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油茶优良无性系子叶体细胞胚植株再生 被引量:42
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作者 张智俊 罗淑萍 +2 位作者 李亚玲 毕方铖 谭晓风 《植物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第B08期43-49,共7页
以油茶优良无性系‘湘林4号’子叶为外植体,采用附加不同种类激素的MS培养基对其进行组织培养实验。研究结果表明:子叶形成胚性愈伤组织的最适合培养基为MS+2.0mg.L-12,4-D+1.0mg.L-1KT;经胚状体诱导产生不定芽分化的最适合培养基为MS+2... 以油茶优良无性系‘湘林4号’子叶为外植体,采用附加不同种类激素的MS培养基对其进行组织培养实验。研究结果表明:子叶形成胚性愈伤组织的最适合培养基为MS+2.0mg.L-12,4-D+1.0mg.L-1KT;经胚状体诱导产生不定芽分化的最适合培养基为MS+2.5mg.L-16-BA+1.5mg.L-1IAA;油茶优良无性系的生根培养基以MS+7.0mg.L-1NAA最适;通过对植株再生过程中各阶段的组培材料进行RAPD鉴定分析表明,DNA水平上未发现变异,说明通过组织培养建立的油茶优良无性系再生植株同原无性系无明显差别,最终获得的组培苗木能够保持原无性系的优良特性,其遗传是稳定的。 展开更多
关键词 油茶 无性系 体细胞胚 组织培养 优良无性系 植株再生 子叶 MS培养基 胚性愈伤组织 不定芽分化
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油茶子叶体细胞胚形成的细胞学观察 被引量:8
2
作者 张智俊 金晓玲 +2 位作者 罗淑萍 李亚玲 田兴军 《植物生理学通讯》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期570-572,共3页
以油茶子叶块为外植体,在附加2.0 mgL-1 2,4-D和1.0 mgL-1 KT的MS培养基上进行培养,观察诱导产生的体细胞胚性愈伤组织细胞学结构。结果表明:油茶体细胞胚可直接起源于表皮或近表皮的单细胞原胚或者多细胞团。其中,单细胞原胚先分裂形... 以油茶子叶块为外植体,在附加2.0 mgL-1 2,4-D和1.0 mgL-1 KT的MS培养基上进行培养,观察诱导产生的体细胞胚性愈伤组织细胞学结构。结果表明:油茶体细胞胚可直接起源于表皮或近表皮的单细胞原胚或者多细胞团。其中,单细胞原胚先分裂形成二细胞原胚,二细胞原胚再进一步分裂后聚集形成多细胞团,最终经过球形胚、梨形胚、心形胚发育形成一个完整的体细胞胚。 展开更多
关键词 体细胞胚 油茶 子叶 细胞学观察 MS培养基 胚性愈伤组织 外植体 单细胞 胚发育 分裂
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同时提取油茶中DNA和RNA的简便方法 被引量:22
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作者 张智俊 谭晓风 陈永忠 《生物技术》 CAS CSCD 2003年第3期23-24,共2页
介绍了一种以CTAB提取方法为基础 ,结合其它DNA和RNA提取方法 ,经反复实验建立的一种同时提取油茶DNA和RNA的简便方法。该方法能有效地去除植物组织中酚类和多糖等次生物质的影响 ,所得到的DNA和RNA纯度高 ,完整性好 ,可以用于进一步的... 介绍了一种以CTAB提取方法为基础 ,结合其它DNA和RNA提取方法 ,经反复实验建立的一种同时提取油茶DNA和RNA的简便方法。该方法能有效地去除植物组织中酚类和多糖等次生物质的影响 ,所得到的DNA和RNA纯度高 ,完整性好 ,可以用于进一步的如DNA分析、mRNA的分离、RT -PCR、构建cDNA文库和基因表达分析等实验。 展开更多
关键词 油茶 DNA RNA 提取方法 CTAB
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哈密瓜转ACC脱氨酶基因再生植株的获得 被引量:13
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作者 张智俊 罗淑萍 +1 位作者 廖康 赵长生 《上海农业学报》 CSCD 2002年第2期10-14,共5页
ACC脱氨酶基因表达产物具有减少植物乙烯合成的作用 ,从而达到果实保鲜耐贮的目的。用农杆菌侵染三种哈密瓜 (皇后、迦师瓜、红蜜脆 )培养 8d的子叶块 ,接种在MS附加BA1.0mg/L ,Kana(卡那霉素 ) 75mg/L和Amp(氨苄青霉素 ) 2 0 0mg/L的... ACC脱氨酶基因表达产物具有减少植物乙烯合成的作用 ,从而达到果实保鲜耐贮的目的。用农杆菌侵染三种哈密瓜 (皇后、迦师瓜、红蜜脆 )培养 8d的子叶块 ,接种在MS附加BA1.0mg/L ,Kana(卡那霉素 ) 75mg/L和Amp(氨苄青霉素 ) 2 0 0mg/L的培养基上 ,在温度 (2 7± 1)℃、光照 2 0 0 0lx条件下 ,经 2 0d左右培养出现不定芽的分化 ;继续将这些不定芽接种在MS附加IBA0 .1mg/L ,Kana 5 0mg/L和Amp 2 0 0mg/L的培养基上 ,诱导根的产生 ,最终获得了转化植株。通过对转化植株的PCR扩增检测证明 ,1kb的ACC脱氨酶基因已经整合到哈密瓜基因组中。 展开更多
关键词 哈密瓜 ACC脱氢酶 再生植株 转基因 植株再生
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油茶总RNA及mRNA的分离与纯化 被引量:26
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作者 张智俊 谭晓风 陈永忠 《中南林学院学报》 CSCD 2003年第2期76-78,共3页
 利用改良的CTAB法,从富含酚类糖类等次生物质油茶叶片中分离出总RNA,并从总RNA中,通过两次过Oligo(dT)柱分离纯化得到mRNA.实验结果证明:所提取的RNA和mRNA完整,质量较高,并应用到油茶cDNA文库的构建.
关键词 油茶 总RNA MRNA 分离 纯化 改良CTAB法 提取 CDNA文库
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抗生素对甜瓜植株再生的影响 被引量:13
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作者 张智俊 罗淑萍 廖 康 《中国西瓜甜瓜》 CAS 2002年第1期6-7,共2页
在建立以农杆菌介导的表达ACC脱氨酶基因的甜瓜遗传转化体系过程中,进行了抗生素影响甜瓜植株再生试验。结果表明:卡那霉素对甜瓜愈伤组织、不定芽分化及生根均有明显的抑制作用,75mg/L的卡那霉素可作为今后甜瓜遗传转化筛选转化体... 在建立以农杆菌介导的表达ACC脱氨酶基因的甜瓜遗传转化体系过程中,进行了抗生素影响甜瓜植株再生试验。结果表明:卡那霉素对甜瓜愈伤组织、不定芽分化及生根均有明显的抑制作用,75mg/L的卡那霉素可作为今后甜瓜遗传转化筛选转化体和非转化体的临界浓度;200-400mg/L浓度范围内的氨苄青霉素能够很好地抑制农杆菌过度生长造成的污染,但对甜瓜植株再生的影响较小。 展开更多
关键词 甜瓜 抗生素 植株再生 农杆菌介导 ACC脱氨酶 遗传转化体系
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茂原链霉菌谷氨酰胺转胺酶基因克隆、序列分析及原核表达 被引量:2
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作者 张智俊 罗淑萍 +2 位作者 田兴军 李亚玲 杨昌林 《南京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期88-95,共8页
以茂原链霉菌(Streptomyces m obaraensis)的基因组DNA为模板,利用PCR的方法扩增出谷氨酰胺转胺酶(Transglutam inase,TGase)的完整基因片段.序列分析结果表明,该片段全长1 246 bp,包含一个完整的ORF,长度1 146 bp,编码395 aa,分子量为4... 以茂原链霉菌(Streptomyces m obaraensis)的基因组DNA为模板,利用PCR的方法扩增出谷氨酰胺转胺酶(Transglutam inase,TGase)的完整基因片段.序列分析结果表明,该片段全长1 246 bp,包含一个完整的ORF,长度1 146 bp,编码395 aa,分子量为44 kD左右.该基因的核酸序列及推导的氨基酸序列同已知微生物来源的若干TGase相比,序列相似性均很高,并且发现与酶催化活性有关的一些motif,如酰胺化位点等;在此基础上,又进一步对其二级结构进行分析并完成了TGase三维结构的建模.将编码TGase酶的基因片段插入到原核表达载体pQE30Xa中,并转化大肠杆菌(E.coliJM109).SDS-PAGE结果表明,经IPTG诱导后该基因得到表达,表达产物的酶活为2.2 U/mL. 展开更多
关键词 茂原链霉菌 谷氨酰胺转胺酶 基因克隆 序列分析 表达
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基因表达快速分析新技术-MPSS简介 被引量:2
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作者 张智俊 罗淑萍 谭晓风 《生物技术》 CAS CSCD 2003年第2期40-41,共2页
介绍了一种新的基因表达快速分析技术 -MPSS技术的基本原理、技术路线及其优点和应用。
关键词 基因表达 快速分析技术 MPSS技术 技术原理 技术路线 应用 大量平行测序技术
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哈密瓜组织培养和离体快繁 被引量:2
9
作者 张智俊 罗淑萍 《植物生理学通讯》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期231-231,共1页
关键词 哈密瓜 组织培养 离体快繁 子叶 生根 移栽
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猕猴桃果实成熟生理和贮藏保鲜研究进展 被引量:11
10
作者 张智俊 谭晓风 罗淑萍 《河北林果研究》 2002年第2期173-179,共7页
从猕猴桃果实成熟生理的规律入手 ,分析了影响猕猴桃贮运性的因素 ,总结了国内外近年来各种贮藏保鲜技术 ,剖析了我国目前猕猴桃贮藏保鲜方面存在的问题 ,提出了依靠生物技术培育耐贮品种 ,配合各种常规保鲜技术来进行猕猴桃贮藏保鲜的... 从猕猴桃果实成熟生理的规律入手 ,分析了影响猕猴桃贮运性的因素 ,总结了国内外近年来各种贮藏保鲜技术 ,剖析了我国目前猕猴桃贮藏保鲜方面存在的问题 ,提出了依靠生物技术培育耐贮品种 ,配合各种常规保鲜技术来进行猕猴桃贮藏保鲜的解决策略。 展开更多
关键词 猕猴桃 果实成熟生理 贮藏保鲜 研究进展
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茂原链霉菌谷氨酰胺转胺酶序列分析及三维结构建模 被引量:2
11
作者 张智俊 田兴军 +1 位作者 李亚玲 罗淑萍 《生物信息学》 2005年第3期97-100,120,共5页
利用DNASTAR、VectorNTI9、SignalP等生物信息学平台对茂原链霉菌(Streptomyces mobaraensis)谷氨酰胺转胺酶(TGase)进行了序列分析和三维结构建模。结果表明:茂原链霉菌TGase同已报道其他微生物来源的TGase有较高的同源性,无信号肽,存... 利用DNASTAR、VectorNTI9、SignalP等生物信息学平台对茂原链霉菌(Streptomyces mobaraensis)谷氨酰胺转胺酶(TGase)进行了序列分析和三维结构建模。结果表明:茂原链霉菌TGase同已报道其他微生物来源的TGase有较高的同源性,无信号肽,存在一个跨膜结构区,二级结构是由多个α螺旋、转角和少量β折叠构成。同时在一二级结构分析的基础上,利用同源建模的方法完成了三维结构的建模。 展开更多
关键词 序列分析 谷氨酰胺转胺酶 三维结构同源建模 茂原链霉菌
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用于SARS冠状病毒快速诊断的分子信标探针设计 被引量:2
12
作者 张智俊 李亚玲 田兴军 《生物信息学》 2004年第3期23-26,共4页
利用Genbank中已知SARS -Cov完整基因组信息 ,通过BeaconDesigner2 .1软件进行其分子信标探针设计 ,共找出 7条分子信标探针和相对应的引物 ,它们均分布在SARS -Cov基因组的保守区域 ,后经过软件评估和Blast搜索 ,证明所获得的 7条分子... 利用Genbank中已知SARS -Cov完整基因组信息 ,通过BeaconDesigner2 .1软件进行其分子信标探针设计 ,共找出 7条分子信标探针和相对应的引物 ,它们均分布在SARS -Cov基因组的保守区域 ,后经过软件评估和Blast搜索 ,证明所获得的 7条分子信标探针为SARS -Cov的特异性探针。这将为今后SARS 展开更多
关键词 SARS 分子信标探针 快速诊断
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石家庄市中小学体育场地场馆对外开放现状调查及对策研究 被引量:2
13
作者 张智俊 石晓圆 路致远 《沧州师范学院学报》 2016年第1期75-79,共5页
随着人们对健康的重视,对健身场所的需求也在增加,为了充分利用学校场地场馆资源,中小学体育场地场馆由过去单纯作为教师和学生享用的教学资源,逐渐发展为向社会公众开放的公共资源.对石家庄市区28所已开放体育场地的学校调查,总结石家... 随着人们对健康的重视,对健身场所的需求也在增加,为了充分利用学校场地场馆资源,中小学体育场地场馆由过去单纯作为教师和学生享用的教学资源,逐渐发展为向社会公众开放的公共资源.对石家庄市区28所已开放体育场地的学校调查,总结石家庄市中小学体育场地场馆对社会开放的现状及制约条件,提出了相应的建议. 展开更多
关键词 中小学 体育场地场馆 对外开放 现状 对策
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河北省普通高校开展软式排球的现状及发展对策研究 被引量:2
14
作者 张智俊 《沧州师范学院学报》 2013年第2期129-132,共4页
主要通过调查法对河北省普通高校开展软式排球的现状进行了调查,结果表明,软式排球在河北省普通高校引入得较早,但没有得到普及.提出了加快软式排球在河北省普通高校推广普及的对策.
关键词 软式排球 现状 推广普及 对策
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两种教学模式对排球技术教学的影响 被引量:1
15
作者 张智俊 《沧州师范学院学报》 2004年第1期72-73,共2页
通过两种教学模式的比较分析,分别找出二者的优缺点,并用技术考核达标成绩来验证说明,目的在于寻求新的教学模式,提高体育专业技术的教学质量,以适应当前体育教学改革的要求。
关键词 教学模式 排球教学 教学质量 教学改革 高等教育
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沧州市1-9年级软式排球开展现状的调查与研究 被引量:1
16
作者 张智俊 《沧州师范学院学报》 2014年第1期97-100,104,共5页
采用调查问卷的方式,对沧州市1-9年级开展软式排球的情况进行了调查,结果显示:1-9年级的学校都有软式排球器材,但是正式开设软式排球课,形成教学体系的却很少.分析了影响软式排球开展的因素,并提出了相应的发展对策.
关键词 沧州市 1-9年级 软式排球 现状 对策
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扁桃的栽培及研究概况 被引量:89
17
作者 李疆 胡芳名 +3 位作者 李文胜 成建红 陆婷 张智俊 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期346-350,共5页
扁桃(Amygdalus communis L.)属蔷薇科李亚科桃属扁桃亚属植物,为世界著名的干果树种,起源于中亚细亚,约6000年的栽培历史,大面积栽培始于19世纪后期。目前扁桃的引种栽培遍及美国、西班牙、希腊、意大利、土耳其等32个国家和地区,其中... 扁桃(Amygdalus communis L.)属蔷薇科李亚科桃属扁桃亚属植物,为世界著名的干果树种,起源于中亚细亚,约6000年的栽培历史,大面积栽培始于19世纪后期。目前扁桃的引种栽培遍及美国、西班牙、希腊、意大利、土耳其等32个国家和地区,其中美国的栽培面积及产量均居世界之首。在我国,栽培扁桃的分布和产区位于新疆的南部,目前的栽培面积约10000hm^2。2001年世界扁桃总产量为610769t,其中美国的年总产量为397000t,其产量的75%出口到40多个国家,创汇5.87亿美元。综合有关文献介绍了世界扁桃的分布、产业发展和我国扁桃的引种、栽培概况及国内外扁桃的研究进展情况。 展开更多
关键词 扁桃 栽培技术 分布 引种 生物学特性 品种选育
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谈21世纪高师体育专业学生的素质教育
18
作者 张智俊 曹毅 《沧州师范学院学报》 2003年第4期79-79,共1页
通过文献资料法、调查访问法、问卷调查法和十年的体育专业教学经验,对高师体育专业学生的素质教育提出一些观点和看法。
关键词 21世纪 高等师范院校 体育专业 素质教育 体育改革 师资队伍
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榉属植物总DNA提取方法研究 被引量:31
19
作者 金晓玲 乌云塔娜 +1 位作者 张智俊 何平 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期107-110,共4页
榉属植物体内酚类、多糖等次生物质含量较高 ,严重影响从中提取总DNA的产量和质量。针对这一问题探索出一种适合榉属植物总DNA的提取方法 ,并对提取的总DNA进行了纯度和浓度的鉴定。结果表明此方法可有效去除次生物质对DNA的干扰 ,样品... 榉属植物体内酚类、多糖等次生物质含量较高 ,严重影响从中提取总DNA的产量和质量。针对这一问题探索出一种适合榉属植物总DNA的提取方法 ,并对提取的总DNA进行了纯度和浓度的鉴定。结果表明此方法可有效去除次生物质对DNA的干扰 ,样品DNA的质量和纯度较高 。 展开更多
关键词 榉属 DNA提取 RAPD 木本植物 榆科
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几株半知菌对马尾松落叶的分解——木质纤维素酶的活性动力学 被引量:18
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作者 郝杰杰 宋福强 +3 位作者 田兴军 黄丰 张鹏 张智俊 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第11期69-75,共7页
应用固体发酵方法,研究Alternaria sp.,Penicillium sp.,Cephalosporium sp.,Tricherderma sp.,Pestalotiopsis sp.和Aspergillusfumigatus6种土壤半知菌降解马尾松凋落叶片过程中产生的漆酶(Laccase)、木质素过氧化物酶(LiP)、锰过氧... 应用固体发酵方法,研究Alternaria sp.,Penicillium sp.,Cephalosporium sp.,Tricherderma sp.,Pestalotiopsis sp.和Aspergillusfumigatus6种土壤半知菌降解马尾松凋落叶片过程中产生的漆酶(Laccase)、木质素过氧化物酶(LiP)、锰过氧化物酶(MnP)、羧甲基纤维素酶(CMCase)和滤纸糖酶(FPA)的动力学曲线,以及各种酶活性与底物降解的关系。结果表明:Pestalotiopsis sp.能够产生相对较高的漆酶活性和引起底物的总有机物质(TOM)质量损失最大;Alternaria sp.产生的MnP酶活性最高;Pestalotiopsis sp.产生的CMCase和FPA酶活性也为最高。试验中6种菌前期的降解速率依赖于CMCase和FPA酶活性的高低,后期则由木质素酶和纤维素酶协同作用来决定。依据6种菌的酶生产动力学曲线、TOM质量损失和降解速率,可将其划分为2种功能类型:功能群Ⅰ为纤维素分解菌,包括Alternaria sp.,Penicillium sp.,Cephalosporium sp.和Tricherderma sp.4种;功能群Ⅱ为木质纤维素分解菌,包括Pestalotiopsis sp.和Aspergillusfumigatus2种。试验中也发现:Pestalotiopsis sp.产生漆酶的活性较高,同时是一株比较有效降解木质纤维素底物的菌种。 展开更多
关键词 半知菌 凋落物 降解速率 木质素酶 纤维素酶
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