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赤爱胜蚯蚓(Eisenia Foetida Sarigny)纤溶酶的研究——Ⅲ.消化道吸收的研究 被引量:4
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作者 张云湖 杨志兴 +3 位作者 姚汉炳 杨明 董桂华 赵克强 《生物技术》 CAS CSCD 1993年第5期14-16,共3页
本文通过用^(125)I(NaI^(125)标记的纤溶酶所作的家兔消化道的吸收实验研究及用3P87药代动力学程序的微机处理,确定了纤溶酶的消化道吸收的药时曲线;在血液中的消除半衰期为137分钟;消除速率常数为0.00506立升/分钟;峰浓度时间约为170... 本文通过用^(125)I(NaI^(125)标记的纤溶酶所作的家兔消化道的吸收实验研究及用3P87药代动力学程序的微机处理,确定了纤溶酶的消化道吸收的药时曲线;在血液中的消除半衰期为137分钟;消除速率常数为0.00506立升/分钟;峰浓度时间约为170分钟和其生物利用度约为39%的结果。为使纤溶酶制成肠溶溶栓酶片提供了临床应用研究的依据。 展开更多
关键词 生物利用度 生化药物 纤溶酶
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赤子爱胜蚯蚓(Eisenia Foetida)纤溶酶的研究,Ⅳ纤溶酶组成成分的分子量测定 被引量:1
2
作者 张云湖 杨志兴 +3 位作者 董桂华 赵克强 张凤芹 杨明 《生物技术》 CAS CSCD 1993年第6期17-20,共4页
本文报告了用SephadexG—100柱层析法纯化样品和聚丙烯酰胺凝胶电泳测定纤溶酶组成成分的分子量的研究结果。经柱层析分离的纤溶酶电泳测定分子量结果为11条带,分别为68,000、49,000、42,000、41,000、36,000、29,000、27,000、26,000、... 本文报告了用SephadexG—100柱层析法纯化样品和聚丙烯酰胺凝胶电泳测定纤溶酶组成成分的分子量的研究结果。经柱层析分离的纤溶酶电泳测定分子量结果为11条带,分别为68,000、49,000、42,000、41,000、36,000、29,000、27,000、26,000、25,000、21,000和12,000。而纤溶酶的主要组分集中在21.000与42.000之间,为其活性组分。 展开更多
关键词 蚯蚓纤溶酶 赤子爱胜蚯蚓 化学成分
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纳豆激酶基因的克隆与表达 被引量:43
3
作者 张淑梅 张云湖 +3 位作者 赵晓祥 李晶 金红星 田洁萍 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第6期912-915,共4页
利用PCR方法从分泌纳豆激酶的枯草杆菌基因组DNA 中扩增得到了纳豆激酶基因,并测定其核苷酸序列.利用基因重组技术构建了纳豆激酶基因的表达载体,并在大肠杆菌中进行了表达.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳表明,表达蛋白占菌体... 利用PCR方法从分泌纳豆激酶的枯草杆菌基因组DNA 中扩增得到了纳豆激酶基因,并测定其核苷酸序列.利用基因重组技术构建了纳豆激酶基因的表达载体,并在大肠杆菌中进行了表达.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳表明,表达蛋白占菌体蛋白的15.2% ,琼脂糖-纤维蛋白平板法测出表达产物具有溶解血栓活性. 展开更多
关键词 纳豆激酶基因 序列 表达 克隆 溶栓药
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一种具有纤溶活性的枯草杆菌蛋白激酶的初步研究 被引量:13
4
作者 杨志兴 张淑梅 +3 位作者 张云湖 赵晓祥 李荣萍 李晶 《药物生物技术》 CAS CSCD 1996年第3期133-136,共4页
从纳豆和豆豉中分离、筛选出2株能产生明显纤溶活性的枯草杆菌蛋白激酶(简称枯激酶)的枯草杆菌菌株(Bacillussubtilis)。并用两种柱层析(SewphadexG-100和bephaerylS-200)纯化出纯... 从纳豆和豆豉中分离、筛选出2株能产生明显纤溶活性的枯草杆菌蛋白激酶(简称枯激酶)的枯草杆菌菌株(Bacillussubtilis)。并用两种柱层析(SewphadexG-100和bephaerylS-200)纯化出纯的酶。测定出其分子量30200D,PI为8.6±0.3,同时进行了家兔的动物实验。结果表明对家兔实验性血栓有显著的溶解作用。在一定范围内,表明有很好的量-效关系。因此枯激酶的深入研究,有可能开发成一种新的溶栓药物。 展开更多
关键词 枯草杆菌 溶栓作用 蛋白激酶 纤溶活性
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一种具有纤溶活性的枯草杆菌蛋白激酶的研究──Ⅰ高产酶菌株的筛选与鉴定 被引量:28
5
作者 李荣萍 李晶 +3 位作者 赵晓祥 张淑梅 张云湖 杨志兴 《生物技术》 CAS CSCD 1996年第3期21-23,共3页
本文主要阐述了一种具有纤溶活性的枯草杆菌(Bacillussubtilis)蛋白激酶产生菌株的筛选与鉴定的研究结果。作者从初筛的12株Bacillussublilis菌中,通过对固体发酵和液体发酵所产生的枯草杆菌蛋白... 本文主要阐述了一种具有纤溶活性的枯草杆菌(Bacillussubtilis)蛋白激酶产生菌株的筛选与鉴定的研究结果。作者从初筛的12株Bacillussublilis菌中,通过对固体发酵和液体发酵所产生的枯草杆菌蛋白激酶,用琼脂糖-纤维蛋白平板法测其活性,经比较不同菌株的活性,筛选出两株高产酶菌株:B.subtilisHW—12和B.subtilisHW—3。同时对菌体和菌落形态特点、生理生化反应进行了鉴定,认为B.SubtilisHW-12菌株可用来做为发酵生产该酶的菌种。 展开更多
关键词 枯草杆菌 蛋白激酶 高产酶菌株 发酵微生物
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精子作载体的转基因鱼研究 被引量:14
6
作者 李晶 李莹 +4 位作者 赵晓祥 张淑梅 张云湖 姜凯波 杨志兴 《生物技术》 CAS CSCD 1994年第3期20-22,共3页
本文报道了以精子为载体将美洲拟蝶抗冻蛋白基因导入罗非鱼卵,构建转基因鱼的方法,此法简单易行。斑点杂文和SouthernBlot杂交结果表明,外源基因的整合率为18.1%,与其它方法构建转基因鱼的外源基因整合率相近。
关键词 精子 载体 转基因鱼 遗传工程
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枯草芽孢杆菌生物拌种剂对玉米病害的田间防效研究 被引量:6
7
作者 王玉霞 张先成 +4 位作者 赵晓宇 李晶 张淑梅 孟利强 张云湖 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期81-82,共2页
目的:明确枯草芽孢杆菌生物拌种剂对玉米病虫害的防病和增产效果,为推广应用提供科学依据。方法:将2种杀虫剂分别加入枯草芽孢杆菌生物拌种剂中充分摇匀后,按肥种比1∶50比例均匀混拌玉米种子,阴干后播种。结果:枯草芽孢杆菌生物拌... 目的:明确枯草芽孢杆菌生物拌种剂对玉米病虫害的防病和增产效果,为推广应用提供科学依据。方法:将2种杀虫剂分别加入枯草芽孢杆菌生物拌种剂中充分摇匀后,按肥种比1∶50比例均匀混拌玉米种子,阴干后播种。结果:枯草芽孢杆菌生物拌种剂对玉米根腐病防效达80.1%-96.7%,对玉米黑穗病的防效达74.6%-83.3%,对地下害虫防效达66.7%-77.8%,增产率达8.7%-15.7%。结论:该生物拌种剂可以大面积示范推广使用。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 生物拌种剂 玉米病害 防病效果
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一株具有纤溶活性的枯草杆菌(Bacillus Subtilis)的研究——液体发酵条件的选择 被引量:27
8
作者 傅俐 李荣萍 +4 位作者 李晶 张淑梅 张云湖 赵晓祥 杨志兴 《生物工程进展》 CSCD 1997年第3期31-33,共3页
本文主要报告了,以BacilusSubtilisHW-12为试验菌株,在液体发酵中,所确定的发酵条件为:碳源是木糖,氮源是大豆胰蛋白胨,发酵液pH7.0,培养温度37℃,培养时间96小时。在这样的发酵条件下。
关键词 枯草杆菌 尿激酶 发酵
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赤爱胜蚯蚓(Eisenia Foetida Sarigny)纤溶酶的研究Ⅱ药理学作用 被引量:6
9
作者 杨志兴 杨学成 +9 位作者 张云湖 马元生 李洪超 刘伟民 赵晓祥 姜凯波 张昕 赵克强 董桂华 张凤琴 《生物技术》 CAS CSCD 1992年第1期15-18,共4页
对蚯蚓纤溶酶进行了哈白兔体内、体外溶栓、抗凝试验,分别以蛇毒抗栓酶和尿激酶不同剂量组作对照试验,均有显著的溶解血栓功能.另外,蚯蚓纤溶酶溶解天然血块,对纤维蛋白原含量及凝血时间影响的药理学试验,结果证明蚯蚓纤溶酶具有溶栓与... 对蚯蚓纤溶酶进行了哈白兔体内、体外溶栓、抗凝试验,分别以蛇毒抗栓酶和尿激酶不同剂量组作对照试验,均有显著的溶解血栓功能.另外,蚯蚓纤溶酶溶解天然血块,对纤维蛋白原含量及凝血时间影响的药理学试验,结果证明蚯蚓纤溶酶具有溶栓与抗凝作用. 展开更多
关键词 蚯蚓纤溶酶 溶血栓 药理
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Screening of Two Biocontrol Strains of Bacillus subtilis against Ginseng Soil-borne Disease and Their Antifungal Activities 被引量:5
10
作者 于丽萍 姜竹 +2 位作者 王玉霞 张云湖 李晶 《Plant Diseases and Pests》 CAS 2011年第2期16-18,50,共4页
[ Objective] The paper was to obtain biocontrol strains with good control effects against ginseng soil-borne disease through screening. [ Method] Dilu- tion plate method and plate confrontation culture method were use... [ Objective] The paper was to obtain biocontrol strains with good control effects against ginseng soil-borne disease through screening. [ Method] Dilu- tion plate method and plate confrontation culture method were used to isolate and screen biocontrol bacteria from the rhizosphere soil of diseased ginseng. The strains were identified through morphology, physiological and biochemical characteristics and 16S rDNA. [ Result ] With Rhizoctonia solani, Fusarium oxysporum and Fu- sarium solani as the indicator strains, two biocontrol strains B59 and X1 with strong antagonistic effects were screened from the rhizosphere soil of diseased ginseng in Tieli farm of Heilongjiang Province, and they were identified to be Bacillus subtilis. The inhibition rates of two biocontrol strains against eight different fungi were all greater than 90%. The primary study indicated that B59 and X1 strains could secrete antifungal active substances. [ Conclusion] Two biocontrol Bacillus subti- lis strains 1359 and X1 all had strong antagonistic effect against ginseng soil-borne disease, which had certain potential for development and utilization. 展开更多
关键词 Ginseng soil-borne disease Bacillus subtilis SCREENING Antifungal activity
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赤爱胜蚯蚓(EisenibaFoentidaSarigng)纤溶酶的研究──Ⅵ.蚯蚓溶栓酶对家兔血栓溶解及大鼠实验性脑缺血的保护作用研究 被引量:9
11
作者 杨明 董桂华 +2 位作者 张凤琴 杨志兴 张云湖 《生物技术》 CAS CSCD 1995年第3期9-11,共3页
本文通过家兔及大鼠的动物实验证明了,蚯蚓溶栓酶不仅具有明显地抑制血栓形成的作用,更具有很强的血栓溶解作用,其作用性质为激酶和溶酶两种功能。同时证明溶栓酶能明显缩小大脑皮层因结扎大脑中动脉后产生的梗塞灶。从而认为:蚯蚓... 本文通过家兔及大鼠的动物实验证明了,蚯蚓溶栓酶不仅具有明显地抑制血栓形成的作用,更具有很强的血栓溶解作用,其作用性质为激酶和溶酶两种功能。同时证明溶栓酶能明显缩小大脑皮层因结扎大脑中动脉后产生的梗塞灶。从而认为:蚯蚓溶栓酶是一种很有效的溶栓药物。 展开更多
关键词 蚯蚓溶栓酶 赤爱胜蚯蚓 纤溶酶 药理 脑缺血
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大麻哈鱼基因文库的构建及其生长激素基因的克隆 被引量:5
12
作者 杨学成 杨志兴 +5 位作者 刘伟民 毕吉威 赵晓祥 姜凯波 张云湖 李洪超 《生物技术》 CAS CSCD 1991年第1期13-16,共4页
本文主要论述了黑龙江省特有鱼种,大麻哈鱼全基因文库的构建方法以及从所构建的1.9×10^(?)噬菌体成斑单位/ugDNA基因文库中克隆出生长激素基因片段的研究结果,作者使用DM-BL3入噬菌为载体,将大麻哈鱼肝总DNA的15-20Kb片段重组到载... 本文主要论述了黑龙江省特有鱼种,大麻哈鱼全基因文库的构建方法以及从所构建的1.9×10^(?)噬菌体成斑单位/ugDNA基因文库中克隆出生长激素基因片段的研究结果,作者使用DM-BL3入噬菌为载体,将大麻哈鱼肝总DNA的15-20Kb片段重组到载体中,再包装成新的重组噬菌体,以含虹鳟鱼生长激素DNA部分序列的PAF51为探针,经[^(12)P]dCTP标记后,与噬菌斑杂交,自显影,获得3个阳性斑,复筛获得90%以上阳性斑,酶切回收生长激素基因片段,实验证明,已成功地获得大麻哈鱼生长激素基因片段,可供进一步亚克隆或转移研究使用。 展开更多
关键词 大麻哈鱼 基因文库 基因克隆
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赤爱胜蚯蚓(Eiseniba Foetida Sarigng)纤溶酶的研究──■蚯蚓纤溶酶活性测定方法的研究 被引量:11
13
作者 杨明 金玉芝 +4 位作者 张云湖 杨志兴 董桂华 张凤琴 赵克强 《生物技术》 CAS CSCD 1994年第4期42-44,共3页
本文主要阐述了蚯蚓纤溶酶活性(效价)的测定方法的研究结果。通过对气泡上升法,精氨酸脂酶法(TAME法)和纤维蛋白平板法测定蚯蚓纤溶酶活性的比较,最后认为纤维蛋白平板法能够客观地表示出纤溶酶溶解血栓的能力,虽然方法较为... 本文主要阐述了蚯蚓纤溶酶活性(效价)的测定方法的研究结果。通过对气泡上升法,精氨酸脂酶法(TAME法)和纤维蛋白平板法测定蚯蚓纤溶酶活性的比较,最后认为纤维蛋白平板法能够客观地表示出纤溶酶溶解血栓的能力,虽然方法较为复杂,难度较大,但准确性强,结果可靠。TAME法由于受样品中混有杂蛋白酶其稳定性受到一定的影响,但此法简便易行可作为中间产品的快速检测。文中详细地介绍了纤维蛋白平板法。 展开更多
关键词 纤维蛋白 平板法 效价 蚯蚓纤溶酶
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赤爱胜蚯蚓(Eisenib Foetide Sorigng)纤溶酶的研究 1.提取纯化和生物化学性质 被引量:2
14
作者 杨志兴 杨学成 +7 位作者 张云湖 马元生 李洪超 刘伟民 赵晓祥 姜凯波 赵克强 董桂华 《生物技术》 CAS CSCD 1991年第5期22-25,共4页
采用35%和65%的饱和硫酸铵分级沉淀法,获得蚯蚓纤溶酶活性蛋白,并对其纤溶酶的分子量,纤溶酶对其底物专一性,温度对纤溶酶的影响,纤溶酶最适pH值和pH值稳定性,纤溶酶的等电点,抑制剂对蚓蚯纤溶酶的影响几方面的测定,从而确定了蚯蚓纤... 采用35%和65%的饱和硫酸铵分级沉淀法,获得蚯蚓纤溶酶活性蛋白,并对其纤溶酶的分子量,纤溶酶对其底物专一性,温度对纤溶酶的影响,纤溶酶最适pH值和pH值稳定性,纤溶酶的等电点,抑制剂对蚓蚯纤溶酶的影响几方面的测定,从而确定了蚯蚓纤溶酶的生物化学性质。 展开更多
关键词 蚯蚓 纤溶酶 赤爱胜蚯蚓 提取
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美洲鲽抗冻蛋白基因的亚克隆及构建转基因鱼的表达载体 被引量:2
15
作者 赵晓祥 李晶 +3 位作者 李荣萍 张淑梅 张云湖 杨志兴 《生物技术》 CAS CSCD 1995年第4期34-36,41,共4页
用限制性内切酶PStⅠ部分消解含有美洲鲽抗冻蛋白基因的pCT5质粒,分离得到324bp的片段,将此片段亚克隆到pUC19质粒中,筛选到pUC-AF重组子。从pUC-AF重组子中,用BamHⅠ和HirdⅢ切下324hp... 用限制性内切酶PStⅠ部分消解含有美洲鲽抗冻蛋白基因的pCT5质粒,分离得到324bp的片段,将此片段亚克隆到pUC19质粒中,筛选到pUC-AF重组子。从pUC-AF重组子中,用BamHⅠ和HirdⅢ切下324hp的抗冻蛋白基因,再重组到含有SV40病毒启动子的PKSV-10的载体中,构建成转基因鱼的表达载体,此表达载体可用于鱼的基因转移的研究。 展开更多
关键词 亚克隆 抗冻蛋白基因 表达载体 美洲鲽 转基因鱼
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抗冻蛋白结构基因片段的克隆 被引量:2
16
作者 李荣萍 李晶 +3 位作者 赵晓祥 张淑梅 张云湖 杨志兴 《生物技术》 CAS CSCD 1996年第1期10-11,共2页
为了研究和开发利用抗冻蛋白或多肽,木文通过聚合酶链式反应(PCR)合成了抗冻蛋白110bp的结构基因片段,然后将该基因片段克隆到大肠杆菌质粒载体P(Bluescript)Ⅱks+/-上,获得了重组质粒,经酶切证明,获... 为了研究和开发利用抗冻蛋白或多肽,木文通过聚合酶链式反应(PCR)合成了抗冻蛋白110bp的结构基因片段,然后将该基因片段克隆到大肠杆菌质粒载体P(Bluescript)Ⅱks+/-上,获得了重组质粒,经酶切证明,获得的重组质粒中含有抗冻蛋白结构基因片段,以供该基因在大肠杆菌或酵母中表达抗冻蛋白。 展开更多
关键词 抗冻蛋白 结构基因 克隆
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枯草芽孢杆菌B29菌株对黄瓜植株的诱导抗性 被引量:2
17
作者 张先成 张云湖 +1 位作者 赵晓宇 李晶 《武夷科学》 2009年第1期24-29,共6页
对枯草芽孢杆菌B29菌株诱导黄瓜根系相关防御反应酶活性的变化趋势进行了研究,结果表明该菌株接种能够诱导黄瓜根系苯丙氨酸解胺酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)活性有不同程度的提高,尤其在挑战接种病原菌后,3种防御反应酶... 对枯草芽孢杆菌B29菌株诱导黄瓜根系相关防御反应酶活性的变化趋势进行了研究,结果表明该菌株接种能够诱导黄瓜根系苯丙氨酸解胺酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)活性有不同程度的提高,尤其在挑战接种病原菌后,3种防御反应酶活性上升的幅度比单独接种要高,说明挑战接种有利于诱导抗性的表达。结合枯草芽孢杆菌B29菌株对黄瓜枯萎病的田间防效试验,可以说明诱导抗性是其生防作用机制之一。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 诱导抗性 防御酶
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虹鳟鱼金属硫蛋白启动子的体外扩增、克隆及其序列分析 被引量:1
18
作者 赵晓祥 张淑梅 +3 位作者 李晶 张云湖 金红星 王佳龙 《生物技术》 CAS CSCD 2000年第1期1-3,共3页
以含有虹鳟鱼金属硫蛋白基因的质粒DNA为模板 ,以合成的两段 32个寡聚核苷酸为引物 ,经过PCR扩增 ,合成了 4 33bp的片段 ,把其克隆到pBL -CAT载体中 ,序列分析和限制酶切图谱表明所克隆的虹鳟鱼金属硫蛋白启动子含有 4 33bp ,含有TATA和... 以含有虹鳟鱼金属硫蛋白基因的质粒DNA为模板 ,以合成的两段 32个寡聚核苷酸为引物 ,经过PCR扩增 ,合成了 4 33bp的片段 ,把其克隆到pBL -CAT载体中 ,序列分析和限制酶切图谱表明所克隆的虹鳟鱼金属硫蛋白启动子含有 4 33bp ,含有TATA和CAAT序列 ,与Hong报导的鳟鱼金属硫蛋白启动子的序列比较 ,其核苷酸的同源率为 10 0 %。 展开更多
关键词 虹鳟鱼 金属硫蛋白 启动子 PCR 克隆 序列分析
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鲤鱼生长激素基因工程菌的发酵研究 被引量:1
19
作者 李晶 张云湖 +5 位作者 赵晓祥 张淑梅 李荣萍 阎淑芳 张凤琴 张季妹 《生物技术》 CAS CSCD 1998年第6期32-35,共4页
对表达鲤鱼生长激素的大肠杆菌工程菌的发酵条件进行了详细的研究,探讨了发酵条件对工程菌外源蛋白表达量的影响,优化了影响工程菌发酵的各种条件,形成了一套工程菌小量发酵表达外源蛋白的工艺。
关键词 工程菌发酵 外源蛋白 高表达
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含人抗体恒定区基因的酵母表达质粒的构建 被引量:1
20
作者 杨志兴 杨学成 +5 位作者 王革伏 刘伟民 张云湖 赵晓祥 姜凯波 李洪超 《生物技术》 CAS CSCD 1992年第2期10-12,9,共4页
本文主要报告了用以表达人-鼠嵌合抗体基因的酵母表达载体的构建、筛选与鉴定的研究结果.作者利用高度表达的酵母质粒YEP_(51),与含人抗体恒定区基因的pSV_2gptHuG_4两个质粒为材料,构建成可以供表达任何小鼠单克隆抗体的可变区基因,以... 本文主要报告了用以表达人-鼠嵌合抗体基因的酵母表达载体的构建、筛选与鉴定的研究结果.作者利用高度表达的酵母质粒YEP_(51),与含人抗体恒定区基因的pSV_2gptHuG_4两个质粒为材料,构建成可以供表达任何小鼠单克隆抗体的可变区基因,以构成嵌合的人-鼠抗体基因,用酶切回收插入DNA片段、原位和斑点杂交法对重组质粒予以鉴定和筛选,获得了pYEP-H重组的酵母表达载体. 展开更多
关键词 嵌合抗体基因 酵母质粒
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