辣椒Rop cDNA分离及其序列分析

从cDNA文库中分离获得1个cDNA阳性克隆,测序和序列分析结果表明,其长度为1 141 bp,含有1个长度为197 aa的开放读码框架,与烟草等植物的Rop有较高的同源性,该cDNA是从UV处理的辣椒cDNA文库中分离获得的,可能与辣椒适应UV辐射胁迫有关。该cDNA的分离为进一步研究其在辣椒适应UV辐射防御反应的分子机理研究奠定了重要的基础。

玉米种植制度的高产栽培技术体系 Ⅰ.晚玉米高产栽培技术措施的优化方案

玉米产量的高低受种植时间、密度和施 Ｐ量、施 Ｎ 量及其施肥方法的影响．在产量大于５．２５０ ｔ·ｈｍ － ２时，５ 个因素的最佳取值为播种时间在 ８ 月 ２ 日～５ 日，密度为７２ ４２０～７６ ０９５ 株·ｈｍ － ２，施 Ｐ 量为 ８２．３３～１０８．１５ ｋｇ·ｈｍ － ２，施 Ｎ 量为１２８．８５～１３６．１０ ｋｇ·ｈｍ － ２，施肥方法以平稳法（前后施肥比例５０∶５０）为佳．

多效唑在金花1012上的应用

研究了多效唑在金花1012上的应用效果及喷施方法，并探讨金花1012高产栽培的主要技术措施。实验结果表明，多效唑能克服其种性不足，抑制后期旺长，增加茎粗，增强抗倒伏能力，增产荚果14％-21％，在水田地施用效果较旱地更明显，是金花1012高产栽培的一个有效措施。

辣椒质膜水通道蛋白CaPIP1基因全长cDNA的分离及序列分析

通过对辣椒均一化cDNA文库的筛选分离获得了一个与烟草水通道蛋白NtAQP1高度同源的aquaporin基因全长cDNA,命名为CaPIP1。序列分析结果表明该cDNA包含有858 bp的完整开放阅读框,编码286个氨基酸,具有6个跨膜区,2个NPA模序以及植物质膜水通道蛋白高度保守的序列。氨基酸同源性及进化分析同样表明CaPIP1为辣椒水通道蛋白家族新成员。

紫外线照射辣椒叶片cDNA文库构建及部分防御信号基因cDNA的检测

对抗病的朝天椒地方品种,以紫外线(UV)处理叶片并提取叶片总RNA,采用SMARTTMcDNA文库构建试剂盒构建了一个cDNA文库.该文库含有2.6×106个独立的噬菌斑克隆,扩增后滴度达到1.5×109pfu.μL-1,随机挑取的噬菌斑PCR检测发现重组率达90.0%.在搜索、拼接与植物WRKY、bZIP、AP2和E2等重要调节基因同源的辣椒表达序列标签(ESTs),获得重叠群的基础上,分别设计上述基因ESTs重叠群特异性引物,以cDNA文库为模板进行PCR扩增.结果表明,部分上述基因cDNA存在于文库中.因此,本研究所构建的文库可用于进一步分离响应UV的重要调节基因cDNA的分离.

高温高湿下辣椒抗病分子机制及其遗传改良技术与应用

高温高湿环境下病害严重发生是导致我国南方辣椒露地栽培和设施栽培减产的重要障碍因素。该文对辣椒应答高温高湿胁迫和病原菌侵染的分子机制进行研究,发现了以CaWRKY40为中心的转录调控网络在辣椒耐高温、抗病及高温高湿下抗病表现中起重要的调节作用。在此基础上建立了病圃与高温高湿处理相结合的生态压力选择法与CaWRKY40转录表达量相结合的资源筛选体系,对通过有性杂交、诱变等创制的中间材料实施在高温高湿环境下的抗病资源筛选与新品种选育,选育出的辣椒新品种均表现出在高温高湿环境下较高的抗病水平,适合在我国南方地区进行露地栽培或设施栽培。

钙对花生植株生长和叶片活性氧防御系统的影响

水培条件下设置不同钙离子施用量,研究了施钙对花生泉花10号生长发育和叶片活性氧防御系统的影响。结果表明,高钙处理的植株高大,茎枝粗壮,叶片厚且大,果量多,果大饱满,叶片叶绿素含量、过氧化氢酶·产生速率、电导率值较低。低钙对(CAT)活性、过氧化物酶(POD)活性较高,脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量、O2花生生长发育的影响与植株体内活性氧防御系统受到破坏密切相关。

花生幼胚RNA提取方法研究

花生(ArachishypogaeaL.)幼胚体积很小,不易剥取且富含多糖、酚类等化合物,因此以花生幼胚为材料提取RNA时会遇到很大困难.采用改进的Trizol法和异硫氰酸胍一步法成功提取出了高质量的花生幼胚总RNA,后续实验证明具有良好的逆转录活性.介绍了花生幼胚快速剥取的方法.

以农杆菌为介导花生遗传转化研究

应用花生丛生芽再生体系 ,以农杆菌为介导将含有几丁质酶和 β - 1,3-葡聚糖酶抗病基因的植物双价表达载体 pCGⅡ转入花生品种泉花 10号和金花 10 12 ,获得转基因植株 ,并已通过PCR和Southernblot鉴定。研究表明 ,侵染时间以 5～ 15min的效果较好 ,侵染时间过长不利于提高转化率 ;0～ 1d预培养对基因转化有利 ,预培养2d可使转化率下降。

南方沙质旱地花生空秕的田间表现及其防治措施

花生是以种子为经济指标的作物。土壤钙不足易使花生空秕或种子发育受阻从而导致产量降低。以福建平潭典型缺钙地的大田种植 (设本底与施钙处理 )为实验方案 ,对缺、足钙水平下花生生长基本指标 ,田间管理与栽培措施进行实验与探讨 ,总结了南方沙质旱地花生空秕的原因 ,提出了空秕防治的对策。

基于形态及SRAP标记的辣椒资源遗传多样性及亲缘关系比较

采用形态学标记与序列相关扩增多态性(SRAP)分子标记相结合的手段,分别对49和72份辣椒资源的遗传多样性及亲缘关系进行了分析.结果表明:(1)根据果实性状及叶色等形态学标记聚类分析,在遗传相似系数为0.69处将辣椒分为4个组群,即朝天椒、圆锥椒、棱柱形椒和樱桃形椒;(2)基于辣椒资源的SRAP分子标记分析,发现72份辣椒材料间的遗传相似系数为0.56-0.91,在相似系数为0.737处被分为8个组群,形态学标记与SRAP分子标记结果有较大的出入.可见,SRAP作为分子标记的结果不受环境影响,所揭示的种质资源遗传多样性更为丰富,在辣椒等作物遗传多样性和亲缘关系的研究中更具应用价值.

辣椒种质资源抗青枯病的鉴定与评价

采用青枯菌FJC100301菌株对田间辣椒(Capsicum annuum)抗病品种76a和感病品种TW-1分别作了不同温度、不同接种量和不同接种方法的接种试验。结果表明,辣椒青枯病抗性的室内鉴定以接种温度28℃、浸根20 min和3×108cfu/mL接种浓度为宜;辣椒种质田间抗青枯病接种鉴定宜选择5月上旬进行,浸根20 min,接种浓度为3×108cfu/mL。采用田间抗性接种鉴定的方法,用青枯菌FJC100301菌株对106份辣椒材料进行了抗性鉴定。田间接种后每隔10 d统计病情指数,划分辣椒抗青枯病鉴定分级标准,获得了高抗材料14份、抗病材料8份、中抗材料23份、中感材料23份、感病材料20份、高感材料18份;采用离体叶片接种法对田间筛选得到的高抗和高感纯度较高品种进行抗性分析,结果与田间鉴定一致。

福建花生种质资源筛选及灰色关联度分析

为探索福建省近年引进花生种质资源的利用价值,以汕油71为对照,间比法设计,对其中142份种质资源的产量性状、植物学性状、抗逆性等进行较全面的观察测定。结果表明:有27份种质的产量达到3 750.2kg.hm-2,其中高于对照汕油71的有28份,产量高出对照10%的有10份,有27份种质单株结果数达到18个,有11份种质的单株生产力达到20 g,有28份种质的百果重高于200 g,有42份种质的百仁重高于80 g,有35份种质的出仁率高于75%。小区产量高于900 g的种质普遍具有单株结果数多,百果重、出仁率高,抗旱性中抗的特点。在综合比较分析的基础上,选出15份有希望的材料进行灰色关联分析,结果经花20号、选33、梧油6号与标准品种的灰色关联度最大,可供作杂交亲本和进一步试种鉴定。

水稻Pi-ta启动子的克隆及其功能分析

本研究分离了水稻品种日本晴Pi-ta基因的启动子,并构建其GUS融合表达载体,通过农杆菌介导的遗传转化获得了其转基因植株。以获得的转基因水稻为材料进行GUS组织染色和GUS(β-葡萄糖苷酸酶)酶活性分析,结果表明,GUS基因在根、茎和叶中都有表达,转基因植株在接种稻瘟病菌后GUS活性显著增加。用抗病信号分子水杨酸(SA)和茉莉酸甲酯(MeJA)处理后,Pi-ta启动子驱动的GUS活性也显著增加。以上结果表明,Pi-ta启动子是一个对稻瘟病菌应答的诱导型启动子,同时Pi-ta启动子还受到SA和MeJA的诱导表达。

水稻OsERF96应答病原菌的表达及启动子的功能分析

前人研究发现水稻Os ERF96(ethylene responsive factor 96)可应答白叶枯病病原菌的侵染,但其功能及表达调控机制仍不清楚,本研究进一步分析了该基因在水稻应答稻瘟病病原菌侵染及外源激素(SA和Me JA)处理下的转录情况,并分析了其启动子的诱导表达活性。结果表明:相对于对照组,Os ERF96在接种稻瘟病后1~4 d表达量显著上调,以第1天最高,此后逐渐下降,外源SA处理后Os ERF96表达量持续上调;利用Os ERF96启动子驱动GUS的转基因株系分析了Os ERF96启动子的诱导活性,结果表明GUS在根、茎和叶均有不同程度组成型表达,稻瘟病菌接种后4~7 d GUS活性持续升高。GUS活性定量表明,稻瘟病菌和SA处理条件下均出现了升高。综上所述,Os ERF96可应答白叶枯病或稻瘟病病原菌的浸染,其启动子是一个对病原菌侵染产生应答的诱导性启动子。

福建春播覆膜花生生长发育特性及栽培技术

用白皮 1号和泉花 10号分别在红黄壤旱地的中低肥力和中等肥力水平土壤进行覆膜栽培试验 ,并对其整个生长发育进程进行观察和取样分析 ,最后进行考种和测产。试验表明 ,花生覆膜栽培出苗早、生长快、出苗率高 ,明显促进前期茎枝和叶片生长 ,使分枝数增多 ,叶面积系数和净同化率提高 ,提早开花 ,增加开花量 ,并使花生的整个生育期提前。覆膜花生果多果重 ,增产显著 (达 2 4 .1%～ 34.1% ) ,表明覆膜栽培适合南方普及推广 。

拟南芥AtLURP1基因启动子在转基因烟草和水稻中的功能分析

克隆拟南芥LURP1基因上游1 515 bp的启动子调控序列并命名为AtLURP1p,将其与GUS报告基因融合,构建成植物表达载体,分别遗传转化烟草和水稻,获得LURP1p::GUS的烟草和水稻转基因植株及其相应的T2代株系,分别研究LURP1p对水稻稻瘟病、辣椒青枯病侵染及SA、MeJA、ABA等几种重要的植物激素信号分子处理的应答。结果表明:(1)转基因烟草和水稻在几种激素,包括SA、MeJA、ABA的诱导处理下,GUS基因均可以被诱导表达;(2)转基因烟草在细菌性病菌青枯病的侵染下,GUS可被诱导表达并表现出持续表达的趋势,转基因水稻在稻瘟病的侵染下,其GUS基因也被诱导表达,并表现出后期持续上调的趋势。这些研究结果表明,拟南芥LURP1的应答逆境信号通路也存在于烟草和水稻等植物,该启动子可用作诱导型启动子广泛地应用于不同植物抗病基因工程。

疫霉侵染的辣椒cDNA文库的构建及非特异性脂转移蛋白cDNA的筛选

建立了辣椒疫霉侵染的辣椒幼苗cDNA文库,该原始文库含有1.5×106个独立克隆,插入片段约为0.5-2 kb.采用基于PCR技术的96孔文库筛选方法,从该cDNA文库中筛选出了1个应答辣椒疫霉侵染的候选基因的全长cDNA.经生物信息学分析,推测这个候选基因为非特异性脂转移蛋白(non-specific lipid-transfer protein,nsLTP)基因.

水稻Xa1基因启动子的克隆及功能分析

Xa1是一个能对日本白叶枯病优势小种(小种1号)产生专化性抗性的R基因,虽已有该基因克隆、表达和功能方面的研究,但对其表达调控分子机制还不很清楚。本研究利用Xa1启动子与GUS报告基因的转基因T1株系,研究了Xa1启动子的时空表达及对不同外源激素的应答特征。结果表明,Xa1启动子驱动的GUS基因在水稻根中的表达量明显高于茎和叶,且在根部的中柱区GUS的表达量明显高于周围组织;在外源MeJA作用下GUS的表达显著增强,在SA和ABA处理下也有一定程度的增强,这些结果暗示Xa1的抗病作用与其在根系中柱的组织特异性表达存在一定的相关性,MeJA对Xa1启动子的活性起重要的调控作用。

福建杂交玉米单作栽培技术研究

在单因素与多因素正交试验的基础上 ,采用二次回归正交旋转组合设计 ,对福建杂交玉米单作栽培的 4项主要农艺措施进行田间试验。结果表明 ,播种期对杂交玉米产量影响最大 ,呈负向线性关系 ,种植密度与播种期、施氮量、追肥方法之间存在着显著互作效应。福州地区每公顷 52 50kg以上的优化栽培组合方案是 :7月 2 5日至 8月 5日间适时早播 ,每公顷保苗基本苗750 0 0～ 82 50 0株 ,施氮素 150～ 180kg ,基肥 :拔节肥 :穗肥为 3∶3∶4。