规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征感染混合细菌研究

规模化猪场爆发急性高热病,采集死猪肺脏病料和血清5份用RT-PCR方法进行PRRSVNSP2基因扩增,3份为猪繁殖与呼吸综合征阳性,编号为scwhn01,scwhn02和scwhn03.对scwhn01 NSP2基因进行克隆和序列测定分析,有30个氨基酸的不连续缺失,与VR2332,JXA1,BJ-4,HuN4,CH-1a,HB-1（sh）2002和HB-2（sh）2002的NSP2的同源率在74.2%~91.0%之间,并从病料中分离到2株细菌,编号分别为SNC0901和SNC0902,均使被攻毒小鼠死亡.16S rDNA测序并在Genbank中blast鉴定为副猪嗜血杆菌和大肠杆菌.对所分离的细菌进行17种抗生素药敏实验,对头孢噻呋、头孢噻吩等敏感;对克林霉素、阿莫西林/棒酸等中度敏感;对荷兰、林可霉素、丁胺卡那霉素和土霉素等耐药.表明该猪场因高致病性蓝耳病病毒混合感染副猪嗜血杆菌、大肠杆菌导致猪大量死亡.

规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒与细菌混合感染的诊断防治

本文就对某规模化猪场暴发急性、高热、呼吸系统疾病导致猪大量死亡,发病率50%,死亡率20%。临床诊断疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）感染,采集死猪肺脏、淋巴结、肾脏用RT-PCR进行PRRSV诊断和并进行细菌分离、鉴定及药敏试验，根据诊断结果提出防治措施。

西南地区猪肠外大肠杆菌毒力基因检测及耐药性研究

为了解规模化猪场肠外致病性大肠杆菌(ExPEC)的毒力基因与耐药性的流行情况,本实验室于2008年～2011年间对中国西南地区61个不同规模化猪场的427份组织病料进行细菌检验。采用菌落形态、显微观察和16SrDNA PCR测序鉴定分离菌,共检出79株(18.5%)ExPEC。对小鼠致病性试验结果显示其中50个分离株具有致病性,致病菌为66.3%。此外,对其8种毒力基因PCR检测结果表明astA、escV、invE、Stx2e 4种基因检出率分别为48%、44%、10%、4%,其他4种毒力基因未检出。18种药物的药敏试验结果显示头孢噻呋(7.6%)、氨苄西林/舒巴坦(11.4%)、阿莫西林/棒酸(16.4%)相对敏感,其他药耐药率均高于24%,多重耐药严重。该研究结果对近年来猪源大肠杆菌病的防控和临床用药提供了实验依据。

2011-2014年泸州市人民医院肺炎链球菌的耐药性分析

目的了解近4年泸州市人民医院肺炎链球茵的检出率和耐药情况及变化趋势。方法收集泸州市人民医院2011年1月-2014年12月分离的肺炎链球菌共306株（其中黏液型肺炎链球茵15株），主要来源于下呼吸道标本，其次为血液。青霉素用E—test法检测其MIC，其余10种抗生素用全自动细菌鉴定和药敏分析仪的GP68卡检测其MIC。结果4年来非脑膜炎来源的青霉素不敏感的肺炎链球茵（PNSSP）占18．30％（56／306），儿童为14．35％（30／209），成人为26．80％（26／97），差异具有统计学意义（χ^2=6．87，P〈0．01）。肺炎链球茵对多数抗生素的耐药性均有不同程度升高，尤其是红霉素、克林霉素、复方新诺明、四环素、青霉素明显。2011年红霉素的敏感性为21．43％（12／56），2014年仅为9．18％（9／98）；2011年克林霉素的敏感性为25．0％（14／56），2014年仅为12．24％（12／98）；2011年复方新诺明的敏感性为21．43％（12／56），2014年仅为8．16％（8／98）；2011年四环素的敏感性为32．14％（18／56），2014年仅为12．24％（12／98）；2011年PNSSP为10．71％（6／56），2014年为23．47％（23／98）。莫西沙星、环丙沙星、左旋氧氟沙星仍保持良好的敏感度，敏感率分别为97．71％（299／306），92．81％（284／306），97．71％（299／306）。未发现耐万古霉素、利奈唑胺的茵株。黏液型肺炎链球茵占所有分离株的4．9％（15／306），其耐药性与非黏液型有一定差异。结论2011-2014年泸州市人民医院分离的肺炎链球茵对青霉素、红霉素、克林霉素、四环素、复方新诺明的耐药性呈上升趋势，临床应结合药敏试验结果合理选择抗茵药物。

规模化猪场不同品种猪重要疾病的免疫效果分析

试验采用ELISA方法检测了某多品种混养的规模化猪场4个品种猪的4种重要疾病的抗体情况,并对该场的免疫程序进行评价,为制定科学的免疫程序提供参考。结果显示,藏猪、杜洛克、巴克夏、约克猪瘟抗体合格率分别为100%、98.3%、100%、95%,平均为98.3%;伪狂犬病抗体合格率分别为98.3%、95%、100%、98.3%,平均为97.9%;口蹄疫抗体合格率分别为18.3%、26.7%、60%、15%,平均为30%;猪繁殖与呼吸综合征抗体合格率分别为51.7%、16.7%、11.7%、28.3%,平均为27.1%。由此可见,此规模化猪场猪瘟和伪狂犬病抗体水平理想,口蹄疫和猪繁殖与呼吸综合征抗体水平不理想,并且4个不同品种猪在口蹄疫和猪繁殖与呼吸综合征的免疫上不适用相同的免疫程序。

兔IL-6真核表达质粒的构建及其分子佐剂效应的初步研究

为了研究兔IL-6真核表达质粒(pcDNA-IL-6)对家兔免疫应答的影响,本文构建了真核表达质粒pcDNA-IL-6,并将其与pcDNA-VP60、兔瘟组织灭活苗分别共同免疫家兔,用血凝抑制试验检测家兔RHDV特异性抗体水平。结果表明:在免疫后的7 d到70 d,无论是核酸疫苗pcDNA-VP60或是兔瘟组织灭活苗,与真核重组质粒pcDNA-IL-6共注射免疫组抗体水平均高于未注射pcDNA-IL-6质粒免疫组,差异均显著P<0.05或极显著P<0.01。真核重组质粒pcDNA-IL-6对重组质粒pcDNA-VP60和组织灭活苗的免疫均具有免疫增强作用。

人类生存困境的关照——对莫泊桑《项链》的再解读

莫泊桑的《项链》叙述了女主人公玛蒂尔德两次人生理想破灭的过程，体现了玛蒂尔德生存之困境．结合作者卓有成就的短暂生命历程分析。本文作者认为。《项链》暗含着对人类生存困境的关照，也正因为此，它的教育意义是常青的。

应激引起种猪急性死亡的诊断与治疗

长途运输作为一种应激原常常会导致运送的猪只发生死亡和发病，Vander Meulenl等（2001）证明长途运输的应激能够降低肠道内pH值，使肠道的渗透性增加，运输结束后肠道的渗透性达到最高峰。渗透性的增加导致肠道内的细菌和内毒素从肠道迁移至全身血液循环中，这可能能够解释运输后疾病增加的原因。2010年9月下旬，因猪场搬迁某集约化养猪场将猪只进行长途运输，猪场搬迁后20日间陆续出现11头种猪急性死亡。 通过对急性死亡种猪临床症状观察，并采集急性死亡猪的病料，对可疑引起猪死亡临床症状和病理解剖变化的病原进行实验室诊断，并且进行细菌分离，然后检测分离出的细菌对18种常见药物的敏感性试验，为临床治疗提供依据。

利用SMART技术构建鸡肺酵母双杂交cDNA文库

以1月龄SPF鸡肺为材料,用Trizol方法提取总RNA,并用mRNA纯化试剂盒纯化PolyA+mRNA,利用SMART技术合成双链cDNA(ds cDNA)。合成的ds cDNA通过CHROMA SPINTM TE-400 Column进行纯化,纯化后的ds cDNA与线性pGADT7-Rec共转化酵母感受态细胞AH109中,以同源重组的方式,在酵母细胞内构建成鸡肺的cDNA文库。获得的文库容量为3.9×106cfu,随机选取20个克隆进行PCR检测,插入片段大小集中在0.3～3.0kb之间,平均插入片段约为1.4kb左右,文库重组率为100%。结果表明该文库达到了高质量文库所应具备的条件,为酵母双杂交技术筛选与IBV-N相互作用的宿主细胞蛋白奠定基础。

角色渐变、隐痛益深——《小狗包弟》第二课时教学设计

【教材和学情分析】《小狗包弟》选自巴金先生的《随想录》，是一篇文字平实，内容感人的叙事性散文，其因小见大、以小动物反映大时代的表现手法，以及作者严于解剖自己的勇气、深刻的反省忏悔意识等等，都值得学生揣摩和探究。

猪鸡致病性大肠杆菌沙门菌对β-内酰胺类药耐药表型和基因检测

本试验指130株细菌对β-内酰胺类药物头孢噻吩、头孢西丁、头孢他啶、头孢曲松、头孢噻肟等的耐药表型进行研究。结果大肠杆菌及沙门菌对β-内酰胺类耐药率较高:头孢噻吩83.5%、头孢他啶63.4%。敏感率较高的:头孢曲松93.2%、亚胺培南97%、头孢吡肟100%。采用本实验室建立的三重PCR方法,检测β-内酰胺类药物CTX-M、SHV和TEM耐药基因,TEM的检出率最高82%(82/130),SHV的检出率34%(34/130)、CTX-M检出率23%(23/130)。耐药基因和耐药性比较表明,大肠杆菌及沙门菌对β-内酰胺类药物耐药表型与耐药基因型符合率较高,能很好的反映细菌耐药情况并给临床用药提供参考。

2015-2016年川南地区猪繁殖与呼吸综合征病毒遗传进化分析

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)主要引起母猪繁殖障碍与生长猪呼吸障碍性疾病,给养猪业造成严重损失.为了解川南地区2015-2016年PRRSV遗传变异情况,该研究收集了85份疑似感染PRRSV组织样品,通过RT-PCR扩增ORF5基因,对其进行克隆、序列测定和所测序列遗传进化分析.获得15个ORF5序列,其遗传距离与序列相似性为0.0~0.25和81.1%~100%.与VR2332,JXA1,NADC30和JX1411核酸序列相似性分别为83.4%~89.1%,83.4%~99.3%,81.9%~95.7%和81.4%~92.9%.进化树分析显示,15个ORF5序列形成3个亚群,8个ORF5序列与JXA1形成subcluster Ⅰ,5个与NADC30like形成subcluster Ⅱ,2个与ZJ1503like毒株形成subcluster Ⅲ.研究结果表明,该地区PRRSVs毒株基因型日趋复杂,建议通过合理疫苗免疫,减少通过重组导致出现复杂的PRRSV基因型,对PRRSV的防控具有重要意义.

PBL结合CBS教学法在留学生医学微生物学教学中的应用初探

目的探索PBL结合CBS教学法的应用,以提高留学生医学微生物学的教学质量。方法本研究在传统LBL教学的基础上,选择适当内容采用PBL结合CBS教学法,通过课堂小测验、期末考试成绩及问卷调查综合评价PBL结合CBS教学法的效果。结果实验组比对照组教学效果显著提高。结论 PBL与CBS相结合教学法的应用在留学生医学微生物学教学中取得了较好的教学效果。

雷氏普罗威登斯菌耐药性及耐药基因的单中心研究

目的了解某院雷氏普罗威登斯菌耐药情况,分析耐碳青霉烯类雷氏普罗威登斯菌耐药基因遗传特征,为临床预防和感染治疗提供理论依据。方法收集2017年1月—2019年12月该院分离的雷氏普罗威登斯菌的药敏结果,采用高通量测序技术测定3株耐碳青霉烯类雷氏普罗威登斯菌全基因组,利用生物信息学分析方法挖掘其遗传特征。结果共分离雷氏普罗威登斯菌25株,其中对碳青霉烯类药物耐药株10株,占40.00%。神经外科检出最多(7株,占28.00%),标本来源以尿为主(13株,52.00%)。25株菌对氨苄西林、阿莫西林均耐药,耐药率为100.00%。对亚胺培南、厄他培南、美洛培南的耐药率分别为36.00%、40.00%、28.00%。3株耐碳青霉烯雷氏普罗威登斯菌全基因组测序,结果分析显示均携带β-内酰胺类(bla NDM-1、bla OXA-10和bla TEM-1B)、大环内酯类[mph(A)、mph(E)、msr(E)]、甲氧苄啶(dfrA1)、氨基糖苷类[aadA1、aadA5、aph(3″)-Ib、aph(4)-Ia、acc(6′)-Ib3、aadB]、磺胺类(sul1)和氯霉素类(catB8)6类耐药基因型,所携带耐药基因型bla NDM-1、bla OXA-10的遗传结构分别为:IS30-bla NDM-1-ble MBL-trpF-dsbC-orf-groES-groEL-IS91、aac(6’)-Ib3-dfrA1-aadA1-bla OXA-10-catB8-aadB。结论雷氏普罗威登菌多重耐药现象严重,携带耐药基因种类多,应加强医院感染防控,减少耐药菌株的传播。

西南地区某医院2015—2019年血源性病原体职业暴露特点

目的分析医务人员血源性病原体职业暴露特点,为制定有针对性的职业防护策略提供依据。方法回顾性调查西南地区某医院2015—2019年医务人员上报的职业暴露资料,分析职业暴露的原因、类型、暴露源及处置随访等情况。结果共上报411例次职业暴露。暴露者以护士为主(47.44%),暴露科室主要为内科系统(39.41%)、外科系统(22.63%)和急诊科(12.41%)。暴露类型主要为锐器伤(78.10%,主要发生在整理诊疗器具/医疗废物、采血时),皮肤黏膜接触(19.71%)和其他类型(2.19%,主要是抓伤、咬伤所致)。暴露源不明的职业暴露主要分布在急诊(33.38%)、门诊(13.89%)和后勤(8.33%)等科室,主要由于整理诊疗用物/医疗废物(44.44%)、门急诊注射输液(27.78%)、门诊采血(13.89%)等操作引起。血源性病原体暴露源以乙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒和梅毒螺旋体为主,暴露后预防性用药率为70.67%。结论预防医务人员职业暴露发生的工作中,应重点关注锐器伤,同时应加大职业防护培训和医疗废物处置管理力度。

2014~2018年某三甲医院血流感染分布及革兰阴性菌耐药性分析

目的:分析本院血流感染常见革兰阴性菌分布、耐药性及碳青霉烯酶基因型,为临床血流感染的防治提供依据。方法:选择2014年1月至2018年12月临床送检血培养标本及其分离革兰阴性菌为研究对象,梅里埃ATB及药敏系统对细菌种属进行鉴定和药敏测定,PCR检测碳青霉烯酶基因型。结果:在所送检13028例血培养标本中,1283份标本为血培养阳性。并从中分离到革兰阴性菌,阳性菌和真菌分离率分别为58.07%(n=745),39.59%(n=508)和2.34%(n=30)。所分离细菌主要由大肠埃希菌61.07%(n=480),肺炎克雷伯菌18.19%(n=143),阴沟肠杆菌4.71%(n=37),铜绿假单胞菌3.69%(n=29)和鲍曼不动杆菌2.42%(n=19)等组成。所分离菌细菌对青霉素类、头孢菌素类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类、复方新诺明、头孢菌素/酶抑制剂、碳青霉烯类耐药率分别为85.44~100.00%,12.78~55.60%,0.00~38.30%,6.10~47.40%,13.57~96.00%,18.41~100.00%和0.00~100.00%。产碳青霉烯酶基因主要有blaKPC,blaNDM,blaIMP和blaOXA-23,且存在同时携带blaKPC和blaNDM菌株。结论:血流感染革兰阴性菌对常见抗菌药物耐药性严峻,应加强此类菌临床监测,指导临床合理用药。

3Cr-1Mo-(1/4)V双层不锈钢带极堆焊工艺试验研究

通过3Cr-1Mo-(1/4)V钢锻板上进行双层不锈钢带极堆焊试验,摸索出了合理的堆焊工艺参数,焊后机械性能解剖试验表明,其堆焊层机械性能完全满足指标要求,达到了日本同类产品水平。

300MW核反应堆压力容器球形顶盖向心环焊缝的焊接

本文介绍了我公司在300 MW核反应堆压力容器的球形顶盖向心环焊缝的焊接中,经过对焊接材料、焊接方法和工艺的全面试验和研究,在变位器上实现了窄间隙丝极埋弧自动焊接工艺方法,一次焊接成功。焊后经无损检测质量优良。通过产品鉴证件性能检验结果表明,其各项性能指标均符合产品设计要求,与日本制造的同类产品鉴证件性能相一致,填补了国内空白,为国产化开创了新局面。

浅谈历史课堂多媒体教学的作用

多媒体教学手段的运用，一改往日在教学中枯燥、乏味、呆板的理论说教和单纯语言讲解的教学模式，有利于将较多的知识信息，以较丰富的感观形式再现于课堂教学中，它大大增强了课堂教学的直观性和感染力，提高了教学效果。

非医背景青年教师在医学微生物学教学中如何提升临床知识的探讨

医学微生物学是一门重要的医学基础课程,同时也具有较强的临床专业性,在其教学过程中结合感染性疾病的病例,既可以提高教学质量,同时又可以加深学生对知识的理解和记忆。近年来,青年教师已成为高校师资队伍中的重要组成人员,其中非医学背景教师占据了较高比例。只有不断提升青年教师的临床知识,才能有效地在医学微生物学教学中将基础与临床结合起来,调动学生学习的积极性,促进教学质量和水平的提高。