无血缘关系供体外周血造血干细胞移植治疗白血病的临床研究

目的 :观察无血缘关系供体外周血造血干细胞移植 (PBSCT)治疗白血病的疗效及其并发症的防治。 方法 :用 HL A配型完全相合的无关供体移植治疗白血病 3例。预处理方案为 :例 1采用环磷酰胺 (CTX) +全身照射 (TBI) ;例 2采用 CTX+TBI+抗胸腺细胞球蛋白 (ATG) ;例 3采用 CTX+TBI+ATG+依托泊苷 (VP16 )。 3例患者输入单个核细胞数 (/ kg)分别为5 .90× 10 8、6 .43× 10 8和 6 .0 1× 10 8,CD34 +细胞 (/ kg)分别为 6 .34× 10 6、2 .6 2× 10 6和 2 .30× 10 6;急性移植物抗宿主病(GVHD)预防采用霉酚酸酯 (MMF)联合环孢素 A (Cs A)和短程甲氨蝶呤 (MTX)方案。 结果 :3例患者均顺利造血重建 ,无 1例发生 度或 度以上急性 GVHD;例 1患者移植后 180 d细胞遗传学复发 ,停用 Cs A后 2个月 Ph染色体消失 ,且出现局限性慢性 GVHD;例 2患者移植后 2 2 0 d出现局限性慢性 GVHD;例 3患者移植后 30 0 d有复发趋势 ,停用 Cs A 2周后完全缓解。结论 :无关供体 PBSCT可用于治疗白血病 ;MMF联合 Cs A和短程 MTX可用于预防无关供体移植急性 GVHD的发生。

α干扰素联合化疗治疗CML的分子水平疗效观察

目的 :分析 bcr/ abl融合基因表达水平与α干扰素 (IFNα)治疗慢性粒细胞白血病 (CML )疗效及预后的关系。方法 :应用半定量 RT- PCR方法 ,分析 6例α干扰素治疗的 CML患者不同时期骨髓细胞 bcr/ abl融合基因表达水平。结果 :5例患者 bcr/ abl融合基因表达水平减低 ,临床获得持久完全血液学缓解。结论 :半定量 RT- PCR有助于α干扰素治疗 CML的疗效观察及预后判断。

表达人Jagged1基因的骨髓基质细胞系的建立及其在HL-60细胞分化过程中的作用

目的 :建立表达人Jagged1基因的骨髓基质细胞系 ,并研究Jagged1基因表达在HL 6 0细胞诱导分化过程中的作用。 方法 :构建含有人全长Jagged1基因的逆转录病毒载体MSCV Jagged1 /neoR ,将其导入包装细胞PT6 7并收获病毒上清 ,用病毒上清转染骨髓基质细胞系HFCL ,经G4 1 8筛选得HFCL pMSCV Jagged1细胞 ,用Western印迹方法检测Jagged1基因的表达 ;将HL 6 0细胞与HFCL pMSCV Jagged1细胞、HFCL细胞在含有全反式维甲酸 (ATRA )的培养液中共培养 ,流式细胞仪检测不同时间点HL 6 0细胞CD1 1b的阳性率。 结果 :Western印迹方法证明HFCL pMSCV Jagged1细胞Jagged1表达水平明显高于HFCL细胞 ;HL 6 0细胞与HFCL pMSCV Jagged1、HFCL共培养 4 8和 72h后 ,CD1 1b阳性率在Jagged1组明显低于HFCL组 (P <0 .0 5 )。 结论 :Jagged1基因表达可以较为显著地抑制ATRA诱导的HL 6

血浆置换预防ABO血型主要不合骨髓输注溶血反应的疗效

目的 :观察血浆置换预防ABO血型主要不合骨髓移植时骨髓输注溶血反应的效果。方法 :采用血浆置换去除受者体内凝集素的方法预防 2例ABO血型主要不合骨髓移植急性溶血反应。置换液主要采用供体血型血浆 ,例 1置换血浆 42 2 0ml,例 2置换血浆 4339ml。结果 :血浆置换后 ,2例患者抗体滴度 (IgM、IgG)均在 1∶16以下 ,输注血型主要不合骨髓时均未发生急性溶血反应 ,亦未出现迟发性溶血反应 ;2例患者均植入成功 ,其中1例发生Ⅰ度急性移植物抗宿主病。结论 :血浆置换可有效预防ABO血型主要不合骨髓移植时溶血反应的发生。

角色模拟训练提高医学生临床交流和沟通能力的探讨

我国传统的医学院校教育体系中,学生缺乏交流与沟通能力的培训。以现行的物理诊断学教学为依托,探讨如何设置提高医学生临床交流和沟通能力的课程。计划开展问诊的医患角色模拟训练,专题讲座及讨论的形式,引导学生树立"以病人为中心"的理念,强调医患、医护以及临床与辅诊科室之间沟通能力的培养。实习前安排学生参加为期2周的劳动实践,体会与其他医疗工作人员的交往,增加与患者直接接触的机会,通过为患者服务赢得患者信任,为顺利进入实习做好铺垫。

异基因外周血造血干细胞移植治疗慢性髓细胞白血病的临床研究

为了评价异基因外周血造血干细胞移植 (allo PBSCT)治疗慢性髓细胞白血病 (CML)的疗效 ,作者对 12例CML进行了allo PBSCT的临床研究 ,12例均为第 1次慢性期 ,中位年龄 32 .5岁 ;全部供受者HLA配型完全相合 ,供者动员用G CSF 5 μg/ (kg·d)× 5天 ,分离外周血单个核细胞 (2 .49.5 7)× 10 8/kg(中位数 5 .0× 10 8/kg) ,CD 34 + 细胞数为 (0 .72 6 6 .30 )× 10 6/kg(中位数 5 .82× 10 6/kg)。预处理方案 :9例采用全身照射 (TBI) +环磷酰胺 (CTX) +依托泊甙 (VP16 ) ,3例采用TBI +CTX ;移植物抗宿主病 (GVHD)预防采用环孢素A(CsA) +短程甲氨喋呤 (MTX)方案。全部患者均顺利造血重建 ,中性粒细胞 >0 .5× 10 9/L中位数 14.5天 (142 3天 ) ,血小板 >2 0× 10 9/L中位数 16天 ;发生Ⅱ度以上急性GVHD 3例 (2 5 % ) ;慢性GVHD共 5例 ,其中局限性 3例 ,广泛性 2例 ;死亡 3例 ,2例死于感染 ,1例死于间质性肺炎 ,中位随访 6个月 ,存活 9例。Allo PBSCT急性GVHD发生率并不比异基因骨髓移植高 。

细胞因子对小鼠造血祖细胞基因转移效率的影响

目的：观察细胞因子对逆转录病毒载体介导的ＮｅｏＲ基因在小鼠造血祖细胞及人Ｋ５６２细胞中基因转移效率的影响，以探求最有效地促进造血细胞基因转移的细胞因子或其组合。方法：白细胞介素１α（ＩＬ－１α）、白细胞介素３（ＩＬ－３）、干细胞因子（ＳＣＦ）作用下预培养的骨髓细胞用含病毒颗粒的上清转染后，经Ｇ４１８或不含Ｇ４１８体外半固体培养，以生物学方法及ＰＣＲ方法检测造血祖细胞的某因转移效率。结果：ＩＬ－１α／ＩＬ－３／ＳＣＦ联合应用能最有效地提高小鼠ＣＦＵ－ＧＭ基因转移效率，使转移效率从（６．０４±１．３４）％提高到（４３．６±５．９４）％；ＳＣＦ单独应用能最有效地促进Ｋ５６２细胞基因转移，使其转移效率从（１９．０４±１．５８）％提高到（５４．４６±２．１３）％。结论：ＩＬ－１α／ＩＬ－３／ＳＣＦ联合应用可提高造血干、祖细胞基因转移效率，ＳＣＦ可用于急性髓性白血病患者自体骨髓移植时基因标志的临床研究。

异基因外周血造血干细胞移植41例临床分析

为分析异基因外周血造血干细胞移植 (allo PBSCT)治疗恶性血液病的效果和并发症的防治 ,用allo PBSCT治疗恶性血液病4 1例 ,急性移植物抗宿主病 (GVHD)预防采用环孢素A(CsA) +短程氨甲蝶呤 (MTX)、霉酚酸脂 (MMF)联合CsA +短程MTX两种方案。结果显示 ,全部患者均顺利造血重建。HLA完全相合移植急性GVHDⅡ度以上者 8例 (2 1 0 5 % )。慢性GVHD发生率 76 %。急性白血病CR1和慢性髓细胞白血病 慢性期 (CML CP)、HLA完全相合移植 34例 ,复发 3例 (8 82 % ) ;随访 2年以上者存活率 71 4 3% (10 /14 )。表明allo PBSCT急性GVHD发生率并不高于骨髓移植 ,但慢性GVHD发生率明显升高 ;

标志基因在自体造血干细胞移植中的应用

造血干细胞标志基因的转移,不但为竞争性造血重建的实验研究提供了一种很好的方法,而且已用于临床以判明ABMT后重建造血的干细胞来源及复发的肿瘤细胞来源。

健康供者外周血造血干细胞动员的临床研究(英文)

目的 :探讨造血生长因子 (HGFs)对健康供者外周血干细胞 (PBSC)的动员作用 ,并比较粒细胞集落刺激因子 (G- CSF)单用及 G- CSF联合粒 -巨噬细胞集落刺激因子 (GM- CSF)的动员效果。 方法 :5 2例健康供者分成 G- CSF单用组 (34例 )及与GM- CSF合用组 (18例 ) ,分别采用 G- CSF(5 μg· kg- 1· d- 1 )及 G- CSF(3μg· kg- 1· d- 1 ) +GM- CSF(2 μg· kg- 1· d- 1 ) ,连续皮下注射 5～ 6 d动员 ,采集 PBSC。动员前后动态检测外周血及采集物 MNC、CD34 +细胞、CFU- GM计数。 5 2例血液病患者接受上述供体动员之 PBSC并行异基因 PBSC移植 (Allo- PBSCT)。 结果 :动员后 CD34 +细胞及 CFU- GM分别较动员前增加10 .83及 8.7倍 ,并在第 5～ 6天达到高峰 ;G- CSF单用及与 GM- CSF合用均可有效动员 CD34 +细胞和 CFU- GM,但合用较单用更有效 (P<0 .0 5 ) ;所有患者接受 Allo- PBSCT后均满意获得造血重建 ;随访观察至今应用 HGFs对健康供者无明显不良反应。 结论 :采用中小剂量 G- CSF单用和与 GM- CSF合用均能安全、有效动员健康供者 PBSC,但以合用更为有效。

自体外周血干细胞移植治疗T细胞淋巴瘤的临床研究

目的:探讨自体外周血干细胞移植(APBSCT)治疗T细胞淋巴瘤的临床疗效和安全性。方法:2000年7月～2008年4月,行APBSCT的T细胞淋巴瘤患者共17例,包括T淋巴母细胞淋巴瘤10例,鼻型NK/T淋巴瘤4例,外周细胞T淋巴瘤2例,间变大细胞淋巴瘤1例。按照AnnArbor标准和IPI分期评分。8例患者的采集物采用CD34+细胞纯化。所有患者均采用CTX+VP-16+TBI预处理方案。结果:(1)所有患者移植后造血功能均顺利重建,中性粒细胞恢复至0.5×109/L为移植后(12.18±2.63)天,血小板恢复至20×109/L为移植后(14.50±4.02)天。(2)中位随访7个月(1～94个月),2年预期的无疾病生存率为62.89%,总生存率为71.87%。(3)随访2年以上未复发的6例患者,均无病存活,中位随访54个月(24～94个月)。(4)死亡均发生在移植后半年内,移植前未缓解的2例患者移植后均死亡,移植前处于复发状态的患者移植后3个月时再次出现复发,带病生存。(5)至随访截止时间,获完全缓解患者行或未行CD34+细胞分选移植的疗效无明显差别。结论:APBSCT对移植前完全缓解和部分缓解的T细胞淋巴瘤患者疗效较好,造血重建顺利,且安全性好,但复发和原发难治的患者疗效相对差,应考虑选择异基因造血干细胞移植治疗。

HIF-1α-PDK1信号系统参与急性单核细胞白血病糖代谢和耐药的机制研究

目的·探讨HIF-1α-PDK1信号系统调控急性单核细胞白血病细胞糖代谢以及耐药的机制。方法·定量聚合酶链式反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测U937细胞、U937/DNR细胞和原代急性单核细胞白血病细胞中丙酮酸脱氢酶激酶1(pyruvate dehydrogenase kinase 1,PDK1)的mRNA水平。采用基因沉默构建siRNA HIF-1α质粒,分别转染作用于U937和U937/DNR细胞24 h;噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖抑制,qPCR检测PDK1 mRNA表达量,蛋白印迹法(Western blotting)检测PDK1和多药耐药基因1(multi-drug resistance gene 1,MDR1)蛋白的表达,流式细胞术检测染料JC-1水平以评估线粒体膜电位变化,血气分析仪测定培养液中乳酸含量。用二氯乙酸盐(dichloroacetate,DCA)和柔红霉素(daunorubicin,DNR)作用于U937/DNR和原代急性单核细胞白血病细胞24 h;MTT比色法检测细胞增殖抑制,Western blotting检测PDK1和MDR1蛋白的表达。结果·PDK1 mRNA在原代急性单核细胞白血病细胞、U937细胞和U937/DNR细胞中均高表达。沉默低氧诱导因子-1α(hypoxiainducible factor-1α,HIF-1α)可显著抑制U937和U937/DNR细胞的增殖活力、PDK1和MDR1蛋白的表达以及乳酸的生成。DCA能够逆转U937/DNR细胞和已复发的原代急性单核细胞白血病细胞对DNR的耐药。结论·HIF-1α-PDK1信号系统可调控细胞糖代谢并参与急性单核细胞白血病的耐药。

移植后早期免疫重建与急性移植物抗宿主病关系的研究

为了分析异基因造血干细胞移植 (allo HSCT)后的早期淋巴细胞重建与急性移植物抗宿主病 (aGVHD)之间的关系 ,本研究对 2 6例恶性血液病患者行allo HSCT ,移植后 2个月内采用流式细胞术动态检测淋巴细胞亚群CD3+ ,CD4 + ,CD8+ ,CD2 5 + ,CD6 9+ 细胞的变化。所有患者均获得造血重建 ,9例发生Ⅰ度GVHD ,5例发生Ⅱ -Ⅳ度GVHD。CD2 5 + 细胞在aGVHD发生组于移植后第 2周上升 ,第 3周达峰值 ,早于aGVHD的症状出现 ,与疾病的严重程度显著相关 ,随症状的缓解而下降。实验结果提示 :分析患者移植后的早期免疫重建可以预测aGVHD的发生 ,CD2 5 + 细胞在aGVHD发生之前明显上升 ,是预测aGVHD的指标。

细胞因子在急性移植物抗宿主病发病机制中的作用

目的 探讨细胞因子白介素 (IL) 2、IL 4、IL 10、干扰素 γ(IFN γ)在急性移植物抗宿主病(aGVHD)发病中的作用。方法 用RT PCR检测 2 1例行异基因造血干细胞移植 (allo HSCT)后患者IL 2、IL 4、IL 10、IFN γ的基因表达。结果 所有患者均获得造血重建 ,9例发生Ⅰ度移植物抗宿主病 (GVHD) ,3例发生Ⅲ～Ⅳ度GVHD。IL 2、IFN γ在aGVHD发生组表达阳性率明显高于未发生aGVHD组 (P <0 .0 1) ,而IL 10在未发生aGVHD组明显上升 (P <0 .0 1) ,IL 4的表达在两组间无显著差异。结论 细胞因子IL 2、IFN γ在人类aGVHD的发病中起重要的正向调节作用 ,IL

恶性血液病并发肺部霉菌感染14例临床分析

为了探讨恶性血液病并发肺部霉菌感染的发病原因及其诊断和治疗,对14例患者的临床症状、体征、体温、血常规检查、痰病原学结果、影像学诊断、抗生素及激素使用情况进行了收集和分析。结果表明:14例中有呼吸道症状者11例,7例痰粘稠不易咳出,11例胸片检查可见大小不等的点片状阴影;10例白色念珠菌感染(71.4%),2例曲霉菌感染;8例中性粒细胞<0.5×109/L(57.1%),3例<1.0×109/L(21.4%);对这些霉菌感染病例均用广谱抗生素联合抗感染治疗7天以上;对曲霉菌感染者给予二性霉素B,余12例用氟康唑治疗2周以上;治疗1周内症状改善并消失者6例(42.9%),治疗2周内症状改善并消失者5例(35.7%),3例死亡。结论:恶性血液病合并肺部霉菌感染原因与强烈化疗、中性粒细胞减少、大量广谱抗生素的应用有关,早期诊断较困难,对此临床上应予以重视,及时发现,及时治疗。

含氟达拉滨的联合化疗方案治疗慢性淋巴细胞白血病/小淋巴细胞性淋巴瘤

目的:评价以氟达拉滨为主的化疗方案治疗慢性淋巴细胞白血病/小淋巴细胞淋巴瘤(CLI/SLL)的疗效和不良反应。方法:采用氟达拉滨为主的化疗方案,FC方案:氟达拉滨+环磷酰胺;FMD方案:氟达拉滨+米托蒽醌+地塞米松;FMC方案:氟达拉滨+米托蒽醌+环磷酰胺,共治疗18例CLL/SLL患者,其中初发9例,复发、难治9例。结果:18例患者平均完成4.2个周期,完全缓解(CR)率61.1%,部分缓解(PR)率22.2%,总的有效(OR)率83.3%。初发组CR率66.7%,PR率33.3%,OR率100%;复发、难治组CR率55.6%,PR率11.1%,OR率66.7%,两组CR、OR率无显著性差异(P>0.05)。FC方案和FMD方案治疗组CR、OR率无显著性差异(P>0.05)。主要不良反应为骨髓抑制和免疫功能抑制,27.8%的患者出现Ⅲ～Ⅳ级粒细胞减少,22.2%的患者出现Ⅲ～Ⅳ级血小板减少。5例患者出现感染、发热,其中1例死亡。其它毒性包括恶心、呕吐,轻度肝肾功能损害,自身免疫性溶血性贫血。中位随访时间24月(1～40月),2年生存率88.9%,2年PFS率81.8%。初发组2年生存率100%,2年PFS率100%;难治组2年生存率83.3%,2年PFS率66.7%,两组无显著性差异(P>0.05)。结论:氟达拉滨为主的联合化疗方案对CIL/SLL疗效好,同时患者对其耐受性亦较佳。

异基因外周血造血干细胞移植治疗重型再生障碍性贫血

目的评价异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)治疗重型再生障碍性贫血(SAA)的疗效。方法10例接受allo-PBSCT治疗的SAA患者中,8例为血缘供体移植,2例为无关供体移植。男、女各5例,年龄18～42岁,中位年龄为27岁。3例患者为急性SAA(SAA-Ⅰ型),其中2例患者移植前合并重型感染且未能完全控制;7例患者为慢性SAA(SAA-Ⅱ型),患者移植前大多经包括环孢素(CsA)在内的多种治疗无效。诊断至移植的时间为1～240个月,中位时间为12个月。采用兔抗人T淋巴细胞球蛋白(ATG)+环磷酰胺(CTX)方案:移植前-5～-1d静脉缓慢滴注ATG4～5μg·kg-1.d-1,移植前-4d～-3d静脉滴注CTX60mg·kg-1.d-1;采用CsA+短程甲氨蝶呤(MTX)方案预防移植物抗宿主病(GVHD)。结果患者移植后均获造血重建,中性粒细胞绝对值≥0.5×109/L和血小板计数≥20×109/L的中位时间分别为移植后+13.2d(+11～+15d)和+14.3d(+13～+15d)。8例患者为完全供体型植入;2例为嵌合状态,其中1例亲缘供体患者予冻存外周血干细胞输注1次即转为完全供体型,另1例无关供体患者移植后3个月出现外周血白细胞、红细胞、血小板计数逐渐下降,DNA短串联重复序列多态性分析(STR-PCR)显示移植排斥,再次行同一供体移植后逐渐恢复自身造血。1例患者出现Ⅱ度急性GVHD,2例出现局限性慢性GVHD。3例患者移植后出现纯红细胞再生障碍,经血浆置换后红系恢复正常造血。随访3～92个月,中位数为33个月,10例SAA患者均存活。结论采用以免疫抑制为主的ATG+CTX的减低剂量预处理方案进行allo-PBSCT能够有效治疗SAA,移植相关并发症少,值得临床推广应用。

异基因外周血干细胞移植治疗急性白血病的疗效及卫生经济学分析

目的 :评估异基因外周血干细胞移植治疗急性白血病的疗效与卫生经济效率。 方法 :回顾性分析 2 0例缓解期急性白血病患者行人类白细胞抗原 (HL A )相合外周血干细胞移植 (移植组 )病例资料 ,另对应每例患者各选取 2例常规化疗病例(化疗组 )作对照 ,比较两组病例的预后及经济费用。 结果 :移植组 3年生存率、复发率分别为 (6 5 .3± 12 .4) %和(15 .6± 7.1) %,化疗组分别为 (2 9.5± 8.2 ) %和 (6 7.2± 5 .8) %,统计学分析有显著性差异 (P<0 .0 1) ,而比较两组病例的 3年治疗费用无明显差异 (P>0 .0 5 ) ;计算成本效果比 ,异基因外周血干细胞移植挽回 1例死亡所耗费成本为 48.7万元 ,明显低于常规化疗的 6 7.4万元。 结论 :异基因外周血干细胞移植疗效好 ,经济效率高。

异基因外周血造血干细胞移植治疗白血病(附 50例临床报告)(英文)

目的 :评价异基因外周血造血干细胞移植 (Allo- PBSCT)治疗白血病的疗效 ,同时比较 ABO血型相合与不相合移植以及两种移植物抗宿主病 (GVHD)预防方案。方法 :用 Allo- PBSCT治疗白血病 5 0例 (急性 2 9例 ,慢性 2 1例 ) ,其中 ABO血型相合 30例 ,不相合 2 0例。 PBSC动员采用 G- CSF或 G- CSF+GM- CSF皮下注射 5 d;预处理采用 CTX+VP16 +TBI或CTX+TBI方案 ;GVHD预防采用常规环孢素 A(Cs A) +短程甲氨蝶呤 (MTX)和霉酚酸酯 (MMF)联合 Cs A +短程 MTX两种方案。 结果 :本组患者经 Allo- PBSCT均获得造血功能重建。 ABO血型相合移植与不相合移植比较 ,后者血红蛋白恢复较慢 (P<0 .0 5 ) ,中性粒细胞和血小板恢复两者无差异 (P>0 .0 5 )。本组发生 a GVHD 2 0例 (4 0 %) ,其中 度以上 9例 (18%)。生存 6个月以上者发生 c GVHD 2 2例 (6 6 .6 7%) ,其中广泛性 11例 (33.33%)。 MMF联合 Cs A和 MTX方案与常规 Cs A联合MTX方案相比 ,前者可减少 a GVHD发生率 (P<0 .0 5 ) ,虽两者 c GVHD总发生率无差异 (P>0 .0 5 ) ,但前者广泛性 c GVHD明显减少 (P<0 .0 5 ) ;本组患者中位随访 30个月存活 33例 ,移植后 3年无病生存率为 6 6 %;GVHD合并感染和间质性肺炎是主要死因。结论 :ABO血型不合不影响移植 。