白花蛇舌草提取物通过下调Hippo-YAP信号通路促进结肠癌细胞凋亡

目的探讨白花蛇舌草提取物熊果酸、齐墩果酸对结肠癌细胞增殖与凋亡的影响及其机制。方法不同浓度的熊果酸、齐墩果酸作用结肠癌(HCT-8)细胞24、48、72 h后,CCK-8法、平板克隆形成实验检测HCT-8细胞的存活情况。筛选最佳实验条件,将细胞分为对照组和实验组,各组细胞做成细胞爬片,细胞免疫荧光检测YAP1蛋白水平。各组细胞消化离心做成细胞蜡块,免疫组织化学方法检测YES相关蛋白(YAP1)、p53基因(p53)、尾型同源盒转录因子2(CDX-2)、白介素6(IL-6)、第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源等位基因(PTEN)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的蛋白水平。结果白花蛇舌草提取物可不同程度抑制结肠癌HCT-8细胞的增殖。细胞免疫荧光结果显示,对照组YAP1蛋白表达较实验组强。免疫组化结果显示YAP1的表达与TNF-α的表达有一定相关性。结论白花蛇舌草提取物通过抑制Hippo-YAP信号通路的活性,抑制结肠癌HCT-8细胞的增殖,诱导其凋亡。白花蛇舌草提取物可能是一种潜在的肠癌治疗药物。

IL-6和TNF-α在结肠癌患者血清中的测定及其意义

目的:分析白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平与结肠癌的关系。方法:选择2013年8月-2014年5月本院收治结肠癌患者39例(结肠癌组)及同期健康体检者39例(对照组)作为研究对象,测定两组两种细胞因子术前及术后血清浓度,并比较其浓度在组内和组间的差异。结果:结肠癌组血清中TNF-α浓度明显低于对照组,而IL-6浓度则高于对照组,比较差异均有统计学意义(P<0.05);Dukes A+B期TNF-α及IL-6浓度均低于Dukes C+D期,比较差异均有统计学意义(P<0.05);术后TNF-α浓度高于术前,IL-6浓度低于术前,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:结肠癌患者中,IL-6与TNF-α的血清浓度与对照组比较差异显著,且与肿瘤分期有一定相关性,因此对于其灵敏度和特异度可做深入研究探讨,其有可能成为结肠癌临床诊断的重要指标。

奥沙利铂联合化疗治疗结肠癌患者的疗效分析及对细胞因子的影响

目的:探讨奥沙利铂联合亚叶酸钙和5-氟尿嘧啶治疗结肠癌的有效性及对细胞因子水平的影响。方法:选取2013年1月-2015年2月于本院收治的晚期结肠癌患者78例作为研究对象,采用随机数字表法将其分为对照组和观察组,每组39例。对照组给予亚叶酸钙及5-氟尿嘧啶联合治疗,观察组在进行联合治疗的基础上加用奥沙利铂,8周为1个疗程,2个疗程后比较两组治疗总有效率和不良反应发生率,应用ELISA法检测血清肿瘤坏死因子及白细胞介素水平。结果:观察组治疗总有效率高于对照组,比较差异有统计学意义(P<0.05);两组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后两组血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)水平均高于治疗前,白细胞介素-6(IL-6)血清水平低于治疗前,且观察组IL-6、IL-2及TNF-α水平均优于对照组,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:奥沙利铂联合化疗治疗晚期结肠癌疗效明确,并可有效改善患者免疫功能,值得临床推广应用。

不同的抗原修复方法对免疫组化染色结果的影响

目的探讨不同的抗原修复方法对免疫组化染色结果的影响。方法分别采用1)高温高压EDTA(pH9.0)缓冲液修复法;2)高温高压EDTA(pH8.0)缓冲液修复法;3)高温高压柠檬酸盐(pH6.0)缓冲液修复;4)微波炉EDTA(pH9.0)缓冲液修复法;5)微波炉EDTA(pH8.0)缓冲液修复法;6)微波炉柠檬酸盐(pH6.0)修复法。结果采用高温高压修复方式比采用微波修复处理的染色效果要好,大多数抗体使用高pH值的EDTA比用柠檬酸盐(pH6.0)缓冲液修复效果要好。结论高温高压EDTA缓冲液抗原修复方法对大多数抗体来说能达到理想的染色结果,是一种值得推广使用的免疫组化抗原修复方法。

IL-6在不同病理类型的结肠癌组织中的表达水平及意义

目的研究不同病理类型的结肠癌组织的IL-6表达水平。方法选择30例无肠道疾病的门诊病例作为对照组,60例结肠癌患者作为病例组研究。使用免疫组化检测所有研究对象结肠组织内IL-6表达情况,分析其与病理类型及肿瘤发生部位、肿瘤组织大小的关系。结果免疫组化半定量评分比较发现结肠癌组织IL-6表达水平得分显著高于对照组;且IL-6在直径>10cm组的表达水平显著高于<10 cm组,在粘液腺癌及印戒细胞癌中表达水平显著高于管状腺癌及其他类型的癌症患者。结论肿瘤组织IL-6表达水平与结肠癌的大小、病理类型具有相关性,为今后进一步研究结肠癌的免疫病理提供了思路。

不同热修复抗原方法与胰腺导管腺癌分子标记物CD105免疫组化方法的研究

目的探讨不同热抗原修复方法与CD105染色阳性率的关系。方法病理切片进行不同热抗原修复方法的免疫组化染色。结果免疫组化染色结果显示,热修复能量越高,CD105阳性率越好,但同时非特异性染色的情况会极具增加,使得结果可信度降低;而低能量的热抗原修复会使得染色效果不好。结论对于CD105的染色来说,高温高压抗原修复2分钟,或者普通高温抗原修复6分钟,都能使得抗体特异性和灵敏度达到理想的效果。

胰腺癌细胞CD10基因表达与患者术后存活率的关系探讨

目的探讨CD10在胰腺癌中的表达及其与临床病理特征和术后存活率的关系。方法采用免疫组织化学方法,检测83例胰腺癌和10例正常胰腺组织中CD10的表达。分析CD10在胰腺癌中的表达与临床病理特征和预后之间的相关性。结果胰腺癌中CD10的表达率随着临床TNM分期的增加而明显增高;胰腺癌中CD10的表达阳性患者,其术后生存率明显低于CD10表达阴性患者(P<0.05)。结论胰腺癌中CD10的高表达与TNM分期高有关。CD10在胰腺癌的发展、转移及预后中可能发挥重要作用,可作为临床评价胰腺癌生物学行为及评估预后的指标之一。

盲肠造疝原位接种瘤块法建立小鼠大肠癌肝转移模型

目的通过盲肠造疝原位接种瘤块法建立小鼠大肠癌肝转移模型。方法将CT26细胞接种到BALB/c小鼠项背部,约10d后获得实体瘤,再对30只BALB/c小鼠实行盲肠造疝原位接种瘤块术,术后随机将小鼠分为A,B两组。A组20只,分别于术后1,2,3,4周随机抽取5只用颈椎脱臼法处死,剖腹观察原位移植瘤体积大小、肝转移癌情况、其他脏器受累情况及有无腹水等,并对肝组织进行连续病理切片,HE染色,以观察肝转移情况。B组10只,观察其自然生存期。结果盲肠造疝原位接种瘤块术后小鼠自然生存时间为(30.4±2.7)d。术后1,2周肝组织病理检查未见转移灶,术后3周1只(1/5)出现肝转移灶,术后4周3只(3/5)出现肝转移灶。结论通过盲肠造疝原位接种瘤块法成功建立了小鼠大肠癌肝转移模型,并且是研究大肠癌肝转移的理想模型。

血管母细胞瘤40例临床病理分析

目的探讨血管母细胞瘤临床病理学特征、影像学特点、免疫表型、诊断及鉴别诊断。方法应用HE染色和免疫组化标记等方法对40例血管母细胞瘤进行病理学特征观察,同时分析其CT和MRI影像学特点。结果40例血管母细胞瘤临床表现主要为头晕、头痛、呕吐、视乳头水肿、共济失调等。CT和MRI检查示颅内界限尚清的囊实性病变,内有壁结节,增强扫描后囊性部分无强化,附壁结节明显强化。组织学检查肿瘤主要由两种成分构成:即不同成熟阶段的毛细血管和毛细血管网之间丰富的间质细胞。免疫组化肿瘤组织中的血管内皮细胞均表达CD34和FⅧRAg,间质细胞大多表达S-100,少数表达NSE,血管内皮细胞和间质细胞均表达vimentin,而一般不表达GFAP、EMA和p53,Ki-67表达较低或不表达。结论血管母细胞瘤主要由不同成熟阶段的毛细血管和来源未定的肿瘤性间质细胞构成。其影像学表现具有一定的特异性。血管母细胞瘤须注意与毛细胞型星形细胞瘤、血管瘤型脑膜瘤、转移性肾癌等鉴别。

颅内胶质母细胞瘤51例临床病理分析

目的回顾性分析51例胶质母细胞瘤临床病理特征、免疫表型、影像学特点、诊断及鉴别诊断。方法对51例胶质母细胞瘤标本进行临床资料统计,应用HE染色、免疫组化等方法进行病理学特征观察,CT和MR检查分析其影像特点。结果胶质母细胞瘤临床表现主要为头晕、头痛、呕吐,CT和MR检查示颅内界限不清的占位性病变,常伴有出血、坏死和囊性变,增强扫描呈不规则环状强化。肿瘤组织学显示瘤细胞弥漫分布,异型性明显,血管明显增生,伴有出血和坏死,坏死灶周围瘤细胞常排列呈栅栏状。免疫组化显示GFAP和vimentin均呈强弱不等的阳性,Ki-67表达较高,阳性细胞数平均为28.94%,而其它标记物的表达不尽相同。结论胶质母细胞瘤来源于星形细胞,组织形态具有一定的特征性,在颅内肿瘤中恶性程度最高,预后差。其影像学表现与肿瘤的病理改变密切相关。特殊类型的胶质母细胞瘤须注意与胶质肉瘤、恶性神经节细胞胶质瘤等相鉴别。

多形性黄色星形细胞瘤临床病理特点及免疫表型分析

目的探讨多形性黄色星形细胞瘤(PXA)的临床病理特点及免疫表型。方法回顾性分析26例PXA的临床资料、影像学表现和病理组织学特点。运用HE染色及免疫组化EnVision法检测GFAP、vi mentin、EMA、S-100、NSE、Syn、NF、nestin、NeuN、CD68、CD34、EGFR、p53、Ki-67。观察其病理组织学特点和免疫表型特征,对所有病例进行随访。结果临床上主要表现为头痛和癫痫发作,影像示肿瘤均发生于大脑表浅部位,且伴有囊性变,增强后可见强化及瘤周水肿;典型组织形态学表现为瘤细胞呈多形性,可见黄色瘤细胞和嗜酸性小体(EGB)及核内包涵体,瘤组织内有多少不等的淋巴细胞散在浸润,有丰富的网状纤维,无坏死及血管内皮细胞增生,核分裂少或无。1例局灶区域出现上皮样结构,1例间变性PXA有较多核分裂,并见灶性坏死。免疫组化GFAP、vi mentin、S-100、NSE、nestin均阳性,p53、EGFR部分病例阳性,CD68散在瘤巨细胞阳性,Ki-67约1%瘤细胞阳性,EMA、CD34、Syn、NeuN、NF均阴性。随访无1例复发。结论 PXA是一种好发于年轻人的少见的具有特殊临床病理特征的、预后较好的中枢神经系统肿瘤。病理组织学上需与巨细胞型胶质母细胞瘤、脂质化胶质母细胞瘤、黄色瘤型脑膜瘤、胶质肉瘤和室管膜下巨细胞星形细胞瘤等鉴别。

IL-10、IL-17在子宫内膜癌中的表达及其与临床病理的关系

子宫内膜癌（endometrial carcinoma）作为临床常见的妇科恶性肿瘤,多发生于50岁及以上的绝经妇女,并且其发病率有呈逐渐升高的趋势,严重威胁患者的健康和生命质量。关于其发病机制,目前尚无统一结论 ,有研究证实多种细胞因子可能参与了子宫内膜癌的发生及发展过程。

儿童颅内肿瘤254例临床病理分析

目的分析儿童颅内肿瘤的临床特点和病理类型,提高儿童颅内肿瘤的早期诊断率和诊疗效果。方法对254例儿童颅内肿瘤的临床及病理资料进行总结分析。结果本组病例占我院同期脑肿瘤病例的11.70%,以男性患儿居多,占64.57%;发病年龄以9～12岁为高发,占27.95%;临床表现以头痛、头晕、呕吐为主,占73.23%;儿童颅内肿瘤以胶质细胞瘤为多见,占50.79%,其次为髓母细胞瘤,占24.42%;发病部位幕下多于幕上,占57.09%;CT检查阳性率为94.09%,MR检查阳性率为100%。结论儿童颅内肿瘤发病男多于女,肿瘤好发于幕下,以胶质瘤和髓母细胞瘤最为多见,其临床表现、发病部位、肿瘤性质和组织学类型均与成人有很大不同;影像学检查仍是目前儿童颅内肿瘤的常规检查方法,MR诊断阳性率高于CT。

胚胎发育不良性神经上皮性肿瘤的临床病理分析

目的提高对胚胎发育不良性神经上皮性肿瘤(DNET)临床表现、病理形态学、免疫组织化学及影像学特征的认识。方法回顾性分析39例DNET的临床表现、病理形态改变、免疫组织化学检测及影像学表现,并对患者进行随访。结果 39例DNET患者均在25岁以前发病,以局灶性难治性癫痫发作为主要临床表现。肿瘤由神经元和特异性胶质神经元成分(SGE)构成,基质为黏液伴微囊形成,周围有少突胶质细胞样细胞(OLC)。单纯型DNET 33例,复杂型DNET 5例,非特殊型DNET 1例。OLC示S-100及少突胶质细胞转录因子-2(Oligo-2)阳性,神经元核抗原(NeuN)、突触素(Syn)及神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)阴性;神经元示NeuN及Syn阳性。CT检查示病变为不规则低密度影,少数有囊性改变或钙化;磁共振成像(MRI)检查示病灶T1加权像(T1WI)呈低信号,T2加权像(T2WI)呈高信号,无强化,无瘤周水肿及占位效应。随访无肿瘤复发及死亡。结论 DNET具有独特的临床、病理及影像学特征。

胶质瘤中MKK7与c-Jun磷酸化的表达及其相关性

目的探讨胶质瘤中MKK7和c-Jun磷酸化(p-c-Jun)的表达及意义,分析两者表达的相关性。方法选取弥漫型星形细胞瘤(15例)、少突胶质细胞瘤(5例)、间变性星形细胞瘤(11例)、间变性少突胶质细胞瘤(8例)、胶质母细胞瘤(53例)及其瘤旁正常脑组织(25例)共117例,采用免疫组织化学法检测MKK7、c-Jun及p-c-Jun的表达。体外培养神经胶质瘤细胞株U87,用脂质体转染MKK4-siRNA、MKK7-siRNA和对照siRNA,48h后Westernblot检测MKK7、c-Jun及p-c-Jun的表达水平。结果胶质母细胞瘤中p-c-Jun及MKK7的表达均明显高于其他组织学类型胶质瘤及胶质母细胞瘤瘤旁正常脑组织中的表达(P=0.000,P=0.000)。随着胶质瘤WHO分级的升高,p-c-Jun及MKK7的表达增高,且与WHO分级呈明显正相关(r=0.494,P=0.000;r=0.606,P=0.000)。胶质瘤及胶质母细胞瘤瘤旁正常脑组织中MKK7与p-c-Jun的表达存在正相关关系(r=0.387,P=0.000)。沉默神经胶质瘤细胞株U87MKK7表达抑制了c-Jun磷酸化水平。结论MKK7可以通过调控JNK/c-Jun活性进而促进胶质母细胞瘤的发生。

子痫前期与Foxp3表达量及其基因位点924(rs2232365)多态性的相关性

目的探讨子痫前期患者胎盘Foxp3的表达变化和Foxp3-924（rs2232365）基因位点多态性与子痫前期的相关性。方法选取2010年10月~2011年12月在广州医医科大学附属第三医院产科住院的子痫前期患者156例,和同期住院分娩的正常妊娠孕妇252例,应用PCR-SSP技术进行Foxp3-924（rs2232365）基因位点分型。在上述对象中随机选择子痫前期患者68例,其中轻度痫前期患者33例,重度痫前期患者35例,正常晚期妊娠患者30例,采用免疫组织化学法检测蜕膜Foxp3的表达。结果Foxp3在轻度子痫前期和重度子痫前期组的表达阳性率分别为51.52%和28.57%,显著低于正常妊娠组（86.67%,P〈0.05）;子痫前期的Foxp3-924G/G、G/A、A/A表型频率分别为：0.1346、0.4615、0.4038,对照组分别为0.1508、0.4087、0.4405;子痫前期组Foxp3-924 A、Foxp3-924 G基因频率分别为：0.6346和0.3654,对照组分别为：0.6448和0.3552;Foxp3-924各种基因型频率在子痫前期组与正常对照组之间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论子痫前期患者胎盘组织中的Foxp3表达量显著性低于正常孕妇,提示Foxp3表达量的水平下降使其免疫抑制功能减弱,母胎免疫耐受失衡,诱导子痫前期的发生;Foxp3-924（rs2232365）位点基因多态性对子痫前期发生无显著性作用与影响。

口腔鳞状细胞癌中Tip60(KAT5)的表达及其相关性分析

[目的]探讨口腔鳞状细胞癌(OSCC)分化程度与Tip60(KAT5)表达相关性。[方法]选取口腔鳞状细胞共49例及癌旁正常口腔组织36例,采用免疫组化方法检测Tip60(KAT5)的表达状态。体外培养口腔鳞状细胞癌Cal27及UM1细胞株,Tip60(KAT5)抑制剂Nu9056处理Cal27及UM1细胞株后,MTT比色法检测Nu9056对Cal27及UM1细胞株增殖的影响。[结果]口腔鳞状细胞癌中Tip60(KAT5)的表达均明显高于癌旁正常组织中的表达(P=0.000);随着组织学分化程度的降低,Tip60(KAT5)的表达增高,且其表达与组织学分化程度的降低呈明显正相关(r=0.461,P=0.001);随着浓度及时间的增加,Nu9056对Cal27及UM1细胞株的增殖抑制率逐渐增加,呈浓度及时间依赖关系(P<0.05)。[结论]T ip60(KAT5)蛋白在口腔鳞状细胞癌组织中表达上调,且与其的组织学分化程度相关,Tip60(KAT5)可作为预测口腔鳞状细胞癌进展和预后的生物学指标。

三种方法检测胃黏膜活检标本幽门螺杆菌感染的病理诊断价值

目的探讨不同检测方法对胃黏膜活检标本中幽门螺杆菌(helicobacter pylori,HP)感染的诊断价值。方法收集胃黏膜活检标本200例,采用美蓝染色、荧光染色及免疫组化染色检测HP的感染情况,分析各方法HP检测结果的一致性。结果胃黏膜活检标本中HP的检出率:美蓝染色75%(150/200),荧光染色79%(158/200),免疫组化染色68.5%(137/200)。荧光染色的阳性率最高,κ系数检验结果显示,三种方法的检测结果高度一致,差异有统计学意义(P<0.05),免疫组化染色与美蓝染色的一致性最高(κ=0.840)。HP的感染率与炎症程度、活动度呈正相关,与肠化生呈负相关(P<0.05)。结论免疫组化染色可在蛋白水平检测HP的表达,并可预测疾病的发展,是检测胃黏膜活检标本中HP的最佳方法。

结外鼻型T／NK细胞淋巴瘤23例临床病理分析

目的:探讨结外鼻型T/NK细胞淋巴瘤(ENKL)的临床特点、病理组织学特征及免疫表型。方法:回顾性分析23例ENKL的临床表现、病理组织学特点,采用免疫组化Envision法检测CD3、UCHL1、CD20、CD79a、CD56、GrB,原位杂交方法检测EBER在ENKL中的表达情况。结果:23例ENKL有特征性临床、病理学改变,CD56及EBER阳性表达率达100%。结论:ENKL根据典型的临床表现、病理形态学改变、免疫表型特点及EBER原位杂交阳性能准确诊断。

人非小细胞肺癌组织中HIN-1基因甲基化的检测与分析

目的:检测HIN-1(high in normal-1)基因在非小细胞肺癌中的甲基化情况,探讨其与非小细胞肺癌患者临床病理特征及预后的关系。方法:采用基因甲基化特异性PCR检测73例非小细胞肺癌和20例正常肺组织中HIN-1基因启动子的甲基化情况,分析HIN-1基因甲基化水平与非小细胞肺癌患者临床病理特征及预后的关系。结果:非小细胞肺癌患者HIN-1基因甲基化的检出率为68.49%,而正常对照组中未检出HIN-1基因的甲基化,两者有显著差异(P<0.01)。HIN-1基因甲基化情况与肺癌患者的临床分期、有无淋巴结转移、肿瘤分级及患者的预后相关(P<0.01),而与患者的性别、年龄及肿瘤的组织学类型无关(P>0.05)。结论:HIN-1基因甲基化在非小细胞肺癌中检出率较高,其启动子高甲基化可能与非小细胞肺癌的发展及预后具有一定的关系。