无乳链球菌致病性研究进展

无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)是一种分布广泛的人兽共患性致病菌,通过形成生物膜可在奶牛乳腺中黏附、定植并长期存活,同时增强对宿主免疫防御的抵抗,引起奶牛乳腺感染而发生亚临床型乳腺炎,是全球范围内引起奶牛乳腺炎的最常见病原体之一,给奶牛养殖业和奶业造成巨大的经济损失。此外,其还可感染骆驼与罗非鱼等多种动物,造成严重的动物福利恶化,且存在人与动物间接传播的可能。无乳链球菌是一种革兰阳性机会致病菌,可在健康成年人的胃肠道及泌尿生殖道中无症状定植,感染新生儿可导致危及生命的败血症及脑膜炎的发生,并常伴有严重的神经系统后遗症。近年来,成人无乳链球菌感染的发病率呈上升趋势,尤其是对孕妇、老年人及免疫力低下的人群具有更高的易感率,可引起皮肤和软组织感染以及更为严重的败血症、脑膜炎和心内膜炎等疾病的发生。尽管使用抗生素治疗可部分缓解症状,但耐药菌株的出现和传播使得抗生素的治疗效果逐步下降,对无乳链球菌感染的控制愈发困难。笔者就无乳链球菌对多种动物及不同人群的致病性进行综述,以期为无乳链球菌的综合防控提供参考。

新农科视域下高等农业院校生物类人才培养融入思政元素的探索

新农科建设是高等农业院校提升核心竞争力和服务乡村振兴战略的客观要求,培养一批既具备涉农专业知识又有“三农”意识的人才是新农科建设的重要目标。但目前高等农业院校的大学生对服务“三农”缺乏认同感,需要将思政元素融入人才培养过程中,激发大学生投身乡村振兴的热情。本文以生物类专业人才为研究对象,探讨了思政元素融入人才培养的模式,以此进一步完善新农科视域下高等农业院校的人才培养体系。

大肠杆菌ABC超家族转运体YadGH药物外排作用及其转运药物的验证

大肠杆菌ABC转运体(ABC transporter)能够介导大肠杆菌耐药性,但有关大肠杆菌ABC转运体YadGH介导的耐药性以及转运何种药物尚未见报道。为探究YadGH转运体的外排功能,首先对YadGH进行生物信息学分析,然后采用Red重组技术构建缺失yadG基因的E.coli K-12菌株,并检测多种抗生素对基因缺失菌株的最低抑菌浓度;同时,对表达纯化的YadG蛋白进行ATP酶活性测定。结果显示,yadG基因缺失菌株对于大环内酯类抗生素罗红霉素、泰乐菌素、红霉素的外排转运能力下降,且YadG蛋白具有ATP酶活性。综上,YadGH是一种大环内酯类药物的ABC转运体。

奶牛乳房炎主要病原菌GapC蛋白生物信息学分析及抗原表位预测

奶牛乳腺炎是主要由病原菌感染引起的奶牛常见疾病,新型疫苗研发是防控奶牛乳腺炎的重要内容之一。引起奶牛乳腺炎的主要病原菌为链球菌和葡萄球菌,包括无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌、金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌,它们都存在甘油醛-3-磷酸脱氢酶C(GapC),且均能诱导机体产生良好的抗感染免疫保护作用。但对链球菌和葡萄球菌GapC的交叉免疫原性分析和研究缺乏报道。研究从GenBank获取链球菌和葡萄球菌GapC基因序列,利用生物信息学软件对理化性质、同源性、T细胞和B细胞表位等进行分析。结果显示,这些病原菌GapC均由336个氨基酸组成的亲水性蛋白,且无规则卷曲占比较高,表明具有良好的抗原性;三种链球菌与两种葡萄球菌之间GapC的氨基酸序列同源性67.8%~69.9%,存在4个共同线性B细胞表位、9个共同CD4~+T细胞表位和9个共同CD8~+T细胞表位,表明有一定的交叉免疫原性,为进一步实验研究GapC交叉免疫原性提供重要参考。

热电公司设备故障诊断与预测性维护技术研究

近年来,随着热电公司对于设备稳定性及设备维护管理标准的不断提升,预测性维护能力也得到显著增强。面对潜力巨大的数百亿元市场,众多生产公司、设备管理软件生产商及预测性维护服务供应商纷纷布局设备维护的全流程。为进一步提升设备管理的智能化与效率,引入物联网技术,实现对设备故障的精准检测、快速诊断及预防性维护,有助于实时监控设备状态、实现远程故障诊断,更可推动维护策略由传统的计划性向基于设备健康状态的预测性转变。通过这种转变,将显著提高生产安全稳定性,优化设备维护策略的制定与实施,降低维护成本,并缩短设备停机时间,为热电公司的持续发展奠定基础。

基于mRNA-seq数据筛选Mn2+调控小鼠巨噬细胞的差异表达基因

目的对Mn^(2+)调控的小鼠巨噬细胞mRNA进行测序和生物信息学分析,筛选出差异表达的基因并分析其生物学功能,探究Mn^(2+)对小鼠巨噬细胞的调控作用。方法采用MnCl2和NaCl分别处理小鼠腹腔巨噬细胞24 h,利用m RNA-seq方法筛选出Mn^(2+)调控巨噬细胞的差异表达基因,对差异表达基因进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,并采用qPCR对关键的差异表达基因进行验证。结果通过整合数据库信息和分析获得1637个差异表达基因,包括表达上调的基因912个、表达下调的基因725个,GO富集分析表明这些差异表达基因具有免疫吞噬、细胞增殖和分化、转录因子调控等生物活性,KEGG通路主要富集在PI3K-Akt、NF-κB等信号通路。其中与免疫相关且差异最显著的10个基因为免疫球蛋白G Fc段受体Ⅰ(Fcgr1)、含不育α基序结构域蛋白11(Samd11)、活性调节的细胞骨架相关蛋白(Arc)、G蛋白偶联受体35(Gpr35)、富含脯氨酸的小蛋白2H(Sprr2h)、Wnt家族成员4(Wnt4)、整合膜蛋白2A(Itm^(2)a)、无调性bHLH转录因子8(Atoh8)、泛素结合酶E2C(Ube2c)及富含脯氨酸的小蛋白2B(Sprr2b),qPCR验证结果与mRNA测序分析趋势一致。结论通过mRNA-seq数据筛选Mn^(2+)调控小鼠巨噬细胞的差异表达基因及GO和KEGG富集分析结果表明Mn^(2+)对巨噬细胞具有免疫调节作用。

牛乳铁素优势肽Lfcin B_(1-10)的生物信息学分析

牛乳铁素(Bovine lactoferricin,Lfcin B)是牛乳铁蛋白经胰酶消化后释放出的17位至41位氨基酸残基构成的短肽,具有广谱抗菌、抗病毒、抗肿瘤和抗寄生虫等生物活性。为了深入开发和利用Lfcin B,进一步去除Lfcin B的部分C-末端氨基酸残基,形成了由10个氨基酸残基构成的短肽,称为Lfcin B_(1-10)。Lfcin B1-10较好地保留了Lfcin B的生物活性,但有关Lfcin B_(1-10)的理化性质、结构、跨膜区等是否改变尚不清楚。因此,利用生物信息学方法对Lfcin B_(1-10)的氨基酸的理化性质、二级结构、跨膜区、信号肽及酶切位点等特征进行预测分析。结果显示,Lfcin B_(1-10)为阳离子型抗菌肽,理论等电点为11.71,热稳定性较差;分子为亲水性寡肽,二级结构仅有无规则卷曲,无跨膜区和信号肽,可被机体内多种酶降解,具有良好安全性。研究不仅为深入认识其构效关系、抗菌机制提供依据,同时为Lfcin B1-10的实际应用提供参考。

用大肠杆菌K_(99)和F_(41)菌毛抗原检测牛血清抗体的琼脂扩散试验的研究

用含２ｍｏｌ／Ｌ尿素的磷酸盐缓冲液以热处理方法提取的Ｋ９９和Ｆ４１菌毛作为抗原，对琼脂扩散试验方法进行研究。结果表明本试验方法简便，特异性强，敏感性高，可用于血清抗体检测；所制备的抗原稳定、重复性好。

兔大肠杆菌性腹泻的诊断及防治

兔大肠杆菌性腹泻的诊断及防治崔玉东侯喜林赵淑兰朱战波朴范泽（黑龙江八一农垦大学动物科技学院，密山１５８３０８）１９９６年３月中旬，黑龙江省虎林县某种兔场长毛兔群发生了一起以水样或胶冻样下痢为特征的急性致死性疾病，经过系统地临床和实验室诊断，确认本病为...

新城疫病毒Ⅰ系毒株通过Caspase途径诱导鸡胚成纤维细胞凋亡

应用不同Caspases抑制剂研究了新城疫病毒(NDV)Ⅰ系毒株诱导鸡胚成纤维细胞(CEF)凋亡的途径。结果,用20μmol/L的Z-VAD.fmk、Z-IETD.fmk和Z-LEHD.fmk分别处理CEF后,均能抑制NDVⅠ系毒株诱导的CEF凋亡;而用20μmol/L的Z-DEVD.fmk和Z-AEVD.fmk分别处理CEF,则不能抑制NDVⅠ系毒株诱导的CEF凋亡。由此表明,NDVⅠ系毒株能通过Caspase依赖性途径诱导CEF凋亡,其中Caspase-8和Caspase-9在凋亡中发挥重要作用,而Caspase-3和Caspase-10在凋亡中不发挥作用。

大肠杆菌K99和F41菌毛抗原的不同缓冲液热处理提取方法比较的研究

本试验用Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液（Ｔ）、ＰＢＳ缓冲液（Ｐ）、生理盐水（Ｓ）和２Ｍ尿素ＰＢＳ缓冲液（Ｕ）以热处理的方法提取大肠杆菌Ｋ９９和Ｆ４１菌毛抗原，并用硫酸铵盐析纯化Ｋ９９以及用１Ｎ醋酸滴定和氯化镁沉淀分别纯化Ｆ４１。根据ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳和蛋白质含量测定结果，四种缓冲液对Ｋ９９的提取量依次是Ｕ＞Ｓ＞Ｐ，而Ｔ检不出Ｋ９９；对Ｆ４１的提取量依次是Ｕ＞Ｔ＞Ｐ＞Ｓ。Ｋ９９纯化后取得了满意的纯化结果，Ｆ４１纯化后大量上样做电泳时仍有微细的污染带出现，而且氯化镁沉淀后造成Ｆ４１严重损失。Ｋ９９和Ｆ４１纯化前后的各个样品经超声波处理、０．５％脱氧胆酸钠处理和未处理的原液与自家因子血清做琼扩试验以及Ｋ９９和Ｆ４１做交叉琼扩试验，均具有良好的特异性，而且以超声波处理后的样品做琼扩试验效果最佳。

胞浆Ca^(2+)和某些激酶对NADPH氧化酶激活和肌动蛋白聚合的作用

为澄清中性粒细胞胞浆 Ca2 +和某些 O-·2 产生相关激酶对 NADPH氧化酶激活和肌动蛋白聚合的作用 ,利用分化为中性粒细胞样的 HL- 60细胞研究了胞浆 Ca2 +螯合剂 BAPTA- AM和激酶抑制剂对这些激酶激活、NADPH氧化酶激活和肌动蛋白聚合的影响 .使用 1 0 μmol/L的 Ca2 +螯合剂 BAPTA- AM去除胞浆 Ca2 +后 ,趋化肽 f MLP诱导的 O-·2 产生明显减少 ,但不影响 f MLP诱导的肌动蛋白聚合 ;8μmol/L的 PKC激酶抑制物 GF1 0 92 0 3x几乎完全抑制 O-·2 产生 ;50 μmol/L的p38激酶抑制物 SB2 0 3580、50 μmol/L的 ERK激酶抑制物 PD0 980 59和 0 .1 μmol/L的 PI3激酶抑制物渥曼青霉素 (Wortmannin)使 f MLP诱导的 O-·2 产生大约减少一半 ;其中 Wortmannin还抑制 f MLP诱导的肌动蛋白聚合 ;f MLP刺激细胞后 ,PI3- K、p38和 ERK激酶迅速激活 ,但这些激酶的激活对 Ca2 +是非必需的 .这些结果说明 Ca2 +依赖途径 (PKC)和 Ca2 +非依赖途径 (PI3- K、p38和ERK)对 NADPH氧化酶激活都起着重要作用 ,而 Ca2 +非依赖途径中的 PI3- K激酶还参与中性粒细胞样 HL- 60细胞的肌动蛋白聚合 .

育成牛大肠杆菌肠毒血症病原分离鉴定

育成牛大肠杆菌肠毒血症病原分离鉴定崔玉东，刘桂清，赵淑兰，朴范泽，侯喜林（黑龙江八一农垦大学牧医系，密山１５８３０８）王龙祥，韩宗烈，曹舜，岑福英（黑龙江省八五一一农场畜牧公司）１９９２年１０月中旬，我们从八五一一农场某养牛单位发生的以小肠严重出血为...

育成牛大肠杆菌肠毒血症的诊断与防治

育成牛大肠杆菌肠毒血症的诊断与防治崔玉东，朴范泽，刘桂清，赵淑兰，侯喜林（黑龙江省八一农垦大学密山１５８３０８）王龙祥，韩宗烈，曹舜，岑福英，冯丽荣，金俊浩（黑龙江省八五一一农场畜牧公司）１９９２年１０月，密山市八五一一农场某养牛单位育成牛群突然发生...

雏鸡绿脓杆菌感染的诊治

雏◇鸡◇绿◇脓◇杆◇菌◇感◇染◇的◇诊◇治崔玉东侯喜林赵淑兰朱战波朴范泽（黑龙江省八一农垦大学动物科技学院，密山１５８３０８绿脓杆菌常引起创伤感染，有时也引起败血症。１９９６年６月黑龙江省虎林地区某蛋鸡场新进一批雏鸡，于２月龄发病死亡，经临诊和实验室...

FMLP刺激HL-60细胞NADPH氧化酶激活的信号转导途径

目的澄清中性粒细胞中 [Ca2 + ]i 及某些激酶在 NADPH氧化酶激活中的作用和 NADPH氧化酶激活的信号转导途径。方法利用中性粒细胞样 HL- 60细胞 ,研究 [Ca2 + ]i 和某些激酶对 f ML P刺激 NADPH氧化酶激活的影响。结果用 10μm ol/ L BAPTA- AM去除 [Ca2 + ]i 后使 O- 2 生成明显减少 ;8μm ol/ L的 PKC抑制物 GF10 92 0 3 x显著地抑制了 O- 2 产生 ;5 0 μmol/ L 的 p3 8抑制物 SB2 0 3 5 80、5 0 μm ol/ L 的 ERK抑制物 PD0 980 5 9和 0 .1μm ol/ L 的 PI3K抑制物 Wortm annin使O- 2 产生受到不同程度抑制 ;PKC、PI3K、p3 8和 ERK激活对 [Ca2 + ]i 升高没有影响 ;[Ca2 + ]i、PKC和 PI3 K对 p3 8激活有一定作用 ,而 ERK和 Akt激活主要受 PI3- K的调控。结论试验说明 [Ca2 + ]i 依赖途径 ( PKC)和 [Ca2 + ]i 非依赖途径 ( PI3K、p3 8和ERK)对

牛大肠杆菌灭活疫苗(K_(99)、F_(41)兼型)的研制与免疫研究

应用分离鉴定的兼有K99、F41菌毛抗原的产ST肠毒素的O142血清型大肠杆菌作菌种,制备出菌毛、全菌体和菌毛与菌体混合等3种灭活疫苗。疫苗物理性状良好,接种怀孕母牛产生良好的免疫反应,接种疫苗14 d后,抗体效价K99 为4.7～6log2, F41 为2.1～5.5 log2;28 d后K99 为6.5～8log2,F41 为2.6～6.5 log2。产犊后8～10 h,对犊牛口服攻毒800亿菌/mL O142大肠杆菌,结果3种疫苗均能使犊牛获得一定保护,保护率分别为89.1%、55.6%和94.6%,对照组为16.3%。菌毛苗和混合苗免疫效果均优于全菌体苗,K99免疫效果优于F41,两次免疫效果优于一次免疫。现地试验取得了良好的免疫效果,证明制备的油乳剂灭活疫苗安全, 免疫原性良好。

在fMLP刺激的HL-60细胞中PI3-K介导的肌动蛋白聚合

趋化肽fMLP能够诱导中性粒细胞粘附、游走和吞噬 .为了澄清这种趋化反应的发生机理 ,将HL 6 0细胞诱导分化为中性粒细胞样细胞 ,然后利用激酶特异性抑制剂研究了在fMLP刺激下细胞内PI3 K、p38和ERK激酶在肌动蛋白聚合中的作用 .结果 0 1μmol/L的PI3 K抑制物Wortmannin抑制fMLP诱导的肌动蛋白聚合 ;而 5 0 μmol/L的 p38激酶抑制物SB2 0 35 80和 5 0 μmol/L的ERK激酶抑制物PD0 980 5 9对fMLP诱导的肌动蛋白聚合没有影响 ,但 p38和ERK在不同程度上受到PI3 K的调节 .这说明PI3 K介导的肌动蛋白聚合信号传导途径不同于PI3 K介导的 p38和ERK激活途径 .

雏鸡新的致病菌——弗尼斯弧菌的分离鉴定

对国内某鸡场５日龄肉仔鸡发生的以肝脏肿大、出血和坏死为特征的传染病病原进行分离和系统鉴定，首次确定该病原菌为弗尼斯弧菌，并证实对雏鸡有明显的致病作用。