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建设生态文明校园,树立节约新风尚——上海市徐教院附中资源节约型校园建设纪实
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作者 吴燕峰 《环境教育》 2024年第1期109-109,共1页
上海市徐汇区教育学院附属实验中学是上海市一所公办初级中学,学校占地40亩,绿化覆盖率近50%。学校坚持“以人为本,为学生发展而奠基、为教师发展而铺路、为学校发展而改革”的办学理念,坚持校本化实施科技环保教育,优化科技环保类校本... 上海市徐汇区教育学院附属实验中学是上海市一所公办初级中学,学校占地40亩,绿化覆盖率近50%。学校坚持“以人为本,为学生发展而奠基、为教师发展而铺路、为学校发展而改革”的办学理念,坚持校本化实施科技环保教育,优化科技环保类校本课程群,开展课题研究,以研究精神引领学生的探究实践活动。学校先后被评为“全国绿色学校”“国际生态校(Eco-school)绿旗荣誉”“全国生态文明教育示范校”。 展开更多
关键词 校本课程 探究实践 精神引领 示范校 校本化实施 生态文明教育 办学理念 绿化覆盖率
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续断含药血清对成骨细胞增殖的影响及其细胞毒性检测 被引量:10
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作者 吴燕峰 程志安 +2 位作者 沈慧勇 罗懿明 李庆明 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2006年第1期66-68,共3页
目的:观察不同浓度续断含药血清的细胞毒性及其对成骨细胞增殖的影响。方法:实验于2001-01/07在中山医科大学附属第二医院脐血库、医学研究中心以及中山医科大学放免检测中心完成。①制备大鼠含药血清:取雌性SD大鼠18只,随机分为3组,续... 目的:观察不同浓度续断含药血清的细胞毒性及其对成骨细胞增殖的影响。方法:实验于2001-01/07在中山医科大学附属第二医院脐血库、医学研究中心以及中山医科大学放免检测中心完成。①制备大鼠含药血清:取雌性SD大鼠18只,随机分为3组,续断组6只,空白对照组8只,雌激素组4只,按体质量分别给予续断生药、生理盐水、雌激素灌胃3d后取血,离心后取上清液。②根据文献方法分离、培养人的原代成骨细胞。③含药血清细胞毒性的观察:成骨细胞按1.0×108L-1密度接种培养24h,换成无血清培养液24h后,用含不同续断浓度(100%,50%,25%,12.5%,6.25%,3%)的大鼠血清处理细胞。采用直接计数法和四氮唑蓝法观察不同浓度续断含药血清的细胞毒性。④细胞增殖的定量分析:将培养人成骨样细胞用不同组大鼠血清稀释,分为5%,10%和20%续断组,5%,10%和20%雌激素1组,5%,10%和20%空白对照组,5%,10%和20%雌激素2组。采用氚-胸腺嘧啶和四氮唑蓝法检测细胞增殖能力。结果:①续断含药血清细胞毒性的观察结果:直接计数表明含续断血清浓度12.5%和25%时,细胞生长数量最多,四氮唑蓝法测定A值最高。②续断对成骨细胞增殖的影响:氚-胸腺嘧啶掺入法显示10%续断组,10%,20%雌激素1组,各浓度雌激素2组细胞增殖显著高于空白对照组、5%雌激素1组和5%续断组(P<0.01);四氮唑蓝法显示10%,20%续断组,10%,20%雌激素1组,10%,20%雌激素2组细胞增殖显著高于空白对照组、5%雌激素1组和5%续断组(P<0.01)。结论:高剂量续断对成骨细胞增殖产生抑制作用,低剂量无明显影响,中剂量续断对细胞增殖的刺激作用最强。 展开更多
关键词 成骨细胞 续断 雌激素类 含药血清 成骨细胞增殖 细胞毒性检测
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姜黄素对Saos-2细胞增殖和凋亡的影响 被引量:3
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作者 吴燕峰 梁新军 +3 位作者 郭宇 夏侃 夏仁云 沈慧勇 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1150-1153,共4页
目的观察姜黄素对人骨肉瘤细胞系Saos-2增殖和凋亡的影响及其对Fas蛋白表达的调控。方法体外培养人骨肉瘤细胞系Saos-2,MTT法检测不同浓度姜黄素对骨肉瘤细胞系Saos-2的生长抑制作用,Annexin V/PI染色,流式细胞术检测细胞凋亡,Hoechst 3... 目的观察姜黄素对人骨肉瘤细胞系Saos-2增殖和凋亡的影响及其对Fas蛋白表达的调控。方法体外培养人骨肉瘤细胞系Saos-2,MTT法检测不同浓度姜黄素对骨肉瘤细胞系Saos-2的生长抑制作用,Annexin V/PI染色,流式细胞术检测细胞凋亡,Hoechst 33258染色,显微镜下观察细胞凋亡的形态学变化,Western blot法检测Saos-2细胞Fas蛋白表达情况。结果 MTT检测显示姜黄素可抑制人骨肉瘤Saos-2细胞增殖,并具有时间和剂量依赖性,在姜黄素浓度为20μmol·L-1时,对细胞生长的抑制作用明显增强;流式细胞检测显示姜黄素可明显诱导骨肉瘤细胞凋亡;Hoechst33258染色可见凋亡小体;Western blot分析显示经姜黄素作用后的骨肉瘤细胞系Saos-2表达Fas较用药前明显增强。结论姜黄素对骨肉瘤细胞系Saos-2的增殖有抑制作用,并可诱导其发生凋亡,其可能通过上调Fas的表达,启动细胞凋亡程序,发挥其抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 姜黄素 骨肉瘤 增殖 凋亡 流式细胞术 FAS
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罗西格列酮对脊髓损伤大鼠神经功能恢复的作用及机制 被引量:3
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作者 吴燕峰 孟庆奇 +6 位作者 梁新军 叶记超 唐勇 黄霖 杨睿 王鹏 沈慧勇 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期913-917,共5页
目的:观察罗西格列酮对脊髓损伤(SCI)大鼠后肢运动功能恢复的作用,探讨其作用机制。方法:75只成年SD大鼠,应用Allen改良法制作大鼠T10SCI模型,随机分为A、B、C三组,每组25只,B、C组于损伤后5min、6h、24h腹腔注射罗西格列酮,C组在腹腔... 目的:观察罗西格列酮对脊髓损伤(SCI)大鼠后肢运动功能恢复的作用,探讨其作用机制。方法:75只成年SD大鼠,应用Allen改良法制作大鼠T10SCI模型,随机分为A、B、C三组,每组25只,B、C组于损伤后5min、6h、24h腹腔注射罗西格列酮,C组在腹腔注射罗西格列酮前1h给予G3335,A组于相应时间点腹腔注射等体积生理盐水作为对照组。每组取6只大鼠于伤后1d、7d、2w、4w、6w时对后肢运动功能进行BBB评分;伤后3d每组取4只动物脊髓组织行免疫组织化学染色法检测核转录因子κB(nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells,NF-κB)的表达;伤后1、3、5、7d和2w每组取3只应用Westernblot法检测脊髓组织中凋亡相关蛋白caspase-3和Bcl-2的表达。结果:伤后1d、7d时3组大鼠BBB评分均为0分,伤后2w开始B组BBB评分高于A组和C组,4w和6w时与A、C组比较有显著性差异(P<0.05);伤后3d时三组NF-κB表达均为阳性,但B组平均光密度值明显低于A、C组(P<0.05),B组与C组比较无显著性差异(P>0.05);伤后各时间点B组caspase-3表达量均低于A组和C组(P<0.05),而Bcl-2表达均高于A组和C组(P<0.05),其差异均在伤后5d达到高峰,A组与C组同时间点比较无显著性差异(P>0.05)。结论:罗西格列酮可促进SCI大鼠神经功能恢复,其机制可能与抑制炎症反应及细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 脊髓损伤 罗西格列酮 细胞凋亡 核转录因子ΚB 凋亡相关蛋白 大鼠
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斑马鱼S型起动运动学研究 被引量:11
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作者 吴燕峰 贾来兵 尹协振 《实验力学》 CSCD 北大核心 2007年第5期519-526,共8页
快速起动是鱼类重要的一种机动能力,有助于鱼类的逃逸和捕食。快速起动通常分为C形起动和S形起动两种模式。本文利用数字式高速摄像机定量地研究了斑马鱼从低速巡游状态做出捕食反应的运动过程。通过分析斑马鱼的运动图像,发现S形起... 快速起动是鱼类重要的一种机动能力,有助于鱼类的逃逸和捕食。快速起动通常分为C形起动和S形起动两种模式。本文利用数字式高速摄像机定量地研究了斑马鱼从低速巡游状态做出捕食反应的运动过程。通过分析斑马鱼的运动图像,发现S形起动过程大体可以分解为三个阶段:第一阶段,斑马鱼的头部和尾部都迅速向相同的一个体侧方向转动,整个身体近似弯曲反写的S型。第二阶段,斑马鱼的头部转向捕食方向,尾部摆动1~2个周期,整个身体近似成S型。第三阶段整个鱼体逐渐恢复平直形态,其前端2/3的部分不再摆动,维持一种类似在水中滑翔的游动姿态。本文定量分析了各个阶段鱼体躯干曲线的形状,给出了鱼体的速度分布,并定性地解释了S形起动的力学机理。 展开更多
关键词 斑马鱼 机动 S形起动 高速摄影
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CIK/NK细胞4周培养过程中的CD27、CD28的表达及其意义 被引量:3
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作者 吴燕峰 黎阳 +2 位作者 王潇娉 方建培 魏菁 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期525-528,共4页
目的:了解细胞因子诱导杀伤(CIK)细胞和自然杀伤(NK)细胞在培养过程中CD27和CD28的表达变化规律。方法:通过流式细胞仪检测CD3+CD56+CIK细胞以及CD3-CD56+NK细胞在4周培养过程中其上CD27和CD28的表达变化。结果:CD27在CIK和NK细胞上均... 目的:了解细胞因子诱导杀伤(CIK)细胞和自然杀伤(NK)细胞在培养过程中CD27和CD28的表达变化规律。方法:通过流式细胞仪检测CD3+CD56+CIK细胞以及CD3-CD56+NK细胞在4周培养过程中其上CD27和CD28的表达变化。结果:CD27在CIK和NK细胞上均于培养的第2周达到最高峰,分别为(44.57±4.07)%和(51.02±5.20)%,但之后逐步下降,在培养第4周降至30%左右的水平。CD28在CIK和NK细胞上分别是在第3周和第2周时达到表达的最高峰,为(4.40±0.66)%和(45.14±3.58)%,之后迅速下降,在培养第4周已经几乎消失。结论:根据CD27和CD28在CIK/NK细胞上的表达变化规律,CIK/NK细胞的收获时机以培养第3周为宜。 展开更多
关键词 细胞因子诱导杀伤细胞 自然杀伤细胞 CD27 CD28 过继免疫治疗
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最优化细胞因子诱导杀伤细胞/自然杀伤细胞少因子培养体系的探索 被引量:3
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作者 吴燕峰 林永潮 +2 位作者 黎阳 王潇娉 魏菁 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期361-366,共6页
【目的】尝试使用IL-2、IL-7和IL-12的单因子、双因子和三因子组合进行杀伤细胞/自然杀伤细胞(CIK/NK)细胞扩增培养,探讨最优化CIK/NK细胞少因子培养体系的建立。【方法】采用Ficoll-Hypaque法分离脐血单个核细胞并分成6组,每组分别加入... 【目的】尝试使用IL-2、IL-7和IL-12的单因子、双因子和三因子组合进行杀伤细胞/自然杀伤细胞(CIK/NK)细胞扩增培养,探讨最优化CIK/NK细胞少因子培养体系的建立。【方法】采用Ficoll-Hypaque法分离脐血单个核细胞并分成6组,每组分别加入IL-2(80ng/mL)、IL-7(40ng/mL)及IL-12(40ng/mL)的单因子、双因子和三因子组合(IL-7组;IL-12组;IL-7+IL-12组;IL-2+IL-7组;IL-2+IL-12组;IL-2+IL-7+IL-12组),每组6个重复孔,共培养21d收获细胞。在细胞培养开始和第21天,实验各组取细胞悬液进行流式细胞仪检测CD3+CD56+CIK细胞及CD3-CD56+NK细胞比例。【结果】单因子培养体系的IL-12组在CIK细胞扩增比例上是各组中最高的(22.96±1.41)%,双因子体系的IL-2+IL-12组的CIK细胞扩增比例也达到(18.58±0.68)%;上述两组的CIK细胞扩增比例已经达到或基本达到使用传统多因子扩增方法所获得的比例。IL-12组的NK细胞扩增比例为(30.23±1.18)%,IL-2+IL-7组的NK细胞扩增比例也达(29.52±0.89)%。【结论】使用IL-12、IL-2+IL-12或IL-2+IL-7组合的少因子培养体系进行CIK/NK细胞的培养扩增是可行的。 展开更多
关键词 细胞培养 细胞因子诱导杀伤细胞 自然杀伤细胞 细胞因子
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IL-2/IL-15刺激后脐血NK细胞穿孔蛋白表达及其与细胞毒活性的关系 被引量:2
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作者 吴燕峰 张碧红 +2 位作者 岑丹阳 魏菁 陈纯 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第4期1015-1018,共4页
本研究旨在探讨脐血NK细胞的穿孔蛋白表达水平以及IL-2、IL-15作用下穿孔蛋白表达与NK细胞细胞毒活性的关系。采用CD3阴选后CD56阳选两步免疫磁珠分选法纯化脐血NK细胞,流式细胞术测定NK细胞纯度,通过IL-2、IL-2+IL-15两种细胞因子培养... 本研究旨在探讨脐血NK细胞的穿孔蛋白表达水平以及IL-2、IL-15作用下穿孔蛋白表达与NK细胞细胞毒活性的关系。采用CD3阴选后CD56阳选两步免疫磁珠分选法纯化脐血NK细胞,流式细胞术测定NK细胞纯度,通过IL-2、IL-2+IL-15两种细胞因子培养体系培养3天,流式细胞术测定培养前后穿孔蛋白表达水平;LDH释放法检测培养前后脐血NK细胞对白血病细胞株K562的细胞毒活性(效靶比10∶1)。结果表明,纯化后CD3-CD56+细胞含量为(92.39±0.8)%。,以K562为靶细胞,新鲜纯化CB-NK的杀伤活性为(27.76±8.8)%,IL-2组杀伤活性为(61.9±9.1)%,IL-2+IL-15组杀伤活性为(87.62±3.7)%,新鲜纯化CB-NK穿孔蛋白表达率为(67.21±6.14)%,IL-2组CB-NK细胞穿孔蛋白表达率(84.55±3.8)%,IL2-+IL-15组CB-NK细胞穿孔蛋白表达率(87.22±2.2)%。穿孔蛋白表达率与NK细胞毒活性呈正相关(r=88.6,p<0.05)。IL-2组穿孔蛋白表达率与新鲜组差别有统计学意义,IL-2组与IL-2+IL-15组穿孔蛋白表达率差别无统计学意义。结论:促进穿孔蛋白表达是IL-2提高脐血NK细胞细胞毒活性的途径之一。 展开更多
关键词 脐血 IL-2 IL-15 自然杀伤细胞 穿孔蛋白 细胞毒
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大鼠脑源性神经营养因子基因T载体的构建及鉴定 被引量:3
9
作者 吴燕峰 王鹏 +3 位作者 唐勇 黄霖 杨睿 沈慧勇 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 2006年第4期291-294,共4页
目的:探讨利用T载体完成大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)聚合酶链式反应(polymerasechainreac-tion,PCR)产物克隆的可行性。方法:提取大鼠脑组织总RNA,利用M-MLV逆转录酶及oligo-dT引物逆转录合成cDNA第一条链,再利用exTaq酶及BDNF上、下... 目的:探讨利用T载体完成大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)聚合酶链式反应(polymerasechainreac-tion,PCR)产物克隆的可行性。方法:提取大鼠脑组织总RNA,利用M-MLV逆转录酶及oligo-dT引物逆转录合成cDNA第一条链,再利用exTaq酶及BDNF上、下游引物扩增出BDNFcDNA,最后利用BufferⅠ连接液将BDNF基因克隆入T载体用于测序及下一步克隆。结果:成功构建了BDNF基因T载体,经双脱氧链终止法测序证实为大鼠BDNF基因。结论:利用T载体克隆BDNF基因PCR产物简便、快捷,成功率高。 展开更多
关键词 脑源性神经营养因子 T载体 基因克隆
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人骨髓及脐血间充质干细胞体外大量扩增及建库的质量控制 被引量:3
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作者 吴燕峰 包蓉 +4 位作者 张绪超 周敦华 梁舜华 方建培 黄绍良 《实用医学杂志》 CAS 2006年第1期1-3,共3页
目的:研究人骨髓和脐血间充质干细胞(MSC)的体外培养特性及建立细胞库的可行性。方法:Ficoll离心剂法分离人骨髓及脐血来源单个核细胞,进行体外培养并大量扩增,观察细胞生长特性,流式细胞术检测MSC表面分子标志物表达情况。结果:骨髓样... 目的:研究人骨髓和脐血间充质干细胞(MSC)的体外培养特性及建立细胞库的可行性。方法:Ficoll离心剂法分离人骨髓及脐血来源单个核细胞,进行体外培养并大量扩增,观察细胞生长特性,流式细胞术检测MSC表面分子标志物表达情况。结果:骨髓样本比脐血标本的MSC更易于体外短期培养扩增,骨髓样本(5×106)体外培养2周约获得MSC3×107~1.2×108,成功率达100%,而脐血样本的MSC较难培养,成功率低(12.9%),细胞数扩增有限。对冻存复苏前后的细胞进行流式细胞术检测提示MSC表面标志物CD29、CD44、CD59、CD90、CD105、CD166等均阳性表达,造血细胞标志物CD34、CD14和CD45为阴性表达,提示MSC对本室的冻存复苏程序耐受能力较好,可获得复苏后扩增培养。结论:本研究表明对成人骨髓MSC建库的条件较成熟,获得成功培养的MSC分子表型在冻存复苏前后无明显改变。而脐血来源的MSC培养条件有待改善方能提高MSC培养成功率。 展开更多
关键词 间质干细胞 骨髓 胎血 质量控制
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人神经干细胞移植修复大鼠脊髓损伤的实验研究 被引量:4
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作者 吴燕峰 贺晓玉 +8 位作者 唐勇 刘晓梅 叶记超 史玉朋 黄霖 杨睿 刘鹄 项鹏 沈慧勇 《中国医药》 2008年第7期385-387,共3页
目的研究人神经干细胞(hNSCs)移植对大鼠脊髓损伤的修复作用,并初步探讨其作用原理。方法分离、培养和鉴定hNSCs。24例成年SD大鼠分为移植组12例和对照组12例,均采用NYU-Ⅱ型脊髓打击器制作脊髓损伤模型,第9天移植组于损伤脊髓中... 目的研究人神经干细胞(hNSCs)移植对大鼠脊髓损伤的修复作用,并初步探讨其作用原理。方法分离、培养和鉴定hNSCs。24例成年SD大鼠分为移植组12例和对照组12例,均采用NYU-Ⅱ型脊髓打击器制作脊髓损伤模型,第9天移植组于损伤脊髓中心分别注入经CM-DiI标记的hNSCs混悬液,对照组注入人DMEM/F12培养液。术后第4、8周取损伤部位脊髓,免疫组织化学染色检测移植细胞的存活和分化;术后每7天行BBB评分,评定大鼠后肢运动功能恢复情况。数据进行成组设计资料的t检验。结果成功建立hNSCs的体外培养体系;移植的hNSCs在大鼠脊髓内存活超过8周,并向脊髓损伤头尾端迁移,免疫组织化学荧光染色示移植细胞可分化为神经元、少突胶质细胞和星形胶质细胞;移植组大鼠BBB评分高于对照组(P〈0.05)。结论移植到大鼠损伤脊髓中的人神经干细胞可分化为神经元和神经胶质细胞,并可促进脊髓损伤大鼠后肢运动功能恢复。 展开更多
关键词 脊髓损伤 神经干细胞 移植
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联合低温保护剂对脐血造血干细胞长期低温保存的作用 被引量:2
12
作者 吴燕峰 方建培 +1 位作者 黄绍良 包蓉 《广东医学》 CAS CSCD 2001年第8期665-666,共2页
目的 观察联合低温保护剂对脐血造血干细胞长期低温保存的作用。方法  6 0份由联合低温保护剂( 5%DMSO + 6 %HES + 5%人体白蛋白 )保存在岭南脐血库的脐血 ,按时间分为 1 ,2 ,3,4年等 4组 ,复温后观察其细胞活力、总有核细胞数 (TNC)... 目的 观察联合低温保护剂对脐血造血干细胞长期低温保存的作用。方法  6 0份由联合低温保护剂( 5%DMSO + 6 %HES + 5%人体白蛋白 )保存在岭南脐血库的脐血 ,按时间分为 1 ,2 ,3,4年等 4组 ,复温后观察其细胞活力、总有核细胞数 (TNC)、CD3 4 + 、CD3 4 + CD3 8-、CFU -GM及BFU -E的回收率。结果  6 0例脐血冻存后的细胞活力为96 39% ,TNC ,CD3 4 + ,CD3 4 + CD3 8-,CFU -GM及BFU -E的回收率分别是 95 89% ,94 45% ,88 88% ,87 77%及 83 1 8% ,不同时间组的上述指标之间差异无显著性 (P >0 0 5)。结论 联合低温保护剂具有效果可靠、操作简单等优点 ,适用于脐血造血干细胞的长期低温保存。 展开更多
关键词 低温保存 脐血 血干细胞 联合低温保护剂
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MIP-1α和PF_4对造血干/祖细胞作用的对比研究 被引量:1
13
作者 吴燕峰 黄科 黄绍良 《实用医学杂志》 CAS 2000年第7期532-533,共2页
目的 :研究化疗时巨噬细胞炎症蛋白 (macrophageinflammatoryprotein - 1α,MIP - 1α)和血小板第 4因子 (plateletfactor 4,PF4 )对造血干 /祖细胞的保护作用。方法 :骨髓标本 13份 ,脐血标本 10份。分 4组 :A组为MIP - 1α ,B组为PF4... 目的 :研究化疗时巨噬细胞炎症蛋白 (macrophageinflammatoryprotein - 1α,MIP - 1α)和血小板第 4因子 (plateletfactor 4,PF4 )对造血干 /祖细胞的保护作用。方法 :骨髓标本 13份 ,脐血标本 10份。分 4组 :A组为MIP - 1α ,B组为PF4 ,C组MIP - 1α +PF4 ,D组为空白对照组 ,分别检测其细胞周期、细胞活性、集落形成能力等。结果 :3个实验组细胞的S +G2 期百分比均显著低于D组 (P <0 0 5 ) ;单个核细胞均明显高于D组 (P<0 0 5 ) ;粒 -巨噬细胞系集落明显少于预处理前 (P <0 0 5 ) ,但均高于对照组 (P <0 0 5 )。C组与A ,B组差异无显著意义。结论 :化疗过程中 ,MIP - 1α和PF4 对造血干 /祖细胞有可逆性、选择性保护作用 ; 展开更多
关键词 造血生长因子 造血祖细胞 造血干细胞 PF4 肿瘤
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间充质干细胞与脐血联合移植的Ⅰ期临床观察 被引量:20
14
作者 黄绍良 周敦华 +4 位作者 方建培 黎阳 黄科 吴燕峰 包蓉 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期306-306,F004,共2页
为促进无关供体脐血移植( UD- UCBT)患儿的造血干细胞( HSC)植入和造血恢复,我们在 2001年 9月至 2003年 3月,以自体或异基因双亲(母亲或父亲)骨髓源性间充质干细胞( MSC)联合脐血移植的Ⅰ期临床观察,探讨 MSC是否可促进 HSC植入及造血... 为促进无关供体脐血移植( UD- UCBT)患儿的造血干细胞( HSC)植入和造血恢复,我们在 2001年 9月至 2003年 3月,以自体或异基因双亲(母亲或父亲)骨髓源性间充质干细胞( MSC)联合脐血移植的Ⅰ期临床观察,探讨 MSC是否可促进 HSC植入及造血恢复、对 GVHD的影响及安全性. 展开更多
关键词 间充质干细胞 脐血 联合移植术 临床观察 无关供体 预处理
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联合使用干细胞因子、FLT3配基与白介素2,7,15体外扩增人脐血来源CIK/NK细胞 被引量:17
15
作者 黎阳 黄绍良 +3 位作者 吴燕峰 魏菁 包蓉 周敦华 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2004年第3期350-354,共5页
通过干细胞因子 (SCF)、FLT3配基 (FL)联合白介素 (IL) 2 ,7,15等的不同组合体系体外扩增人脐血来源的CIK NK细胞 (CB CIK NK) ,探讨不同培养方式对CB CIK NK细胞诱导、扩增产率的影响。按诱导扩增体系的不同分 3组 :A组 (SCF +IL2 +IL7... 通过干细胞因子 (SCF)、FLT3配基 (FL)联合白介素 (IL) 2 ,7,15等的不同组合体系体外扩增人脐血来源的CIK NK细胞 (CB CIK NK) ,探讨不同培养方式对CB CIK NK细胞诱导、扩增产率的影响。按诱导扩增体系的不同分 3组 :A组 (SCF +IL2 +IL7+IL15 ) ,B组 (SCF +FL +IL2 +IL7+IL15 )和C组 (IL2 +IL7+IL15 ,对照组 ) ,培养 2 1天 ,检测CD3+ CD5 6 + CIK细胞、CD3- CD5 6 + NK细胞比例和扩增倍数。结果表明 :经 2 1天培养 ,A ,B及C组CIK细胞比例分别为 (19.84± 2 .93) %、(2 6 .2 0± 4 .0 5 ) %及 (2 4 .0 3± 4 .99) % ;而NK细胞的比例A、B及C组比例分别为 (4 9.6 0± 1.4 0 ) %、(5 1.16± 6 .4 5 ) %及 (30 .85± 8.12 ) %。含SCF +FL的B组扩增效率最高 ,其中CIK细胞的扩增倍数由对照组 (C组 )的 (5 75 81± 2 2 1.72 )倍增加至 (796 .0 9± 2 78.4 7)倍 (最高为 1313倍 ) ;NK细胞由对照组 (C组 )的 (30 .39± 14 .4 7)倍增加至 (6 5 .85± 30 .83)倍 (最高为 12 1.0 6倍 )。结论 :通过合适的细胞因子组合可以同时扩增CB来源的CIK NK细胞 ;联合诱导、扩增CB CIK NK细胞以采用含SCF +FL +IL2 +IL7+IL15的培养体系为佳。 展开更多
关键词 CIK/NK细胞 脐血 干细胞因子 FLT3配基 白介素2 白介素7 白介素15
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续断对成骨细胞增殖、分化、凋亡和细胞周期的影响 被引量:80
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作者 程志安 吴燕峰 +5 位作者 黄智清 曾志勇 谢文峰 罗懿明 萧劲夫 刘尚礼 《中医正骨》 2004年第12期1-3,共3页
在动物实验的基础上 ,探讨续断对成骨细胞增殖、分化、凋亡、细胞周期和 Ⅰ 型前胶原αmRNA表达影响。根据文献方法培养大鼠成骨细胞株UMR 10 6 /0 1,采用3 H Tdr法检测细胞增殖 ,PNPP法、RIA法、茜素红染色法以及定量RT PCR法分别检测... 在动物实验的基础上 ,探讨续断对成骨细胞增殖、分化、凋亡、细胞周期和 Ⅰ 型前胶原αmRNA表达影响。根据文献方法培养大鼠成骨细胞株UMR 10 6 /0 1,采用3 H Tdr法检测细胞增殖 ,PNPP法、RIA法、茜素红染色法以及定量RT PCR法分别检测碱性磷酸酶活性、骨钙素活性、矿化结节形成和Ⅰ 型胶原αmRNA的表达 ,从而了解续断对成骨细胞增殖、分化的影响 ;FCM法检测细胞周期。结果显示续断中、高剂量能显著促进成骨细胞的增殖、增加碱性磷酸酶的表达及矿化结节形成的数量 ,促进成骨细胞骨钙素和Ⅰ 型前胶原mRNA的表达 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ,和雌激素组比较差异无显著性。续断高剂量组细胞增殖率、S期细胞比率和细胞增殖指数等均显著高于空白对照组 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ,和雌激素组比较差异也无显著性。细胞凋亡率和G0 G1期细胞比率显著低于空白对照组 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 )。表明续断能有效促进成骨细胞的分化、增殖 ,防止成骨细胞凋亡 ,可能是该药促进骨折愈合、防治骨质疏松的机制之一。 展开更多
关键词 成骨细胞 续断/药效学 增殖/药物作用 分化/药物作用 细胞周期 实验研究 动物 大鼠
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再生障碍性贫血儿童TCRVβ亚家族T细胞克隆性增殖及其与HLA-DRB1*15的关系 被引量:11
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作者 黄永兰 黄绍良 +2 位作者 包蓉 张绪超 吴燕峰 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期165-168,172,共5页
【目的】探讨再生障碍性贫血(再障)儿童TCRVβ24个亚家族T细胞克隆性及其与HLA-DRB1*15的关系。【方法】再障儿童17例(SAA14例,MAA3例),采用RT-PCR和基因扫描分析外周血或骨髓TCRVβ24个亚家族基因的表达和克隆性,SSP-PCR检测HLA-DR。... 【目的】探讨再生障碍性贫血(再障)儿童TCRVβ24个亚家族T细胞克隆性及其与HLA-DRB1*15的关系。【方法】再障儿童17例(SAA14例,MAA3例),采用RT-PCR和基因扫描分析外周血或骨髓TCRVβ24个亚家族基因的表达和克隆性,SSP-PCR检测HLA-DR。【结果】再障儿童外周血T细胞仅表达4~22个Vβ亚家族,而正常儿童外周血T细胞几乎表达所有Vβ亚家族。12例(包括初诊SAA4例,CR4例,复发1例和MAA3例)再障儿童存在不同程度T细胞克隆性增殖,但个体间差异较大,正常外周血和骨髓均为多克隆性T细胞。5例HLA-DRB1*15(+)患儿中4例(80%)有寡克隆T细胞,而12例HLA-DRB1*15(-)患儿中仅3例(25%)见寡克隆T细胞,两组比较差异具有显著意义(P<0.05)。伴寡克隆T细胞的6例SAA儿童经免疫抑制治疗后达CR;不伴寡克隆T细胞的5例SAA儿童接受免疫抑制治疗,其中CR1例,PR2例、无效1例,死亡1例。【结论】大多数再障儿童存在T细胞克隆性增殖,寡克隆T细胞多见于SAA,尤其是HLA-DRB1*15(+)的SAA儿童。TCRVβT细胞克隆的检测对进一步了解再障免疫功能状态、预测免疫抑制治疗效果具有一定的参考价值。 展开更多
关键词 再生障碍性贫血 TCR Vβ基因谱 T细胞克隆 HLA—DR
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健骨二仙丸含药血清对人成骨细胞增殖及细胞周期的影响 被引量:13
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作者 程志安 吴燕峰 +2 位作者 曾志勇 魏青 萧劲夫 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期129-132,共4页
目的 :在临床研究和动物实验的基础上 ,进一步探讨健骨二仙丸对成骨细胞增殖和细胞周期的影响。方法 :分离、培养人的原代成骨细胞 ,采用3 H 胸腺嘧啶掺入法和四氮唑蓝法检测细胞增殖 ,流式细胞仪检测细胞周期。结果 :健骨二仙丸中、高... 目的 :在临床研究和动物实验的基础上 ,进一步探讨健骨二仙丸对成骨细胞增殖和细胞周期的影响。方法 :分离、培养人的原代成骨细胞 ,采用3 H 胸腺嘧啶掺入法和四氮唑蓝法检测细胞增殖 ,流式细胞仪检测细胞周期。结果 :健骨二仙丸中、高剂量组细胞增殖率、S期细胞比率和细胞增殖指数等均显著高于空白对照组 (P <0 0 1,P <0 0 5 ) ,与雌激素组比较差异无显著性。细胞凋亡率和G0 G1期细胞比率显著低于空白对照组 (P <0 0 1,P <0 0 5 )。结论 :健骨二仙丸能有效促进成骨细胞的增殖、分化 。 展开更多
关键词 成骨细胞 细胞增殖 细胞周期 健骨二仙丸 流式细胞仪
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通用型脊髓打击器的研制与脊髓损伤动物模型的建立 被引量:19
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作者 黄霖 唐勇 +6 位作者 杨睿 史玉朋 贺晓玉 叶记超 刘鹄 吴燕峰 沈慧勇 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 2008年第9期688-693,I0002,共7页
目的:研制一种通用型脊髓打击器,并评估其制作脊髓分级挫伤动物模型的稳定性。方法:依据重物坠落致伤原理,设计一种通用型脊髓打击器;将50只SD大鼠,分为3个实验组和1个对照组,实验组应用该打击器以质量为20g的打击棒在不同高度实施打击:... 目的:研制一种通用型脊髓打击器,并评估其制作脊髓分级挫伤动物模型的稳定性。方法:依据重物坠落致伤原理,设计一种通用型脊髓打击器;将50只SD大鼠,分为3个实验组和1个对照组,实验组应用该打击器以质量为20g的打击棒在不同高度实施打击:12.5mm组(A组,n=12),25mm组(B组,n=12),50mm组(C组,n=14),对照组仅行椎板切除,不打击(n=12),分别于术前、术后第2天、1周至6周进行大鼠BBB运动评分,方差分析比较各组各时间点的BBB评分;术后1周和6周取材行组织学观察,用Photoshop CS软件直方图命令处理连续切片中最大受损面积的图像,计算大鼠脊髓最大受损面积比;对BBB评分与大鼠脊髓最大受损面积比进行相关分析。取4只国产家猪,应用该打击器以50g×150mm打击能量打击后制备胸髓半侧挫伤模型,于术前、术后第2天和第7天行改良Tarlov分级法评价猪后肢功能,并进行组织学观察。结果:通用型脊髓打击器能够准确定点、定高打击制作动物脊髓损伤模型。大鼠分级脊髓挫伤模型在各个时间点上BBB评分差异有统计学意义(P<0.05),A组和B组在术后1周后肢功能有不同程度恢复,而C组至术后6周均无明显恢复,对照组无功能障碍。大鼠和猪脊髓组织学表现均为以打击震中为中心的离心纵向损伤。大鼠脊髓最大受损面积比在各损伤组组内齐同、组间差异有统计学意义(P<0.05),脊髓最大受损面积比与BBB评分呈密切负相关关系(r=0.89807,P<0.001)。猪脊髓半侧挫伤后Tarlov分级法评价显示为中重度损伤。结论:研制的通用型脊髓打击器可成功建立不同损伤程度、稳定性高的大鼠急性脊髓挫伤模型,并可用于建立猪脊髓挫伤模型。 展开更多
关键词 脊髓损伤 动物 疾病模型 致伤装置
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人神经干细胞移植对脊髓损伤大鼠后肢运动功能恢复的影响 被引量:11
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作者 贺晓玉 沈慧勇 +6 位作者 项鹏 吴燕峰 唐勇 史玉朋 黄霖 杨睿 叶记超 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期208-210,共3页
目的:探讨人神经干细胞(hNSCs)移植对脊髓损伤大鼠后肢运动功能恢复的影响及可能机制。方法:取2~3个月流产胎儿海马区组织,体外培养神经干细胞;采用通用型脊髓打击器将24只成年SD大鼠制成脊髓损伤模型,伤后第8天随机分为移植组和对照组... 目的:探讨人神经干细胞(hNSCs)移植对脊髓损伤大鼠后肢运动功能恢复的影响及可能机制。方法:取2~3个月流产胎儿海马区组织,体外培养神经干细胞;采用通用型脊髓打击器将24只成年SD大鼠制成脊髓损伤模型,伤后第8天随机分为移植组和对照组,于损伤中心分别注入CM-DiI标记的hNSCs悬液和DMEM/F12培养液。分别于hNSCs移植后当天及1、2、3、4、6、8周采用Basso,Beattie,Bresnahan(BBB)行为功能评定量表评估大鼠后肢运动功能恢复情况。移植后第4、8周取损伤部位脊髓,行病理切片,免疫组化方法观察移植细胞的存活和迁移,并检测损伤脊髓处胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经元核心抗原(NeuN)、2,3-环核苷酸磷酸二酯酶(CNPase)、神经巢蛋白(Nestin)等抗原的表达。结果:移植组后肢运动功能评分随时间延长而逐渐升高,移植1周时后肢运动功能有所改善,与对照组无明显差异(6.4±0.99 vs 6.0±0.93,P>0.05);移植4周时后肢运动功能比1周时有明显恢复,BBB评分明显高于对照组(9.7±1.04 vs 7.4±0.95,P<0.05);移植的hNSCs可在损伤脊髓处长时间存活(至少8周),并分化为神经元、少突胶质细胞和星形胶质细胞。结论:人神经干细胞可在损伤脊髓处向神经元和神经胶质细胞分化,并能促进脊髓损伤大鼠后肢运动功能的部分恢复。 展开更多
关键词 脊髓损伤 神经干细胞 移植 大鼠
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