HepaCAM联合吡柔比星抑制膀胱癌BIU-87细胞的增殖

目的:研究肝细胞黏附分子(hepatocyte cell adhesion molecule,hepa CAM)联合吡柔比星(pirarubicin,THP)对膀胱癌细胞BIU-87的增殖影响。方法:将BIU-87细胞分为空白处理组、hepa CAM过表达腺病毒(adenovirus-GFP-hepa CAM,Ad-GFPhepa CAM)处理组、THP处理组、Ad-GFP-hepa CAM联合THP处理组。噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测细胞增殖,流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测细胞周期,real-time PCR检测细胞周期相关基因cyclin D1,CDK2的m RNA表达。将空白、空载腺病毒(adenovirus-GFP,Ad-GFP)、hepa CMA过表达腺病毒(Ad-GFP-hepa CAM)处理的BIU-87细胞分别注射于裸鼠皮下,观察裸鼠成瘤情况并记录瘤体体积,4周后处死裸鼠。切取各组瘤体组织,组织切片行HE染色和免疫组化检测hepa CAM蛋白的表达。结果:Ad-GFP-hepa CAM联合THP处理组,与THP处理组比较,BIU-87细胞增殖受到明显抑制(F=2.702,P=0.00);细胞周期明显阻滞于G0/G1期(F=10.989,P=0.000);cyclin D1、CDK2的m RNA表达明显下调(F=5.4299,P=0.000)。Ad-GFPhepa CAM处理组的BIU-87细胞成瘤体积明显低于空白处理组(F=12.587,P=0.000)。结论:hepa CAM基因能够增强吡柔比星对膀胱癌BIU-87细胞的增殖抑制作用。

WPBL教学法在临床检验基础教学中的应用

随着医疗事业的不断改革和发展,面向基层的实用型医学检验技术人才越来越被重视,如何培养更多的医学检验技术实用型人才也就成为当务之急,所以要以高职高专类医学检验技术专业课程的教学改革为基点。以问题为基础的学习（Problem-Based Learning,PBL）是1969年由美国医学教育先驱、神经病学专家Howard Barrows教授在加拿大Mc Master（麦克马斯特）大学首创的一种教学方法,与传统的以讲授为基础的学习（Lecture—Based Learning，LBL）教学法比较，PBL教学法更加重视学生能力的培养，包括学生的自主学习能力、问题分析能力等。

腺病毒介导的hepaCAM基因对膀胱癌细胞周期的影响

膀胱移行细胞癌是泌尿系恶性肿瘤之一，其生物学特性复杂，易复发。肝细胞黏附分子（hepatocytecelladhesionmolecule，hepaCAM）由Shen课题组于2005年发现，具有抑制肿瘤生长的作用。本课题组的前期研究结果也表明，外源性hepaCAM基因导入肾癌细胞和膀胱癌细胞后，能有效抑制肿瘤的生长。

浅谈循证检验医学发展

随着科学技术和基础医学研究的不断发展,人们不断对循证医学有了更深刻的了解,从而促进检验医学的发展,提出循证检验医学。

金黄地鼠颊黏膜鳞癌动物模型的建立及其生物学特性的研究

目的建立金黄地鼠颊黏膜鳞癌动物模型,观察其生物学特性。方法 40只采用0.05%4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)涂抹颊黏膜,10只采用自来水涂抹颊黏膜。苏木精-伊红(HE)、转录因子蛋白(Foxm1)免疫组织化学观察第8、12周组织标本。有限稀释法体外传代培养颊黏膜组织标本,观察平板克隆形成率,检测单克隆细胞内细胞角蛋白(CK)和波形蛋白(Vim)表达,染色体分析确定细胞核型。结果第12周时26(84.6%)只颊黏膜病理为原位癌,HE染色、Foxm1免疫组织化学结果表明,符合鳞癌细胞基本特征,CK和Vim免疫组织化学阳性率约为96.0%,染色体为四倍体核型。结论 4NQO涂抹诱发金黄地鼠颊黏膜癌变,建立金黄地鼠颊黏膜鳞癌动物模型。

用中和试验评价四种ELISA试剂盒检测抗-HBe结果的准确性

目的用中和试验方法验证酶联免疫吸附试验(ELISA)竞争抑制法和中和竞争法检测血清乙型肝炎e抗体(抗-HBe)的性能。方法竞争抑制法选择A、B试剂,中和竞争法选择C、D试剂检测抗-HBe;4种试剂结果明显差异的标本,用中和试验确认抗-HBe。结果 4种试剂检测随机血清标本455份,其中195份(42.85%)抗-HBe结果有差异。4种试剂检测抗-HBe总阳性数279份(61.32%),其中均阳性84份(30.11%)。经中和试验确认,A、B、C试剂假阴性率为35.0%～72.5%;假阳性率为31.4%～77.1%。D试剂假阳性率为37.1%,假阴性率为5.0%。结论 ELISA一步法检测抗-HBe,4种试剂均存在一定比例的假阳性或假阴性,D试剂准确性明显优于A、B、C试剂。中和试验对于确认抗-HBe结果的准确性简便而实用。

吡柔比星通过PLCε-Bcl-2通路抑制膀胱癌细胞增殖

目的探讨吡柔比星对膀胱癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法膀胱癌细胞T24和BIU-87分别用0.4、0.8、1.6、3.2mg/L的吡柔比星处理24、48、72h,用四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率,qRT-PCR、RT-PCR检测磷脂酶Cε(PLCε)mRNA及凋亡调控基因Bcl-2mRNA的表达,蛋白质印迹法检测PLCε蛋白的表达。将膀胱癌细胞分为空白组、吡柔比星处理组、Ad-shPLCε处理组、吡柔比星联合PLCε干扰腺病毒载体(Ad-shPLCε)处理组,检测并比较各组细胞增殖和Bcl-2蛋白的表达量。结果在膀胱癌细胞T24、BIU-87中,吡柔比星对细胞的抑制率呈浓度、时间依赖性,即随着药物浓度增加、处理时间延长,细胞抑制率升高;吡柔比星促进T24和BIU-87细胞凋亡,并且抑制PLCε和Bcl-2表达。吡柔比星处理组、Ad-shPLCε处理组、Ad-shPLCε联合吡柔比星处理组均能抑制细胞增殖和Bcl-2表达,且Ad-shPLCε联合吡柔比星处理组的抑制作用高于吡柔比星处理组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论吡柔比星能有效抑制膀胱癌细胞的增殖,可能与其抑制PLCε癌基因及下游Bcl-2基因的表达有关。

牛磺酸上调基因1(TUG1)对肝纤维化的作用及其机制

目的:探讨牛磺酸上调基因1(TUG1)在肝纤维化中的作用机制。方法:按照文献建立TGF-β1(5 ng/ml)刺激的活化肝星状细胞模型和经典的1%DMN(1 ml/kg/d)致大鼠肝纤维化模型,将肝纤维化大鼠和活化肝星状细胞(HSC)均分为模型对照组、阴性对照组(沉默TUG1阴性对照)、siRNA干扰组(TUG1基因沉默组)。实验结束后利用苏木精-伊红(HE)染色检测大鼠肝脏组织病理变化;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法、蛋白免疫印记(Western blot)分别测定大鼠肝组织及活化肝星状细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、TUG1、I型胶原蛋白(collagenI)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1)、Smad2、Smad3表达水平。结果:肝组织病理学检查显示,沉默TUG1能够明显缓解肝脏纤维化病理改变,Western blot结果显示,沉默TUG1能够显著降低大鼠肝组织和活化肝星状细胞中TUG1、α-SMA、collagenI、MMP-2、TIMP-1、Smad2、Smad3基因与蛋白表达水平(P<0.05)。与模型对照组相比,阴性对照组的TUG1、α-SMA的蛋白与基因水平明显升高(P<0.05)。与模型对照组和阴性对照组相比,siRNA干扰组中TUG1,α-SMA,collagenI,MMP-2,TIMP-1,Smad2 and Smad3的蛋白和基因水平显著降低(P<0.05),而在模型对照组和阴性对照组中TUG1,α-SMA,collagenI,MMP-2,TIMP-1,Smad2 and Smad3的蛋白和基因表达水平之间差异无显著性。结论:TUG1在肝纤维化组织和活化的肝星状细胞中显著上调,沉默TUG1可能通过抑制转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad信号通路改善1%DMN致大鼠肝纤维化病理损伤,降低活化肝星状细胞中纤维化相关蛋白水平,发挥抗肝纤维化的作用。

《临床检验基础》教学改革策略综合性探析

如何培养高素质与临床结合紧密的医学检验技术实用人才,提高医学检验专业的教学质量是关键,本人从多年的教学实践着手,以《临床检验基础》为例,对教学模式、教学方法、教学手段进行了改革和创新,取得了较好的教学效果。

梅毒螺旋体感染筛选方法的临床研究

梅毒是性传播疾病中危害最严霞的一种,近年来其发病率有上升趋势,为了选择一种梅毒螺旋体（treponema.pallidum,TP）检测的简便、准确方法,协助临床诊断和治疗,我们采用TRUST、TP-DICA、TPPA 3种方法对4 012例住院患者进行了梅毒的筛选,并将3种方法进行了比较.现报告如下.

microRNA研究现状

MicroRNAs(miRNAs)是近年来发现的一种非编码的小RNA,长度仅22个核苷酸左右,普遍介导基因转录后的调节,参与调控机体各种生理进程。miRNA与多种疾病的发生发展密切相关。本文对miRNA的来源、合成、功能、与疾病的关系等方面研究进行综述。

河南省疾病预防控制机构卫生检验人力资源现状分析

目的了解河南省高职高专卫生检验专业设置的必要性。方法在河南省范围内,对108家疾病预防控制中心人力资源进行调查。依据中国疾病预防控制中心基本信息系统,分析省、市、县(区/县级市)疾病预防控制中心卫生检验人员数量、年龄、学历、专业、职称等。结果河南省各级疾病预防控制中心卫生检验人员在数量、学历、职称等方面存在一定的差异,省级总体情况较好,县(区)级卫生检验人员匮乏,学历、职称低等问题较突出。结论各级政府应加强高职高专卫生检验应用型人才培养,提高人才素质。

高职高专病原生物学与免疫学实验课教学与安全管理的问题及策略

针对高职高专院校病原生物学与免疫学实验课教学存在的教学及安全管理问题,本课题组提出相应的解决策略,使实验课安全得到保障,提高了教学效果。

乡村医生的实验室检查认知现状及需求调查分析

乡村医生是我国基层卫生队伍的重要组成部分，直接担负着我国8．7亿农业人口的初级卫生保健工作，他们的医疗技术水平直接影响着广大农民的生命安全。2004年，中央把“三农”问题列为一号文件，内含诸多矛盾与问题亟待解决，其中一个突出的问题就是乡村医生综合素质偏低，疾病误诊率较高。

雷公藤甲素诱导急性髓细胞白血病干细胞凋亡及其机制

目的探讨雷公藤甲素诱导急性髓细胞白血病干细胞凋亡的分子机制。方法采用MTT法检测雷公藤甲素对KG-1细胞的增殖抑制作用,计算出IC50值,按照浓度梯度用雷公藤甲素处理KG-1细胞48 h,流式细胞仪检测细胞凋亡变化。Western blot法检测Bcl-2、β-catenin、p-AKT和AKT等蛋白的变化。结果雷公藤甲素对KG-1细胞的增殖抑制呈剂量依赖性,IC50值约为4 nmmol/L,其还可诱导KG-1细胞凋亡。雷公藤甲素能够下调Bcl-2、β-catenin,p-AKT等蛋白的表达水平。结论雷公藤甲素诱导KG-1细胞的分子机制可能与Bcl-2、β-catenin、p-AKT的下调有关。

肝细胞黏附分子对膀胱移行癌细胞基因表达谱的影响

目的利用Affymetrix基因表达谱芯片探讨肝细胞黏附分子(hepaCAM)对膀胱移行癌细胞基因表达谱的影响及作用的分子机制。方法运用Affymetrix Human plus 2.0全基因组芯片检测膀胱移行癌细胞株EJ细胞腺病毒-绿色荧光蛋白-hepaCAM感染组与腺病毒-绿色荧光蛋白感染组的基因表达谱,用SAM法进行差异基因分析、DAVID软件进行基因本体论分析及wikiPathway分析,并用RT-PCR和Western blot验证芯片结果。结果 hepaCAM能引起EJ细胞系基因表达谱的广泛变化,表达差异超过2倍以上的基因共2469个,其中上调基因1602个、下调基因867个。这些差异表达的基因功能主要涉及细胞周期、细胞增殖调节等方面。用RT-PCR对差异基因DNA修复蛋白,肝脏激酶B1和细胞周期蛋白D1进行验证,结果与基因芯片相符;进一步在3细胞株中用Western blot佐证DNA修复蛋白、肝脏激酶B1变化与芯片结果一致。结论 hepaCAM能够诱导EJ细胞基因表达谱的广泛变化,在基因水平通过多条通路作用于膀胱癌细胞。

微RNA-103a-3p靶向调节Kazal基序富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白表达对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响

目的探讨胃癌细胞中微RNA(miR)-103a-3p与Kazal基序富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白(RECK)表达的关系及其对胃癌细胞迁移、侵袭能力的影响。方法将对数生长期人胃癌细胞系MKN-45细胞随机分为阴性对照(NC)组、miR-103a-3p组、RECK组、miR-103a-3p+RECK组。NC组细胞共转染miR-103a-3p-NC(miR-NC)和pCDH空表达载体,miR-103a-3p组细胞共转染miR-103a-3p模拟物(miR-103a-3p mimics)和pCDH空表达载体,RECK组细胞共转染miR-NC和含RECK的pCDH表达载体(pCDH-RECK),miR-103a-3p+RECK组细胞共转染miR-103a-3p mimic和pCDH-RECK。采用划痕试验检测各组细胞的迁移能力,采用Transwell实验检测各组细胞的侵袭能力,采用Western blot法检测各组细胞中RECK蛋白相对表达量。应用Starbase数据库通过生物信息分析预测miR-103a-3p与RECK的3′非翻译区(3′-UTR)是否存在结合位点,构建含有预测结合位点的野生型(Wt)、突变型(Mt)RECK 3′-UTR片段的荧光素酶报告基因载体Wt-RECK和Mt-RECK,使用脂质体2000将Wt-RECK或Mt-RECK载体与miR-NC或miR-103a-3p mimics共转染入MKN-45细胞,将转染后的细胞设为miR-NC+Wt-RECK组、miR-103a-3p+Wt-RECK组、miR-NC+Mt-RECK组、miR-103a-3p+Mt-RECK组,使用双荧光素酶检测试剂盒检测4组细胞的相对荧光素酶活性。结果4组细胞的划痕愈合率、侵袭细胞数比较差异有统计学意义(F=16.044、60.975,P<0.05);RECK组细胞划痕愈合率显著低于NC组,miR-103a-3p组细胞划痕愈合率显著高于RECK组,miR-103a-3p+RECK组细胞划痕愈合率显著低于miR-103a-3p组(P<0.05);miR-103a-3p组、miR-103a-3p+RECK组与NC组细胞划痕愈合率比较差异无统计学意义(P>0.05);RECK组与miR-103a-3p+RECK组细胞划痕愈合率比较差异无统计学意义(P>0.05)。RECK组侵袭细胞数显著少于NC组,miR-103a-3p组侵袭细胞数显著多于NC组(P<0.05);miR-103a-3p组、miR-103a-3p+RECK组侵袭细胞数显著多于RECK组(P<0.05);miR-103a-3p+RECK组侵袭细胞数显著少于miR-103a-3p组(P<0.05);NC组与miR-103a-3p+RECK组侵袭细胞数比较差异无统计学意义(P>0.05)。4组细胞中RECK蛋白相对表达量比较差异有统计学意义(F=33.473,P<0.05);RECK组细胞中RECK蛋白相对表达量显著高于NC组,miR-103a-3p组、miR-103a-3p+RECK组细胞中RECK蛋白相对表达量显著低于RECK组(P<0.05);NC组与miR-103a-3p组、miR-103a-3p+RECK组细胞中RECK蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);miR-103a-3p组与miR-103a-3p+RECK组细胞中RECK蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。Starbase数据库预测显示,miR-103a-3p与RECK的3′UTR存在结合位点。miR-NC+Wt-RECK组、miR-NC+Mt-RECK组、miR-103a-3p+Mt-RECK组细胞的相对荧光素酶活性显著高于miR-103a-3p+Wt-RECK组(P<0.05);miR-NC+Wt-RECK组、miR-NC+Mt-RECK组、miR-103a-3p+Mt-RECK组细胞的相对荧光素酶活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论miR-103a-3p可能通过靶向抑制RECK的表达而促进胃癌细胞的侵袭和迁移。

造血干细胞捐献后电解质和骨代谢相关指标变化及意义

目的探讨干细胞捐献者柠檬酸钠抗凝剂对电解质和骨代谢相关指标的影响, 评估其对干细胞捐献者骨密度(BMD)的影响, 更好地保护干细胞捐献者的健康。方法采集23名正常外周血干细胞捐献者注射动员剂人类粒细胞集落刺激因子(G-CSF)前24 h及干细胞采集后6个月的血样, 分别进行电解质以及骨代谢相关指标检测, 包括游离钙离子(Ca2+)、镁离子(Mg2+)、钾离子(K+)、钠离子(Na+)、氯离子(Cl-)、无机磷(Pi);骨形成指标骨钙素(OC)、β-胶原特殊序列(β-CTX)、碱性磷酸酶(ALP)、BMD、总Ⅰ型胶原氨基端延长肽(T-PINP)和25羟维生素D(25-OHVD)。结果注射动员剂G-CSF前24 h及干细胞采集后6个月血清中Ca2+(2.35±0.06比2.41±0.06)、Mg2+(0.89±0.05比0.89±0.06)、K+(4.29±0.30比4.18±0.34)、Na+(142.26±1.83比141.21±2.31)、Cl-(2.35±0.06比2.41±0.06)水平差异无统计学意义(P>0.05), Pi水平升高(0.47±0.42比0.63±0.39, P<0.05);注射动员剂G-CSF前24 h及干细胞采集后6个月OC(14.46±3.79比14.71±3.03)、β-CTX(0.44±0.18比0.41±0.18)、ALP(69.82±19.43比80.87±23.87)、BMD(0.95±0.09比0.91±0.15)、T-PINP(48.59±19.00比46.02±16.54)差异无统计学意义(P>0.05), 25-OHVD水平明显降低(21.09±7.13比19.94±6.34, P<0.05)。结论注射动员剂和柠檬酸钠抗凝剂对造血干细胞捐献后电解质和骨代谢相关指标无明显影响, 干细胞捐献者采集前后未出现明显不良反应。

教育教学中的形式主义探析

一教学管理中的形式主义1教学计划中的形式主义:计划脱离实际随着教学资源的共享,网络资源的推广,很多学校的教学计划"广借广摘",内容丰富,既有新课程理念培训。