利用宏转录组学技术分析酸马奶发酵过程中活性微生物功能基因表达的变化特征

[目的]探究酸马奶不同发酵时期活性微生物功能基因表达的变化特征。[方法]收集发酵初期(12 h)、中期(48 h)、后期(96 h)酸马奶样品,构建宏转录组文库,进行RNA-Seq高通量测序;对测序数据进行组装和功能注释后,分析差异表达基因,确定GO和KEGG信号通路中显著差异表达基因的静态富集。[结果]3个发酵时期酸马奶样品的宏转录组高通量测序共产生12.17 GB的高质量短序列。序列组装后进行数据分析,发现酸马奶发酵过程中代谢过程相关基因表达占主导地位。差异表达基因的筛选与分析显示,发酵前期、中期、后期酸马奶样品间两两相比,下调表达基因数量多于上调表达基因数量。GO功能富集分析显示,发酵初期与中期酸马奶样品间差异表达基因高度富集的GO条目是细胞过程、代谢过程、有机环状化合物结合、杂环化合物结合;发酵中期与后期样品间差异表达基因高度富集的GO条目是细胞过程、细胞大分子代谢过程;发酵初期与后期样品间差异表达基因高度富集的GO条目主要涉及细胞过程、有机物质代谢过程、核苷结合、核糖核苷结合、嘌呤核苷酸结合。KEGG通路富集分析显示,发酵前期与中期酸马奶样品间仅有1条差异表达基因显著富集的信号通路,即核糖体通路;发酵中期与后期酸马奶样品间差异表达基因显著富集的信号通路包括醚酯代谢、氨基苯甲酸降解、mRNA监测途径、类固醇生物合成;发酵前期与后期酸马奶样品间差异表达基因显著富集的信号通路包括类固醇生物合成、氨基苯甲酸降解、mRNA监测途径、核糖体、乙苯降解。[结论]酸马奶发酵过程中涉及活性微生物多种功能基因的差异表达,不同发酵时期活性微生物功能基因的差异表达呈现动态变化。研究结果为深入了解酸马奶发酵机制、优化酸马奶发酵工艺提供了参考。

共轭亚油酸及其生物学功能研究进展

共轭亚油酸（CLA）是含有共轭双键的亚油酸家族的总称,在这个家族中至少有28个同分异构体,它们主要存在于反刍动物的脂肪中.其中含量最多,生物学功能最为广泛的c9t11 CLA,占整个CLA总量的80％～90％.其生物学功能包括抗肿瘤细胞生长、改善心血管系统功能、增强机体免疫力以及预防糖尿病等.其次为t1oc12 CLA,占CLA总量的3％～5％,其主要生物学功能为降低脂肪酸的合成,抑制脂肪细胞的分化与生长等.给反刍动物饲喂具有不同脂肪酸含量特征的油菜籽、长链不饱和脂肪酸等,或对体内硬酯酰辅酶A去饱和酶的活性进行调节,均可提高反刍动物组织中的CLA含量,从而生产出具有促进人体健康的功能性畜产品.未来的研究应该阐明共轭亚油酸中的共轭结构是如何发挥其生物学功能的,在其他营养物质中是否也存在具有生物学功能的结构形式.

瑞香狼毒对健康人体外外周血淋巴细胞微核率的影响

目的初步探讨瑞香狼毒对健康年轻人体外外周血淋巴细胞内染色体畸变的影响效应。方法在外周血培养过程中加入不同剂量的瑞香狼毒水煎液,显微镜下检测微核率的变化,通过x2检验作统计学分析。结果瑞香狼毒终浓度为2.5、5、10mg/mL实验组的微核出现率分别是1.63‰、5.13‰和7.25‰,对照组微核率为1.50‰,第1个低剂量实验组微核率与对照组比较无统计学差异(P>0.05)。后两个中剂量和高剂量实验组微核率显著高于对照组,并具有统计学差异(P<0.01)。结论超过一定剂量的瑞香狼毒水煎液可能对健康人体外外周血淋巴细胞遗传物质有不同程度的毒性作用。

低温对钝顶螺旋藻质膜上6种脂肪酸含量的影响

目的:探讨低温下鄂尔多斯高原碱湖钝顶螺旋藻(S1)质膜脂肪酸的变化及其与抗低温的关系,并与非洲Chad湖钝顶螺旋藻(S2)进行比较。方法:采用两相法提纯质膜,气相色谱法测定质膜类脂脂肪酸相对百分含量。结果:随着温度的降低,S1和S2质膜的总饱和脂肪酸均呈降低的趋势,总不饱和脂肪酸均呈增加的趋势;软脂油酸(16:1)和亚麻酸(18:3)的含量在S1中明显增加,在S2中明显减少;而油酸(18:1)和亚油酸(18:2)的含量正好相反,在S1中明显减少,S2中明显增加。结论:不饱和脂肪酸在低温逆境中存在调节作用。推测S1质膜中与抗低温有关的关键脂肪酸可能是软脂油酸和亚麻酸;S2中可能是油酸和亚油酸。S1的抗寒性比S2的强。

低温对钝顶螺旋藻质膜H^+-ATP酶活性的影响

目的:探讨低温下鄂尔多斯高原碱湖钝顶螺旋藻(S1)PM H+-ATPase活性的变化及其与抗低温的关系,并与非洲Chad湖钝顶螺旋藻(S2)进行比较。方法:以鄂尔多斯钝顶螺旋藻(S1)和非洲Chad湖钝顶螺旋藻(S2)为材料,采用两相法提纯质膜(plasms membrae PM),钼蓝法测定PM H+-ATPase活性。结果:结果显示:低温直接处理和锻炼后低温处理,S1和S2PM H+-ATPase活性都是先升后降。S1PM H+-ATPase活性比S2PM H+-ATPase活性稳定。低温锻炼可提高PM H+-ATPase活性。PM H+-ATPase活性变化范围S1<S2。低温直接处理,S1的生理活动临界低温为0℃,S2的生理活动临界低温为10℃;锻炼后处理,S1的生理活动临界低温为0℃,S2的生理活动临界低温为5℃。结论:S1对低温有较强的适应性。

用瘦体质量、身高标准体重法评价江淮汉族肥胖标准的研究

为了探讨用体脂率、身高标准体重法评价江淮地区汉族肥胖的标准,于2010年在安徽滁州和江苏淮安调查了1426例（城市男性309例,乡村男性414例,城市女性312例,乡村女性391例）江淮汉族成年人的身高、体重,通过身高、体重来计算身体质量指数（ BMI）.用BMI、体脂率、身高标准体重分别评价江淮汉族成年人肥胖率.结果表明：（1）江淮汉族男性BMI值为（24.1±3.6）kg/m^2,女性BMI值为（23.8±3.6）kg/m^2.（2）随年龄增长,BMI增大,身高下降.（3）用 BMI法判断,江淮汉族超重率男性为34.7%,女性为30.7%；肥胖率男性为14.4%,女性为13.2%.（4）男性以体脂率大于26,女性以大于37作为用瘦块体重法判断中国汉族人肥胖标准为宜.（5）用身高标准体重公式测定成人肥胖率,以往体重≥标准体重的120%为肥胖的标准不适合于成年人.本文研究结果提示男性标准在标准体重的128%~132%为宜,女性标准在标准体重的132%~136%为宜. WHO标准也不适合我国族群肥胖的判定.

用皮褶厚度、体脂率评价江淮汉族肥胖标准初探

为了探讨用皮褶厚度、体脂率法评价江淮地区汉族肥胖的标准,于2010年在安徽滁州和江苏淮安调查了1 426例（城市男性309例,乡村男性414例,城市女性312例,乡村女性391例）江淮汉族成年人的身高、体重、肱三头肌皮褶、肩胛下皮褶,通过身高、体重来计算身体质量指数（BMI）,通过肱三头肌皮褶、肩胛下皮褶来计算体密度,采用Brozek公式计算体脂率.用BMI、皮褶厚度、体脂率分别评价江淮汉族成年人的肥胖率.结果表明：（1）江淮汉族男性BMI值为（24.1 ±3.6） kg/m2,女性BM1值为（23.8-3.6） kg/m2.用BMI法判断,江淮汉族超重率男性为34.7％,女性为30.7％；肥胖率男性为14.4％,女性为13.2％.（2）随年龄增长,肱三头肌皮褶、肩胛下皮褶值、BMI、体脂率增大,身高下降.（3）用长岭晋吉皮褶厚度法判断,江淮汉族肥胖率男性为39.8％,女性为30.4％.皮褶厚度法得出的肥胖率远远高于BMI法,两种方法存在较大矛盾.本研究认为用肱三头肌皮褶与肩胛下皮褶之和来判断中国人群肥胖的标准,男性应该在35～45 mm之间,女性应该在45～55 mm之间选取.（4）用长岭晋吉体脂率法作为判断肥胖的标准,肥胖率男性为43.3％,女性为5.3％.用体脂率和BMI法判断江淮汉族成年人的肥胖存在较大矛盾.长岭晋吉体脂率法男性标准定得太低；女性标准定得太高.本研究认为用体脂率来判断江淮地区汉族肥胖,男性以大于24％、女性以大于28％为宜.

饲粮中添加梧桐子油和罗格列酮对绵羊生产性能、血清激素和生化指标的影响

本试验旨在研究饲粮中添加硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)的抑制剂(梧桐子油)和促进剂(罗格列酮)对育肥绵羊生产性能以及与脂肪代谢相关血清激素和生化指标的影响。选用18只平均体重为(27.71±2.64)kg、体况相似的杂交公羊(美利奴羊×小尾寒羊♀),随机分为3组,每组6只。对照组(C组)饲喂基础饲粮+4.8%胡麻籽,梧桐子油组(W组)饲喂C组饲粮+15 g/d梧桐子油,罗格列酮组(L组)饲喂C组饲粮+8 mg/d罗格列酮。试验期50 d,其中过渡期10 d,预试期5 d,正试期35 d。结果表明:1)生产性能方面,饲粮中添加梧桐子油和罗格列酮对绵羊生产性能、屠宰性能和产肉性能均无显著影响(P>0.05);脂肪沉积方面,W组的背膘厚比C组和L组分别提高了12.55%和17.23%(P<0.05)。2)血清激素指标方面,与C组相比,W组血清生长激素(GH)、胰高血糖素(GC)和瘦素(LEP)含量均显著升高(P<0.05),L组血清GC含量显著升高(P<0.05);3)血清生化指标方面,与C组相比,W组血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)的含量均显著升高(P<0.05),L组血清TG的含量显著高于C组(P<0.05)。综上所述,饲粮中添加梧桐子油和罗格列酮对绵羊生产性能、屠宰性能和产肉性能等均无显著影响,但梧桐子油显著提高了绵羊的背膘厚度;饲粮中添加梧桐子油可以显著提高绵羊血清GH、GC和LEP含量,罗格列酮可以显著提高血清GC含量;饲粮中添加梧桐子油能显著提高绵羊血清HDL-C、LDL-C、TC和TG的含量,罗格列酮可显著提高血清TG的含量。

低温胁迫对钝顶螺旋藻细胞过氧化和质膜透性的影响

低温胁迫下,测定了2个不同生境的钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)细胞丙二醛含量和电解质外渗量,对钝顶螺旋藻细胞过氧化和质膜透性进行了研究。结果发现,在相同条件下,MDA含量和质膜伤害程度均为S2>S1,S1质膜过氧化程度小于S2,,抗寒性强于S2;随着低胁迫的增强,2个样品的MDA含量均呈升高趋势,细胞电解质外渗增加,细胞过氧化程度加大,质膜透性增强;经低温锻炼后2个样品的MDA量均比直接低温处理的低,质膜的伤害程度也小,说明低温锻炼能增强钝顶螺旋藻对低温逆境的适应性。

布依族成人围度特征的研究

对贵州省黔南州494例(男259例,女235例)布依族成人的围度值进行测量,分析了不同年龄组围度值的变化情况,并与我国其他15个族群的围度值进行聚类分析与主成分分析.结果显示:(1)不同年龄组的头水平围值变化很小;(2)男性与女性四肢围度的最大值均在30-岁组,男性躯干围度的最大值在40-岁组,女性胸围、臀围最大值在30-岁组,腹围最大值在50-岁组;(3)躯干围度年龄组间的绝对变化值高于四肢围度,但相对变化率都低于四肢围度;(4)同年龄组间比较,女性的腹围、臀围、大腿围值多大于男性,而四肢围度值小于男性;(5)我国16个族群进行比较,布依族围度值较小,但在5个南方族群中,布依族围度值较大;(6)聚类分析显示,我国16个族群围度可分为2个大组,即南北方混合组与北方组,布依族男性和女性均属于南北方混合组;(7)主成分分析显示,南北方混合组上肢围度值小,北方组上肢围度值大,上肢围度值是16个族群分组的主要依据.

饲粮中添加梧桐子油和罗格列酮对绵羊组织中脂肪酸组成及含量的影响

本研究旨在探讨饲粮中添加硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)的抑制剂(梧桐子油)和促进剂(罗格列酮)对绵羊背最长肌及皮下脂肪中脂肪酸组成及含量的影响。选用18只平均体重为(27.71±2.64)kg、生理状况相似的杂交公羊(美利奴×小尾寒羊♀)随机分为3组,每组6只。对照组(C组)饲喂基础饲粮+4.8%胡麻籽,梧桐子油组(W组)饲喂C组饲粮+15 g/d梧桐子油,罗格列酮组(L组)饲喂C组饲粮+8 mg/d罗格列酮。试验期50 d,其中过渡期10 d,预试期5 d,正试期35 d。结果表明:1)与C组相比,W组背最长肌中反-11油酸(trans-11 C18∶1)、反-9,12亚油酸(trans-9,12 C18∶2)的含量显著增加(P<0.05),亚麻酸(C18∶3)(n-6)含量显著降低(P<0.05),皮下脂肪中花生烯酸(C20∶1)含量显著升高(P<0.05),其他脂肪酸含量没有显著变化(P>0.05);2)与C组相比,L组背最长肌中trans-11 C18∶1、trans-9,12 C18∶2、顺-9,反-11共轭亚油酸(cis-9,trans-11 CLA)、多不饱和脂肪酸(PUFA)含量和PUFA/饱和脂肪酸(SFA)显著增加(P<0.05),C18∶3(n-6)和SFA的含量显著降低(P<0.05),皮下脂肪中癸酸(C10∶0)、顺-9油酸(cis-9 C18∶1)和花生三烯酸(C20∶3)(n-3)含量显著升高(P<0.05)。结果提示,饲粮中添加梧桐子油增加了绵羊背最长肌中trans-11 C18∶1、trans-9,12 C18∶2的含量,降低了C18∶3(n-6)的含量,增加了皮下脂肪中C20∶1的含量;饲粮中添加罗格列酮增加了绵羊背最长肌中trans-11 C18∶1、trans-9,12 C18∶2和cis-9,trans-11 CLA的含量,降低了C18∶3(n-6)的含量,增加了皮下脂肪中C10∶0、cis-9 C18∶1和C20∶3(n-3)的含量。

沙葱多糖的提取纯化及纯度鉴定

采用热水浸提法提取沙葱多糖,三氯乙酸法除蛋白,活性炭脱色,Sephadex凝胶柱层析纯化,收集单一峰溶液命名为SCSP,对纯化产物SCSP分别采用紫外分光光度法、纸层析法、比旋光度法、凝胶柱层析4种方法联合检验其纯度,结果表明,在波长260nm和280nm处无核酸和蛋白的明显吸收,纸层析见单一染色海蓝色斑点,比旋光度测定结果均一致为+51.36°,凝胶柱层析结果显示出现了单一狭窄对称峰,以上纯化结果综合表明SCSP为均一组分多糖。

山东潍坊汉族4项人类群体遗传学指标的研究

目的:研究山东潍坊汉族4项人类群体遗传学特征。方法:2011-07在山东寿光采用随机整群抽样方法调查了370例(男215例,女155例)汉族的4项人类群体遗传学指标。结果:(1)χ2检验显示,山东潍坊汉族拇指过伸率、环指长率、指甲扁形率均男性高于女性;(2)u检验显示,在我国族群中山东潍坊汉族拇指过伸型率很高,环指长率、指甲扁型率均较低;(3)山东潍坊汉族与手足相关的4项指标间无相关性。结论:山东潍坊汉族的4项遗传指标具有北方族群特征。

低温下两个品系的钝顶螺旋藻质膜蛋白的变化

采用考马斯亮蓝G-250法和SDS-PAGE电泳对经低温处理和低温锻炼的内蒙古鄂尔多斯沙区碱湖的钝顶螺旋藻(S1)和引进非洲Chad湖的钝顶螺旋藻(S2)的质膜蛋白含量和电泳图谱分析表明:两种藻质膜蛋白对低温反应的规律相似,但抗寒性较强的内蒙古鄂尔多斯沙区碱湖的钝顶螺旋藻(S1)质膜蛋白含量比抗寒性较弱的引进非洲Chad湖的钝顶螺旋藻(S2)的高,较低的低温下质膜蛋白降低幅度S1<S2;直接处理时,抗寒性较强的内蒙古鄂尔多斯沙区碱湖的钝顶螺旋藻(S1)对5℃反应更强。低温锻炼可适当增加螺旋藻的质膜蛋白含量。较低的低温下有分子量较小的新质膜蛋白的合成和分子量较大的旧质膜蛋白的解聚或解体。

实行开放式实验教学,培养学生的科研创新能力

生物化学是一门实验与理论并重的学科,为适应21世纪人才培养的需要,提高实验课教学效果,本文从引入开放式实验教学理念,改革传统的实验教学方法,更新实验内容,完善考核制度等方面讨论如何提高学生的科研创新能力,培养新世纪高素质人才。

敌百虫的遗传毒性效应及维生素C的拮抗作用

目的:初步探讨敌百虫(dipterex,Dip)的遗传毒性效应及维生素C(VitC)的拮抗作用。方法:昆明种小鼠40只,随机分为5组,即对照组、Dip组、VitC干预组Ⅰ、VitC干预组Ⅱ、VitC干预组Ⅲ。每组8只。对照组和Dip组小鼠每天分别饮用自来水和含Dip的水溶液(5mgDip/mL),VitC干预组Ⅰ、VitC干预组Ⅱ和VitC干预组Ⅲ小鼠每天的饮用水中除含有Dip(5mgDip/mL)外,同时给予补充不同剂量的VitC进行干预,50d后观察其骨髓细胞微核率的变化。结果:Dip组小鼠的骨髓细胞微核率显著高于对照组(P<0.01);VitC干预组Ⅱ和VitC干预组Ⅲ微核率显著低于Dip组(P<0.01)。结论:Dip对骨髓细胞遗传物质有不同程度的损伤作用,即具有遗传毒性效应;适量的VitC具有拮抗Dip致小鼠骨髓细胞微核的作用,即抗诱变作用。

敌百虫对小鼠精子的致畸效应及维生素C的拮抗作用

目的:初步探讨敌百虫(dipterex,Dip)对小鼠精子的致畸效应及维生素C的拮抗作用。方法:昆明种小鼠40只,随机分为5组,即对照组、Dip组、维生素C(Vitamin C,VitC)干预组Ⅰ、VitC干预组Ⅱ、VitC干预组Ⅲ,每组8只。对照组和Dip组小鼠每天分别饮用自来水和含Dip的水溶液(5 mg Dip/ml);VitC干预组Ⅰ、VitC干预组Ⅱ和VitC干预组Ⅲ小鼠每天的饮用水中除含有Dip(5 mg Dip/ml)外,同时给予补充不同剂量的VitC进行干预,50 d后观察其精子畸形率的的变化。结果:Dip组小鼠的精子畸形率显著高于对照组(P<0.01);VitC干预组Ⅰ、VitC干预组Ⅱ和VitC干预组Ⅲ的精子畸形率均显著低于Dip组(P<0.01)。结论:Dip的毒性作用可引起雄性小鼠生殖细胞的遗传损伤,导致生殖毒性效应;适量的VitC具有拮抗敌百虫致小鼠精子畸形的作用,即抗诱变作用。

钝顶螺旋藻两个不同生态种藻胆蛋白抗癌作用的比较研究

目的:探讨鄂尔多斯高原碱湖钝顶螺旋藻S1藻胆蛋白的抗癌作用,并与Chad湖钝顶螺旋S2的进行比较。方法:用MTT法分别测定螺旋藻藻胆蛋白对人肝癌细胞(HepG-2)及人胃癌细胞(MGC-823)的生长抑制作用。结果:S1、S2的藻胆蛋白对HepG-2的生长抑制率分别为67.6%、8.1%。S1与空白对照组间呈极显著性差异(P<0.01),S2与空白对照组差异显著(P<0.05);S1与S2差异极显著(P<0.01)。S1和S2的藻胆蛋白对MGC-823的生长抑制率分别为68.8%、62.5%。S1、S2与空白对照组间均差异显著(P<0.01);S1与S2间无显著性差异(P>0.05)。结论:S1的藻胆蛋白对HepG-2的生长抑制作用大于S2;S1和S2对MGC-823的生长均有抑制作用且效果相同。

软体动物扇贝横纹肌中类肌联蛋白的纯化

利用含1mol/L尿素的0.15mol/L磷酸钾缓冲液(pH=7.0)从扇贝横纹肌肌原纤维中提取了相对分子质量为2.0×106的类肌联蛋白.将类肌联蛋白提取液添加到DEAETOYOPEARL 650M型层析柱,利用阴离子交换柱层析法对其进行了纯化,并利用共沉淀法研究了扇贝类肌联蛋白与纤维型肌动蛋白(F-actin)的相互作用.结果表明:纤维型肌动蛋白不产生沉淀,但扇贝类肌联蛋白和纤维型肌动蛋白产生共沉淀,类肌联蛋白可能是存在于软体动物横纹肌中的一种新型的肌联蛋白样蛋白.

日粮中添加具有不同脂肪酸特征的油籽对育肥绵羊脂肪组织中脂肪酸组成的影响

文章旨在探讨日粮中添加具有不同脂肪酸特征的油籽对育肥绵羊脂肪组织中脂肪酸组成的影响,为研究通过日粮调控手段提高绵羊肉中功能性脂肪酸的含量,改善羊肉品质提供理论依据。试验采用单因子完全随机组区设计,选用40只体重为(33.73±3.65)kg、生理状态相似的杂交公羊(小尾寒羊×蒙古羊)随机分为4个组,每组10只。其中对照组采用基础日粮(不含油籽),以豆粕和棉粕代替油籽,试验组分别饲喂含10%油菜籽、10%葵花籽、10%胡麻籽的日粮。预饲期10 d,正试期35 d。试验结果表明:日粮中添加油菜籽、葵花籽和胡麻籽后,葵花籽组和胡麻籽组显著提高了育肥羊脂肪组织中多不饱和脂肪酸(PUFA)含量(P<0.05),油菜籽组相比于对照组有一定的增加,但差异不显著(P>0.05),不饱和脂肪酸(USFA)含量油菜籽组和葵花籽组极显著高于对照组和胡麻籽组(P<0.01),而试验组饱和脂肪酸(SFA)含量均有不同程度的降低,存在差异极显著(P<0.01)的情况。n-6多不饱和脂肪酸/n-3多不饱和脂肪酸(n-6/n-3)为胡麻籽组(4.49)<油菜籽组(8.77)<对照组(13.92)<葵花籽组(17.40),组间差异极显著(P<0.01),胡麻籽组对于改善n-6/n-3效果最好。在本试验条件下,日粮中添加油菜籽和葵花籽可以极显著提高脂肪组织中不饱和脂肪酸的含量,胡麻籽对于改善PUFA及n-3脂肪酸的含量效果最好。