这一现象可能与THH的作用机制有关。结论 :THH总生物碱对L5 178Y细胞具有肯定的细胞毒性与诱导基因突变作用。

丙烯酰胺对人白血病细胞HPRT位点的影响

目的 :为了研究丙烯酰胺 (AA)对人白血病HL - 6 0细胞HPRT位点的影响作用。方法 :本研究采用AA水溶液对HL -6 0细胞进行浓度梯度染毒 ,不同时间点进行单细胞微孔接种 ,在含 6 -TG培养基中筛选突变细胞 ,计数阳性克隆 ,测定接种存活率、克隆效率和突变频率。结果 :AA染毒细胞的突变频率在处理剂量范围内具有明显的剂量—反应关系 ,在最高剂量组(70 0 μg/ml)才有明确的致HPRT基因突变作用 ,同时发现AA染毒细胞的克隆效率随着剂量增加有轻度升高 ,这一现象可能与AA较强的细胞毒性有关。结论 :AA具有较弱的基因损害能力。

1,3-丁二烯的毒理学研究

本文对1,3-丁二烯的理化性质、生物转化、一般毒性、致突变性、致癌性、生殖与发育毒性、防护标准等方面的国外研究现状进行了综述,介绍了最新研究成果及研究动向。

如何做好新形势下审计项目计划管理工作

从审计署五年规划中可以看出 ,我国的国家审计正处在加快与国际审计接轨的“转型期” ,在目前审计体制下和审计转型过程中 ,制定审计项目计划首先要正确处理好真实合法审计、经济效益审计、经济责任审计以及审计与审计调查的关系和比重。其次要注重节约审计成本 ,科学确定审计重点和审计覆盖面 ,加强质量控制 ,提高工作质量和效率。

1，3—丁二烯及其环氧化物遗传毒理学研究进展

１，３—丁二烯及其环氧化物遗传毒理学研究进展①刘胜学综述曹佳审校第三军医大学预防医学系分子毒理实验室重庆６３００３８１，３—丁二烯（１，３－Ｂｕｔａｄｉｅｎｅ，简称ＢＤ）是一种无色、易燃的气体，广泛用于合成橡胶、轮胎、塑料等石油化工与制造行业中（１３...

HPRT基因突变的分子图谱及检测方法学

ＨＰＲＴ基因编码产生参与细胞内嘌呤补救代谢途径的关键酶，由于其本身所具有的一些独特性质，逐渐成为基因突变、基因定位与基因转移研究中的重要靶基因之一。本文介绍了ＨＰＲＴ基因的分子结构、基因突变检测的分子生物学技术、ＨＰＲＴ基因突变谱以及分子突变机制的研究现状，并展望了其发展前景。

试谈如何写好审计统计分析

审计统计分析是审计统计工作的重要阶段,它是在占有大量统计数据和审计工作情况的基础上,对审计统计资料进行全面系统地归纳整理,灵活运用统计分析方法,从审计统计数据中发现规律性的问题,是对统计资料进行深加工形成的综合产品。它融数据、情况、问题、分析、建议于一体,能够深刻地反映情况、说明问题、揭露矛盾、提出建议、预测未来,能够发挥审计统计工作的服务与监督作用,为领导宏观决策服务,以促进审计事业的发展。 本文针对目前在撰写审计统计分析过程中存在的问题,浅谈一下如何写好审计统计分析。

昆明山海棠总生物碱诱发HL-60细胞凋亡的观察

目的 观察昆明山海棠 (TH)总生物碱诱导白血病细胞凋亡的发生情况。方法 应用台盼蓝染色法 ,荧光双重染色法 ,DNA电泳结合流式细胞仪对HL 6 0细胞的凋亡进行观测。结果 HL 6 0细胞在TH总生物碱作用下出现典型的细胞凋亡特征 ,包括细胞形态改变、DNA梯状带及亚G1峰 ,且动态变化过程较为一致。结论 TH总生物碱具有较强的诱导白血病HL 6 0细胞凋亡的能力 ,总生物碱是TH诱导凋亡的有效成份之一。

昆明山海棠总生物碱体外抗肿瘤作用的研究

目的:探讨昆明山海棠(THH)总生物碱对10种不同肿瘤细胞系的抑制作用,并筛选出最敏感的肿瘤细胞系。方法:采用XTT法和SRB法对THH总生物碱体外抗肿瘤作用进行初步筛选。结果:THH总生物碱对10种不同肿瘤细胞系生长均有明显的抑制作用,而且对不同肿瘤细胞系抑制作用存显著差异和选择性。尤其是对人T细胞白血病细胞系MOLT-4、人T淋巴母细胞白血病细胞系Jurkat、小鼠黑色素瘤细胞系B16-F10、人结肠腺癌细胞系SW-480抑制率均>80%,其对应的IC50分别为13.59,24.10,30.05,31.39mg·L-1。结论:THH总生物碱体外具有广泛,高效的抗肿瘤活性,可进一步探讨其作为抗肿瘤药物研究开发的价值。

昆明山海棠诱导HL-60细胞凋亡的初步研究

目的 探讨中药昆明山海棠 (THH)诱导急性白血病细胞凋亡的规律及发生机制。方法 应用染料排除法、活细胞荧光染色、DNA电泳、流式细胞仪、斑点杂交、原位杂交和荧光 Ca2 +指示剂进行检测和观察。结果 HL-6 0细胞在 THH作用下出现典型的细胞凋亡特征 ,包括细胞形态改变、DNA梯状带以及亚 G1 峰 ,并且存在明显的量效和时效关系。进一步研究表明 ,Bcl- 2基因在凋亡过程中的表达持续下调 ,细胞内游离 Ca2 + 浓度未发生明显变化。结论 THH有较强的诱导白血病 HL- 6 0细胞凋亡的能力 ,其作用机制与下调 Bcl-

昆明山海棠总生物碱诱导肺腺癌A549细胞凋亡与细胞周期改变

目的为探讨昆明山海棠总生物碱(alkaloids from Tripterygium Hypoglaucum Hutch,THHa)抗肺癌机制,研究THHa诱导肺腺癌A549细胞凋亡与细胞周期改变的关系。方法应用形态学观察、DNA凝胶电泳、流式细胞仪检测分析肺腺癌A549细胞凋亡及细胞周期改变。结果THHa能够诱导肺腺癌A549细胞凋亡并主要作用于细胞周期S期(S期细胞增多)。结论THHa可能通过诱导细胞凋亡而抑制A549细胞增殖,这种作用与细胞周期有关,这些有助于将来肺癌治疗方案的合理设计。

贫铀对小鼠睾丸生精细胞和精子遗传损伤的初步研究

目的 初步探讨小鼠吸入不同剂量的贫铀 (DU)气溶胶对生精细胞和精子的遗传损伤作用。方法 采用小鼠睾丸初级精母细胞染色体畸变试验、小鼠睾丸生殖细胞微核试验和精子染色质结构试验 (SCSA) ,评价DU诱导小鼠生精细胞和精子的遗传损伤程度。结果 吸入DU气溶胶组睾丸生殖细胞微核发生率与对照组相比无显著差异 ,吸入 ( 73 1 5 2± 3 5 99)和 ( 877 83± 43 19)ng gDU组小鼠睾丸初级精母细胞染色体数目畸变率为 17 2 %和 2 7 2 %,与对照组比较显著升高 (P <0 0 1) ;精子染色质结构试验中 ,对照组、吸入 ( 73 1 5 2± 3 5 99)和 ( 877 83± 43 19)ng gDU组的精子SCSA各变量平均值 :αT分别为 2 5 3 5 1± 3 1 76、2 88 2 9± 68 3 0、2 94 5 6± 72 90 ,%COMP分别为 3 73± 5 5 0、9 0 2± 4 43、9 11± 5 3 3 ,%GREEN分别为 0 89± 0 44、1 62± 1 0 6、1 80± 0 61,DU组各变量值与对照组比较均有显著增高 (P <0 0 5 )。

硝酸羟胺急性毒性和诱导染色体损伤的初步研究

背景与目的:探讨硝酸羟胺的急性毒性和半数致死剂量(LD50)以及对染色体的影响,为其安全使用提供依据。材料与方法:小鼠腹腔注射不同浓度的硝酸羟胺溶液,观察小鼠死亡率和脏器的病理改变;计数小鼠骨髓细胞微核率和染色体畸变率,评价硝酸羟胺对小鼠的毒性作用程度。结果:小鼠的LD50 24 h为186 mg/KG(177-197 mg/kg);14 d为183 mg/kg(174-194mg/kg);肉眼未见脏器有病理改变。小鼠腹腔注射硝酸羟胺实验组微核发生率、染色体畸变率与对照组相比差异有显著性。结论:按化学物质的急性分级标准,硝酸羟胺属中等毒级别,腹腔注射硝酸羟胺可诱导小鼠染色体损伤。

大豆异黄酮对UUO大鼠TGF-β_1的抑制作用

目的 探讨大豆异黄酮对单侧输尿管梗阻 (unilateralureteralobstruction ,UUO)大鼠梗阻肾脏肾间质纤维化的防治作用及机制。方法 观察大鼠结扎侧肾脏的病理改变 ,应用HE和PAS染色观测肾间质容量 ,应用RT PCR法检测肾组织内TGF β1mRNA的表达。结果 异黄酮组梗阻肾肾间质容量明显低于对照组 ;异黄酮组TGF β1mRNA表达明显低于对照组 ,统计学分析差异显著 (P <0 0 5 ) ,异黄酮组肾间质纤维化程度轻于对照组。结论 大豆异黄酮对UUO大鼠梗阻肾肾间质纤维化有一定的抑制作用 ,其机制与大豆异黄酮可抑制TGF β1mRNA的表达有关。