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BOPPPS教学模式在分子生物学教学中的探索与实践
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作者 雷海英 宋慧芳 +1 位作者 秦成 王玺 《高教学刊》 2024年第24期114-118,123,共6页
为适应应用型人才的培养要求,针对当前学生课堂学习的自主性较差,课前不预习,或预习无头绪,课堂的积极性不高,不主动,氛围沉闷,考核方式单一等问题,采用BOPPPS教学模式,对分子生物学课程内容、课程思政内容和教学评价等方面进行重构、... 为适应应用型人才的培养要求,针对当前学生课堂学习的自主性较差,课前不预习,或预习无头绪,课堂的积极性不高,不主动,氛围沉闷,考核方式单一等问题,采用BOPPPS教学模式,对分子生物学课程内容、课程思政内容和教学评价等方面进行重构、探索与实践。研究表明,经过多年的教学实践,与传统教学方法相比,BOPPPS教学模型中的参与式学习环节,提升课堂的到课率、学生的抬头率和参与度,成效显著;同时,课程思政的巧妙融入,体现了“知识传授、能力培养、价值塑造”三位一体的育人理念,让师范类本科生的家国情怀得到传承,塑造热爱生命、敬畏生命、珍惜生命并造福生命的价值观,重过程评价方式避免考前忙突击、一考定终身的教学弊端,具有推广应用价值。 展开更多
关键词 应用型人才 BOPPPS教学模式 分子生物学 探索 实践
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机构编制工作发展历程初探
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作者 宋慧芳 贾兴隆 《行政科学论坛》 2024年第2期68-73,共6页
习近平总书记在二十届中央编委第一次会议上,对党的十八大以来机构编制工作取得的重大成就和宝贵经验进行了系统的总结,对新时代机构编制工作高质量发展作出了重要部署,具有很强的政治性、思想性、指导性和针对性,为机构编制工作高质量... 习近平总书记在二十届中央编委第一次会议上,对党的十八大以来机构编制工作取得的重大成就和宝贵经验进行了系统的总结,对新时代机构编制工作高质量发展作出了重要部署,具有很强的政治性、思想性、指导性和针对性,为机构编制工作高质量发展指明了前进方向,提供了根本遵循。 展开更多
关键词 机构编制工作 党的十八大以来 根本遵循 发展历程 前进方向 重大成就 政治性 习近平总书记
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大单元视域下初中生物教学的研究策略
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作者 宋慧芳 《成长》 2024年第7期106-108,共3页
大单元视域将课程内容整合成一个统一的主题,使学生能够在更广阔的范围内理解和掌握知识,提高学习的效果。在这个背景下,需要研究出适合大单元视域的教学策略,以激发学生的兴趣、培养他们的思维能力和实践能力。本文旨在探讨大单元视域... 大单元视域将课程内容整合成一个统一的主题,使学生能够在更广阔的范围内理解和掌握知识,提高学习的效果。在这个背景下,需要研究出适合大单元视域的教学策略,以激发学生的兴趣、培养他们的思维能力和实践能力。本文旨在探讨大单元视域下初中生物教学的研究策略,为教师提供参考和借鉴,从而提升教学质量和学生的学习效果。本研究旨在探讨大单元视域下开展初中生物教学的策略。通过将生物知识划分为有机的大单元,并进行跨学科整合,以促进学生对学科知识的深入理解和应用能力的培养。同时,注重培养学生的观察、推理和实践能力,鼓励学生主动参与探究性学习,提高学生的自主学习能力和创新思维水平。 展开更多
关键词 初中生物教学 跨学科整合 提升教学质量 探究性学习 自主学习能力 知识划分 思维能力 教学策略
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方正书版和方正飞翔在机关文印排版设计中的应用与质量提升策略
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作者 宋慧芳 《网印工业》 2024年第8期68-70,共3页
本文旨在深入探讨机关文印排版设计的现状、挑战及解决策略,重点介绍各种设计工具的应用,分析核心设计要素,并提出提升设计质量的方法。通过技术应用与创新实践,期望推动机关文印排版设计的现代化发展。
关键词 方正书版 方正飞翔 机关文印 排版设计 技术应用 创新实践
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保健醋生产工艺及车间设计
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作者 宋慧芳 《食品工程》 2024年第3期45-50,共6页
保健醋生产车间应满足国家标准GB 17405—1998《保健食品良好生产规范》及《保健食品生产许可审查细则》的要求。综合考虑厂区人流、物流路线,为便于生产,新建保健醋车间与丙类仓库贴邻建设,防火间距不限,连通处设双防火卷帘。丙类仓库... 保健醋生产车间应满足国家标准GB 17405—1998《保健食品良好生产规范》及《保健食品生产许可审查细则》的要求。综合考虑厂区人流、物流路线,为便于生产,新建保健醋车间与丙类仓库贴邻建设,防火间距不限,连通处设双防火卷帘。丙类仓库用于存放酿造原辅料、包装材料及成品。保健醋车间包含原醋酿造、保健醋生产两个生产区,完成从原醋酿造到保健醋生产全过程。根据工艺流程、操作要点及工艺参数,选配主要设备,并以此为基本要求布置车间平面方案,说明设计依据、设计要点及《保健食品良好生产规范》(中国保健品GMP)在设计中的应用。 展开更多
关键词 原醋酿造 保健醋 车间布置 GMP
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1986—2020年黄河流域十大孔兑土地利用变化及驱动力分析 被引量:2
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作者 娄佳乐 党晓宏 +2 位作者 蒙仲举 张昊 宋慧芳 《水土保持学报》 CSCD 北大核心 2024年第1期319-327,336,共10页
[目的]十大孔兑是黄河几字湾的重要组成部分,生态环境敏感脆弱,开展其土地利用变化与驱动力分析对黄河流域高质量发展具有重要生态意义。[方法]对十大孔兑基于1986年、2000年、2010年、2020年4期遥感影像,运用ArcMap 10.8空间分析法和... [目的]十大孔兑是黄河几字湾的重要组成部分,生态环境敏感脆弱,开展其土地利用变化与驱动力分析对黄河流域高质量发展具有重要生态意义。[方法]对十大孔兑基于1986年、2000年、2010年、2020年4期遥感影像,运用ArcMap 10.8空间分析法和主成分分析法系统分析其土地利用变化情况及驱动因素。[结果]林地、建设用地、耕地呈逐期扩张趋势,未利用地、草地、水域呈逐期缩减趋势,截至2020年林地成为占地面积最大地类,面积达6308.43 km^(2),占总面积的59.99%。2010—2020年综合动态度最高,达1.59%,表明土地利用变化在2010—2020年变化最为剧烈。平原区地势平坦,耕地和建设用地在此扩张明显;风沙区在生态治理政策与工程作用下,未利用地向林草地转变,在风沙区东部尤为明显,而在风沙区中部则小比例转变为光伏发电建设用地;丘陵区主要由未利用地转变为林地,由于区域工矿业发达,丘陵区东南部极小部分林地转变为城乡工矿建设用地;水域在孔兑内部共减少75.81 km^(2),而耕地除北部平原区扩张外,在孔兑沿岸增加明显。土地利用变化主要受社会经济、农业生产力、地势、政策驱动变化。[结论]近35年来,十大孔兑土地利用变化较大,整体生态向好的方向发展较为明显。该研究结果可为决策部门制定黄河流域生态保护政策提供科学参考。 展开更多
关键词 土地利用 时空演变 驱动力 十大孔兑
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基于BOPPPS的线上、线下混合式教学在系统解剖学中的应用 被引量:3
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作者 石丽洪 刘成芳 +4 位作者 张卫国 宋慧芳 赵云鹤 张忠 陆利 《基础医学教育》 2023年第10期899-903,共5页
以BOPPPS教学模式和线上、线下混合式教学为依托,以人卫MOOC、雨课堂、学习通等平台为工具,以Jigsaw、Running paper和翻转课堂等多种教学方法为手段,课题组实施以学生为主体、教师为主导的启发式教学,创建集基础、临床、思政教育于一... 以BOPPPS教学模式和线上、线下混合式教学为依托,以人卫MOOC、雨课堂、学习通等平台为工具,以Jigsaw、Running paper和翻转课堂等多种教学方法为手段,课题组实施以学生为主体、教师为主导的启发式教学,创建集基础、临床、思政教育于一体的基于BOPPPS的线上、线下混合式教学模式,将此模式大规模应用于临床医学五年制各专业,全方位提升教师综合育人能力,全面提升学生综合素质水平,使培养的医学生更加契合新医科人才培养目标和“健康中国”理念。 展开更多
关键词 系统解剖学 BOPPPS教学模式 教学改革 混合式教学 本科生
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呼和浩特市慢性咳嗽不同病因检出率及相关危险因素分析
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作者 贾钧婷 宋慧芳 +1 位作者 刘源 徐毛冶 《中文科技期刊数据库(引文版)医药卫生》 2024年第7期0128-0133,共6页
探讨呼和浩特市慢性咳嗽患者不同病因的检出率为慢性咳嗽经验性治疗提供依据;将慢性咳嗽患者和非慢性咳嗽患者(正常人)一般情况及临床特征进行对比,初步探讨慢性咳嗽患者相关危险因素。方法 分析2021年10月-2022年10月就诊于内蒙古自治... 探讨呼和浩特市慢性咳嗽患者不同病因的检出率为慢性咳嗽经验性治疗提供依据;将慢性咳嗽患者和非慢性咳嗽患者(正常人)一般情况及临床特征进行对比,初步探讨慢性咳嗽患者相关危险因素。方法 分析2021年10月-2022年10月就诊于内蒙古自治区人民医院呼吸与危重症医学科门诊慢性咳嗽患者237例,收集相关一般情况及临床特征,并以同期就诊于我院体检中心的健康成人154例作为对照组,比较两组一般资料,分析影响慢性咳嗽的危险因素以及相关危险因素的受试者操作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)。结果 在237例慢性咳嗽患者中咳嗽变异性哮喘(cough variant asthma,CVA)患者所占比例最高为46.4%,其次为上气道咳嗽综合征(upper airway cough syndrome,UAVS)和嗜酸粒细胞性支气管炎(eosinophilic bronchitis,EB),所占比例分别为13.5%和7.6%,而25.3%的慢性咳嗽患者由于为进一步检查暂时不能明确病因。将慢性咳嗽组(237例)和非慢性咳嗽组(正常人)(154例)一般资料及临床特征进行对比分析发现,性别、吸烟史、过敏史、鼻炎/鼻窦炎病史、是否喜爱进食寒性水果、熬夜均有意义(P<0.05),其中过敏史和鼻炎/鼻窦炎病史更有意义(P<0.01);将上述相关危险因素联合后得出ROC曲线下面积为0.76,灵敏度为65.40%,特异度为73.38%,约登指数为0.38。结论 呼和浩特市慢性咳嗽患者中CVA所占比例最高,因此建议对无法确定病因的慢性咳嗽患者可以优先考虑以CVA进行经验性治疗;性别、过敏史、鼻炎/鼻窦炎病史、熬夜均为慢性咳嗽的相关危险因素,基于多因素logistic逐步回归分析筛选出的5项危险因素构建的ROC曲线对患慢性咳嗽具有预测价值。 展开更多
关键词 慢性咳嗽 病因 呼和浩特市 经验性治疗 危险因素
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建立适用于BALB/c Nude小鼠的急性肝衰竭模型
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作者 谈佳音 刘阳 +2 位作者 李斌 陆利 宋慧芳 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第14期2152-2157,共6页
背景:在干细胞和组织工程领域的动物实验中,免疫缺陷裸小鼠(BALB/c Nude小鼠)对于提升研究准确性具有重要意义。但CCl致BALB/c Nude小鼠发生急性肝衰竭的浓度及检测时间尚不明确,严重影响该动物模型在具有免疫原性的干细胞治疗研究中的... 背景:在干细胞和组织工程领域的动物实验中,免疫缺陷裸小鼠(BALB/c Nude小鼠)对于提升研究准确性具有重要意义。但CCl致BALB/c Nude小鼠发生急性肝衰竭的浓度及检测时间尚不明确,严重影响该动物模型在具有免疫原性的干细胞治疗研究中的应用。目的:通过与C57小鼠急性肝衰竭模型比较,探索腹腔注射CCl建立BALB/c Nude小鼠急性肝衰竭模型的合适浓度和检测时间。方法:将50%浓度的CCl按照4 m L/kg腹腔注射到C57小鼠(n=6)和BALB/c Nude小鼠(n=6)体内,注射后72 h内观察小鼠存活情况。分别将50%,20%,10%浓度的CCl按照4 m L/kg腹腔注射到BALB/c Nude小鼠体内,注射后72 h观察小鼠存活情况,并进行肝脏病理切片形态学观察。根据建立两种小鼠急性肝衰竭模型的最佳CCl浓度,将50%浓度的CCl腹腔注射到C57小鼠体内,将20%浓度的CCl腹腔注射到BALB/c Nude小鼠体内,注射前后检测小鼠血清中谷丙转氨酶和谷草转氨酶水平。结果与结论:(1)CCl注射24 h后,C57小鼠的存活率为50%,BALB/c Nude小鼠全部死亡,提示现有针对C57小鼠的最适CCl浓度不适合BALB/c Nude小鼠造模;(2)注射50%浓度CCl的BALB/c Nude小鼠在24 h之内陆续死亡;注射体积分数20%CCl的小鼠24 h后存活率是66.7%,至注射后72 h存活率仍为66.7%;注射10%浓度CCl的小鼠至注射后72 h全部存活;注射后24 h肝病病理结果显示,CCl注射浓度越小肝脏损伤程度越轻,其中20%浓度的CCl最适合建立BALB/c Nude小鼠急性肝衰竭模型;(3)C57小鼠腹腔注射CCl4h后谷丙转氨酶和谷草转氨酶水平达到最高,1 d时开始下降;BALB/c Nude小鼠在腹腔注射CCl1 d后谷丙转氨酶和谷草转氨酶水平达到最高,3 d时开始下降;(4)结果表明,为提高动物实验可靠性,使用C57小鼠建立急性肝衰竭模型时应选择50%浓度的CCl,在注射后4 h施行干预措施;使用BALB/c Nude小鼠建立急性肝衰竭模型时应选择20%浓度的CCl,在注射后1 d施行干预措施。 展开更多
关键词 四氯化碳 急性肝衰竭 BALB/c Nude小鼠 C57小鼠 模型
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基于态靶辨证的补肾活血方联合泼尼松治疗重症免疫球蛋白A肾病临床观察
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作者 王建立 薛翠英 +3 位作者 袁秀梅 张红英 曾庆华 宋慧芳 《中国药业》 CAS 2024年第4期93-96,共4页
目的探讨基于态靶辨证理论的补肾活血方联合泼尼松治疗重症免疫球蛋白A(IgA)肾病的临床疗效。方法选取滦州市人民医院2020年1月至2022年12月收治的重症IgA肾病患者98例,按随机数字表法分为对照组和观察组,各49例。在常规治疗的基础上,... 目的探讨基于态靶辨证理论的补肾活血方联合泼尼松治疗重症免疫球蛋白A(IgA)肾病的临床疗效。方法选取滦州市人民医院2020年1月至2022年12月收治的重症IgA肾病患者98例,按随机数字表法分为对照组和观察组,各49例。在常规治疗的基础上,两组患者均予醋酸泼尼松片口服,观察组患者基于态靶辨证理论加用补肾活血方,两组均以30 d为1个疗程,连续治疗3个疗程。结果观察组总有效率为91.84%,显著高于对照组的73.47%(P<0.05)。观察组患者治疗后的中医证候(包括全身浮肿、小便不利、疲乏无力、舌淡苔白)积分均显著低于对照组,24 h尿蛋白定量、血尿素氮、血清肌酐水平均显著低于对照组,血清白蛋白水平显著高于对照组,血清水通道蛋白3、过氧化物酶增殖物激活受体α、肾损伤因子-1水平均显著低于对照组(P<0.05)。观察组与对照组不良反应发生率相当(14.29%比10.20%,P>0.05)。结论基于态靶辨证理论的补肾活血方联合泼尼松治疗重症IgA肾病,可改善患者的主要中医证候和肾功能指标,降低机体炎性因子水平。 展开更多
关键词 免疫球蛋白A肾病 糖皮质激素 补肾活血方 态靶辨证 临床疗效 中医证候
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达格列净联合miR-126缓解缺血缺氧诱导的心肌细胞损伤
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作者 李艳珍 王元明 +3 位作者 马明峰 张卫国 和荣丽 宋慧芳 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第11期2750-2753,共4页
目的探讨达格列净联合miR-126减弱心肌缺血缺氧诱导的心肌细胞损伤。方法将H9c2心肌细胞分为对照组、模型组、模型+0.4μmol/L达格列净组、模型+0.8μmol/L达格列净组、模型+达格列净+anti-miR-NC组、模型+达格列净+anti-miR-126组。采... 目的探讨达格列净联合miR-126减弱心肌缺血缺氧诱导的心肌细胞损伤。方法将H9c2心肌细胞分为对照组、模型组、模型+0.4μmol/L达格列净组、模型+0.8μmol/L达格列净组、模型+达格列净+anti-miR-NC组、模型+达格列净+anti-miR-126组。采用流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western印迹检测B细胞淋巴瘤/白血病(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)、Bcl-2蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测过氧化氢酶(CAT)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量、白细胞介素(IL)-1β含量;实时荧光定量-聚合酶链反应(qTR-PCR)检测miR-126表达水平。结果与对照组相比,模型组凋亡率、Bax蛋白表达、TNF-α含量、IL-1β含量明显增加,Bcl-2蛋白表达、CAT活性、SOD活性、miR-126表达水平显著降低(P<0.05)。与模型组相比,模型+0.4μmol/L达格列净组、模型+0.8μmol/L达格列净组凋亡率、Bax蛋白表达、TNF-α含量、IL-1β含量明显降低,Bcl-2蛋白表达、CAT活性、SOD活性、miR-126表达水平显著增加(P<0.05)。与模型+达格列净+anti-miR-NC组相比,模型+达格列净+anti-miR-126组miR-126表达水平、Bcl-2蛋白表达、CAT活性、SOD活性显著降低,凋亡率、Bax蛋白表达、TNF-α含量、IL-1β含量明显增加(P<0.05)。结论达格列净可能通过调控miR-126表达减轻心肌缺血缺氧诱导的心肌细胞凋亡、氧化应激和炎性损伤,对心肌细胞具有保护作用。 展开更多
关键词 达格列净 MIR-126 缺血缺氧 心肌细胞
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颊间隙的解剖学结构及其临床意义
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作者 郝银萍 陆利 +2 位作者 杨桂姣 段建峰 宋慧芳 《解剖学研究》 CAS 2023年第4期352-356,共5页
目的为了给颊间隙疾病的诊治提供解剖学基础,探讨颊间隙的解剖边界、内容物及其与颊间隙疾病的关系。方法选用成年尸体头颈部5例,逐层解剖分离,观察颊间隙的解剖结构、内容物以及与相邻组织的关系;选用2例健康人、3例颊间隙感染和2例颊... 目的为了给颊间隙疾病的诊治提供解剖学基础,探讨颊间隙的解剖边界、内容物及其与颊间隙疾病的关系。方法选用成年尸体头颈部5例,逐层解剖分离,观察颊间隙的解剖结构、内容物以及与相邻组织的关系;选用2例健康人、3例颊间隙感染和2例颊间隙肿瘤患者进行电子计算机断层扫描和磁共振成像检查,观察其解剖及疾病影像特征。结果颊间隙有较为明确的前后、内外及下界,而无明确的上界;在间隙内有面神经、面动脉、颊神经、颊动脉、面深静脉走行,也有少许淋巴结及脂肪组织分布;颊间隙内并未发现面静脉、腮腺导管;电子计算机断层扫描和磁共振成像是颊间隙病变诊断的重要方式。结论颊间隙可以认为是一个不完全封闭的相对独立空间,依据其内容物的特点可以指导颊间隙及相关疾病提供合理的治疗手段,颊间隙的影像学与解剖对比研究对颌面部疾病的诊治也具有重要意义。 展开更多
关键词 颊间隙 边界 电子计算机断层扫描 磁共振 应用解剖
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16SrRNA基因测序技术在呼吸系统疾病与气道微生物中的研究进展
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作者 贾钧婷 宋慧芳 +1 位作者 徐毛冶 刘源 《内蒙古医学杂志》 2024年第2期193-196,共4页
呼吸系统疾病是世界各地病死率较高的疾病之一,呼吸道病毒和细菌感染已经被确定为人口病死的主要原因。根据感染的区域不同,主要分为上呼吸道感染和下呼吸道感染两种类型。定植于健康人肺部的微生物群大多属于四个门类:厚壁菌门、拟杆... 呼吸系统疾病是世界各地病死率较高的疾病之一,呼吸道病毒和细菌感染已经被确定为人口病死的主要原因。根据感染的区域不同,主要分为上呼吸道感染和下呼吸道感染两种类型。定植于健康人肺部的微生物群大多属于四个门类:厚壁菌门、拟杆菌门、放线菌门和变形菌门,它们与人体气道局部黏膜免疫系统相互作用共存,维持呼吸系统的免疫平衡与稳定。近年来,宏基因组学技术的发展为研究共生菌提供了可能性,随着SrRNA和基因测序技术的应用,微生物菌群与呼吸系统疾病之间的关系引起广泛的关注,也证明了呼吸系统疾病与呼吸道微生物菌群之间有着密不可分的关系,这不仅有助于呼吸系统疾病的诊断,而且为患者的治疗及预后提供方向。本文就目前关于呼吸系统疾病与气道微生物的相关研究在PubMed、中国知网、万方医学和维普医学上检索“呼吸系统疾病、16SRrRNA、慢性阻塞性肺疾病、哮喘、慢性咳嗽、囊性纤维化、气道微生物”等关键词,对相关文献进行回顾和总结并作简要综述。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 16SrRNA 气道微生物
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飞蝗β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶基因的表达及酶学特性分析 被引量:10
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作者 宋慧芳 李应龙 +1 位作者 马恩波 张建珍 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第21期4140-4148,共9页
【目的】β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(β-N-acetylglucosaminidase,NAG)是昆虫几丁质降解过程中的重要酶类。研究旨在利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统获得高纯度LmNAG1蛋白并对其酶学特性进行分析,探究该酶在飞蝗(Locusta migratoria)生长... 【目的】β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(β-N-acetylglucosaminidase,NAG)是昆虫几丁质降解过程中的重要酶类。研究旨在利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统获得高纯度LmNAG1蛋白并对其酶学特性进行分析,探究该酶在飞蝗(Locusta migratoria)生长发育过程中的生物学功能,为飞蝗绿色防控分子靶标研发提供理论与实践依据。【方法】根据Lm NAG1的cDNA全长序列(Gen Bank:JX888720.1)设计包含酶切位点Bam H Ⅰ、Hind Ⅲ和6×His标签的引物。采用PCR技术扩增包含开放阅读框的目标片段,双酶切后连接至pFast Bac^(TM)-Dual载体上。将重组质粒转化至大肠杆菌DH10Bac感受态细胞中,通过Tn7转座子把目的基因转座到杆状病毒基因组上,用蓝白斑结合抗生素筛选。挑取白斑用pUC/M13引物来扩增目的条带,挑选带目的基因全长的重组杆状病毒质粒(baculovirus plasmid,Bacmid)。用转染试剂将重组Bacmid转染至草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)卵巢细胞系Sf9中,72 h内连续观察细胞形态,当出现感染迹象后收集细胞,离心,取上清得到P1代重组病毒粒子。用P1代病毒粒子去感染Sf9细胞,裂解并提取蛋白,Western blot检测目的蛋白是否成功表达。之后大量感染Sf9细胞,提取蛋白,利用Ni-NTA琼脂糖亲和层析柱和阴离子交换柱Q对重组蛋白进行纯化,取最纯的馏分用Bradford法测定蛋白浓度。采用4MU-GlcNAc为底物对重组目的蛋白LmNAG1的动力学参数、最适温度和最适pH进行测定。【结果】克隆得到包含1 845 bp LmNAG1全长的pFast Bac-LmNAG1重组质粒,酶切验证与目标条带一致。将重组质粒转化至DH10Bac感受态细胞中,PCR扩增挑选出纯白斑,成功将LmNAG1全长序列构建到杆状病毒基因组上。将重组Bacmid转染至Sf9细胞,72 h后在显微镜下观察可见细胞膨大,边缘不规则等感染迹象。离心收集重组病毒粒子感染新的Sf9细胞,72 h后收集细胞,Western blot检测发现在67 kD附近有明显条带,与LmNAG1的理论分子量一致,获得带6×His标签的融合蛋白。大量感染收集细胞提取蛋白,经Ni-NTA琼脂糖层析纯化,进一步透析除盐后用阴离子交换柱Q二次纯化,得到了高纯度的目的蛋白。用Bradford法测定最纯的E3组分的蛋白浓度为0.057μg·μL^(-1)。体外活性测定结果表明LmNAG1的最适pH为8.0,且在pH 6.0—8.0范围内具有较高的稳定性;LmNAG1的最适温度为40℃,在40℃以下具有很高的稳定性,当温度高于45℃时热稳定性迅速下降;采用4MU-GlcNAc为底物测得LmNAG1具有水解β-1,4糖苷键的活性,可以释放出4MU,它的动力学参数K_m值为(0.28±0.02)mmol·L^(-1),K_(cat)值为(902.88±38.15)s^(-1)。【结论】成功获得高纯度且具活性的LmNAG1蛋白,其可水解β-1,4糖苷键连接的几丁质寡糖,与已知昆虫NAG1具有相似的生物学功能,即参与几丁质的降解。 展开更多
关键词 飞蝗 β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG) 几丁质降解 蛋白表达 酶学特性
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新媒体在人体解剖学教学中的应用及效果评价 被引量:6
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作者 宋慧芳 张忠 +7 位作者 张卫国 刘雪芹 赵云鹤 龙女 周楠 石丽洪 贺婵婷 陆利 《解剖学杂志》 CAS 2019年第6期627-628,共2页
新媒体是以数字信息技术为基础发展起来的新的媒体形态,具备强大的传播功能.其所具有的交互性,数字化,超文本,模拟性等典型特点符合人体解剖学这一形态学课程教学的典型特征.其亦符合世界医学教育联合会(WFME)制定的5个全新教育理念当... 新媒体是以数字信息技术为基础发展起来的新的媒体形态,具备强大的传播功能.其所具有的交互性,数字化,超文本,模拟性等典型特点符合人体解剖学这一形态学课程教学的典型特征.其亦符合世界医学教育联合会(WFME)制定的5个全新教育理念当中提到的自主学习及互联网+的理念[1-4]. 展开更多
关键词 媒体形态 传播功能 数字信息技术 人体解剖学 医学教育 模拟性 超文本 自主学习
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低氧预处理通过激活AKT通路提高老年hBM-MSCs对氧化应激损伤的耐受能力 被引量:5
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作者 宋慧芳 郭蕊 张亮 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期912-916,共5页
目的:探讨低氧预处理对老年人骨髓间充质干细胞(h BM-MSCs)的保护作用,为提高老年自体干细胞移植治疗效果提供实验支持。方法:老年h BM-MSCs于低氧培养箱中培养24 h进行低氧预处理,实验分为年轻h BM-MSCs组(young组),老年h BM-MSCs组(ol... 目的:探讨低氧预处理对老年人骨髓间充质干细胞(h BM-MSCs)的保护作用,为提高老年自体干细胞移植治疗效果提供实验支持。方法:老年h BM-MSCs于低氧培养箱中培养24 h进行低氧预处理,实验分为年轻h BM-MSCs组(young组),老年h BM-MSCs组(old组)及低氧预处理老年h BM-MSCs组(old+hypoxia组)。300μmol/L H_2O_2作用30 min建立细胞氧化应激模型,50μmol/L LY294002作用2 h阻断PI3K/AKT信号通路,Brd U掺入实验检测细胞增殖能力;CCK-8法检测细胞活力,Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达水平和AKT磷酸化水平。结果:Brd U掺入实验显示低氧预处理的老年h BM-MSCs细胞阳性率为39.85%±3.45%,与old组相比增殖能力显著提高(P<0.05)。300μmol/L H_2O_2作用30 min诱导细胞氧化应激后,old+hypoxia组与old组比较,细胞活力显著提高(P<0.05),凋亡相关蛋白Bax表达量显著降低(P<0.05),抑制凋亡的Bcl-2蛋白表达量显著增高(P<0.05),且AKT磷酸化水平显著增高,差异有统计学显著性(P<0.05);应用LY294002抑制PI3K/AKT信号通路后,细胞活力下降(P<0.05)。结论:低氧预处理可以通过激活AKT信号通路提高老年人骨髓间充质干细胞活力及增殖能力。 展开更多
关键词 低氧 PI3K/AKT信号通路 骨髓间充质干细胞 氧化应激
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飞蝗双链RNA降解酶的抗体制备及组织定位 被引量:2
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作者 宋慧芳 张建琴 +3 位作者 范云鹤 李涛 马恩波 张建珍 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第19期3704-3713,共10页
【目的】双链RNA降解酶(dsRNA degrading enzyme, dsRNase)是制约RNA干扰(RNAi)技术在害虫防治中应用的关键因素之一。本研究旨在利用原核表达系统获得飞蝗LmdsRNase2和LmdsRNase3的特异抗原,进而制备抗体,对其进行组织定位和蛋白表达... 【目的】双链RNA降解酶(dsRNA degrading enzyme, dsRNase)是制约RNA干扰(RNAi)技术在害虫防治中应用的关键因素之一。本研究旨在利用原核表达系统获得飞蝗LmdsRNase2和LmdsRNase3的特异抗原,进而制备抗体,对其进行组织定位和蛋白表达量检测,为进一步解析飞蝗中肠dsRNA降解酶基因的功能分化提供蛋白水平的证据。【方法】通过对LmdsRNase2和LmdsRNase3的氨基酸序列(GenBank:ARW74135.1和ARW74134.1)进行比对,分别选取特异的LmdsRNase2和LmdsRNase3抗原序列(R2'、R3')进行后续的研究。根据LmdsRNase2和LmdsRNase3的cDNA全长序列,设计包含酶切位点BamH I、Hind Ⅲ的引物,采用PCR技术扩增目标片段,双酶切后连接至pET-32a载体。将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,加入IPTG至终浓度为0.5mmol·L^(-1),37℃下诱导4 h后提取蛋白,采用SDS-PAGE电泳方法检测蛋白表达。大量培养带重组质粒的大肠杆菌,诱导目的蛋白大量表达,用镍柱亲和层析法分离R2'和R3'蛋白,Bradford法检测蛋白浓度。经两次免疫新西兰大白兔后,最终获得LmdsRNase2和LmdsRNase3的多克隆抗体。利用ELISA法测定多克隆抗体的效价,通过Western blot检测抗体的特异性。提取飞蝗5龄第3天的中肠组织蛋白和中肠液,分别用LmdsRNase2和LmdsRNase3的抗体检测其表达量。最后制备飞蝗5龄第3天的中肠石蜡切片,通过免疫组化对LmdsRNase2和LmdsRNase3蛋白进行亚细胞定位。【结果】通过氨基酸序列比对发现,LmdsRNase2和LmdsRNase3具有37%的序列一致度,选取特异的序列R2'和R3'设计引物,分别包含157和153个氨基酸残基,理论分子量分别为17.0和16.8 kD。在IPTG浓度为0.5 mmol·L^(-1)条件下,37℃诱导4 h后,目的蛋白在包涵体中大量表达。扩大培养重组菌株后提取蛋白,用镍亲和层析柱分离得到纯度为85%的R2'蛋白,可直接用于免疫;而R3'蛋白的纯度低于85%,利用电泳切胶纯化后免疫新西兰大白兔,36 d后取抗血清进行检测,效价均达到1:102 400,表明抗体效果良好。用多克隆抗体杂交实验室保存的His-LmdsRNase2和His-LmdsRNase3融合蛋白,对抗体进行特异性检测,结果表明R2和R3的抗体分别特异性识别LmdsRNase2和LmdsRNase3,无交叉杂交现象,且条带与His抗体杂交到的条带大小一致。采用Western blot方法检测,发现LmdsRNase2蛋白在中肠组织中高表达,但在中肠液中未检测到可见表达,LmdsRNase3蛋白在中肠组织和中肠液中均未检测到表达。进一步采用免疫组化方法对两个蛋白进行组织定位,发现LmdsRNase2和LmdsRNase3均在中肠细胞质中表达,但LmdsRNae3的表达量较低。【结论】成功制备了特异性良好的飞蝗LmdsRNase2和LmdsRNase3抗体,Western blot和免疫组化分析表明LmdsRNase2在中肠细胞质中高表达,而LmdsRNase3的表达量很低。研究结果为飞蝗中肠两个dsRNA降解酶LmdsRNase2和LmdsRNase3的功能分化提供了蛋白水平的证据。 展开更多
关键词 飞蝗 dsRNA降解酶 多克隆抗体 组织定位
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正常成人窦房结形态学及Cx43、Cx40的表达 被引量:5
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作者 宋慧芳 夏仲年 +1 位作者 高雨仁 杨桂姣 《山西医科大学学报》 CAS 2008年第2期97-101,共5页
目的观察正常成人心脏窦房结的细胞构筑及连接蛋白43、40(connexin43、40,Cx43、Cx40)的表达和分布情况。方法常规石蜡包埋,HE、Masson染色,选定目标部位行Cx43、Cx40免疫组织化学染色,并进行图像及统计分析。结果①正常成人窦房结细胞... 目的观察正常成人心脏窦房结的细胞构筑及连接蛋白43、40(connexin43、40,Cx43、Cx40)的表达和分布情况。方法常规石蜡包埋,HE、Masson染色,选定目标部位行Cx43、Cx40免疫组织化学染色,并进行图像及统计分析。结果①正常成人窦房结细胞组成、形态、排布区别于普通工作心肌。②由房肌、窦房结外周到动脉周围结组织,Cx43、Cx40表达逐渐减弱,胞质染色逐渐浅淡;而Cx40的分布范围在动脉周围窦房结组织中多于外周结组织。结论正常成人窦房结的细胞组成、排布及Cx43、Cx40的表达与其电生理起搏、传导特性相符。 展开更多
关键词 窦房结 形态学 连接蛋白表达
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波浪作用下堤前冲淤研究综述 被引量:4
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作者 宋慧芳 李昌良 高学平 《海洋技术》 2007年第1期80-85,共6页
总结了近年来国内外对波浪作用下堤前冲淤的研究状况,包括规则波和不规则波作用下堤前海床的冲淤形态、冲淤形态判别标准、冲淤机理等。针对该课题的研究现状,提出了需进一步研究的问题。
关键词 防波堤 波浪 泥沙 冲淤形态 冲淤机理
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叔丁基对苯二酚激活骨髓间充质干细胞蛋白酶体活性延缓复制性衰老 被引量:2
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作者 宋慧芳 杨佳超 +1 位作者 牛晓洁 陆利 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1647-1651,共5页
目的:探讨叔丁基对苯二酚(tert-butylhydroquinone,t BHQ)在延缓骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)复制性衰老进程中的作用,以期为细胞移植治疗提供数量充足的种子细胞。方法:30μmol/L t BHQ持续作用于体外... 目的:探讨叔丁基对苯二酚(tert-butylhydroquinone,t BHQ)在延缓骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)复制性衰老进程中的作用,以期为细胞移植治疗提供数量充足的种子细胞。方法:30μmol/L t BHQ持续作用于体外传代晚期BMSCs 4周,化学发光法测量蛋白酶体活性;CCK-8法检测细胞活力;Brd U掺入实验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期分布;衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-Gal)染色检测衰老细胞百分比;Western blot检测衰老相关蛋白P53表达变化。结果:30μmol/L t BHQ持续作用于传代晚期BMSCs 4周后,蛋白酶体活性较DMSO溶剂对照组上调(21.96±1.98)%(P<0.05)。CCK-8法显示随t BHQ浓度增加,细胞活力逐渐升高,至40μmol/L达到平台期,且至120μmol/L未见明显细胞毒性。Brd U掺入实验显示t BHQ组阳性细胞率与DMSO溶剂对照组比较,细胞增殖能力显著提高(P<0.05);t BHQ组细胞增殖指数也显著高于DMSO组(P<0.05)。t BHQ组SA-β-Gal阳性率较DMSO溶剂对照组显著降低(P<0.01),且衰老相关蛋白P53表达量也较对照组下降(P<0.05)。结论:t BHQ能够通过提高蛋白酶体活性延缓因蛋白酶体功能障碍引起的BMSCs复制性衰老进程。 展开更多
关键词 叔丁基对苯二酚 骨髓间充质干细胞 复制性衰老
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