目的研究体外低氧诱导小鼠心脏成纤维细胞（cardiac fibroblasts，CFs）向心脏肌成纤维细胞（cardiac myofibroblasts，CMFs）表型转换过程中，促分裂素原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases，MAPK）信号通路与Smad2／3...目的研究体外低氧诱导小鼠心脏成纤维细胞（cardiac fibroblasts，CFs）向心脏肌成纤维细胞（cardiac myofibroblasts，CMFs）表型转换过程中，促分裂素原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases，MAPK）信号通路与Smad2／3蛋白磷酸化的关系。方法新生小鼠第1代CFs低氧（37℃、3％O2）无血清培养48h，免疫荧光检测α-SMA蛋白；新生小鼠CFs给予3种MAPK（ERK、JNK和p38）特异性抑制剂常氧培养1h，进行低氧培养30min，免疫印迹检测ERK、JNK、p38和Smad2／3蛋白磷酸化水平。结果①低氧显著上调新生小鼠CFs中α-SMA蛋白的表达；②低氧能显著地促进ERK、JNK和P38蛋白磷酸化，PD98059（ERK特异性抑制剂）、SP600125（JNK特异性抑制剂）和SB203580（P38特异性抑制剂）能抑制低氧诱导的ERK、JNK和P38蛋白的磷酸化；③PD98059（ERK特异性抑制剂）和SP600125（JNK特异性抑制剂）能抑制低氧诱导的Smad2／3蛋白的磷酸化，SB203580（P38特异性抑制剂）无此作用。结论①低氧可诱导小鼠CFs细胞发生表型转化为CMFs；②ERK和JNK信号通路能调控Smad2／3蛋白的磷酸化表达；③MAPK和Smad信号通路可能参与低氧诱导的小鼠CFs细胞的表型转化。展开更多
文摘目的研究体外低氧诱导小鼠心脏成纤维细胞（cardiac fibroblasts，CFs）向心脏肌成纤维细胞（cardiac myofibroblasts，CMFs）表型转换过程中，促分裂素原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases，MAPK）信号通路与Smad2／3蛋白磷酸化的关系。方法新生小鼠第1代CFs低氧（37℃、3％O2）无血清培养48h，免疫荧光检测α-SMA蛋白；新生小鼠CFs给予3种MAPK（ERK、JNK和p38）特异性抑制剂常氧培养1h，进行低氧培养30min，免疫印迹检测ERK、JNK、p38和Smad2／3蛋白磷酸化水平。结果①低氧显著上调新生小鼠CFs中α-SMA蛋白的表达；②低氧能显著地促进ERK、JNK和P38蛋白磷酸化，PD98059（ERK特异性抑制剂）、SP600125（JNK特异性抑制剂）和SB203580（P38特异性抑制剂）能抑制低氧诱导的ERK、JNK和P38蛋白的磷酸化；③PD98059（ERK特异性抑制剂）和SP600125（JNK特异性抑制剂）能抑制低氧诱导的Smad2／3蛋白的磷酸化，SB203580（P38特异性抑制剂）无此作用。结论①低氧可诱导小鼠CFs细胞发生表型转化为CMFs；②ERK和JNK信号通路能调控Smad2／3蛋白的磷酸化表达；③MAPK和Smad信号通路可能参与低氧诱导的小鼠CFs细胞的表型转化。
