直接床位管理在骨科实习教学中的作用研究

目的探索实习医生在带教老师的协助下直接管床对提高实习教学质量的作用。方法选择2020年9—12月重庆医科大学附属第一医院骨科实习的30名临床医学专业实习生作为研究对象;随机分为对照组及管床组,每组15名,对照组进行常规带教,管床组除常规带教外由实习生直接管床。进行为期4周的实习教学,实习结束后分析2组的出科考核成绩以及对实习教学的满意度情况。结果出科考核成绩中管床组的成绩普遍好于对照组,尤其是技能考核成绩高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组总体满意率为80.0%,管床组的整体满意率则高达93.3%,管床组总体满意率高于对照组,差异无统计学意义(P>0.05);后一个实习科室对2组实习生总体评价上,对照组中优良率为73.3%,管床组中的优良率达到了93.3%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论直接床位管理能够提升实习教学质量,提高实习生对实习教学的满意度。

芒果苷对同型半胱氨酸诱导骨髓间充质干细胞分化的影响

目的旨在利用同型半胱氨酸(Hcy)构建体外培养原代大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs)脂向分化模型,剖析Hcy对BMSCs脂向分化与骨向分化的具体作用,对Hcy诱导的BMSCs施加不同浓度的芒果苷进行干预,探究芒果苷对BMSCs脂向分化与骨向分化的影响。方法首先提取分离rBMSCs,将培养至一定代数状态良好的rBMSCs置于含不同浓度Hcy(0.125、0.250、0.5、1、2、4 mmol/L)的培养基中培养,建立rBMSCs脂向分化模型。随后,对实验组细胞施加不同浓度的芒果苷(37.5、75、150μmol/L)进行干预。培养一定时间后,收集细胞进行以下检测:运用油红O染液半定量方法检测细胞内脂质累积情况,以评估脂向分化程度;采用ρNPP法精准测定碱性磷酸酶(ALP)活力;Western blot法检测骨形成蛋白-2(BMP-2)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)的表达变化,以评估骨向分化程度。结果芒果苷在体外能显著上调BMP-2、ColⅠ的表达,升高ALP水平,促进rBMSCs的骨向分化。Hcy则通过增加脂质累积,促进rBMSCs的脂向分化;与此同时,Hcy还下调BMP-2与ColⅠ的表达,降低胞内ALP水平,从而抑制rBMSCs的骨向分化。然而,上述与Hcy相关的效应能够被芒果苷成功扭转。结论芒果苷在体外能够显著促进rBMSCs的骨向分化,而Hcy可抑制rBMSCs骨向分化并促进其脂向分化,芒果苷具有扭转该效应的能力,说明芒果苷在治疗骨质疏松症相关疾病方面具有一定潜能。

低氧诱导因子-1α对骨形态发生蛋白2诱导的干细胞成软骨、成骨分化的影响

目的探讨低氧通路中关键转录调控因子低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)对骨形态发生蛋白2(bone morpho-genetic protein 2,BMP2)诱导干细胞骨、软骨分化的影响,阐明HIF-1α在干细胞成骨、软骨分化中的作用。方法构建相应腺病毒AdBMP2、AdHIF-1α、AdGFP,单独或共同感染干细胞,Western blot法检测成软骨、成骨分化关键转录调控因子Sox9、Runx2的表达,Real-time PCR法检测成软骨、成骨分化标志物COL2A1、aggrecan、COL1A1和ALP mRNA表达,Alcian blue、ALP及Alizarin red S染色检测软骨细胞外基质及骨基质钙盐沉积情况。进行干细胞裸鼠皮下移植,观察不同处理组形成骨块的组织结构情况,探讨HIF-1α对BMP2诱导干细胞成骨、软骨分化的影响。结果诱导分化后第1、3天,BMP2+HIF-1α组Sox9蛋白表达明显高于BMP2单独处理组,而BMP2+HIF-1α组Runx2蛋白表达明显低于BMP2单独处理组。诱导分化后第7、9天,BMP2+HIF-1α组COL2A1、aggrecan mRNA相对表达明显高于BMP2单独处理组(P<0.05),而BMP2+HIF-1α组COL1A1、ALP mRNA相对表达明显低于BMP2单独处理组(P<0.05)。Alcian blue染色发现BMP2+HIF-1α组软骨细胞外基质分泌多于BMP2单独处理组,染色更深;ALP染色发现BMP2+HIF-1α组ALP的活性弱于BMP2单独处理组;茜素红染色发现BMP2+HIF-1α组较BMP2单独处理组骨基质钙盐沉积更少;体内试验组织学观察见BMP2+HIF-1α组软骨成分更多,骨化不明显,BMP2单独处理组软骨成分少,软骨内骨化更明显。结论HIF-1α明显增强了BMP2诱导的干细胞成软骨分化,抑制了成骨分化及软骨内骨化,维持了软骨分化表型。

氧化应激与骨质疏松症的研究进展

骨质疏松症是一种以骨量低下、骨微结构破坏为特征,骨脆性增加、易发生骨折等的代谢性疾病。其发病病因多样,分子机制复杂,已成为影响人们生活质量的流行病之一。人体生活在一个充满氧气的环境,在其代谢过程中不可避免的不断产生活性氧(ROS),当人体因为衰老、疾病等原因产生ROS与消除ROS之间的平衡被打破时,机体便产生氧化应激。越来越多的研究发现ROS诱导的氧化应激在骨质疏松症中发挥重要作用,过多的ROS通过对多种细胞因子、酶活性的激活或抑制和上调或下调受体配体的表达调控多条信号通路,最终影响细胞核内基因表达,促进骨形成相关细胞如骨髓间充质干细胞(BMSCs)、成骨细胞、骨细胞的凋亡和破骨细胞的增殖及分化,使得骨形成速率相对骨吸收速率滞后,打破以破骨细胞吸收骨组织和成骨细胞形成骨组织相协调的动态平衡过程,从而促使骨质疏松症的产生。本文从ROS诱导的氧化应激对骨形成相关细胞、破骨细胞和骨基质的影响展开综述,为骨质疏松症的进一步研究提供依据。

SIRT1去乙酰化修饰p53抑制IL-1β介导的软骨终板细胞衰老

目的 探讨沉默信息调节因子2同源蛋白1（silent information regulation 2 homolog-1,SIRT1）对软骨终板细胞衰老的调控作用及相关机制。方法 IL-1β处理软骨终板细胞,通过细胞周期检测、衰老相关β-半乳糖苷酶染色、衰老相关通路激活情况,判断IL-1β对软骨终板细胞衰老的影响;调控SIRT1的表达或活性后,通过上述方法明确SIRT1对IL-1β介导软骨终板细胞衰老具有调控作用,并通过抑制相关通路活性,进一步探讨SIRT1调控软骨终板细胞衰老的机制。结果 IL-1β处理软骨终板细胞后G_1期细胞比例明显增加（P 〈0. 05）,衰老相关β-半乳糖苷酶染色阳性率升高（P 〈0. 05）,衰老相关通路p53-p21中p53、p21 mRNA表达水平明显增加（P 〈0. 05）;增加SIRT1的表达后p53蛋白乙酰化水平明显降低（P 〈0. 05）,p21蛋白表达明显降低（P 〈0. 05）,G_1期细胞比例较对照组明显较少（P 〈0. 05）,β-半乳糖苷酶染色阳性率明显降低（P 〈0. 05）,而尼克酰胺抑制SIRT1活性后p53蛋白乙酰化水平升高（P 〈0. 05）,p21蛋白表达增加（P 〈0. 05）,G_1期细胞比例较对照组明显增加（P 〈0. 05）,β-半乳糖苷酶染色阳性率明显增高（P 〈0. 05）。无论使用尼克酰胺抑制SIRT1激活p53-p21通路与否,在使用p53抑制剂PFT-α后,p21的表达、G_1期细胞比例、β-半乳糖苷酶染色阳性率均无明显变化（P〉0. 05）。结论 IL-1β介导了软骨终板细胞的衰老,SIRT1能够通过去乙酰化修饰p53抑制IL-1β介导的软骨终板细胞的衰老。

巴赫创意曲版本比较研究

巴赫创意曲是钢琴教学中的必学曲目,是训练钢琴演奏中的复调思维能力和复调弹奏能力的最好的中级教材。由于巴洛克时期音乐风格的一些独特性,如装饰性、即兴性等等,导致在诠释巴赫的创意曲时,出现了不同的乐谱版本和演奏版本。如何正确理解与演奏巴赫的创意曲,是教学中常见的难题。文章从教学角度出发,对常见的巴赫创意曲的乐谱版本与演奏版本进行比较,探寻其基本演奏规律与教学要求。

住院医师规范化培训普遍实施背景下实习教学的挑战与机遇

住院医师规范化培训的普遍开展,在提升我国整体医疗服务能力方面具有重大意义。各大学附属医院在住院医师规范化培训方面承担着重要的培训任务,但随着住培医师的加入,带来的人员结构与数量的变化,给本科实习教学也带来明显的影响。但同时随着住院医师规范化培训制度的普及与规范,住培制度建立所带来的教学资源的增加和教学形式的多样化,同样给临床医学本科实习教学带来多方面的机遇。因此,作为同时承担本科实习教学与住院医师规范化培训任务的大型教学医院需要迎接挑战、把握机遇,让住培教学与实习教学适时融合,提升临床实习教学质量,成为当前及未来必须解决的重要教学课题。

大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养和分化能力鉴定

目的:分离培养大鼠骨髓细胞3代,考察其形态学、标志物及分化功能等生物特性,确定稳定分化能力的大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养方法。方法:取3月龄雌性大鼠,无菌条件下取胫骨、股骨骨髓,采用全骨髓贴壁培养法,以轻度细胞振荡筛选,培养细胞至第3代,显微镜观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞表面标志物的表达,并通过碱性磷酸酶和矿化结节实验观察细胞的骨向分化能力,油红O染色及半定量实验观察细胞脂向分化的能力。结果与结论:全骨髓贴壁法刚分离的细胞,胞体透亮,大小不一,与周围的红细胞等血系细胞相互混杂,经轻度细胞振荡筛选,传代至第三代,细胞呈均匀分布的纺锤形平均生长,呈典型的漩涡状生长。流式细胞仪检测显示,CD90、CD29阳性表达率分别为96.4%…和78.5%…,而CD45、CD11b/c阳性比率分别为2.0%…和…1.9%。具有诱导碱性磷酸酶水平增加,出现矿化结节和诱导脂质累积的能力。表明全骨髓贴壁法培养的第3代骨髓细胞是具有骨向和脂向分化能力的骨髓间充质干细胞,可用作骨组织修复的种子细胞。

SIRT1通过β-catenin信号调控干细胞成软骨与成骨分化

目的探讨SIRT1对干细胞成软骨、成骨分化的调控作用及机制。方法 C3H10T1/2感染腺病毒Ad-SIRT1后于普通培养基培养,通过荧光显微镜了解腺病感染情况,采用Western blot验证目的蛋白是否高表达;在不同时间点,通过Western blot、阿尔新蓝染色、碱性磷酸酶染色检测干细胞成骨、成软骨分化关键转录调控因子及相关分化标志物的表达情况;使用XAV-939抑制β-catenin信号后,再利用Western blot检测成骨、成软骨分化标志物表达情况。结果 C3H10T1/2感染腺病毒Ad-SIRT1后,SIRT1获得高表达;在诱导分化后第5、7、9天,Ad-SIRT1组成软骨分化的标志物Ⅱ型胶原、蛋白多糖,以及成骨分化的标志物Ⅰ型胶原、骨钙素较Ad-GFP组明显增加(P<0.05);阿尔新蓝染色结果发现Ad-SIRT1组软骨细胞外基质分泌较Ad-GFP组明显增加;碱性磷酸酶染色结果发现Ad-SIRT1组部分细胞着色为阳性,而Ad-GFP组无明显着色的细胞;同时发现诱导分化后的第3、5天,Ad-SIRT1组中成软骨、成骨分化关键转录调控因子Sox9、Runx2的表达较Ad-GFP组明显增加(P<0.05);Ad-SIRT1组与Ad-GFP组比较,β-catenin乙酰化水平明显降低(P<0.05),而抑制β-catenin信号后,与Ad-SIRT1组比较,Ad-SIRT1+XAV-939组干细胞成软骨及成骨分化标志物表达明显降低(P<0.05)。结论 SIRT1能够通过β-catenin信号促进干细胞的成软骨及成骨分化。

离子通道对间充质干细胞增殖、骨向分化的作用

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一类具有向中胚层多向分化的干细胞,其细胞表面的离子通道表达多样,功能复杂。近年来,离子通道对间充质干细胞的功能调节备受关注。越来越多研究发现离子通道参与各种信号传递,调控细胞功能,如增殖、分化等基因的表达等。本文主要从离子通道表达的角度介绍离子通道在间充质干细胞的增殖、骨向分化中的作用。

浅论高师学生钢琴应用能力的培养

当前,高师音乐专业学生就业渠道多元化,用人单位对毕业生提出了综合性的要求。此背景下,在高师钢琴教学中应加强钢琴应用能力的培养,运用科学的方法将钢琴应用内容融入进去,并形成较为完善的教学系统,有助于提高高师学生钢琴水平的全面性,以适应社会对高师音乐毕业生的新要求。

《二部创意曲》主题旋律形态与演奏技法分析

巴赫的《二部创意曲》是一部学习弹奏复调的最好的中级教材。本文从旋律形态分析入手，应用分析归纳法，借助已有的理论成果，对《二部创意曲》主题旋律进行旋律形态和演奏方面的分析，并在演奏上提出一些规律性的处理方式。

素质教育的历史谱系及其新时代启示

从历史维度看素质教育的知识谱系可以发现:素质教育理念自萌芽时代起,其核心思想在于促进人的发展,意义非凡;素质教育的发展方向始终贴近时代需求,服务于生产力的发展;及至资本主义时期,素质教育的理论发展脱胎于实用主义,更加关注音乐、文学、艺术等软学科在实现人的全面发展中的重要作用。新时代发展素质教育应当传承其核心理念并把握时代需求,避免在社会结构转型之际片面地追求纯粹的实用主义,要提升文学、音乐、美术、体育等"软学科"的重视程度与成本投入。

奥氏体白口铸铁与马氏体白口铸铁的磨料磨损行为及抗磨性能

讨论了二种白口铸铁在各类磨料磨损时的行为,分析了在模拟各类磨损试验机上测试奥氏体白口铸铁与马氏体白口铸铁的抗磨性能,磨损系统参数的影响.结论是,奥氏体白口铸铁更适用于中等冲击载荷及磨料硬度较大的条件,其加工硬化率是影响其抗磨性的关键因素.

Smad7在Sox9增强BMP2成软骨效应中的作用

目的探讨Smad7在Sox9增强BMP2成软骨效应中的作用和机制。方法将小鼠骨髓间充质干细胞(C3H10T1/2)作为种子细胞,重组腺病毒Ad-BMP2和/或Ad-Sox9感染细胞,Ad-GFP感染细胞为对照。采用Real-time PCR、免疫细胞化学和Western blot分别检测感染后各组Smad7 mRNA表达水平和蛋白表达水平。采用Real-time PCR检测与Smad7相关因子MMP13与OPN mRNA的表达。结果 BMP2+Sox9组感染细胞7、11 d时,Smad7 mRNA和蛋白表达水平均明显低于BMP2组(P<0.05);免疫细胞化学染色结果显示,BMP2+Sox9组Smad7染色明显弱于BMP2组;同时BMP2+Sox9组中与软骨最终成熟因子OPN与MMP13的表达均低于BMP2组(P<0.05)。结论在BMP2诱导间充质干细胞成软骨分化中,高表达的Smad7可被Sox9抑制,并抑制Smad7相关因子MMP13与OPN表达,从而解除了Smad7对BMP2成软骨的抑制作用,阻止了软骨细胞最终成熟骨化,有利于保持软骨发育与正常状态。

四氯化碳诱导的小鼠肝损伤模型比较

目的:比较四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)诱导小鼠急性、亚急性、慢性肝损伤模型的差异,探讨稳定、可靠的小鼠肝损伤模型复制方法。方法:以CCl4油溶液(油为食用植物油)为材料,分别通过腹腔注射、皮下注射、灌胃等给药方式,固定给药时间,观察血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)活性及肝组织细胞形态的变化,考察肝损伤模型复制的的稳定性、可靠性。结果:腹腔注射不同浓度的CCl4均可产生急性肝损伤,使血清ALT明显升高,但只有高剂量才能升高AST;皮下注射不同浓度的CCl4均可产生亚急性肝损伤,CCl4中剂量组不仅可使血清ALT明显升高,还能升高AST;灌胃不同浓度的CCl4均可产生慢性肝损伤,CCl4各剂量组不仅可使血清ALT明显升高,还能升高AST,作用稳定,且呈浓度依赖性。肝组织病理切片显示急性、亚急性肝损伤模型肝组织坏死严重,组间没有明显区别;而慢性肝损伤模型出现肝细胞变性、部位肝组织坏死,浓度间呈现不同趋势。结论:CCl4诱导的慢性肝损伤模型复制稳定、病理特征明显,更有利于用于考察药物的作用及机制。

动态显色法定量检测泊沙康唑原料药中细菌内毒素的含量

目的:以动态显色法定量检测不溶于水的泊沙康唑原料药中细菌内毒素的含量。方法:根据注射液临床用量从严拟订沙康唑原料药限值为0.25 EU·mg^(-1),以稀释液(二甲基亚砜∶RIPA强裂解液=1∶1)为溶剂处理泊沙康唑原料,采用两个不同厂家的动态显色法鲎试剂,依据《中国药典》2020年版四部通则1143(方法2光度测定法之动态显色法)要求,确定样品不干扰的浓度,最后对3批样品的细菌内毒素进行定量检测。结果:两个厂家的鲎试剂标准曲线|r|均大于0.980;样品质量浓度≤0.02 mg·mL^(-1)时,细菌内毒素回收率在范围内;3批样品的细菌内毒素定量检测结果均符合要求。结论:以0.25 EU·mg^(-1)为限值,动态显色法用于不溶于水的泊沙康唑原料药细菌内毒素定量检测,方法可行,过程可控。

联合表达BMP2和Sox9促进体外培养间充质干细胞成软骨分化

目的探讨联合表达骨形态发生蛋白2(BMP2)和Sox9对间充质干细胞(MSCs)成软骨分化的影响,为构建组织工程软骨提供实验依据。方法以小鼠胚胎骨髓MSCs(C3H10T1/2)为种子细胞,重组腺病毒BMP2诱导其分化,联用重组腺病毒Sox9过表达Sox9信号,重组腺病毒GFP作为对照。Real-Time PCR检测成软骨标志物Ⅱ型胶原(Col2a1)、蛋白聚糖(Aggrecan)、X型胶原(Col10a1)表达变化;Alcian blue染色了解细胞基质糖胺聚糖合成情况;免疫组化和Western blotting检测Col2a1合成情况。结果 BMP2能诱导C3H10T1/2细胞成软骨分化,当与Sox9联合作用时,Sox9可促进BMP2诱导的(Col2a1、Aggrecan、Col10a1)基因表达上调;促进细胞基质糖胺聚糖、Col2a1蛋白合成。结论 BMP2与Sox9联合作用可以促进体外培养MSCs成软骨分化,可能为组织工程软骨提供新的方法。

校园网学生机房P2P流量管理

由于P2P应用的高速发展,校园网络内各种P2P软件的广泛应用严重占用带宽,造成网络的严重拥堵,通过简要介绍了P2P的现状,并对校园网络和学生机房中P2P的使用提供几种管理方法。