安徽甜瓜和栝楼蔓枯病的病原菌鉴定及其有效药剂筛选

为明确安徽舒城和巢湖地区甜瓜和栝楼蔓枯病的病原菌种类,2021—2022年对该地区的甜瓜和栝楼蔓枯病的病组织进行病原菌的分离和培养,利用柯赫式法则验证其致病性。通过对分离菌株的形态学特征,以及ITS、LSU和TUB2多位点序列分析,确定引起甜瓜及栝楼蔓枯病的病原菌为亚隔孢壳菌Stagonosporopsis citrulli。采用菌丝生长速率法测定了7种杀菌剂对病原菌代表性菌株的室内毒力,结果显示,啶酰菌胺、咪鲜胺对其抑制效果较好,其EC_(50)值在0.010 6~0.043 8μg·mL^(-1),可优先选择这两种药剂进行轮换使用防治该病害。

EMS诱变对西瓜种子萌发及农艺性状的影响

以高代自交系W-17-FGFB为试验材料,设置4个EMS浓度(0.5%、1.0%、1.5%、2.0%)和3个诱变时间(12、16、24 h)处理,研究不同诱变条件对西瓜种子发芽率、出苗率以及田间农艺性状的影响。结果表明:低浓度(0.5%~1.5%)EMS 3个时间处理的西瓜种子发芽率均在68%以上;2.0%EMS处理24 h的致死率接近半致死量。诱变处理后西瓜植株在叶形、叶色、花器官、果实等表型性状均表现出丰富的变异。综合各项指标,筛选出2.0%EMS浸种24 h为西瓜种子突变的最适宜诱导条件,可以获得丰富的表型变异材料。

甘蓝黑斑病病原菌鉴定及其对杀菌剂的敏感性

对江苏省甘蓝(Brassica oleracea var.capitata L.)叶片上发生的黑斑病进行病原菌鉴定,并测试病原菌对杀菌剂的敏感性。经形态学观察,初步明确分离得到的病原菌(HB0、HB1、HB2、HB3、HB5、HB6)为链格孢属真菌。基于科赫氏法则测定病原菌致病性,发现HB1、HB3、HB6能在甘蓝叶片上致病。扩增上述3个致病菌株的核糖体DNA内转录间隔区(rDNA-ITS)、过敏原基因(Alt a1)、3-磷酸甘油醛脱氢酶基因(GAPDH),得到大小为511~596 bp目的片段。多基因联合聚类分析结果显示,引起江苏省甘蓝黑斑病的病原菌为芸薹生链格孢(Alternaria brassicicola)。室内毒力试验发现,在测试的8种杀菌剂中,苯醚甲环唑、咯菌腈、己唑醇、氟硅唑、戊唑醇、丙环唑、异菌脲对病原菌菌丝生长的抑制效果较好,代森锰锌对病原菌菌丝生长的抑制作用较弱。

乌塌菜ISSR-PCR反应体系的建立及优化

为获得乌塌菜ISSR-PCR的最佳反应体系,采用单因素浓度梯度试验和正交优化设计相结合的方法,研究了引物浓度、dNTP浓度、Mg2+浓度、Taq DNA聚合酶用量对PCR反应的影响。并在此基础上对退火温度和循环数进一步优化,最终确立了适合乌塌菜ISSR-PCR反应的最佳体系和程序。即20μL PCR反应体系含:30 ng模板DNA,0.50μmol.L-1引物,0.25 mmol.L-1 dNTP,1 mmol.L-1 Mg2+,1.0 U Taq DNA聚合酶。PCR扩增程序为:94℃预变性3 min;94℃变性30 s,50℃退火1 min,72℃延伸90 s,35个循环;72℃延伸7 min,4℃保存。这一优化的ISSR-PCR反应体系的建立为今后利用ISSR技术对乌塌菜进行种质资源的分类鉴定奠定了基础。

《园艺植物组织培养学》教学改革的思考与探索

分析了《园艺植物组织培养学》教学中存在的问题,提出了相应的教学改革方案。

BcA9启动子调控的反义BcMF12对白菜基因沉默的效果

【目的】探讨花药绒毡层特异启动子BcA9调控的反义BcMF12基因对白菜(Brassica campestris L.ssp.chinensis,syn.B.rapaL.ssp.chinensis)基因沉默的效果,明确其对花粉发育的影响。【方法】在从白菜花蕾cDNA中克隆BcMF12基因的保守区段的基础上,将白菜花药特异表达启动子BcA9与反义BcMF12基因融合,构建反义表达载体,并经农杆菌介导导入到白菜基因组中,利用抗生素筛选和分子检测筛选出转基因植株。【结果】PCR和Southern检测结果表明,BcA9启动子驱动的反义BcMF12-GUS报告基因已整合到白菜基因组中;Northern杂交显示转基因植株花蕾和花中的BcMF12在mRNA水平的表达明显受到抑制,而且花粉萌发率显著下降。【结论】BcA9调控的反义BcMF12基因明显抑制了BcMF12的表达,从而影响白菜花粉的发育。

植物跨膜蛋白研究进展

跨膜蛋白是一类结构独特,在植物细胞中广泛存在,并发挥重要生理功能的蛋白质。综述了植物跨膜蛋白的理化性质、蛋白质结构预测的方法,以及其生理功能的研究进展。随着对植物跨膜蛋白的深入研究,将有助于揭示跨膜蛋白对植物生长发育调控的重要分子机制。

小鼠大脑中动脉缺血再灌注后缺血区及周边区星形胶质细胞的变化

目的探讨小鼠大脑中动脉缺血再灌注后脑梗死体积、星形胶质细胞(AS)病理形态及其蛋白表达的变化。方法选取69只成年健康雄性KM小鼠,将小鼠随机分为脑缺血2h再灌注1、4、10、24、48、72h模型组(n=9)以及假手术组(n=6,仅结扎右侧颈总动脉)和正常组(n=9)。采用线栓法制备小鼠大脑中动脉局灶性脑缺血再灌注模型。应用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法观察脑梗死的部位与体积;免疫组化法观察脑缺血中心区与周边区不同再灌注时间点胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。结果缺血再灌注1h开始出现脑梗死灶,且再灌注24h时梗死体积最大,之后逐渐缩小(F=745.534,P=0.000)。小鼠脑缺血再灌注后缺血中心区AS肿胀、肥大进而较快发生凋亡,其GFAP表达水平低于周边区(P<0.05);而缺血周边区GFAP阳性表达的AS出现反应性活化,进而发生形态学改变;缺血周边区及对侧相应脑组织区域GFAP的表达量均随再灌注时间的延长呈现增加趋势(P<0.05)。结论 AS反应性活化可能是一种缺血后的全脑保护性防御机制,尤其是在缺血周边区,其活化程度影响脑组织的存活与修复,提示在脑缺血再灌注过程中AS反应性活化可能在脑损伤后可塑性形态及功能改变中发挥重要作用。

甘蓝非编码RNA基因BoNR1的克隆与表达分析

非编码RNA是近年来新发现的一类在生物体内广泛存在、能够在生命活动中行使重要功能的特殊基因。根据普通白菜花粉特异的非编码RNA基因BcMF11的全长序列设计引物,通过PCR直接扩增的方法从甘蓝中克隆出BcMF11的同源基因BoNR1,该基因全长798bp,缺乏明显的开放阅读框,而且在序列中多处出现终止密码子。生物信息学分析发现,BoNR1具有非编码RNA基因的序列特征。RT-PCR表达分析结果显示BoNR1只在甘蓝花药中特异表达,推测该基因对调控甘蓝的花粉发育起作用。

卡那霉素对转基因菜心T1代种子的筛选鉴定研究

采用附加不同浓度卡那霉素(Kan)的1/2MS培养基对转基因油青菜心T1代种子进行培养,快速鉴定转基因菜心T1代种子对Kan的敏感性,结果表明:转基因菜心幼苗的白化率随着Kan浓度的升高而增大,其中以Kan附加浓度为60 mg/L时较适合于菜心转化植株后代的选择鉴定。

植物花粉发育的基因工程研究进展

植物花粉发育过程极其复杂,众多基因参与其中并对花粉发育的正常进行发挥着重要作用。植物花粉发育的基因工程研究是将花粉发育的分子水平研究和植物个体发育调控研究联系起来的中间环节,有助于全面认识植物花粉发育的机理。综述了植物花粉发育相关基因的分离、表达及其调控的研究进展,探讨了利用基因工程创造雄性不育的几种方法,并对今后的应用前景进行了展望。

植物非编码RNA的研究进展

非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)是一类广泛存在于多种生物体中,缺乏明确的开放阅读框,不编码蛋白质的RNA分子。目前已从部分植物中分离到一些ncRNA,它们直接以RNA分子的形式在植物体内发挥重要的调节功能,影响细胞分化和个体发育、基因转录调控、mRNA稳定性、RNA加工与修饰、信号传导、以及环境适应调节等。植物ncRNA的研究为深入了解植物的生长发育及系统进化提供了重要信息。

植物SET蛋白

SET蛋白是一类包含保守的SET结构域、与组蛋白甲基化密切相关的蛋白质。组蛋白修饰作为调控基因表达的重要因素,在植物体基因转录调控中发挥关键的作用。有关SET蛋白的研究为深入了解组蛋白修饰的机制提供了重要信息。植物SET蛋白具有保守的结构特征及进化机制,参与众多细胞核内的反应过程,如染色体的浓缩和分离,基因的转录,以及DNA的复制和修复等,调控植物基因的表达,影响植物体的发育。

本体感觉测量方法相关研究进展

本体感觉包括位置觉、运动觉和振动觉。其检测方法可分为传统体格检查法、音叉检测法、角度阈值测量法、角度重建法、本体感觉诱发电位检测法、定量感觉检查法、事件相关电位法等多种阈值检测法,不同检测方法也各有利弊。本体感觉障碍使关节运动的控制力和稳定性下降,对日常运动和生活能力产生极大影响。所以,人体本体感觉的检测和评估就极为重要。本文将本体感觉的研究方法做一概述。

将科研实践引入蔬菜育种实验教学环节的探索

《蔬菜育种学》是园艺学重要的专业核心课程之一,主要讲授蔬菜育种的基础理论和技术,实验教学和理论教学同等重要,是巩固理论教学、培养学生实践创新能力的重要环节。将科研实践引入蔬菜育种学实验教学中,给学生提供科研训练机会,有利于培养学生的创新意识,加强动手能力和实践操作能力,提高分析问题和解决问题的能力,对培养应用型人才具有积极的作用。

蔬菜育种学立体化教学模式的构建与实践

蔬菜育种学是园艺专业一门理论要求较高、实践性较强的专业核心课程,主要讲授蔬菜育种的基础理论和技术,培养学生的实践创新能力,具有广泛的应用前景。采用混合式立体化教学模式,即启发式的课堂教学、开放式的网络学习、互动型实验实践教学,以调动学生学习兴趣,启发学生创新能力,对培养高素质应用型人才具有积极的作用。

大鼠大脑中动脉缺血及缺血再灌注后星形胶质细胞的改变

众所周知，组成脑组织的细胞主要有神经细胞和神经胶质细胞，神经胶质细胞的数量是神经细胞的10～50倍，其中大部分是星形胶质细胞（astrocytes，AS）。已有研究表明，AS在营养、支持、保护神经元以及维持神经元的细胞代谢、离子浓度、酸碱平衡等方面承担着重要角色，尤其在脑缺血后AS首先受累且在对神经元的保护与损伤方面发挥着双重作用。

体感诱发电位刺激电流阈值与感觉电流阈值的相关性及其影响因素分析

目的：探讨正常成人下肢体感诱发电位刺激电流阈值（SEPCT）与感觉电流阈值（CPT）的相关性及其影响因素,为寻找适宜的刺激强度、规范本实验室体感诱发电位检查及后续本体感觉障碍患者的脑功能研究提供客观理论指导。方法：选择89例健康成年人,其中男49例,女40例,平均年龄（52.75±15.09）岁。按年龄分组,青年组：20~40岁,男7例,女13例;中年组：40~60岁,男20例,女13例;老年组：≥60岁,男20例,女16例。交替刺激双侧内踝部胫后神经,测量其双下肢CPT,并测量其SEPCT,分析二者的相关性及其影响因素。结果：男性受试者SEPCT及CPT均明显高于女性受试者,其SEPCT/CPT比值则显著低于女性（P〈0.05）;老年男性受试者SEPCT及SEPCT/CPT均明显高于中年男性组,且老年男性受试者SEPCT高于青年男性组（P〈0.05）;女性受试者SEPCT及CPT均值均随年龄增长而逐渐增高（P〈0.05）,而SEPCT/CPT则较为恒定,各组均未见显著性差异（P〉0.05）;SEPCT均值与CPT均值呈正相关。结论：在进行SEP临床检查及相关科研工作时,男性可给予4.40倍左右SEPCT/CPT的刺激电流强度,且老年男性受试者可给予稍高的SEPCT;女性则可给予6.13倍左右SEPCT/CPT刺激电流强度。

乌塌菜种质资源遗传多样性的ISSR分析

利用ISSR技术对48份乌塌菜种质资源进行遗传多样性分析。从60条随机引物中筛选出稳定性强、条带清晰且多态性丰富的9条引物进行PCR扩增，共扩增出103条谱带，平均每个引物扩增出11．4条带，其中多态性带85条，多态性位点百分率为82．68％。不同乌塌菜种质间遗传相似系数变幅为0．59—0．97，说明ISSR标记能够揭示材料间较高的遗传多样性。利用UPGMA聚类分析，ISSR标记能将48份乌塌菜品种完全区分开，48份乌塌菜种质被划分为4个类群，聚类结果与叶片颜色相关，为乌塌菜品种资源的研究利用提供参考。