GRP94表达在肺癌细胞对VP-16化疗耐药中的作用

[目的]检测在Ca2＋拮抗剂A23187诱导下,人肺腺癌细胞SPCA1中GRP94的表达水平,并分析其表达在肺癌细胞对VP-16耐药中的作用。[方法]采用RT-PCR、免疫荧光细胞化学方法检测不同浓度A23187处理组细胞的GRP94核酸及蛋白表达,用MTT法测定细胞在VP-16作用下的生存率。[结果]A23187可明显诱导SPCA1细胞GRP94核酸和蛋白表达,且表达水平随A23187呈浓度依赖性增加。MTT法测定结果显示：诱导组细胞（A23187浓度为0.5~6μmol/L）对VP-16的IC50值明显高于对照组,而且IC50值的升高亦对A23187呈一定的浓度依赖性,当A23187浓度为6μmol/L时IC50值最大。[结论]GRP94的表达与肺腺癌细胞SPCA1对VP-16的耐药性有关,有针对性地抑制GRP94基因表达或功能可能成为肺癌治疗的新方法。

糖尿病社区获得性肺炎112例临床分析

目的:探讨糖尿病合并社区获得性肺炎的主要病原菌及临床特点。方法:回顾调查112例糖尿病社区获得性肺炎的临床资料,分析病原学及临床特点。结果:糖尿病社区获得性肺炎的病原菌以革兰阴性杆菌为主占细菌总数56.2%;其中肺炎克雷伯杆菌占27.8%,大肠埃希菌占15.6%,革兰阳性球菌占15.3,霉菌占11.1%,其临床特征不典型,疗程长,病死率高。结论:糖尿病患者易感染肺炎、且症状不典型、病程长,病死率高。

机械通气致下呼吸道黄杆菌感染的临床分析

目的:探讨黄杆菌属致下呼吸道感染的临床特点及对常用抗生素的耐药情况。方法:分析我院六年来机械通气致下呼吸道黄杆菌感染的11例临床资料,平板稀释法测定常用抗菌药物对该菌株的最低抑菌浓度,采用法国生物梅里埃公司API系统进行细菌学鉴定,以美国国家实验室标准化委员会NCCLS的标准判定结果。结果:全部应用广谱抗生素,年龄>60岁者8例,机械通气到发生黄杆菌感染的平均时间为18天,死亡4例;耐药率高,仅对头孢哌酮/舒巴坦、复方磺胺甲恶唑、哌拉西林、左氧氟沙星等较敏感。结论:机械通气致下呼吸道黄杆菌感染常发生在基础状态较差,机械通气时间较长,且长期应用广谱抗生素的老年患者,临床表现常无特征性,细菌耐药严重。

Hsp90表达上调与肺癌细胞化疗耐药的相关性研究

背景与目的热休克蛋白(heatshockprotein,Hsp)90是Hsps家族中的重要成员,其高表达与肿瘤的发生、发展及化疗耐药密切相关。本研究旨在探讨替普瑞酮(geranylgeranylacetone,GGA)作用下人肺癌细胞SPCA-1及H446中Hsp90的表达水平变化及与肺癌细胞对顺铂化疗耐药的相关性。方法将细胞分成实验组与对照组,分别用含有不同浓度(0μM,10μM,50μM,100μM,500μM,1,000μM)的诱导剂GGA处理6h。采用免疫荧光细胞化学及West-ernblot方法检测各组细胞中Hsp90在蛋白水平的表达;应用MTT法测定细胞在化疗药物顺铂作用下生存率,并分析Hsp90的表达在两种肺癌细胞对顺铂耐药中的作用。结果 SPCA-1及H446实验组细胞中Hsp90的表达水平均明显高于相应的对照组细胞,且与GGA具有一定的浓度依赖性。MTT显示两种实验组细胞对顺铂的生存率均明显高于相应的对照组细胞,亦呈一定的GGA浓度依赖性。结论 GGA可以诱导人肺癌细胞SPCA-1及H446中的Hsp90的表达上调,且其表达水平都与GGA具有一定的浓度依赖性。Hsp90高表达的细胞对顺铂的生存率明显高于低表达的细胞,表明Hsp90的表达上调与肺癌细胞对顺铂的耐药有一定的相关性。

热休克蛋白70对人肺腺癌细胞顺铂耐药性的影响

目的 探讨用替普瑞酮诱导人肺腺癌细胞SPCA-1中热休克蛋白70（HSP70）的表达,并观察其对顺铂耐药的作用与联系.方法 1×106株人肺腺癌SPCA-1细胞完全随机分为5个不同剂量的替普瑞酮处理组和对照组,各5 ×105株,对照组加入磷酸盐缓冲溶液处理,替普瑞酮各组分别加入10、50、100、500、1000μmol/L的替普瑞酮处理.采用免疫荧光、逆转录聚合酶链反应方法检测各组细胞中HSP70mRNA和蛋白的表达;流式细胞仪法测定在顺铂作用下的细胞凋亡率,分析其在SPCA-1细胞对顺铂耐约的作用.结果 与对照组相比,细胞中HSP70、蛋白水平的表达均明显升高.流式细胞仪结果显示：在顺铂作用下,对照组细胞凋亡率为（9.70±0.63）,替普瑞酮为10、50、100、500、1000 μmol/L时的细胞凋亡率分别为（7.97±0.14）%、（7.78±0.69）%、（6.37±0.15）%、（6.63±0.93）%、（4.22±0.06）%;替普瑞酮处理的各组细胞凋亡率均明显低于对照组（均P＜0.05）,且呈浓度依赖性.结论 替普瑞酮可上调SPCA-l细胞中HSP70表达,HSP70的高表达可增加SPCA-1细胞对顺铂的耐药性.

GRP78表达下调可降低肺腺癌细胞对VP-16的耐药

背景与目的GRP78(Glucose-regu lated protein78)是GRPs家族的成员之一,其高表达与某些肿瘤细胞化疗耐药相关。本研究旨在探讨在BAPTA-AM作用下肺腺癌SPCA-1细胞GRP78表达水平的变化及GRP78表达下调与细胞对VP-16耐药的相关性。方法将SPCA-1细胞随机分为BAPTA-AM处理组、A23187处理组及对照组。采用RT-PCR和免疫荧光细胞化学方法分别检测各组细胞中GRP78在核酸和蛋白水平的表达。采用流式细胞仪测定细胞在化疗药物足叶乙甙(VP-16)作用下的细胞生存率。结果与对照组和A23187处理组相比,BAPTA-AM处理组细胞GRP78在核酸和蛋白水平的表达均明显降低,而其在VP-16作用下的细胞凋亡率则明显升高(细胞凋亡率:BAPTA-AM处理组为10.84±0.86;对照组为6.85±0.20;A23187处理组为4.95±0.19;P<0.01)。结论BAPTA-AM能够抑制SPCA-1细胞GRP78的表达,GRP78表达下调能够提高SPCA-1细胞对VP-16的敏感性。因此,采用化学药物或反义RNA等方法抑制GRP78的表达可能成为未来治疗肺癌的新手段。

GRP78在肺腺癌细胞顺铂耐药中的作用

背景与目的糖调节蛋白78(GRP78)在肺癌细胞中表达增高并与其对化疗药物VP-16的耐药性有关,而GRP78的表达与其对化疗药物顺铂的耐药性是否相关,研究较少。本研究旨在通过检测GRP78在人肺腺癌细胞SPCA-1中的表达及顺铂作用后的细胞生存率,研究GRP78在肺腺癌细胞顺铂耐药中的作用。方法依据是否应用诱导剂A23187将细胞分为实验组和对照组,采用RT-PCR、Western blot方法检测各组细胞中GRP78在核酸和蛋白水平的表达,利用MTT法测定细胞在顺铂作用下的生存率,分析GRP78在SPCA-1细胞顺铂耐药中的作用。结果A23187可以明显诱导SPCA-1细胞中GRP78在核酸和蛋白水平的表达,且其表达水平与A23187具有一定的浓度依赖性,MTT检测显示:实验组细胞生存率明显低于对照组,亦呈一定的A23187浓度依赖性。结论在人肺腺癌细胞SPCA-1中,诱导剂A23187可以诱导GRP78核酸和蛋白水平的表达,其表达与肺癌细胞在顺铂作用下的生存率呈负相关,表明GRP78可提高SPCA-1细胞对顺铂的敏感性,与肺癌细胞化疗耐药有一定的相关性。

以腹泻高热为首发症状的重症鹦鹉热衣原体肺炎1例

1病例资料患者女,59岁。于2020年10月31日无明显诱因出现腹泻,2~3次/d,呈水样便,无黏液脓血,略感恶心,无明显腹痛,无呕吐。11月2日来我院就诊,于发热门诊就诊时体温39.3℃,不伴畏寒、寒战;精神萎靡,神志淡漠,查胸部CT(图1)示右肺下叶见多发絮状、斑片状密度增高影,边界欠清,其内可见空气支气管征。血常规示白细胞5.3×10^(9)/L,淋巴细胞占比0.112,中性粒细胞占比0.865,PLT 68×10^(9)/L。急诊先后给予氨曲南、头孢哌酮-他唑巴坦、莫西沙星静脉滴注2 d抗感染,体温未见明显下降,为求进一步诊治以“腹泻伴发热5 d”于11月4日收入院。发病以来患者自觉周身乏力,头晕,无头痛,无咳嗽、咯痰,略感气短。既往史无殊。查体:体温38.2℃,脉率104次/min,呼吸率18次/min,血压130/70 mmHg。

社区获得性肺炎初始治疗失败的评估与处理进展

社区获得性肺炎(community-acquired pneumonia,CAP)具有高发病率和高病死率的特点,危害严重。CAP初始治疗的成败很大程度上决定着患者疾病转归。在确立CAP临床诊断并安排合理病原学检查及标本采样后,需根据患者年龄、基础疾病、临床特点等分析患者病原学特征,及时实施初始经验性抗感染治疗。虽然我国和世界众多国家都制定了CAP诊疗指南,但CAP的初始治疗失败率高仍是不可回避的问题。本文对CAP初始治疗失败的评估与处理进展进行综述,以期为CAP的临床诊治提供帮助。

基于微流控芯片技术的三维细胞培养模式的建立及研究

目的建立适于进行三维联合细胞培养的微流控芯片平台。方法设计与制作一个多通道连接的高通量微流控芯片平台，通过向微通道内灌注含有细胞悬液胶质的方法构建三维立体培养体系，并通过注射泵连续供给细胞营养物质以模拟体内细胞生存的微环境，将肺癌细胞与人肺成纤维细胞置于体系中进行近似于人体生理条件下的三维联合细胞培养。结果成功建立了适于进行三维联合细胞培养的微流控芯片平台，实现了肺癌细胞与人肺成纤维细胞的联合三维培养。三维培养状态下的细胞生长状态良好，人肺癌细胞围绕肺成纤维细胞成串状生长，与二维单层培养模式的伸展状态明显不同。结论以基于微流控芯片技术的三维细胞培养模式为模型进行肿瘤生物学方面的研究，能够比较真实的反映肿瘤细胞的生物学特征，为微流控芯片技术在医学和生物学研究方面提供了一个新思路。

分布式智能无功补偿技术研究

提出进行分布式智能无功补偿技术研究的必要性,分析了分布式电源接入对电网的影响,简述了分布式智能无功补偿技术的控制策略、智能控制、综合保护、有源滤波技术,探讨了分布式智能无功补偿装置的设计,对分布式智能无功补偿技术的发展进行了展望。

乌美溴铵/维兰特罗在中国治疗慢性阻塞性肺疾病患者的上市后安全性监测研究

目的评估乌美溴铵/维兰特罗在真实世界临床实践中应用于中国患者的安全性。方法采用前瞻性、多中心、单臂、观察性研究,在2020年12月14日至2022年1月30日,从中国的14家研究中心纳入在真实世界临床实践中接受乌美溴铵/维兰特罗治疗的患者,共随访24周。研究主要结局为随访期内不良事件和严重不良事件的发生率。结果共纳入887例患者,年龄为(67.5±9.6)岁,其中男性689例(77.7%)。大多数患者(98.1%)有慢性阻塞性肺疾病史。468例患者(52.8%)报告了合并药物。在所有纳入的患者中,59例(6.7%)报告了不良事件,21例(2.4%)报告了严重不良事件,其中9例报告了致死性严重不良事件,10例报告了非致死性严重不良事件,2例同时报告了非致死性和致死性严重不良事件。所有严重不良事件,包括致死性事件,经研究者判定均与乌美溴铵/维兰特罗无关。6例(0.7%)发生药物不良反应,其严重程度均为轻度。3例(0.3%)患者报告的不良事件属于重要已确定或潜在风险,经研究者判定均与乌美溴铵/维兰特罗无关。结论乌美溴铵/维兰特罗在真实世界临床实践中应用于中国患者具有良好的安全性,未观察到与该药相关的新的安全性信号。

微流控浓度梯度芯片在肺癌耐药性研究中的应用

微流控芯片系统是20世纪末开发的一种高效的微分析系统，可将样品制备、液体分离、生物与化学反应检测、细胞培养及蛋白分析等研究手段集成，具有高通量检测的特点，近年来已逐渐应用于化学、药物筛选及环境检测等多个领域，但在医学及分子生物学研究中的应用较少。本研究中利用该微流控芯片系统对人肺鳞状细胞癌细胞内葡萄糖调节蛋白78（GRP78）在肺癌对化疗耐药中的作用进行分析。