过敏性哮喘大鼠针刺血清的抗哮喘作用

目的和方法 研究了过敏性哮喘大鼠经针刺治疗后的血清 (针刺血清 )的抗哮喘作用。结果 过敏性哮喘大鼠经针刺治疗后的血清可明显降低大鼠和肾上腺切除大鼠过敏性哮喘模型的气道阻力与外周血嗜酸粒细胞计数 ,针刺血清注射与针刺治疗的作用之间无明显差别。结论 针刺血清具有与针刺类似的抗哮喘作用。但针刺血清对肺顺应性的影响与针刺治疗存在某些差异。

肾上腺切除大鼠过敏性哮喘模型的制备

目的探讨肾上腺切除ＳＤ大鼠过敏性哮喘模型的制备。方法切除ＳＤ大鼠肾上腺后，腹腔注射卵蛋白致敏，２ｗｋ后静脉内注射卵蛋白激发哮喘发作。结果卵蛋白激发后肾上腺切除大鼠气道阻力明显增加，最大增加时间较普通与假切组明显提前，升高幅度较普通组和假切组分别增加３３．３３％和７７．７８％。肾上腺切除大鼠卵蛋白激发后肺顺应性明显降低，与气道阻力的增加呈显著负相关关系。结论制备的肾上腺切除大鼠过敏性哮喘模型可用于非糖皮质激素类抗哮喘免疫抑制剂的研究，也可用于糖皮质激素抗哮喘作用原理的研究。

凝胶过滤层析对针刺全血清成分的分段分离研究

目的 为进一步分离、鉴定针刺血清中存在的有效成分 ,对针刺全血清进行预初分段分离。方法 采用凝胶过滤层析技术对针刺全血清进行分段分离 ,并将分离的血清经冷冻干燥制成干粉。结果 将针刺全血清分成 >4 5 k D、14 .3k D- 4 5 k D和 <14 .3k D 3个分子量段。结论 有利于进一步确定针刺血清中抗哮喘有效成分的大体所在 。

抗体介导的支气管肺嗜酸粒细胞增多大鼠的气道阻力增加

在建立不伴气道阻力增加的大鼠支气管肺嗜酸粒细胞增多模型的基础上，探索了抗体吸入对其气道阻力变化的影响。结果显示抗大鼠ＳＩｇＡ、ＩｇＡ、ＩｇＧ抗体能在体内显著增加支气管肺嗜酸粒细胞增多大鼠的气道阻力（Ｐ＝０．００００，Ｐ＝０．０３１７，Ｐ＝０．００００），而抗大鼠ＩｇＥ抗体不能在体内增加支气管肺嗜酸粒细胞增多大鼠的气道阻力（Ｐ＝１．００００）。提示抗大鼠ＳＩｇＡ、ＩｇＡ、ＩｇＧ抗体可能在体内介导嗜酸细胞脱颗粒。

不伴肺阻力增加的大鼠支气管肺高嗜酸粒细胞模型的制备

为促进嗜酸粒细胞基础与临床研究的发展，本文提供了一种不伴肺阻力增加的ＳＤ大鼠支气管肺高嗜酸粒细胞模型的制备方法。结果显示：Ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ｇ２００造模组支气管肺灌洗液中嗜酸粒细胞与嗜酸粒细胞占白细胞的百分比较生理盐水对照组明显增加（Ｐ＝０．０１０１和０．００７６），两组之间白细胞数无明显差异（Ｐ＝０．６０３８）。不同剂量乙酰胆碱吸入均可明显增加两组ＳＤ大鼠的肺阻力（Ｐ＝０．０２４３和０．００４３），两组之间肺阻力的增加无明显差异。

涤痰散治疗小儿支气管哮喘的临床观察和实验研究

涤痰散由胆星、建曲、巴豆等组成,治疗58例哮喘患儿,临床总有效率89.7%。用卵蛋白致敏和激发大鼠,造成哮喘模型,测定其气道阻力(R)、肺顺应性(C)、血嗜酸细胞(EC)数。结果:模型组动物较正常对照组 R 显著增大(P<0.01)、C 显著降低(P<0.05)、EC 显著增加(P<0.01)。涤痰散治疗组较模型组 R 显著降低(P<0.01),C 显著升高(P<0.01),EC 显著减少(P<0.01)。提示涤痰散具有抑制血 EC 增多、改善哮喘发作时动物气道狭窄等病理改变的作用。

低血清培养工艺在猪圆环病毒Ⅱ型灭活疫苗生产中的应用

为了减少血清在兽用生物疫苗生产中的使用量,降低兽用生物疫苗的生产成本,减少因血清引起的接种动物过敏反应,提升兽用疫苗产品质量稳定性,试验采用低血清培养PK-15细胞和猪圆环病毒Ⅱ型的方法对猪圆环病毒Ⅱ型灭活疫苗的抗原效价进行了研究。结果表明:低血清培养的PK-15细胞生长更快且收获的抗原效价更高,均能稳定在1×10^(6.50)TCID_(50)/m L以上。说明猪圆环病毒Ⅱ型低血清培养工艺已经比较成熟,可以应用到猪圆环病毒Ⅱ型灭活疫苗的生产中,从而降低疫苗生产成本,提升产品质量稳定性。

不同禽流感病毒含量的新-流二联灭活疫苗免疫SPF鸡后抗体水平的监测

将未浓缩的新城疫抗原分别与未浓缩的、浓缩3倍、浓缩6倍的禽流感抗原混合,并制备成三组鸡新城疫、禽流感(H9N2 HP株)二联灭活疫苗(简称新-流二联灭活疫苗),分别免疫21日龄SPF鸡,每羽0.3 m L,同时设置未免疫的空白对照组,免疫组与对照组均在免疫前及免疫后7、14、21、28、35 d进行采血,检测新城疫和禽流感抗体。结果发现,各免疫组在免后不同日龄的新城疫抗体基本一致,禽流感病毒抗原浓缩倍数越高(即禽流感病毒含量越高)的新-流二联灭活疫苗,免后14、21 d的抗体也越高;从免后21 d开始,各免疫组的禽流感抗体水平差异逐渐减小,免疫后禽流感抗体水平的高低可以反映该疫苗的免疫效果。试验结果表明,该疫苗可以通过浓缩提高抗原病毒含量的方法来提高免后早期抗体水平,取得良好的早期免疫效果。

微载体生物反应器按不同细胞密度培养猪圆环病毒2型的研究

本试验旨在探讨微载体生物反应器使用不同PK15细胞密度培养猪圆环病毒2型的效果,对比不同细胞密度培养出的抗原效价,从而选择最佳细胞密度培养猪圆环病毒2型,提升猪圆环病毒2型抗原效价。在生物反应器细胞上罐时分别按每个微载体20、30、40、50个细胞的细胞密度接种至4台相同的生物反应器罐中进行培养,每罐均按相同的条件培养,在分别培养4 h、24 h、48 h、96 h时取样观察细胞的生长状态并统计细胞密度,当大部分载体细胞脱落70%时收获抗原,并留样检测其抗原效价。结果显示:每个微载体40个细胞的细胞密度上罐培养的效果最好,表现在4 h时细胞贴附微载体较均匀,24 h时90%微载体长满单层细胞,48 h时细胞生长致密,细胞密度增长8倍,72 h时细胞增长7倍,最终收获抗原效价最高达到107.5TCID50/m L。结果表明:每个微载体40个细胞的接种密度上罐,培养效果最好,效价最高。因此,在微载体生物反应器上培养猪圆环病毒2型时,选择合适的细胞密度接种是保证培养高效价病毒的一个重要前提。

番鸭呼肠孤病毒感染诱导细胞自噬的研究

本研究通过透射电镜观察自噬体的形态学结构,蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞自噬相关蛋白LC3II和磷酸化mTOR(p-mTOR)表达量的动态变化趋势,探索番鸭呼肠孤病毒(MDRV)感染对细胞自噬的影响。结果显示,MDRV-YB株感染的DF-1细胞中可见典型的包裹胞浆成分的双层膜结构;MDRV感染番鸭成纤维细胞(MDFs)和DF-1细胞后0~60h内,其LC3II表达量均呈现先升高后降低的趋势,且均在感染后36h达到最大值,其p-mTOR表达量均呈现先降低后回升的趋势,且分别在感染后36h和24h达到最低值;灭活MDRV组细胞未见LC3II表达。结果表明MDRV能够诱导感染的MDFs和DF-1细胞持续较长时间细胞自噬,而灭活的MDRV不能引起细胞自噬。

抗菌肽RSRP与常用抗菌药的体外联合药敏试验

为探讨家兔圆小囊抗菌肽(RSRP)的体外抗菌活性以及与抗菌药之间的协同效应关系,采用琼脂糖弥散试验检测RSRP对8株供试细菌的抗菌活性,然后采用棋盘微量稀释法,选取11种常用抗菌药,分别测定其对临床分离的耐药大肠杆菌的最小抑菌浓度,再采用分级抑制浓度指数来定量检测RSRP与抗菌药之间的抗菌作用关系。结果显示,RSRP对8株供试菌均有不同程度的抗菌活性,分级抑制浓度指数从小于0.3到大于5不等。证实该抗菌肽与不同的抗菌药之间协同、相加、无关和拮抗作用关系均存在,其中与β-内酰胺类药物氨苄西林钠、头孢噻呋钠表现明显的协同作用。

番鸭呼肠孤病毒σNS蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备

为制备番鸭呼肠孤病毒(MDRV)YB株σNS蛋白的多克隆抗体,首先经RT-PCR扩增了σNS基因的完整编码序列,并成功构建了重组表达质粒pET-YB-σNS。将其转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后,SDS-PAGE显示成功高效表达出分子质量约为58ku的融合蛋白。该融合蛋白以包涵体和可溶性蛋白两种形式存在,表达时的最佳诱导时间、IPTG诱导浓度、诱导温度分别为4h、1mmol/L和37℃。通过对包涵体和可溶性蛋白进行尿素洗涤纯化和(或)Ni 2+柱亲和层析纯化,得到了高纯度的重组蛋白。分别对纯化前、后的重组蛋白进行Western-blot分析,结果显示两者均可以与MDRV阳性血清发生特异性反应,表明它们具备良好的反应原性。将纯化后的可溶性σNS蛋白免疫家兔,制备的多克隆抗体ELISA效价达1∶32 000。上述研究结果为后续MDRVσNS蛋白功能研究奠定了基础。

Anti-asthma Effects of Serum Derived from Adrenalectomized Asthma Rats Treated with Acupuncture （Abstract）

Objective:To investigate the effect of serum,""acupuncture serum"", derived from adrenalectomized (ADX)asthma rats which accepted acupuncture treatment, on asthma. Methods: SD rats were randomly divided into ADX + asthma group, asthma group, ADX + asthma + acupuncture grou, asthma+ acupuncture group. ADX+ asthma+ serum group, asthma+ serum group. Dazhui(GV 14),

Study on Serum Segments Separated from the Acupuncture Serum by Gel Filtration （Abstract）

Purpose: To separate the acupuncture serum into three segments according to molecular weights.