鸡球虫抗药性现场测定方法综述

鸡球虫抗药性现场测定方法综述孔繁瑶，宁长申，殷佩云（北京农业大学兽医学院北京１０００９４）鸡球虫病是一种对养鸡业危害很大的原虫病。暴发球虫病的雏鸡群，病死率达４０％～８０％甚至更高；而由于球虫病造成的鸡只发育滞缓、减重、产蛋减少、药物及饲料浪费等带来...

15株柔嫩艾美耳球虫Eimeria tenella对五种抗球虫药的抗药性调查研究

应用 AA 肉鸡,检测了采自我国12个省区的15株 Eimeria tenella 对5种抗球虫药的敏感性。根据最适抗球虫活性百分率、相对卵囊产量和病变记分减少率3项指标综合判定,对莫能霉素、氨丙啉、克球粉、氯苯胍和杀球灵具有不同程度抗药性的虫株分别占80%,66.6%,53.3%,53.3%和0%。不同地区虫株的抗药谱和抗药程度存在差异。多数虫株对2种或2种以上的抗球虫药具有复合抗药性。此外,研究制订了比较适用的检测球虫抗药性的判定方法和判定标准。

我国动物寄生虫病防治技术发展回顾与展望

自 19世纪中叶 ,重要寄生虫种如肝片吸虫、带绦虫、斑氏丝虫、梨形虫和疟原虫等的生活史相继被揭示以后 ,寄生虫病综合防治的观念得以形成 ;化学驱虫药与寄生虫疫苗的出现 ,更使寄生虫病的防治工作如虎添翼。迄今寄生虫病的防治都是在以其生活史为基础的综合防治的框架上 ,运用驱虫药与疫苗这 2种武器而取得成效的。这也是成功防治的唯一策略。作者将头绪纷繁的众多寄生虫病归纳为十大寄生虫病 ,并提出了相应的防治对策。

10株柔嫩艾美耳球虫对四种药物的抗药性检测

从4省市10个鸡场分离到10株柔嫩艾养耳球虫，使用AA肉鸡按每只鸡接种10万卵囊，对马杜霉素、百球清、盐霉素和拉沙里菌素的敏感性进行了测试。依照最适抗球虫活性百分率、相对卵囊产量和病变记分减少率3项指标，检测结果显示：30％虫株对马杜霉素和百球清有抗药性，40％虫株对拉沙里菌素有抗药性，70％虫株对盐霉素有抗药性，80％虫株对两种或两种以上的药物有抗药性。虫株的抗药谱带有明显的地方性。此外，对抗药虫株的鉴定标准进行了讨论。

斯氏艾美耳球虫子孢子的移行途径

关于斯氏艾美耳球虫Ｅｉｌｎｅｒｉａｓｔｉｅｄａｉ（Ｓｐｏｒｏｚｏａ：Ｅｉｍｅｒｉｉｄａｅ）子孢子的移行途径争议尚大。作者借光镜和电镜互补的手段研究了子孢子从肠腔到肝内胆管上皮细胞的移行。所取材料为人工感染５～５０万卵囊的１月龄幼兔的血液、肠道、淋巴结、脾和肝，取材料时间为感染后２～７２ｈ（２ｈ的间隔）至４～６６（１６的间隔）。依据子孢子大量出现于肠系膜淋巴结和小量出现于脾脏而未见于其它部位淋巴结，以及肝内胆管周围营养血管（胆管周毛细血管丛）中有大量子孢子出现等观察结果，提出了子孢子移行途径的新假说，即子孢子进入肠固有层淋巴管、肠系膜淋巴结、经乳糜池转入血循环、由肝动脉至汇管区胆管周毛细血管丛并由此处侵入胆管上皮细胞。

松材线虫和拟松材线虫不同株系线粒体DNA RAPD分析

对松材线虫 7个株系和拟松材线虫 2个株系的线粒体DNA随机扩增多态性分析结果显示 ,松材线虫和拟松材线虫种间和种内都表现出很大的变异性 ,但种间变异明显大于种内变异 ,因而支持将松材线虫和拟松材线虫划分为两个不同的种。两个拟松材线虫株系 (法国株系和日本株系 )之间的相似值和松材线虫各株系间的相似值极为接近 ,由此看来 ,这两个株系的变异为种内变异 ,应同属于一个种。聚类分析的结果表明 ,松材线虫和拟松材线虫系两个明显不同的类群 ,即松材线虫类群和拟松材线虫类群。松材线虫类群又分为两个亚组 ,一个是以日本株系为代表 ,另一个是以北美洲 (美国和加拿大 )

马杜霉素抗药性诱导的实验研究

以一株对莫能菌素敏感和一株对莫能菌素抗性的柔嫩艾美耳球虫为材料，进行了马杜霉素抗药性诱导实验的研究。通过高、低两个药物浓度系列的诱导，虫株经鸡体内传代１８次后，均对５ｐｐｍ和７ｐｐｍ马杜霉素产生了抗药性。研究表明：虫株对马杜霉素抗药性产生的时限和强度与药物浓度和对莫能菌素的敏感性无关，证明马杜霉素与莫能菌素之间无交叉抗药性。此外，建立了实验室条件下球虫抗药性诱导的起始浓度和梯度及方法。

斯氏艾美耳球虫小配子的发育及其超微结构

结合光镜和电镜、切片和涂片技术 ,对斯氏艾美耳球虫 (Eimeriastiedai)小配子发育期的超微结构进行了研究。小配子发育分 2个阶段———生长与核分裂阶段及小配子的形成与分化阶段。早期小配子体单核 ,核仁小 ;随着核的分裂变为双核、四核和多核小配子体 ,后者因核极多 ,浅层分叶形成小配子体胚以利于核周边排列。各小配子体胚周边的核与嵌于核前方的线粒体向前突出并生长 ,最后分化形成小配子落入带虫空泡。成熟的小配子有 2根鞭毛、1个大线粒体和 1个强嗜锇性核、被单层膜。

斯氏艾美耳球虫子孢子的超微结构

斯氏艾美耳球虫子孢子呈香蕉形，外被三层膜组成的表膜，有前后极环；顶复合器具典型结构，棒状体为８根；核一个，位于虫体前半部，含一个偏心核仁；相当于核中部水平位置的表膜上，见有一微孔；折光体在核后，呈球形，约占子孢子纵长的２／５；尾部常见一兔尾巴式的结构，构成方式类似阿米巴的伪足，是由被表膜的胞质向外突出形成的；胞质中见有许多管泡状线粒体和一些电子致密体。

PCR技术在住肉孢子虫虫种鉴定上的应用

采用 RAPD 方法对水牛梭形住内孢子虫、待定种及黄牛枯氏住内孢子虫缓殖子基因组 DNA 进行了分析,待定种 PCR 产物的电泳带型与枯氏住肉孢子虫的差异较梭形住内孢子虫大,这与二者表型性状一致的研究结果不吻合.对3种包囊种特异性的 PCR 指纹进行了筛选,回收和纯化了3种包囊种特异性的 DNA 片段,待定种0.7kb 片段经α-^(32)PdATP 标记后用作探针,只与同源 DNA 杂交,不与其它包囊、宿主细胞和艾美耳球虫杂交,用 pGEM-T Easy Vector 对该片段克隆成功,并测出其全长序列,为进一步设计特异引物建立标准 PCR 诊断方法和用作核酸探针奠定了基础。

我国药品不良反应监测模式的趋势探析

目的研究探索我国上市后药物警戒工作的发展趋势。方法采用现状分析方法,针对现有问题,构想警戒工作发展的趋势和方向。结果针对报告质量参差不齐、企业责任落实不到位、医疗机构主渠道优势不明显等现状问题,设想通过强化现有不良反应监测系统、组建国家药品不良反应监测哨点联盟、探索数据源合作研究、开展企业培训和检查、升级PSUR模块、研究企业药品安全性监测与评价系统等方式,不断深化我国上市后药物警戒工作。结论不断强化企业意识、提升企业能力、落实企业责任和持续提升药品不良反应监测体系自身的监测评价能力。

马杜霉素对柔嫩艾美耳球虫线粒体的影响

为了观察马杜霉素对球虫超微结构的影响 ,探讨马杜霉素抑杀球虫的作用机理 ,将马杜霉素按0 .0 0 0 5%浓度混入鸡的育雏饲料中 ,1 2日龄时 ,用该饲料喂给药组的鸡 ,同时 ,另设定 1组不用药对照组 ,在1 4日龄时 ,参加实验的 2个组的每只实验鸡接种对马杜霉素敏感的孢子化的鸡柔嫩艾美尔球虫卵囊 2× 1 0 4个 ,感染后 84,96,1 0 8,1 2 0和 1 32 h每组分别捕杀 2只实验鸡 ,取鸡盲肠组织 ,制成超薄切片 ,通过透射电镜观察鸡体内的柔嫩艾美耳球虫敏感株在马杜霉素作用下超微结构的变化 ,与对照组比较 ,发现线粒体表现为数量增多和形态改变。形态改变表现在有的线粒体弯曲为马蹄形或者弓形 ;内部结构的变化为 :有的线粒体内膜和嵴脱落 ,内部形成空泡、膜状结构、螺旋状或者髓鞘样结构 ,有的线粒体的嵴变为与线粒体的长轴平行排列 ,且贯穿线粒体。作者推测马杜霉素等抗生素类抗球虫药的作用机理为 :破坏虫体内部结构与抑制虫体的生理机能

离体培养中两种脱鞘方法和几种不同营养成份对蒙古马歇尔线虫L_3发育为L_4的影响

本文研究了六个不同pH梯度;四种人工综合培养基(M_(199),EMEM,F_(10),F_(12));YE_(25)(酵母提取物),CLB_(33)(牛肝汤),RLE_(50)(兔肝提取物);Filde's试剂对离体培养中蒙古马歇尔线虫L_3发育为L_4的影响;比较了次氯酸钠脱鞘和MRF(改良法配制的RFN)85分钟脱鞘效果及对L_3发育为L_4的影响。 较早出现脱皮的培养基为:M_(1(?))+CEE_(50)+CBS,pH5.2(脱皮出现于培养后第8天)。L_4出现率较高的培养为:(1)MRF85分钟脱鞘后移入MRF内培养2天;(2)以M_(199)为主配制而成的M_9加谷胱苷肽、Filde's试剂,pH4.5～5,培养8天;(3)M_9加Filde's试剂,pH6,培养40天。L_4的出现率达46.7％。

松材线虫和拟松材线虫扫描电镜结构的比较研究

本文对 3个株系松材线虫和 3个株系拟松材线虫进行了扫描电镜结构的比较。结果表明 ,雌虫尾突的特征、雌虫尾部纵脊的数目以及雄虫尾翼的结构是松材线虫和拟松材线虫分类的主要特征。其中雌虫尾部纵脊的特征是过去没有描述过的 。

斯氏艾美耳球虫大配子发育及其超微结构

凭借光镜和电镜、切片和涂片技术相结合之手段 ,作者对斯氏艾美耳球虫 (Eimeriastiedai)大配子发育及其超微结构进行了研究。大配子发育历经早、中、晚 (成熟 ) 3期。早期虫体以大核、大核仁和数个早期形态的成囊颗粒Ⅰ (WFⅠ )的出现为特征 ;中期虫体以成囊颗粒Ⅱ (WFⅡ )之出现为特征 ,含大量脂肪体和支链淀粉颗粒并出现小管构造 ;成熟期大配子体即大配子 ,被单层膜 ,WFⅠ和WFⅡ周边排列 ,含极多的脂肪体和支链淀粉颗粒 ,有一明显核仁的大核 ,小管构造增多。

鸡球虫卵囊的三种同工酶酶谱分析

者对3种艾美耳球虫和4株柔嫩艾美耳球虫抗药性虫株分别进行了乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖磷酸异构酶(GPI)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)同工酶电泳图谱分析。其中LDH同工酶谱共观察到5条酶带,GPI同工酶谱共观察到8条酶带,G6PD同工酶谱观察到7条酶带。3种艾美耳球虫的同工酶谱存在种间差异,不同抗药性虫株间酶谱也存在差异。G6PD-5很可能与球虫对氯嗪苯乙氰的抗药性有关。

斯氏艾美耳球虫裂殖生殖的多态现象

迄今描述的艾美耳科和住肉孢子虫科球虫的裂殖生殖多为单态，作者发现斯氏艾美耳球虫的裂殖生殖具多态性，其方式有：子孢子型裂殖体以内单多生殖方式产生下代裂殖子；双或多核的裂殖子型裂殖体或以内二多生殖方式或以外单多生殖方式产生下代裂殖子；单核裂殖子型裂殖体以外多多生殖方式产生下代裂殖子；经典型裂殖体以内单多和外单多混生方式产生下代裂殖子。这种裂殖体以多态的方式产生下代裂殖子的现象称为裂殖生殖的多态现象。依据前人以及作者的观察，作者提出两项建议：（１）将艾美耳科和住肉孢子虫科球虫的不同形态的裂殖体归为三型，即子孢子型、裂殖子型和经典型；（２）将此两科球虫的内生方式归为四型，即内单多生殖、内二双生殖、内二多生殖和内多多生殖；将外生方式归为三型，即外单多生殖、外二多生殖和外多多生殖；将斯氏艾美耳球虫的一种特殊生殖方式归为内单多和外单多混生殖。球虫裂殖生殖的多态性反映球虫遗传物质的多型性。

家畜住肉孢子虫研究进展

住肉孢子虫是一类细胞内的寄生性原虫，广泛发现于爬行类、鸟类和包括人、猴、鲸、各种家畜在内的哺乳动物。根据Ｌｅｖｉｎｅ（１９８６）统计，文献记载的虫种有１２０多种，其中已知生活史的有５６种，寄生在家畜有２０多种，而近１０年来仍不断有新种报道。７０年代生...

马杜霉素对不同虫株柔嫩艾美耳球虫超微结构的影响

鸡体内用 5mg/kg马杜霉素作用于柔嫩艾美耳球虫 (Eimeriatenella)敏感虫株和抗药虫株 ,比较裂殖生殖阶段超微结构的差异。敏感株裂殖体体积变小 ,所生成裂殖子的数目变小 ,裂殖子膨胀 ,裂殖子间 (带虫空泡内 )微管膨胀 ,结构模糊 ,有髓鞘样结构出现 ;限制膜外突和细胞质分离形成空隙 ,膜结构模糊 ,有破损 ;细胞浆空泡化 ,出现附加体和髓鞘样结构 ;少数细胞核的外膜外突和内膜分离 ,有的部位的核膜模糊、破损。首次发现裂殖子顶体结构发生异常变化 ,棒状体消失 ,微线数目减少或者消失 ;线粒体表现为形态改变 ,嵴脱落 ,内部形成空泡、膜状结构和髓鞘样结构 ,线粒体的峭与长轴平行排列 ,且贯穿线粒体。抗药虫株没有发现异常变化。推理抗生素类抗球虫药的作用机理为破坏虫体结构和抑制虫体的生理机能两个方面 ;

线粒体DNA在线虫学研究中的应用

线粒体ＤＮＡ在线虫学研究中的应用张路平孔繁瑶（北京农业大学动物医学院，北京１０００９４）线虫是一类世界性分布的生物，在几乎所有的环境中都有线虫的分布。有些线虫寄生于人和动植物体内，引起宿主不同程度的疾病，给人类健康和经济发展造成了重大影响。因此长期以...