利用宏转录组学技术分析酸马奶发酵过程中活性微生物功能基因表达的变化特征

[目的]探究酸马奶不同发酵时期活性微生物功能基因表达的变化特征。[方法]收集发酵初期(12 h)、中期(48 h)、后期(96 h)酸马奶样品,构建宏转录组文库,进行RNA-Seq高通量测序;对测序数据进行组装和功能注释后,分析差异表达基因,确定GO和KEGG信号通路中显著差异表达基因的静态富集。[结果]3个发酵时期酸马奶样品的宏转录组高通量测序共产生12.17 GB的高质量短序列。序列组装后进行数据分析,发现酸马奶发酵过程中代谢过程相关基因表达占主导地位。差异表达基因的筛选与分析显示,发酵前期、中期、后期酸马奶样品间两两相比,下调表达基因数量多于上调表达基因数量。GO功能富集分析显示,发酵初期与中期酸马奶样品间差异表达基因高度富集的GO条目是细胞过程、代谢过程、有机环状化合物结合、杂环化合物结合;发酵中期与后期样品间差异表达基因高度富集的GO条目是细胞过程、细胞大分子代谢过程;发酵初期与后期样品间差异表达基因高度富集的GO条目主要涉及细胞过程、有机物质代谢过程、核苷结合、核糖核苷结合、嘌呤核苷酸结合。KEGG通路富集分析显示,发酵前期与中期酸马奶样品间仅有1条差异表达基因显著富集的信号通路,即核糖体通路;发酵中期与后期酸马奶样品间差异表达基因显著富集的信号通路包括醚酯代谢、氨基苯甲酸降解、mRNA监测途径、类固醇生物合成;发酵前期与后期酸马奶样品间差异表达基因显著富集的信号通路包括类固醇生物合成、氨基苯甲酸降解、mRNA监测途径、核糖体、乙苯降解。[结论]酸马奶发酵过程中涉及活性微生物多种功能基因的差异表达,不同发酵时期活性微生物功能基因的差异表达呈现动态变化。研究结果为深入了解酸马奶发酵机制、优化酸马奶发酵工艺提供了参考。

内蒙古自治区传统发酵酸马奶不同发酵时期真菌菌群结构分析

[目的]探究内蒙古自治区传统发酵酸马奶在不同发酵时期的真菌菌群结构演替变化特征。[方法]以采集自内蒙古自治区锡林郭勒盟镶黄旗的新鲜马奶为原料,采用传统发酵方法制备酸马奶;分别采集发酵0、12、24、36、48、96 h的传统发酵酸马奶样品,测定pH值,然后基于真菌rDNA内源转录间隔区(ribosomal DNA internal transcribed spacer,rDNA-ITS)序列,利用高通量测序及分析技术表征不同发酵时期真菌菌群结构变化。[结果]Chao1指数和香农-维纳多样性指数(Shannon-Wiener′s diversity index)分析表明,传统酸马奶发酵初期(0~12 h)真菌菌群丰度下降、菌群多样性变化不大;发酵12~24 h真菌菌群丰度和菌群多样性同时增加,24~72 h同时减小,72~96 h同时增加,在96 h时二者基本达到发酵初期水平。发酵12 h内,酸马奶发酵体系的pH值急剧下降,发酵12~48 h的pH值下降速度变慢,48~96 h的pH值下降速度继续变慢并趋于平缓。基于真菌rDNA-ITS序列高通量测序及分析,在传统酸马奶中共鉴定出子囊菌门(Ascomycota)和担子菌门(Basidiomycota)2个真菌门,相对丰度分别为99.77%和0.02%;在发酵过程中,子囊菌门一直处于绝对优势地位。属水平上鉴定出9个真菌属,其中,哈萨克斯坦酵母属(Kazachstania)和克鲁维酵母属(Kluyveromyces)为优势真菌属,二者的相对丰度分别为95.76%和3.75%;克鲁维酵母属的相对丰度在发酵12~96 h的变化趋势与哈萨克斯坦酵母属呈现出此消彼长的关系,二者在发酵96 h内始终存在。种水平上鉴定出9种真菌,其中,单孢哈萨克斯坦酵母菌(Kazachstania unispora)、乳酸克鲁维酵母菌(Kluyveromyces lactis)和马克斯克鲁维酵母菌(Kluyveromyces marxianus)为优势真菌种,相对丰度分别为95.76%、2.10%和1.63%;不同发酵时期3种优势真菌的相对丰度变化趋势不同。[结论]明确了内蒙古自治区传统发酵酸马奶发酵过程中的优势真菌种类以及真菌菌群多样性和群落结构的演替变化特征。研究结果为丰富酸马奶发酵机制研究,优化酸马奶发酵工艺、提高酸马奶发酵品质提供了参考。

内蒙古地区传统发酵酸马奶不同发酵时期乳清蛋白SDS-PAGE分析

[目的]探究内蒙古地区传统酸马奶发酵过程中乳清蛋白的变化情况。[方法]以从内蒙古锡林郭勒盟镶黄旗采集的马奶为原料制备传统发酵酸马奶,发酵温度为(22±2)℃,人工捣拌频率5次/d,每次300下;每隔12 h采集1次发酵0~96 h的酸马奶样品;离心提取酸马奶乳清蛋白样品,利用条件优化后的SDS-PAGE电泳技术分析酸马奶乳清蛋白在发酵过程中变化情况。[结果]优化后的SDS-PAGE电泳分析条件为:分离胶浓度12%,浓缩胶浓度5%,分离胶电泳电压180 V、电泳时间300 min,上样浓度0.5μg/μL,上样体积16μL,改良考马斯亮蓝法染色、脱色各12 h。在发酵0~12 h内,酸马奶乳清蛋白含量增加,在12 h时达到最高值(5.12μg/μL),之后随发酵时间延长呈下降趋势,发酵96 h时降低至3.92μg/μL。SDS-PAGE电泳图谱分析显示,在分子量10~70 kDa区间内共获得乳清蛋白有效条带13个。在发酵过程中,β-乳球蛋白、溶酶菌C和α-乳白蛋白3种蛋白质含量呈现不同程度的波动,发酵72 h时三者含量之和最高,占乳清蛋白总含量的85.73%,并且在发酵过程中始终保持较高水平,是传统发酵酸马奶发酵96 h内乳清蛋白的主要组分,其中,β-乳球蛋白含量最高,平均占乳清蛋白总含量的38.92%。分子量在20~40 kDa的酪蛋白含量在发酵24 h之后开始下降,至60 h时条带消失。分子量为10.33 kDa的蛋白质在发酵12 h内被消耗,60 h时再次出现且含量随发酵时间延长逐渐增加,在84 h时达到峰值,占乳清蛋白总含量的9.84%。分子量为49.80 kDa的蛋白质在发酵72 h之后开始出现,含量在96 h时达到乳清蛋白总含量的4.11%。与其他乳清蛋白组分相比,β-乳球蛋白和免疫球蛋白含量在发酵过程中变化较小。[结论]内蒙古地区传统发酵酸马奶在发酵96 h内,分子量为10~70 kDa的乳清蛋白含量表现出有规律的消长,主要被消化分解的蛋白质是酪蛋白。不同发酵阶段酸马奶乳清蛋白组成及含量存在一定差异,但原有主要组分β-乳球蛋白、溶酶菌C和α-乳白蛋白始终保持较高水平。自发酵中期开始,酸马奶乳清蛋白中相对分子质量较小的肽(10.33 kDa)所占比例逐渐升高,由此可见,传统发酵酸马奶中不仅保留马奶中乳清蛋白原有的营养价值,而且通过发酵还增添了易吸收的小分子量蛋白质。

不同发酵时期酸马奶细菌群落结构

以聚合酶链式反应扩增16S r RNA基因序列采用454焦磷酸测序方法分析酸马奶传统发酵过程中细菌群落结构演替变化。结果表明:在发酵的初期细菌多样性最高,而细菌丰度在72 h时最高;硬壁菌门(Firmicutes)和变形菌门(Proteobacteria)为酸马奶中的优势细菌门;乳杆菌属(Lactobacillus)和乳球菌属(Lactococcus)为其优势细菌属;随着发酵时间的延长,各个细菌门与属都存在上升或下降的趋势变化。本研究可为其他乳制品发酵过程中细菌群落结构研究提供借鉴。

酸马奶发酵过程中理化指标与细菌相的动态变化

分析了酸马奶发酵过程中（0-96 h）部分理化指标以及细菌群落的变化情况。结果显示酸马奶发酵96 h内p H为下降趋势,发酵初期迅速酸化,发酵后期下降速度缓慢趋于稳定,最低达到p H3.54;总蛋白质、脂肪含量存在一定的起伏变化,72 h达到最高值;乳糖含量减少,而乳酸含量增加;葡萄糖、半乳糖、乙酸、丙酸含量在发酵过程中处于较低的水平;细菌群落结构分析结果显示酸马奶发酵过程中存在丰富的细菌多样性,并且群落结构有明显的演替变化。乳杆菌属（Lactobacillus）为优势细菌属,在酸马奶发酵过程中12-24 h呈现出上升的趋势,而24-48 h时其含量下降。研究结果表明不同发酵时间酸马奶营养价值存有差异。

血液透析患者血钾波动对预后的影响

高钾血症(hyperkalemia)是维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)患者较为常见的并发症。当血钾浓度升高时不仅改变细胞内外的钾浓度梯度差进而打破心肌细胞的电稳定性,还会促进透析过程中钾离子在血清-透析液间以及细胞内外的大量且快速地移位,这些因素均可能增加MHD患者心律失常的发生风险。因此及时治疗高钾血症并且选择最佳的透析液钾处方至关重要。本综述主要讨论了高钾血症以及透析治疗对于血液透析患者心电稳定性的影响和相关的处理措施。

蒙古马4个地方品种SSR遗传多样性的研究

利用9个微卫星基因座对蒙古马4个地方品种的188匹马进行了遗传检测。通过软件计算了各微卫星座位的有效等位基因数(E)、多态信息含量(PIC)、平均杂合度(H),并构建NJ聚类图和UPGMA聚类图。结果:9个微卫星基因座均为高度多态位点;4个群体在9个位点上的平均有效等位基因数为5.0570～6.0744,平均PIC为0.7662,4个群体平均杂合度无显著差异,均很高;乌珠穆沁马群体与乌审马群体遗传分化最近,巴尔虎马群体与锡尼河马群体遗传分化较远。

三大不同品种马mtDNA Cytb基因PCR-RFLP分析

用BamHⅠ、TaqⅠ、HaeⅢ、RsaⅠ和HincⅡ5种限制性内切酶通过PCR-RFLP技术检测了包括引入品种、培育品种和地方品种的6个类型(纯血马、三河马、乌珠穆沁马、锡尼河马、乌审马和矮马)共256匹马的mtDNACytb基因部分序列多态性。用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳将酶切产物分离,并用银染法显色。结果BamHⅠ和TaqⅠ表现出多态,5种酶共检测到7种态型,归纳为3种单倍型,以单倍型Ⅰ和Ⅲ为主体单倍型,但通过一个特殊的酶型BamHⅠ-B分析推测所研究的马可能起源于一个母系祖先。

用瘦体质量、身高标准体重法评价江淮汉族肥胖标准的研究

为了探讨用体脂率、身高标准体重法评价江淮地区汉族肥胖的标准,于2010年在安徽滁州和江苏淮安调查了1426例（城市男性309例,乡村男性414例,城市女性312例,乡村女性391例）江淮汉族成年人的身高、体重,通过身高、体重来计算身体质量指数（ BMI）.用BMI、体脂率、身高标准体重分别评价江淮汉族成年人肥胖率.结果表明：（1）江淮汉族男性BMI值为（24.1±3.6）kg/m^2,女性BMI值为（23.8±3.6）kg/m^2.（2）随年龄增长,BMI增大,身高下降.（3）用 BMI法判断,江淮汉族超重率男性为34.7%,女性为30.7%；肥胖率男性为14.4%,女性为13.2%.（4）男性以体脂率大于26,女性以大于37作为用瘦块体重法判断中国汉族人肥胖标准为宜.（5）用身高标准体重公式测定成人肥胖率,以往体重≥标准体重的120%为肥胖的标准不适合于成年人.本文研究结果提示男性标准在标准体重的128%~132%为宜,女性标准在标准体重的132%~136%为宜. WHO标准也不适合我国族群肥胖的判定.

用皮褶厚度、体脂率评价江淮汉族肥胖标准初探

为了探讨用皮褶厚度、体脂率法评价江淮地区汉族肥胖的标准,于2010年在安徽滁州和江苏淮安调查了1 426例（城市男性309例,乡村男性414例,城市女性312例,乡村女性391例）江淮汉族成年人的身高、体重、肱三头肌皮褶、肩胛下皮褶,通过身高、体重来计算身体质量指数（BMI）,通过肱三头肌皮褶、肩胛下皮褶来计算体密度,采用Brozek公式计算体脂率.用BMI、皮褶厚度、体脂率分别评价江淮汉族成年人的肥胖率.结果表明：（1）江淮汉族男性BMI值为（24.1 ±3.6） kg/m2,女性BM1值为（23.8-3.6） kg/m2.用BMI法判断,江淮汉族超重率男性为34.7％,女性为30.7％；肥胖率男性为14.4％,女性为13.2％.（2）随年龄增长,肱三头肌皮褶、肩胛下皮褶值、BMI、体脂率增大,身高下降.（3）用长岭晋吉皮褶厚度法判断,江淮汉族肥胖率男性为39.8％,女性为30.4％.皮褶厚度法得出的肥胖率远远高于BMI法,两种方法存在较大矛盾.本研究认为用肱三头肌皮褶与肩胛下皮褶之和来判断中国人群肥胖的标准,男性应该在35～45 mm之间,女性应该在45～55 mm之间选取.（4）用长岭晋吉体脂率法作为判断肥胖的标准,肥胖率男性为43.3％,女性为5.3％.用体脂率和BMI法判断江淮汉族成年人的肥胖存在较大矛盾.长岭晋吉体脂率法男性标准定得太低；女性标准定得太高.本研究认为用体脂率来判断江淮地区汉族肥胖,男性以大于24％、女性以大于28％为宜.

黄花苜蓿光合蒸腾日变化特征及其与环境因子的关系

在盆栽条件下,对一年龄黄花苜蓿(Medicago falcata L.)叶片光合蒸腾特征和光合有效辐射(PAR)、空气CO2浓度(Ca)、空气相对湿度(RH)、空气温度(Ta)等环境因子的日变化进行测定,并采用相关系数、偏相关系数和逐步回归方法分析了黄花苜蓿光合蒸腾特性日变化与环境因子的关系。结果表明,光合速率(Pn)和蒸腾速率(Tr)日变化均呈单峰曲线,12:00左右达到峰值,并且没有光合"午休"现象。Pn和Tr与PAR之间呈极显著正相关,与其它环境因子相关不显著,这说明对光合蒸腾特征起决定作用的环境因子是PAR。

布依族成人围度特征的研究

对贵州省黔南州494例(男259例,女235例)布依族成人的围度值进行测量,分析了不同年龄组围度值的变化情况,并与我国其他15个族群的围度值进行聚类分析与主成分分析.结果显示:(1)不同年龄组的头水平围值变化很小;(2)男性与女性四肢围度的最大值均在30-岁组,男性躯干围度的最大值在40-岁组,女性胸围、臀围最大值在30-岁组,腹围最大值在50-岁组;(3)躯干围度年龄组间的绝对变化值高于四肢围度,但相对变化率都低于四肢围度;(4)同年龄组间比较,女性的腹围、臀围、大腿围值多大于男性,而四肢围度值小于男性;(5)我国16个族群进行比较,布依族围度值较小,但在5个南方族群中,布依族围度值较大;(6)聚类分析显示,我国16个族群围度可分为2个大组,即南北方混合组与北方组,布依族男性和女性均属于南北方混合组;(7)主成分分析显示,南北方混合组上肢围度值小,北方组上肢围度值大,上肢围度值是16个族群分组的主要依据.

瑞香狼毒对健康人体外外周血淋巴细胞微核率的影响

目的初步探讨瑞香狼毒对健康年轻人体外外周血淋巴细胞内染色体畸变的影响效应。方法在外周血培养过程中加入不同剂量的瑞香狼毒水煎液,显微镜下检测微核率的变化,通过x2检验作统计学分析。结果瑞香狼毒终浓度为2.5、5、10mg/mL实验组的微核出现率分别是1.63‰、5.13‰和7.25‰,对照组微核率为1.50‰,第1个低剂量实验组微核率与对照组比较无统计学差异(P>0.05)。后两个中剂量和高剂量实验组微核率显著高于对照组,并具有统计学差异(P<0.01)。结论超过一定剂量的瑞香狼毒水煎液可能对健康人体外外周血淋巴细胞遗传物质有不同程度的毒性作用。

山东潍坊汉族4项人类群体遗传学指标的研究

目的:研究山东潍坊汉族4项人类群体遗传学特征。方法:2011-07在山东寿光采用随机整群抽样方法调查了370例(男215例,女155例)汉族的4项人类群体遗传学指标。结果:(1)χ2检验显示,山东潍坊汉族拇指过伸率、环指长率、指甲扁形率均男性高于女性;(2)u检验显示,在我国族群中山东潍坊汉族拇指过伸型率很高,环指长率、指甲扁型率均较低;(3)山东潍坊汉族与手足相关的4项指标间无相关性。结论:山东潍坊汉族的4项遗传指标具有北方族群特征。

酸马奶降胆固醇作用的刍议

在心脑血管疾病严重威胁人类健康的今天,酸马奶独特的风味及特殊的食疗价值越来越受到人们的青睐。它富含具有降胆固醇效用的不饱和脂肪酸、钙、乳酸菌及发酵过程中产生的乳清酸等物质。主要从酸马奶所含营养成分的降胆固醇作用及酸马奶中乳酸菌的降胆固醇机理2个角度阐述酸马奶对胆固醇的降解作用,并分析了现有的研究乳酸菌降胆固醇机理所得到的成果中存在的问题。

酸马奶的营养价值和产业化发展探究

介绍了蒙古族礼俗中的酸马奶文化,分析了酸马奶的营养成分及其医疗价值,概述了酸马奶产业化发展的现状和障碍,并提出了几点具体的建议。

放牧强度对草原植物群落生产力的影响

本研究项目以内蒙古锡林郭勒典型草原植物群落为研究对象,以进一步贯彻创新、协调、绿色、开放、共享的发展理念,进一步加强草原保护建设利用,促进锡林郭勒盟草原畜牧业生产持续好转为研究目标,根据植物生产力的放牧优化假说,研究了不同放牧强度下锡林郭勒典型草原植物群落生产力状况。研究结果表明:植物群落生产力与放牧优化假说原理比较吻合,在本项研究中,每22天放牧1天的条件下植物群落生产力最高。但是,在研究中也发现植物群落的功能群组和个体水平上,除了克氏针茅和一些多年生丛生禾草表现与植物群落水平一致外,植物群落其他植物状况是随放牧强度的变化趋势而不相同。这个结果充分表明了草原植物群落生态系统对放牧反应的复杂性和多样性。

锡林郭勒盟草原畜牧业生产现状的调查报告

锡林郭勒盟草原畜牧业现状是以天然草地牧草为基础，通过对家畜的放牧获得畜产品的一种传统畜牧业生产。是锡林郭勒盟的传统产业和优势产业，也是当地最具有地区特色的产业，更是经济社会发展的基础产业，同时牧民主要经济收入来源。我们对锡林郭勒盟草原畜牧业生产进行调查工作，其目的，一是为实现放牧管理措施提供一定的理论依据，二是为当前的放牧管理后的草原生态现状提供一定的科学数据支持，三是为科学利用草原和草原畜牧业经济发展提供一定的理论举出。

角色转换教学法在遗传咨询实验课中的应用

医学遗传学是连接基础医学与临床医学的学科,是一门应用性强的学科,在现代医学教育体系中发挥着重要作用。医学遗传学中的遗传咨询是遗传病预防的一个重要环节,对于降低遗传病的发病率有着重要意义。文章根据遗传咨询的关心咨询者、尊重自主权、尊重知情权、尊重隐私权的伦理原则,在角色扮演的同时让学生们感受到思政元素,提升学生学习、记忆效率,简化教学程序,提升医学生人文素质水平。笔者清楚学校办学特色并将其与专业优势相结合,紧扣时代发展的规律,培养学生“博学、尚行、精诚、至善”、勇于担当、开拓创新的伟大精神,争当优秀的新时代中国青年大学生。同时与学生评价相结合,为医学遗传学其他内容的课程思政建设提供了参考。