ATG14调控家兔毛囊毛乳头细胞自噬进程的功能探究

旨在探究自噬相关蛋白14(autophagy-related protein 14,ATG14)调控家兔毛囊毛乳头细胞(dermal papilla cells, DPCs)自噬进程对毛囊发育生长的影响。本试验选取健康6月龄长毛兔,采集背部皮肤分离培养DPCs,通过克隆ATG14基因的编码序列(coding sequence, CDS),利用生物信息学对ATG14的生物学特性进行初步分析,在家兔DPCs中过表达或敲减ATG14对自噬相关蛋白和毛囊生长发育相关基因的表达及DPCs增殖水平的影响进行探究。结果表明,ATG14基因CDS长度为1 479 bp,共编码492个氨基酸,不存在潜在信号肽及跨膜区,属于定位于细胞核的不稳定蛋白,在不同哺乳动物中存在同源性。家兔DPCs中过表达或敲减ATG14后,WB结果显示ATG14能够上调自噬标志蛋白LC3和Beclin1的蛋白表达,抑制自噬抑制蛋白P62表达水平。ATG14能够增加细胞中pEGFP-LC3B荧光表达,表明ATG14能够激活细胞中LC3B的表达。同时,在DPCs中过表达ATG14能够显著上调CCND1、FGF2、LEF1、BCL2和WNT2的mRNA表达水平,显著下调SFRP2和TGFβ-1的基因表达水平(P<0.05),敲减ATG14能够显著下调CCND1、FGF2、LEF1、BCL2和WNT2的基因表达水平,显著上调SFRP2和TGFβ-1的mRNA水平(P<0.05)。ATG14能够上调LEF1和CCND1的蛋白表达水平。此外,DPC中过表达ATG14能够显著促进DPCs细胞增殖(P<0.01)。本研究通过对家兔ATG14基因调控DPCs自噬进程的功能进行分析,为阐明家兔毛囊生长发育的调控机制提供理论依据。

利用微卫星技术分析中国部分地方鸡种的遗传结构

利用 7个微卫星标记对鹿苑鸡、固始鸡、藏鸡、白耳鸡、仙居鸡、茶花鸡、大骨鸡、北京油鸡、狼山鸡、河南斗鸡、泰和乌骨鸡和萧山鸡等 12个中国地方鸡种的等位基因频率、基因杂合度、平均基因杂合度、多态信息含量以及群体间的亲缘关系进行分析。研究结果表明 ,12个地方鸡种在 7个微卫星座位上的基因频率存在一定的差异 ;鹿苑鸡的平均基因杂合度最高 ,为 0 5 92 9;茶花鸡的平均遗传杂合度最低 ,为 0 35 14。平均多态信息含量也出现了类似的结果 ,说明鹿苑鸡的遗传多样性最丰富。模糊聚类分析结果表明 ,12个地方鸡种间 ,泰和乌骨鸡与河南斗鸡的亲缘关系相对较近 ,而固始鸡与其他 11个地方鸡种的亲缘关系相对较远。 12个地方鸡种可以聚为 3类 :泰和乌骨鸡、河南斗鸡、狼山鸡、大骨鸡、萧山鸡、北京油鸡、鹿苑鸡聚为第 1个类群 ;茶花鸡、藏鸡、仙居鸡、白耳鸡聚为第 2类群 ;固始鸡为第

11个地方鸡品种性状间的典型相关分析

对中国部分地方鸡品种的体尺性状、屠宰性状、产蛋性状和生态性状等4组性状间的17个变量关系进行了典型相关分析。结果表明,体尺性状和屠宰性状间、体尺性状与生态性状间以及屠宰性状与生态性状间的第1个典型相关系数达极显著水平,分别占总相关信息的38.17%、42.73%和42.13%,其典型相关系数分别为0.998、0.997和0.998;体尺性状与产蛋性状间和产蛋性状与生态性状间的第1个典型相关系数达显著水平,分别占总相关信息的42.55%和66.79%,其典型相关系数分别为0.965和0.984。研究结果对于鸡的遗传育种具有一定的参考价值。

中国部分地方鸡种肌肉组织学特点及其肉品质的比较研究

对我国肖山鸡、白耳鸡、狼山鸡、乌骨鸡、油鸡、白耳鸡（♂）×肖山鸡（♀）、肖山鸡（♂）×白耳鸡（♀）７个地方鸡种胸肌、腿肌组织学和胸肌肉品质进行了研究。结果表明：（１）腿肌肌纤维密度由高到低依次为乌骨鸡、油鸡、白耳鸡、白耳鸡（♂）×肖山鸡（♀）、肖山鸡（♂）×白耳鸡（♀）、肖山鸡、狼山鸡，其中乌骨鸡与其它鸡种间差异显著（Ｐ＜０．０５），其它鸡种间差异不显著（Ｐ＞０．０５）；胸肌肌纤维密度由高到低依次为乌骨鸡、白耳鸡、油鸡、狼山鸡、肖山鸡（♂）×白耳鸡（♀）、白耳鸡（♂）×肖山鸡（♀）、肖山鸡，其中乌骨鸡与肖山鸡、肖山鸡（♂）×白耳鸡（♀）、白耳鸡（♂）×肖山鸡（♀）有显著差异（Ｐ＜０．０５）；７个鸡种胸肌肌纤维密度均极易著地高于腿肌肌纤维密度（Ｐ＜０．０１）；（２）腿肌肌纤维直径由细到粗依次为乌骨鸡、油鸡、白耳鸡、肖山鸡（♂）×白耳鸡（♀）、白耳鸡（♂）×肖山鸡（♀）、肖山鸡、狼山鸡，其中狼山鸡与肖山鸡腿肌肌纤维直径差异不显著（Ｐ＞０．０５），与其它鸡种间有显著差异（Ｐ＜０．０５）；胸肌肌纤维直径由细到粗的顺序跟腿肌肌纤维直径相同，其中肖山鸡、狼山鸡、白耳鸡（♂）×肖山鸡（♀）、肖山鸡（♂）×白耳鸡（♀）与乌?

萧山鸡体尺性状、产肉性状与血液生化性状的典型相关分析

对萧山鸡体尺、产肉与血液生化3组性状12个变量进行典型相关分析。结果表明:体尺性状与血液生化性状间的第一个典型相关系数达极显著水平,占两组性状间总相关信息的83.98%;体尺性状与产肉性状间和产肉性状与血液生化性状间的第一个典型相关系数达显著水平,分别占两组性状间总相关信息的64.51%和77.67%,其典型相关系数分别为0.948、0.979和0.912。在3组性状中起主要作用的性状有:体斜长、胸肌重、全净膛重、腿肌重、胆固醇含量和碱性磷酸酶活性。

鸡胚胎干细胞分离培养和单细胞克隆的制备

从鸡第X期胚胎中分离胚盘,以鸡成纤维细胞为饲养层,用添加了10%的胎牛血清、2%的鸡血清、2mmol/LL-谷氨酰胺、1mmol/L丙酮酸钠、5.5×10-5mmol/Lβ-巯基乙醇、10μL/mL非必需氨基酸、以及含1000U/mLLIF、10ng/mLbFGF和5ng/mLSCF的高糖DMEM对细胞进行培养和传代。利用鸡第Ⅹ期的胚胎干细胞,采用口吸管法、细胞稀释法和克隆环法3种方法,制备单细胞克隆,采用细胞化学法和免疫荧光法检测细胞表面标志物。结果显示,可获得传至5～6代的鸡胚胎干细胞。通过对传代培养后的鸡ES细胞进行AKP染色鉴定和SSEA-1的鉴定,证实细胞未发生分化,具有胚胎干细胞的特征。通过不同分离胚盘方法和不同消化时间的比较得出药勺法提取胚盘简单易行,原代消化5～8min的ES细胞适合于传代培养。口吸管法、细胞稀释法和克隆环法单细胞克隆形成率分别为0、4.2%和1.0%。经AKP活性和SSEA-1免疫荧光鉴定均呈阳性,扩增出的克隆能稳定增殖不分化。结果表明,细胞稀释法操作简单易行,试验时间短,对细胞伤害小,为鸡ES单细胞克隆进一步建系提供了可行的方法。

兔血浆碱性磷酸酶活性与生产性能关系的研究

对新西兰白兔、加利福尼亚兔、布列塔尼亚兔 (A系 )、齐卡兔 (G系 )、布列塔尼亚兔 (A系 ,♂ )×加利福尼亚兔(♀ )、布列塔尼亚兔 (A系 ,♂ )×新西兰白兔 (♀ )、齐卡兔 (G系 ,♂ )×加利福尼亚兔 (♀ )、齐卡兔 (G系 ,♂ )×新西兰白兔 (♀ ) 1 0 0日龄血浆碱性磷酸酶 (AKP)活性 ,及其与 1 0 0日龄体重、平均日增重和料重比的关系进行研究。结果表明 :齐卡兔 (G系 )、齐卡兔 (G系 ,♂ )×新西兰白兔 (♀ )、布列塔尼亚兔 (A系 )血浆 AKP活性显著高于其他 5个品种 (组合 )(P<0 .0 5) ,而这 5个品种 (组合 )间血浆 AKP活性差异不显著 (P>0 .0 5)。 8个品种 (组合 )血浆 AKP活性与 1 0 0日龄体重、平均日增重均呈正相关 ,总相关系数达极显著水平 (P<0 .0 1 ) ;与料重比均呈负相关 ,相关不显著 (P>0 .0 5)

四种肉兔及杂交兔屠宰性能和肉品质的研究

对新西兰白兔、加利福尼亚兔、布列塔尼亚兔(A系)、齐卡兔(G系)、布列塔尼亚兔(A系,♂)×新西兰白兔(♀)、布列塔尼亚兔(A系,♂)×加利福尼亚兔(♀)、齐卡兔(G系,♂)×新西兰白兔(♀)、齐卡兔(G系,♂)×加利福尼亚兔(♀)100日龄屠宰性能和肉品质进行了研究。结果表明:8个品种(组合)兔的屠宰率在52.76%～55.37%之间,其中加利福尼亚兔的屠宰率最高;肉骨比在4.65～6.53之间,以布列塔尼亚兔(A系,♂)×新西兰白兔(♀)肉骨比为最高;净肉率在82.25%～86.64%之间,亦是布列塔尼亚兔(A系,♂)×新西兰白兔(♀)净肉率最高。8个品种(组合)兔背最长肌pH值在6.33～6.88之间,差异不显著;背最长肌失水率在17.43%～20.26%之间,其中布列塔尼亚兔(A系,♂)×加利福尼亚兔(♀)失水率最低;腿肌的失水率在16.31%～18.00%之间,其中新西兰白兔失水率最低;8个品种(组合)兔腿肌的失水率比背最长肌的失水率要低;背最长肌的熟肉率在60.56%～66.81%之间,以布列塔尼亚兔(A系,♂)×新西兰白兔(♀)熟肉率为最高;腿肌的熟肉率在61.84%～66.54%之间,其中新西兰白兔熟肉率最高;背最长肌嫩度剪切值在2.18～3.96kg之间,其中加利福尼亚兔嫩度剪切值最低,嫩度最好;腿肌嫩度剪切值在2.59～3.64kg,其中新西兰白兔腿肌剪切值最低,嫩度最好。

微卫星标记与皖系长毛兔产毛量相关性的研究

利用微卫星标记技术,分析4个微卫星座位多态性与皖系长毛兔1岁时产毛量之间的关系。结果表明:Sol33微卫星座位与1岁时产毛量呈显著相关,基因型为AD和BD个体1岁时产毛量与其他3种基因型个体间均存在显著差异。其他座位Sat4、Sat13和Sol44与皖系长毛兔1岁时产毛量相关不显著。

家兔全血基因组DNA提取方法

以肝素钠抗凝的皖系长毛兔全血为材料,以常规的酚氯仿抽提法为基础,采用改进的方法提取基因组DNA。结果表明,提取的基因组DNA纯度高,用琼脂糖凝胶电泳检测基因组DNA,主带清晰、无拖尾现象。

肉兔血浆碱性磷酸酶活性比较及其与生产性能关系的研究

对新西兰白兔、加利福尼亚兔、布列塔尼亚兔 (A系 )、齐卡兔 (G系 )、布列塔尼亚兔 (A系 ,♂ )×加利福尼亚兔 (♀ )、布列塔尼亚兔 (A系 ,♂ )×新西兰白兔 (♀ )、齐卡兔 (G系 ,♂ )×加利福尼亚兔 (♀ )、齐卡兔 (G系 ,♂ )×新西兰白兔 (♀ ) 1 0 0日龄血浆碱性磷酸酶 (AKP)活性 ,及其与1 0 0日龄体重、平均日增重和料重比的关系进行了研究。结果表明 :齐卡兔 (G系 )、齐卡兔 (G系 ,♂ )×新西兰白兔 (♀ )、布列塔尼亚兔 (A系 )血浆 AKP活性显著高于其他 5个品种 (或组合 ) (P<0 .0 5) ,其他 5个品种 (或组合 )间血浆 AKP活性差异不显著 (P>0 .0 5)。 8个品种 (或组合 )血浆AKP活性与 1 0 0日龄体重、平均日增重均呈正相关 ,总相关系数达极显著水平 (P<0 .0 1 ) ;与料重比均呈负相关 ,但不显著 (P>0 .0 5)

不同培养方法对鸡精原干细胞体外培养效果的影响

本研究从孵化至16 d的鸡胚睾丸中分离获取精原干细胞(Spermatogonial stem cells,SSCs),比较3种培养液、2种处理(有无饲养层)对SSCs生长的影响,并对SSCs保持特性进行鉴定。结果表明:在无饲养层细胞存在的条件下,DMEM、TCM199和RPMI1640培养液中,SSCs的存活时间分别为6.5、6.0和3.5 d,DMEM和TCM199培养液之间差异不显著(P>0.05),但两者与RPMI1640之间均存在极显著差异(P<0.01)。在有饲养层细胞存在的条件下,在DMEM、TCM199和RPMI1640培养液中,SSCs的存活时间分别为45.5、38.0和14.0 d,三者相互之间存在着极显著的差异(P<0.01)。在6种培养体系中,SSCs在培养体系Ⅳ中的存活时间和AKP阳性克隆率分别为(45.5±3.20)d和0.31±0.46,极显著地高于其他5种培养体系(P<0.01)。SSCs在培养体系Ⅳ中传代至1、2和3代时,AKP阳性克隆率分别为31.6%、20%和18%。SSCs形成的克隆,经AKP活性检测和SSEA-1免疫染色,均呈阳性。传代至第3代的SSCs,其染色体组型保持不变,为2n=78。这些结果表明,SSCs在以DMEM为基础培养基的培养体系Ⅳ中培养至第3代时,仍保持干细胞未分化特性。

拔毛对德系安哥拉兔粗毛率及毛囊群结构的影响

选３１只２月龄德系安哥拉幼公兔，每只兔以背中线为界，左侧拔毛（试验），右侧剪毛（对照）。２月龄开始采毛，共采集１３５，２１０和２８５日龄３批毛样。每次采毛样后的第９天采集皮样。试验结果：（１）拔毛可以显著地提高粗毛率，主要原因是粗毛和两型毛根数增加，其次是粗毛直径增粗；（２）拔毛具有激活毛囊活性的迹象，使原来处于静止期的部分次级毛囊表现活性；（３）拔毛后次级毛囊数比剪毛的少；（４）拔毛使少部分次级毛囊的体积和内鞘在短时期内增大，之后随着时间的延伸逐渐恢复原状，这就是拔毛增长两型毛的机制；（５）拔毛兔与粗毛型兔之间在毛囊群结构和被毛的某些特性上呈现明显的差异。

肉兔血浆酶活性与生产性能关系的研究

对新西兰白兔、加利福尼亚兔、布列塔尼亚兔 (A系 )、齐卡兔 (G系 )、布列塔尼亚兔 (A系 ,♂ )×新西兰白兔 (♀ )、布列塔尼亚兔 (A系 ,♂ )×加利福尼亚兔 (♀ )、齐卡兔 (G系 ,♂ )×新西兰白兔 (♀ )、齐卡兔 (G系 ,♂ )×加利福尼亚兔 (♀ ) 10 0日龄血浆碱性磷酸酶 (AKP)、谷草转氨酶 (GOT)、谷丙转氨酶 (GPT)活性 ,及其与10 0日龄体重、平均日增重和料重比的相关性进行了研究。结果表明 :齐卡兔 (G系 )、齐卡兔 (G系 ,♂ )×新西兰白兔 (♀ )、布列塔尼亚兔 (A系 )血浆AKP活性显著高于新西兰白兔、加利福尼亚兔、布列塔尼亚兔 (A系 ,♂ )×加利福尼亚兔 (♀ ) (P <0 .0 5 )。 8个品种 (或组合 )兔血浆GOT活性之间没有显著差异。加利福尼亚兔血浆GPT活性显著高于齐卡兔 (G系 ,♂ )×加利福尼亚兔 (♀ ) (P <0 .0 5 ) ,其它 6个品种 (或组合 )兔之间差异不显著。 8个品种 (或组合 )兔血浆AKP活性与 10 0日龄体重、平均日增重均呈正相关 ,总相关系数均达极显著水平(P <0 .0 1) ,与料重比呈负相关 ,相关不显著。 8个品种 (或组合 )兔血浆GOT活性与 10 0日龄体重、平均日增重、料重比相关趋势不一致 ,总相关系数不显著。 8个品种 (或组合 )兔血浆GPT活性与 10 0日龄体重、平均日增重基本上呈负相关 ,?

皖系长毛兔微卫星标记多态性及其与产毛量相关的研究

本研究利用微卫星标记技术，分析了4个微卫星座位多态性与皖系长毛兔1岁时的产毛量之间关系。结果表明：皖系长毛兔4个微卫星座位上平均检测到4.5（3～6）个等住基因，平均杂合度为0．680（0．630～0．721），平均多态信息含量为0.642（0．559-0.705）。Sol33微卫星座位与1岁时产毛量呈显著相关（P〈0．05），其中基因型为AD和BD个体1岁时产毛量与其他3种基因型个体间均存在显著差异（P〈0．05）。其他座位Sat4、Sat13和Sol44与皖系长毛兔1岁时产毛量相关不显著（P〉0．05）。

利用微卫星标记分析五个家兔群体的遗传多样性

利用15个微卫星座位,分析了新西兰白兔、德系安哥拉兔、美系獭兔、齐卡G系肉兔、福建黄兔5个家兔群体的遗传多样性。结果表明:15个微卫星位点的平均等位基因数和平均有效等位基因数分别为7.400±1.639个和5.694±1.470个;5个家兔群体的平均基因杂合度和平均多态信息含量分别为0.7367和0.6994;新西兰白的平均基因杂合度和平均多态信息含量最高,福建黄兔最低。5个家兔群体的平均总近交系数(Fit)为-0.03,群体内平均近交系数(Fis)为-0.151,群体平均分化系数(Fst)为0.105(P<0.001)。采用UPGMA法进行聚类分析,5个家兔群体聚为三类:新西兰白兔和德系安哥拉兔聚为一类;齐卡兔G系和美系獭兔聚为一类,福建黄兔独自为一类。

中国部分地方鸡肌肉肌苷酸含量研究

本文采用高效液相技术测定了肖山鸡、白耳鸡、狼山鸡、泰和鸡、北京油鸡 5个地方鸡种及白耳鸡 (♂ )×肖山鸡 (♀ )和肖山鸡 (♂ )×白耳鸡 (♀ )两种杂交鸡的胸肌中肌苷酸含量。结果表明 :(1)肌肉中肌苷酸含量由高到低依次为泰和鸡、白耳鸡、北京油鸡、肖山鸡 (♂ )×白耳鸡 (♀ )、白耳鸡 (♂ )×肖山鸡 (♀ )、肖山鸡、狼山鸡。其中泰和鸡肌肉中肌苷酸含量显著高于肖山鸡、狼山鸡、白耳鸡 (♂ )×肖山鸡 (♀ )、肖山鸡 (♂ )×白耳鸡 (♀ ) (P <0 0 5) ,而与白耳鸡、北京油鸡无显著差异 (P >0 0 5) ;白耳鸡、北京油鸡肌肉中肌苷酸含量显著高于狼山鸡 (P <0 0 5)。 (2 )肌肉中肌苷酸含量公鸡低于母鸡 (P <0 0 5)。 (3)肌肉中肌苷酸含量与体重呈显著性负相关 (- 0 1538～ -0 5547) ,总相关系数为 - 0 3986 (P <0 0 1)。

依靠科技促发展 紧密合作创辉煌——扬州市兔业协会运作体会

扬州地区位于江苏省中部,该地区农民养兔已有几十年的时间,在20世纪70、80年代,主要饲养长毛兔,90年代主要饲养獭兔,近年来主要饲养獭兔。在扬州市兔业协会成立之前,养兔户饲养家兔主要是凭经验,缺乏科学的饲养管理技术;家兔产品销售主要是由兔贩子上门收购,由于对外面的市场行情不了解,销售的价格由兔贩子说了算,在行情不好的情况。

泰和乌骨鸡肌肉肌苷酸含量变化规律及其遗传力估测

以4～28周龄泰和乌骨鸡为材料,研究胸肌和腿肌肌苷酸(IMP)含量的变化规律。结果表明:①肌肉中IMP含量随周龄的增加而逐渐减少;②体重与胸肌和腿肌IMP含量呈极显著中等负相关(P<0.01,r分别为-0.3457、-0.3722),胸肌和腿肌在IMP含量上呈极显著中等正相关(P<0.01,r为0.5196);③应用回归分析建立了泰和乌骨鸡肌肉IMP含量依周龄和体重的最佳线性回归方程;④4～28周龄,各周龄肌肉IMP含量具有中等遗传力(0 4133～0 6025)。

藏鸡和萧山鸡体尺及屠宰性能的比较分析

对藏鸡和萧山鸡的体尺和屠宰性能进行测定,并对测定的指标进行相关性分析,结果表明:藏鸡12周龄平均体斜长、龙骨长、髋宽、胫长、胫围分别为15.36cm,10.26cm,8.42cm,7.94cm和3.42cm,萧山鸡上述指标分别为17.7cm,11.96cm,10.31cm,8.84cm和3.73cm,藏鸡公鸡的屠宰率、半净膛率、全净膛率、胸肌率和腿肌率分别为88.02%,89.03%,71.00%,12.60%和20.91%,萧山鸡公鸡分别为87.97%,89.12%,73.01%,12.83%和21.00%。藏鸡和萧山鸡常规肉质没有显著差异,萧山鸡的体尺和屠宰性能间均存在中度或高度相关,但在藏鸡中并无这种相关性。