a-1,3-N-乙酰半乳糖胺转移酶基因EXON 7突变形成A311血型基因亚型

本研究对1例产生抗A抗体的血清学正反定型不符的A血型标本进行血型血清学分析及基因分析,以了解其分子基础。采用试管法进行血型血清学的检测,采用PCR-SSP对A基因进行扩增分析,采用Sanger测序法对A血型糖基转移酶基因进行测序分析。结果表明:血清学正反定型不符,初定为A亚型;PCR-SSP扩增检测结果有O、A血型基因的存在;对ABO基因第6外显子测序发现存在c.261delG,显示有O基因;对A、O基因第7外显子进行特异性扩增测序分析显示,在A单倍型基因第7外显子出现c.467 C>T、c.626 G>A的突变,在O单倍型基因第7外显子出现c.646T>A、681G>A、771C>T、829G>A等突变。结论:该献血者在A基因第7外显子的c.626G>A是新的等位基因突变,c.467 C>T是SNP;新突变的GenBank序列号是KC690281,被BGMUT命名为1个新的A等位基因亚型A311。

血型基因分析鉴定罕见的B(A)04亚型1例

B（A）型是ABO血型的变异型,在我国人群中的比例极低,常因血清学正反定型不符而难以最终确定。借助于血型基因分析技术,能较好地解决这个问题。本研究通过基因分型及分子测序的方法检测1份临床术前备血的疑难标本,确认其为B（A）04型,报道如下。

献血者血液中HCMVpp65检测方法的建立与初步应用

为保证病人的用血安全 ,建立适合于血站对HCMV病原检测的方法 ,本研究采用免疫组织化学的技术 ,结合本实验室具体条件检测HCMV的 pp6 5 ,细胞计数 (6 - 8)× 10 6/ml,取量 2 0 μl,涂片油镜镜检5 0 0 0 0个细胞。结果表明 :在 10 3人份样本中 ,阳性标本为 10例 ,阳性率为 9.71% ,对 10名阳性人中的 2人进行第 2次pp6 5的监测 ,结果均为阳性。结论 :该方法简单、快速、有效 ,完全适合于血站系统对献血者的HCMV进行病原学检测 ,有推广的价值。

血小板新等位基因Cab^(a+)在汉族人群中的调查

目的对血小板新等位基因Caba+进行分型并调查其在中国汉族部分人群中的分布。方法采用PCR-SSP方法对无亲缘关系的健康无偿献血者进行Caba+基因分型,采用基因计数法进行基因频率、基因型频率的计算。结果 299例正常人的Caba-基因频率为1.000,Caba+基因频率为0.000;Caba+/+、Caba+/-的基因型频率均为0.000,Caba-/-基因型频率为1.000。结论 Caba-(2235G)为高频抗原,Caba+(2235T)为低频抗原,299份标本中尚检测不出Caba+基因。

血小板特异性抗原HPA-17bw基因分型及基因频率调查

目的对HPA-17bw基因分型并调查其在部分汉族人群中的分布。方法采用PCR-SSP方法对无亲缘关系的健康无偿献血者HPA-17bw进行基因分型,采用基因计数法进行基因频率、基因型频率的计算。结果259名正常人的HPA-17bw基因频率为0.000;HPA-17bw/bw的基因型频率为0.000。结论HPA-17bw为低频抗原,259份汉族样本中尚检测不出HPA-17bw。

3万献血者血液传染性标志物检测结果与分析

对取自 2 0 0 0年 3月至 2 0 0 1年 6月共 30 46 4名街头无偿献血者的血液进行ALT、HBsAg、HCV、HIV、梅毒等的检测。得出相应的传染性标志物指标 ,并对这些标志物的检测结果进行了分析。

TPPA-凝胶结合法用于梅毒特异性抗体检测的实验研究

目的研究建立梅毒特异性抗体快速检测的实验方法。方法选取献血者TP-ELISA检测阳性标本46份和RPR法检测阳性的临床梅毒就诊患者的标本14份,以TPPA法为梅毒特异性抗体检测的对照,探讨TPPA与微凝胶柱法相结合的方法检测梅毒特异抗体的可行性。首先在96微孔板中对待检标本进行一定的稀释,然后按TPPA法的要求在相应的稀释孔中加入融化完全的D阴性颗粒、C梅毒抗原包被的阳性颗粒,混匀后注入微凝胶柱上腔中37℃孵育、离心,判读结果。结果46份献血者的标本中,TPPA-凝胶结合法与TPPA法均为阳性的有36份,均为阴性的10份;14份临床梅毒就诊患者的标本,两法均为阳性的13份、阴性1份。结合法与TPPA法的实验结果完全一致,符合率为100%。TPPA-凝胶结合法比TPPA法实验的观测时间大大地缩短,从2h缩短为30min,整个检测时间<1h。结论TPPA-凝胶结合法用时短,结果易于判读和保存,可用于梅毒特异性抗体的快速检测。

血型基因分析鉴定B(A)亚型

目的对2例血清学正反定型不符的ABO血型进行鉴定。方法血清学采用试管法,基因分析采用PCR-SSP法和分子测序的方法。结果血清学为B(A),PCR-SSP分型结果是分别为B(A)02、04型,基因测序的结果:2个标本第6外显子均出现nt.261delG、297A/G;第7外显子标本1出现B(A)02型特有的突变700C】G;标本2出现B(A)04型640A】G的典型突变。结论通过PCR-SSP及基因测序证实此2份标本分别是B(A)02、04型,基因型分别为B(A)02/O01、B(A)04/O01的杂合。血型基因分子测序是疑难血型鉴定中非常有用的方法。

精准输血的初步探讨

本文通过对不同血型系统在临床中的重要性分析,从精准输血的概念、精准输血的内容、标本检测与电子配血等方面,提出了精准输血的三线原则,初步探讨了开展精准输血的相关问题。

超滤盐析结合法纯化人白细胞干扰素的新工艺

<正>常规的KCNS酒精低温法纯化人白细胞干扰素生产周期长、繁琐、收率低。笔者根据多年的生产实践,结合已有的条件,提出采用超滤加KCNS低温纯化的方法,在不降低收率的前提下,可以使生产周期大大缩短（从6d缩短至2～3d）,且便于大规模生产。1主要设备及试剂 密理博超滤器,Pellicon Cassette System,1～2台,日本;超滤膜,8K、30K assette,5SQF,各5块,日本;蠕动泵,XX80 2G2 30,美国; 4C冷室, 18M,自造;大容量冷冻低温离心机,K80,2台,原东德;pH计、无级调速搅拌机、各种规格不锈钢桶、棒等均为国产。 粗品干扰素,效价 1×10~4u/ml以上;KC-NS、NaOH、HCl等。

微柱凝胶技术在新生儿溶血病血清学检查中的运用

目的 采用微柱凝胶技术进行新生儿溶血病血清学检查试验。方法 以微柱凝胶技术对 116例患儿进行血型鉴定及直接抗球蛋白试验、血清游离IgG抗体测定、红细胞抗体释放试验。结果 试验时间缩短 ,判定直观 ,灵敏度及特异性显著提高。结论 该法效果好于试管法 ,具有快速、简便 ,试验样本量少 ,重复性好 ,结果一目了然 。