兔源肠致病性大肠埃希菌全基因组测序及毒力和耐药基因分析

目的揭示一株从腹泻实验兔中分离到的肠致病性大肠埃希菌ILAREc-01的基因组特征、毒力基因和耐药基因分布情况。方法采用高通量测序法对基因组序列进行测定,采用VFDB、ARDB、CAZy、SWISS-PROT、COG、CARD、KEGG、T3SS等8个数据库对基因组中的基因功能进行预测,并且对ILAREc-01菌株进行了遗传进化分析。结果ILAREc-01基因组中编码5249个基因;CARD数据库分析表明ILAREc-01菌株具有7类耐药机制的59个耐药基因;通过VFDB数据库分析,在ILAREc-01中注释了553个毒力基因,并发现了肠细胞脱落位点毒力岛(LEE);ILAREc-01与FORC028、E2865和110512株具有较高的同源性。结论本研究进行了兔源肠致病性大肠埃希菌ILAREc-01的全基因组测序,完成了毒力基因和耐药基因的注释,并开展了遗传进化分析,为揭示该病原的致病机制和科学防控实验兔大肠埃希菌病提供了数据支撑。

PVG大鼠生化标记基因的测定

目的 对PVG大鼠进行生化标记基因的测定。方法 依据国家标准GB/T 14927.1—2008《实验动物近交系小鼠、大鼠生化标记检测法》测定,随机抽取4只PVG大鼠,取(肺、肾、小肠、睾丸)组织器官进行样品制备,用醋酸纤维薄膜电泳法检测11个生化位点(Hbb、Cs1、Alp1、Akp1、Esl、Es3、Es4、Es6、Es8、Es9和Esl0)。结果 PVG大鼠11个位点的基因型分别是Hbb为b型,Cs1为b型,Alp1为b型,Akp1为a型,Esl为a型,Es3为d型,Es4为b型,Es6为b型,Es8为b型,Es9为a型和Esl0为a型,且均为纯合。结论 PVG大鼠遗传生化标记结果符合近交系特征。

不同途径给药恩诺沙星对豚鼠体质量和血液生理生化指标的影响

目的测定不同途径进行恩诺沙星给药,对豚鼠体质量变化和血液生理生化指标的影响。方法分别测定不同途径进行恩诺沙星给药对豚鼠体质量、血液生理指标和血液生化指标的影响,利用统计学方法分析组间差异。结果高剂量恩诺沙星饮水给药会显著影响豚鼠的饮水量,高剂量恩诺沙星和低剂量恩诺沙星饮水给药都会显著影响豚鼠的体质量增长。在血液生理指标方面,不同给药处理组中的白细胞计数WBC、单核细胞绝对值MON、中性粒细胞绝对值GRAN、平均红细胞血红蛋白浓度MCHC、红细胞分布宽度变异系数RDW-CV、血小板分布宽度PDW等6项指标与对照组相比具有统计学意义(P<0.05)。在血液生化指标方面,与对照组相比,不同给药处理组中的钙Ca、丙氨酸氨基转移酶ALT、碱性磷酸酶ALP、γ-谷氨酰转肽酶γ-GT、三酰甘油TG等5项指标具有统计学意义。结论不同途径恩诺沙星给药对豚鼠多项生物学指标影响的测定,为豚鼠的科学用药提供了基础数据。

三种饮用水对NIH小鼠血液指标的影响

目的 探讨三种饮用水对NIH小鼠血液指标的影响。方法 将54只NIH小鼠随机分为3组,分别饮用高压灭菌水、高压酸化水和无菌水袋水(膜过滤水),在实验30、60和90 d分别取血进行血常规和血生化检测,并取肝组织进行组织病理学检查,探讨三种饮用水对小鼠健康状态的影响。结果 60 d水袋水组白蛋白(ALB)显著高于高压灭菌水组(P<0.05),酸化水组总蛋白(TP)极显著高于高压灭菌水组(P<0.01),其他生化和血常规指标组间无统计学意义(P>0.05),肝组织病理学结果显示各组小鼠肝组织未发现病变,为正常肝组织。结论 三种饮用水对NIH小鼠健康状态无明显影响。

凶险型前置胎盘107例临床分析

目的:探讨凶险型前置胎盘(PPP)发病的危险因素、临床特点及围生期结局。方法:随访并回顾分析2012年3月至2014年3月于江西省妇幼保健院分娩的107例PPP孕妇和非前置胎盘剖宫产史孕妇321例的临床资料。结果:我院的PPP发生率为0.354%。107例PPP孕妇中,中央性前置胎盘占60.7%,部分性前置胎盘占30%,边缘性前置胎盘占9.3%。胎盘植入39例,胎盘植入发生率为0.123%。单因素分析显示,两组孕妇的年龄、孕次、产次、流产史、居住地、剖宫产史、既往剖宫产医院为三级医院、分娩前经历产程比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素分析示,年龄、流产史、产次、剖宫产史为PPP发病的高危因素。居住地为城市、既往行剖宫产的医院为三级医院、前次剖宫产前经历产程可降低PPP发生的风险。PPP易发生胎盘植入、产后出血、增加输血、子宫切除等风险,延长分娩后住院时间。PPP孕妇分娩的围生儿体重、胎龄均低于对照组,有较高的早产率(57.0%)、新生儿窒息率(14.0%),增加了围生儿死亡的风险。结论:高龄、多次流产、多产次、多次剖宫产史是凶险型前置胎盘的独立危险因素,而既往行剖宫产的医院为三级医院、前次剖宫产前经历产程、居住于城市可降低PPP发生的风险。

Wistar大鼠超数排卵及胚胎移植

不同剂量激素对Wistar雌鼠超数排卵 ,并与正常雄鼠交配 ,收集 2 -细胞胚胎进行输卵管移植 ,收集 8-细胞胚胎进行子宫移植 ,结果发现每只Wistar雌鼠间隔 4 8h分别腹腔注射 5 0IU的PMSG与hCG ,Wistar大鼠的超数排卵效果最好 ,平均可获得 2 -细胞胚胎 36 .3± 15 8枚 ,输卵管移植后产仔率为 73 33% ,平均可获得 8-细胞 2 2 6±13 1枚 ,子宫移植产仔率为 75 0 0 %。

C57-ras致癌性转基因小鼠模型的脏器及血液学参数

目的测定自主建立的致癌性转基因动物模型C57-ras小鼠的血液生理生化值和主要脏器重量,计算脏器系数并作统计学分析。方法选取同窝C57-ras转基因阳性和阴性小鼠,雌雄各半,采血,测量血液生理指标和血清生化指标,并称主要脏器重量。结果 C57-ras转基因阳性雌鼠和阴性雌鼠间比较,NEUT、NEUT%存在显著性差异(P<0.05),PCT存在极显著性差异(P<0.01)。C57-ras转基因阳性雄鼠和阴性雄鼠间比较,RBC、HCT、PLT、PCT存在显著性差异(P<0.05),MON%存在极显著性差异(P<0.01)。血清生化指标中,ALT和TG存在显著性差异(P<0.05)。主要脏器重量和脏器系数比较结果显示,除C57-ras转基因阳性雌鼠和阴性雌鼠在肺重量存在极显著性差异(P<0.01)外,其余均无显著性差异(P>0.05)。结论新建C57-ras致癌性转基因小鼠模型和正常C57BL/6小鼠的主要生物学特性基本一致,利于该模型在致癌性安全性评价等领域的实际应用。

预测胎盘植入血清学指标研究进展

胎盘植入是由于子宫底蜕膜发育不良，胎盘绒毛侵入或穿透子宫基层所致的一种异常的胎盘种植，是产科严重的并发症之一，产前诊断较为困难，往往在胎儿娩出后胎盘植入部分不能自行剥离，引起产后大出血，子宫穿孔、继发感染和弥漫性血管内凝血等危及产妇生命的严重并发症时或者术后病检才确诊的[1]。据美国产科协会报道，胎盘植入发病率为1/7000[2]。目前产前诊断胎盘植入以影像学检查为主，超声诊断对胎盘植入虽有一定的预测性，但诊断准确率较低，国内报道诊断符合率为7.1%-19%，国外报道也仅为33%[3，4]。 MRI作为进一步的检查手段，但其价格昂贵，费时间、高强磁场能量对胎儿的影响有待进一步研究。因此寻找一种创伤性较小，易于推广的生物学指标或者联合影像学检查方式，以便能尽早预测该病的发生，最大程度的改善母儿预后是我们的共同目标。

应用微卫星技术对KM小鼠种子群体遗传质量进行比较分析

目的应用微卫星技术在2013年和2020年对同一个KM小鼠种子群体进行遗传质量检测和分析。方法2013年和2020年分别提取30只KM小鼠DNA,应用30个微卫星标记进行PCR扩增,基因测序后计算等位基因数、杂合度和多态信息含量等参数。结果2013年该群体有95个等位基因,平均杂合度为0.4864,平均多态信息含量(PIC)为0.4418。2020年该群体有122个等位基因,平均杂合度分别为0.5150,平均多态信息含量(PIC)分别为0.4818。结论KM小鼠种子群体具有良好的遗传稳定性和多样性,符合封闭群动物的群体遗传概貌特征。

凶险性前置胎盘发生相关因素分析

目的探讨凶险性前置胎盘(PPP)发病的相关因素。方法对近2年在本院分娩的230例PPP产妇(研究组)与同期住院分娩的230例剖宫产史的非前置胎盘产妇的临床资料进行回顾性分析与随访,分析其发病的危险因素。结果两组孕妇年龄、孕次、产次、流产次、居住地、孕早期工作、既往剖宫产的医院是否为三级医院、既往剖宫产次数比较、剖宫产前经历产程孕妇比较,有统计学差异(P<0.05)。多因素logistic分析结果显示:流产(≥2次OR:5.574,95%CI 1.336-23.241)、产次(2次,OR:2.079,95%CI 1.002-4.316,≥3次,OR:4.541,95%CI 2.649-9.259)、剖宫产(≥2次OR:4.952,1.014-20.334)是其独立危险因素,而既往剖宫产前经历产程(OR:0.163,95%CI 0.081-0.325)和居住地为城市(OR:0.591,95%CI 0.374-0.931)可降低PPP的发病风险。结论多产次、多次剖宫产、多次流产(流产次≥2)是PPP发病的独立危险因素,既往剖宫产前经历产程和居住地为城市为其保护因素。

C57-ras致癌性转基因模型杂交1代的脏器及血液学参数测定

目的测定自主建立的致癌性转基因动物模型C57-ras小鼠杂交F1代的血液生理生化值和主要脏器重量,计算脏器系数并作统计学分析。方法选取同窝C57-ras转基因阳性鼠和BALB/cJ小鼠交配后的杂交1代CB6F1-Tg小鼠,雌雄各半,采血,测量血液生理指标和血清生化指标,并称主要脏器重量。结果血液生理指标中,CB6F1-Tg转基因阳性(+/-)雌鼠和阴性(-/-)雌鼠间比较,MCHC存在极显著性差异(P<0.01);CB6F1-Tg转基因阳性(+/-)雄鼠和阴性(-/-)雄鼠间比较,PLT、PCT、EOS%、NEUT、NEUT%、LYM%存在显著性差异(P<0.05),NEUT%、LYM%存在极显著性差异(P<0.01)。血清生化指标中,CB6F1-Tg阳性(+/-)雌鼠和阴性(-/-)雌鼠比较,ALT、TP、ALB存在显著性差异(P<0.05),TG存在极显著性差异(P<0.01)。主要脏器重量和脏器系数均无显著性差异(P>0.05)。结论测定了新建C57-ras致癌性转基因小鼠模型F1代阳性小鼠和阴性小鼠的主要生物学特性,为该模型在致癌性安全性评价等领域的实际应用中提供参考。

覆盖处理对干旱河谷区造林苗木生长及土壤速效氮的影响

[目的]研究不同覆盖处理方式对造林苗木生长及土壤速效氮含量的影响。[方法]选取岷江上游山地森林/干旱河谷交错带下沿植树造林试验地段,研究了4种覆盖处理方式(覆草、覆皮、覆膜、挡水墙)对参试树种成活率、苗高生长量及其林下土壤速效氮含量影响。[结果]不同覆盖处理方式均显著提高了参试树种的成活率及苗高生长量,其中成活率均值达到77.87%,较对照组提高了33.25%,而新疆杨苗高生长量显著高于其他树种,这与引种树种速生生理特性有关;覆盖处理均显著增加了油松、岷江柏、榆树林下土壤硝态氮和铵态氮含量,但其含量因不同覆盖方式、不同试验树种而呈现差异特征,对引种树种新疆杨林下土壤硝态氮和铵态氮无显著促进作用。[结论]该研究对干旱河谷区植树造林树种及营林模式选取具有重要参考意义。

C57-ras癌症转基因小鼠模型胚胎冷冻保种技术研究

目的建立C57-ras癌症转基因小鼠模型胚胎的冷冻保种技术。方法通过直接收集体内发育的2-细胞胚或者通过体外受精方法获得2-细胞胚,采用玻璃化冷冻法冷冻、复苏、移植,后代经PCR检测。结果体内发育至2细胞期胚胎90枚,解冻后的平均复苏率是67.78%,移植产仔率是21.31%,后代的阳性率是23.08%;体外受精的2细胞期胚胎203枚,解冻复苏60枚,平均复苏率是63.33%,移植产仔率是15.78%,后代的阳性率是33.33%。结论两种胚胎冷冻途径均获得了C57-ras癌症转基因动物模型阳性小鼠,建立了该模型动物的低温保存方法。

小鼠2细胞期胚胎移植方法的探讨

目的以近交系C57BL/6J小鼠作为供体胚小鼠,封闭群ICR小鼠及昆明鼠作为假孕体,对2细胞期的胚胎移植方法和假孕鼠品系进行对比探讨。方法经超数排卵的C57BL/6J雌鼠于正常雄鼠交配,取受精卵,培养到2细胞期,进行输卵管伞移植和输卵管壁移植,妊娠产仔。结果从KM为假孕鼠,对2细胞期胚胎进行的输卵管壁移植的妊娠数量最多18只,90%的妊娠率,产仔数最多188只,产仔率达34.8%。结论输卵管壁移植的技术简单易行具有较高的妊娠率及产仔率。

获能培养液等因素对遗传工程小鼠冻融精子体外受精率的影响

目的探讨遗传工程小鼠精子冷冻、复苏及体外受精率的效果,建立简便、经济的遗传工程小鼠保种体系。方法采用精子冷冻、体外受精和胚胎移植技术,比较了精子获能培养液、雄鼠周龄及精子冻存液等因素对于遗传工程小鼠精子冷冻保存的影响。结果用CPA精子冻存液冷冻保存精子,精子复苏后用PM精子培养液获能培养,体外受精率在82.49%-91.43%,而HTF精子培养液的体外受精率为14.46%-27.38%,同品系间差异极显著（P〈0.01）;10-35周龄的雄鼠精子均能成功冷冻、受精,移植后产仔;使用R18S3,CPM,CPA三种不同精子冻存液冷冻遗传工程小鼠精子,复苏后采用PM精子培养液体外受精,受精率分别是75.85%、88.89%和94.27%,移植后得到阳性小鼠;体外受精后的胚胎成功冷冻保存,移植后产仔。结论采用CPA精子冻存液冷冻保存精子,精子复苏后用PM精子培养液体外受精,能够更有效地保存遗传工程小鼠。

遗传工程小鼠冻存卵巢异体原位移植比较研究

目的对C57BL/6 J为背景的遗传工程小鼠卵巢冷冻及复苏后原位移植进行研究,建立遗传工程小鼠卵巢冷冻方法,弥补小鼠资源保种体系。方法采用DAP213方法冷冻保存了C57BL/6 J及SCARB2、PSGL1、IGB3S三个遗传工程小鼠10日龄幼鼠的卵巢,将四个品系10日龄幼鼠的新鲜卵巢及冻存复苏卵巢原位移植到4周龄C57BL/6 J及C57BL/6 J(Cg)—Tyr^c-2 J/J(B6 albino)受体雌鼠,术后饲养5周与10周龄性成熟C57BL/6 J雄鼠交配,观察移植出生幼仔。结果C57BL/6 J新鲜卵巢和冻存卵巢,三个品系遗传工程小鼠的冻存卵巢原位移植到C57BL/6 J和B6 albino受体中,均可以恢复正常功能,交配后得到仔鼠。结论采用DAP213方法冻存C57BL/6 J及以C57BL/6 J为背景的遗传工程小鼠卵巢,复苏后原位移植到C57BL/6 J和B6 albino,交配后产仔,卵巢冻存方式是小鼠资源库保存的一个重要补充。

小鼠胚胎干细胞制备嵌合体的方法——聚合法初探

目的利用胚胎干细胞株E14．1及新建立的C57BL／6J小鼠胚胎干细胞，采用聚合法进行嵌合体的构建。方法以E14．1及C57BL／6J干细胞为供体细胞，分为由5-10、10-15、15-20、20-25个单细胞组成的干细胞团。分别与C57BL／6J及ICR的8-16细胞期胚胎细胞聚合共培养24h再进行胚胎移植。结果E14．1与C57BL／6J胚胎的聚合及C57BL／6J与ICR胚胎的聚合均以10-15个单细胞组成的干细胞团产生的嵌合体效果最好，分别得到嵌合体小鼠11只和5只，嵌合率分别为27．50％和16．13％。结论使用聚合法成功构建嵌合体，为嵌合体的制备提供了一种简单易行的方法。

近交系小鼠胚胎玻璃化冷冻技术研究

目的 对近交系小鼠体内受精的胚胎在三种不同处理温度 (2 0℃、2 5℃、2 8℃ )进行玻璃化冷冻保存。方法 不同温度下 ,胚胎在 10 %EG溶液中预处理 5min ,再投入EFS40玻璃化溶液中 1min ,平衡后冷冻。结果 与2 0℃和 2 8℃相比 ,三个品系小鼠的胚胎都在 2 5℃冷冻时获得最佳效果 ,解冻后培养观察发育率分别是 87.77%、90 0 0 %、87 18%。结论 该结果对近交系小鼠胚胎保存具有重要意义。

不同尺度植被恢复与水土流失关系研究评述

指出了植被对固持土壤具有重要作用,而植被破坏是造成水土流失问题的重要因素。在诸多水土流失控制措施体系中,生物防护措施对改善区域环境质量和恢复其生态系统具有无可比拟的优点,尤其是生态脆弱区的植被恢复工程一直是水土流失研究的重点。基于诸多植被与水土流失关系的研究,探讨了不同的植被恢复尺度与水土流失的关系,并对其发展进行了展望。

山地牧道与植被空间异质性研究评述

山地牧道和沿牧道放牧改变植被空间异质性。综合国内外研究进展,将山地牧道的涵义扩展为家畜在山地垂直空间移动的固定路线、放牧往返小道、相对固定的采食路径以及践踏小径等,并总结了山地牧道的形成与分布规律,重点评述了山地牧道与植被空间异质性相互作用机制。山地牧道作为一种线状廊道,为物种扩散提供通道、生境,分割斑块景观,影响植被边界动态,在不同尺度上影响植被空间异质性;家畜沿牧道的选择采食与植被空间异质性相互影响,家畜还通过践踏和排泄改变植被空间异质性;家畜采食、践踏和排泄综合作用于土壤,通过影响土壤异质性间接影响植被的空间分布。山地牧道在动物行为学、放牧生态学研究中具有理论和实践价值,可以为监测植被退化、控制载畜量提供依据。