丹皮酚对人肝癌BEL-7402细胞凋亡和COX-2、Survivin、XIAP、c-IAP1表达的影响

目的研究丹皮酚(paenonal,Pae)对COX-2及凋亡抑制蛋白Survivin、XIAP、c-IAP1表达的影响,探讨其诱导人肝癌BEL-7402细胞凋亡的作用机制。方法应用MTT法检测不同浓度的Pae对体外培养的人肝癌BEL-7402细胞增殖抑制作用,流式细胞术和原位细胞凋亡检测法(TUNEL)检测细胞凋亡,免疫细胞化学技术检测COX-2、Survivin、XIAP、c-IAP1的表达情况。结果 Pae可以明显抑制BEL-7402细胞的增殖,并随着剂量的增加和时间的延长,该抑制作用增强,经7.81、15.63、31.25、62.5mg·L-1Pae作用72h后,其抑制率分别为20.54%、25.74%、33.04%、57.97%(P<0.01或P<0.05);TUNEL染色可见典型的凋亡形态学特征包括染色质凝集、边集化,呈新月形聚集于核膜下;流式细胞仪检测用药组凋亡率明显高于对照组,Pae浓度为7.81、15.63、31.25、62.5mg·L-1时,其凋亡率分别为(1.75±0.32)%、(8.26±0.95)%、(12.46±1.37)%、(25.07±1.87)%、(37.52±2.56)%。与对照组相比,免疫细胞化学分析显示,COX-2、Survivin、XIAP、c-IAP1表达明显下调(P<0.01)。结论 Pae对人肝癌细胞株BEL-7402有抑制增殖和诱导凋亡的作用,其机制可能与通过下调COX-2的表达并与抑制survivin、XIAP和c-IAP1的表达有关。

丹皮酚协同顺铂抑制人食管癌Eca-109细胞的增殖

目的探讨丹皮酚单药及联合顺铂应用对人食管癌Eca-109细胞的增殖抑制作用。方法以不同浓度的丹皮酚、顺铂和两药联用处理人食管癌Eca-109细胞,采用MTT法测定药物对体外培养的人食管癌Eca-109细胞增殖的抑制作用,应用两药相互作用指数(coefficient of drug interaction,CDI)进行联合用药分析。结果丹皮酚(7.81～250 mg.L-1)和顺铂(0.078～5 mg.L-1)单独应用均对人食管癌Eca-109细胞有抑制作用,呈现剂量效应关系。丹皮酚与顺铂联合应用时,丹皮酚能明显提高顺铂对Eca-109细胞的增殖抑制作用,有显著的协同杀伤作用。结论丹皮酚与顺铂联合应用具有明显的协同抗食管癌Eca-109细胞增殖的作用。

B超或CT引导下肝脏肿块穿刺细胞学与组织学对比分析

目的对B超或CT引导下经皮肝脏肿块细针穿刺标本进行细胞学与组织学对比分析,探讨其临床应用价值。方法回顾性分析2006年1月至2014年12月行B超或CT引导下经皮肝脏穿刺活检并经手术病理、影像学及甲胎蛋白(AFP)标准、随访观察证实的60例肝脏占位性病例临床资料。结果 60例肝脏肿块经手术病理、影像学及AFP标准、随访观察证实为恶性肿瘤55例,良性病变5例。穿刺病理组织学提示恶性肿瘤55例,良性病变5例;细胞学提示恶性肿瘤53例,良性病变7例。与组织学诊断结果比较,细胞学诊断恶性肿瘤的灵敏度为:96.4%(53/55),特异度为:100%(5/5),阳性预测值为100%(53/53),阴性预测值为71.4%(5/7),约登指数为0.96。组织学与细胞学诊断符合率为96.7%。结论 B超或CT引导下经皮肝脏肿块穿刺活检的是一种准确而又安全的微创诊断方法,组织学和细胞学检查各有优势,建议临床穿刺活检时同时进行组织学和细胞学的检查,可以显著提高诊断的敏感性,更准确地对肝脏占位性病变做出确切诊断。

GC-MS法分析白术挥发油化学成分的探讨

以水蒸气蒸馏法提取挥发油,进行毛细管气相色谱分析,共分离出66个峰,用GC-MS法从中共鉴定了38个成分,占挥发油总成分的80％以上。以归一化法计算了各个峰的相对含量,其主要成分多是烯类。

培美曲塞单药二线治疗17例Ⅳ期非小细胞肺癌的临床观察

目的回顾分析单药培美曲塞二线治疗Ⅳ期非小细胞肺癌的有效性与安全性。方法17例明确诊断的Ⅳ期NSCLC患者,男性14例,女性3例,既往治疗失败,KPS>70,单药培美曲塞500mg/m2治疗,每3周重复,至少化疗2周期,评价治疗的有效性和安全性。结果17例患者中疗效为PR5.9%,SD52.9%,PD41.2%,疾病控制率PR+SD58.8%,主要毒副反应为粒细胞下降、恶心、肝功能损害、血小板下降等,不良反应较轻微。结论单药培美曲塞二线治疗Ⅳ期非小细胞肺癌有较高的疾病控制率,安全性好。

探究式教学理论在高校生物教学中的应用特点和原则浅析

在我国教育体制改革的影响下,教学模式的改革也成为众多学科的重要任务。在高校生物教学中,应用探究式教学理论,能够实现教学模式上的创新,并且对学生学习和课堂效率都有良好的促进作用。本文在阐述探究式教学理论的基础上,对探究式教学理论在高校生物教学中的应用特点和原则进行了浅析。

高职教育因材施教与职业技能培训的探索

提高教学水平,保证教学质量,实现培养目标,需要教师做多方面工作。根据学生个体差异,因材施教,寻求更多机会和方法,让学生多思考、勤动手,磨炼其意志,锤炼其技能,将高等职业技术院校学生培养成高级实用型、技术型专门人才。

蛋白磷酸酶LY1基因原核表达载体的构建及蛋白的初步表达

目的构建蛋白磷酸酶LY1基因的原核表达载体,并在E.coliBL21(DE3)中表达。方法PCR扩增LY1的CDs基因片段,并将其克隆入原核表达载体pET28a(+)中构建重组质粒pET28a(+)-LY1。经限制性内切酶Nhe I、XhoⅠ双酶切鉴定及序列测定后,转化E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导表达组氨酸融合蛋白。SDS-PAGE、Western blot方法检测重组蛋白的表达。结果获得全长为1179bp的LY1基因片段,以构建的重组质粒pET28a(+)-LY1转化E.coliBL21(DE3)后,经IPTG诱导,表达出分子量约为42kD的重组蛋白。SDS-PAGE分析显示,表达的蛋白主要以不溶性包涵体的形式存在于E.coliBL21(DE3)的胞质中。Western blot方法检测出LY1融合蛋白的表达。结论成功构建了原核表达载体pET28a(+)-LY1,并表达出重组LY1蛋白,为进一步单克隆抗体的制备和生物信号转导的相关研究奠定了实验基础。

中学生物新课程教学中研究性实验教学初探

根据实验原理、实验目的、实验步骤、教材中的某些“不许、”“不能”、“注意”以及教材内容设计一些研究性实验,从而发展学生的创新思维,激发学生的学习兴趣和参与意识,培养他们学习的自主性及发展他们的个性.

全科医学临床专业学位硕士研究生培养探讨

20世纪80年代末,全科医学概念引入中国,2012年起,我国正式开展临床医学(全科)硕士专业学位研究生的招生培养工作,目前各医学高等教育机构均在探索全科医学硕士研究生培养模式,尚未形成标准统一的全科医学硕士研究生培养体系。结合开展此项工作的经验和体会,分析了培养过程中存在的一些问题,并提出初步建议。

光合硫细菌的分离与特性研究

从城市河流滞水中分离得到一株可利用硫化物的光合硫细菌,经鉴定为着色菌属内的最小着色菌．对菌体形态及生理特性进行研究,结果为:单个菌林杆状,大小0．9-1．0×2．0μm,革兰氏染色阴性,厌氧型,生长最佳光照条件为15001x, 最适生长温度为30℃,初始pH为8．0．

Vimentin和E-cadherin蛋白在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的:研究波形蛋白(Vimentin)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)在人乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法:回顾性分析2014年1月至2016年1月在安徽医科大学附属巢湖医院接受乳腺癌根治术的56例乳腺癌组织和相应癌旁组织标本以及病历资料,用免疫组织化学染色法和qPCR分别检测癌组织中Vimentin、E-cadherin蛋白和mRNA的表达,分析Vimentin和E-cadherin蛋白在乳腺癌组织中的表达与临床病理特征的关系。用Logistic多因素回归分析影响Vimentin和E-cadherin蛋白表达的独立因素,用Spearman分析Vimentin与E-cadherin蛋白表达的相关性,用Kaplan-Meier分析Vimentin和E-cadherin蛋白表达与预后的关系,用ROC曲线分析Vimentin和E-cadherin蛋白表达对预后的诊断。结果:56例乳腺癌组织中Vimentin和E-cadherin蛋白高表达率分别为76.79%和19.64%;其中47例(47/56,83.93%)乳腺癌组织中Vimentin mRNA的表达量显著高于癌旁组织(P<0.05),46例(46/56,82.14%)乳腺癌组织中E-cadherin mRNA的表达量显著低于癌旁组织(P<0.05)。Vimentin蛋白表达与肿瘤大小、淋巴结转移、脉管侵袭、组织学分级、临床分期、分子分型、Ki67阳性、ER阴性、PR阴性及HER2阴性表达均有关(均P<0.05);E-cadherin蛋白表达与淋巴结转移、脉管侵袭、组织学分级、临床分期、分子分型、Ki67阳性、ER阴性、PR阴性及HER2阴性表达均有关(均P<0.05)。肿瘤大小、淋巴结转移、脉管侵袭、组织学分级、临床分期、分子分型、Ki67阳性、ER阴性、PR阴性及HER2阴性表达均是促进Vimentin和E-cadherin表达的独立影响因素(P<0.05),且Vimentin与E-cadherin蛋白表达呈负相关关系(P<0.05)。Vimentin蛋白高表达的患者3年生存率为67.44%,E-cadherin蛋白低表达的患者3年生存率为68.89%。结论:在乳腺癌组织中Vimentin高表达和E-cadherin低表达与乳腺癌发生发展、侵袭转移及患者预后有关,可作为临床诊断与预后的评价指标。

甲磺酸阿帕替尼三线或三线以上治疗晚期胃腺癌的临床观察

目的 探讨甲磺酸阿帕替尼三线或三线以上治疗晚期胃腺癌的临床疗效和安全性。方法 回顾性分析2014年12月至2016年1月接受过二线及二线以上化疗方案治疗失败的20例晚期胃腺癌患者，给阿帕替尼500 mg／天口服，持续用药至肿瘤进展或出现不可耐受的不良反应。结果 20例胃腺癌患者的有效率（RR）和疾病控制率（DCR）分别为10.0％和40.0％，中位无进展生存时间（PFS）和中位总生存时间（OS）分别为2.7个月和4.3个月。患者耐受性良好，常见的毒副反应为1～3级高血压、手足综合征和蛋白尿。结论 对于接受过二线及二线以上化疗方案治疗失败的晚期胃腺癌患者，阿帕替尼具有良好的疗效和安全性。

PD-1单抗治疗晚期HER-2阴性胃癌的临床观察

目的探讨程序性死亡受体-1(PD-1)单抗单药及联合化疗和/或抗血管生成药物治疗晚期人类表皮生长因子受体2(HER-2)阴性胃癌的疗效及安全性。方法回顾性分析2019年1月至2020年12月80例经组织病理学确诊的晚期HER-2阴性胃腺癌患者的临床资料。80例患者中9例仅接受PD-1单抗治疗,20例接受PD-1单抗联合化疗,23例接受PD-1单抗联合抗血管生成治疗,28例接受PD-1单抗联合化疗及抗血管生成治疗。分析接受不同治疗方案和治疗线数患者的近期疗效、远期疗效和不良反应。结果80例患者中无CR病例,获PR 15例、SD 34例、PD 31例,有效率(RR)为18.8%,疾病控制率(DCR)为61.2%。中位随访7个月,中位无进展生存期(PFS)为3.0(95%CI:2.8~3.2)个月,其中二线治疗(n=40)的DCR为77.5%,中位PFS为4.0(95%CI:2.9~5.1)个月,优于三线治疗(n=26)的46.2%和3.0(95%CI:2.3~3.7)个月,以及四线及多线治疗(n=14)的42.8%和2.2(95%CI:1.3~3.1)个月(P=0.005)。PD-1单抗联合化疗及抗血管生成治疗组(n=28)的中位PFS为4.0(95%CI:1.7~6.3)个月,仅接受单药PD-1单抗治疗组的中位PFS为3.0(95%CI:0.9~5.1)个月,联合化疗组为3.0(95%CI:2.6~3.4)个月,联合抗血管生成治疗组为3.0(95%CI:2.1~3.9)个月,差异有统计学意义(P=0.027)。全组主要不良反应包括贫血、乏力、转氨酶升高、纳差、中性粒细胞减少,以1~2级为主,3例患者因3~4级不良反应终止治疗。结论PD-1单抗联合治疗用于晚期HER-2阴性胃癌疗效确切,安全性良好,且越早线使用患者获益越明显。PD-1单抗联合化疗及抗血管生成治疗模式值得临床进一步探索。

橙皮素通过内质网应激通路诱导人肺癌细胞PC9发生凋亡

目的探讨不同剂量橙皮素对人肺腺癌PC9细胞凋亡和内质网应激的诱导效应及相关通路蛋白水平的变化。方法用不同剂量的橙皮素处理PC9细胞,使用LDH释放试剂盒检测其细胞毒性,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测凋亡通路中Caspase-3、Caspase-9、Apaf-1、Bcl-2和细胞色素C水平的变化,同时检测内质网应激中相关蛋白CHOP、Caspase-4、Bip、p-JNK以及三大感受器蛋白p-Perk、IRE1和ATF6的水平变化。结果随着橙皮素浓度的增加,其对PC9细胞的杀伤效应逐渐增加;在橙皮素浓度不变时,随着时间的推移,杀伤效应也逐渐增加,橙皮素对PC9细胞的杀伤效应呈时间-剂量依赖。随着橙皮素浓度的增高,PC9细胞的凋亡率逐渐上升,以早期凋亡细胞为主。不同剂量的橙皮素处理PC9细胞后,线粒体途径凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9、Apaf-1和细胞色素C水平均有不同程度的增高,而Bcl-2水平则有所下降。橙皮素处理PC9细胞还可以诱导内质网应激相关蛋白CHOP、Caspase-4、Bip、p-JNK及感受器蛋白p-Perk、IRE1和c-ATF6表达水平上调。结论橙皮素对PC9细胞具有杀伤效应,同时可以诱导PC9细胞发生线粒体途径凋亡,而这种凋亡诱导效应可能与内质网应激相关。

胃癌患者凝血指标检测及临床意义

目的探讨胃癌患者凝血指标的变化与肿瘤侵犯深度、淋巴结转移及临床分期的关系。方法收集2014年1月至12月的120例胃癌患者并检测其凝血指标:凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(Fib)、D-二聚体(DD)和血小板(PLT)。并以同期60例健康体检者作为对照,比较两组间凝血指标的差异,并分析凝血指标和胃癌肿瘤侵犯深度、淋巴结转移及临床分期的关系。结果与对照组相比,胃癌组Fib、DD、PLT均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);而两组APTT、TT、PT水平的差异无统计学意义(P>0.05)。胃癌患者中,T_2~T_4期与T1期比较,N_1~N_3期与N0比较,Ⅳ期与Ⅰ~Ⅲ期比较,Fib、DD、PLT均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胃癌患者的凝血功能明显变差,同时其凝血功能与胃癌的分期、浸润深度及淋巴结转移密切相关。

MNP和MVP方案治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效观察

目的：比较异长春花碱（ＮＶＢ）与丝裂霉素（ＭＭＣ）和顺铂（ＰＤＤ）组成的ＭＮＰ方案及长春花碱酰胺（ＶＤＳ）与ＭＭＣ和ＰＤＤ组成的ＭＶＰ方案治疗非小细胞肺癌的疗效。方法：６９例晚期非小细胞肺癌随机分成两组，其中ＭＮＰ组３４例，ＭＶＰ组３５例。结果：显示ＭＮＰ组有效率为５８．８％，而ＭＶＰ组为５１．４％，两组间疗效无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。ＭＮＰ组的骨髓抑制较ＭＶＰ组明显（Ｐ＜０．０１），而胃肠道反应及神经毒性两组均无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。结论：表明ＭＮＰ和ＭＶＰ可以做为非小细胞肺癌的一线治疗方案。

奥希替尼单药或联合贝伐珠单抗一线治疗EGFR基因突变伴脑转移肺腺癌患者的疗效和安全性分析

目的评估奥希替尼单药或联合贝伐珠单抗一线治疗EGFR基因突变伴脑转移肺腺癌患者的疗效和安全性。方法研究共纳入10例在我院确诊的EGFR突变阳性伴脑转移肺腺癌患者,并接受奥希替尼单药或联合贝伐珠单抗治疗。研究的主要终点是脑内病灶客观缓解率(ORR),次要研究终点包括总体ORR、中位无进展生存(mPFS)、中位总生存(mOS)及治疗相关毒性反应。结果10例患者中,男性、女性各占50%;中位年龄为63.5岁。3例(30%)患者为单纯脑转移,7例(70%)患者同时合并脑外转移。7例(70%)患者接受奥希替尼单药治疗,其余3例(30%)接受奥希替尼联合贝伐珠单抗治疗。3例(30%)患者颅内病灶获得完全缓解,7例(70%)部分缓解,脑内病灶ORR为100%,总体ORR为100%。mPFS和mOS均未达到。最常见的治疗相关不良反应为乏力、淋巴细胞计数减少、皮疹和食欲下降,且均为1/2级。结论奥希替尼单药或联合贝伐珠单抗在EGFR基因突变伴脑转移肺腺癌患者中初步显示出较好的疗效,且耐受性良好,可作为此类患者的初治首选方案之一。

癌症患者长期生存质量及其影响因素的研究

目的:调查癌症长期生存者的生存质量及影响因素。方法:使用自编调查表,采用自评和访谈的方法,对安徽省社会和劳动保障厅118例参加医疗保险的癌症长期生存者进行调查。结果:安徽省社会和劳动保障厅直属医保中心共有登记参保人员117,916人,其中癌症患者970人,癌症患者比例为8.2‰,癌症长期生存者257人,占癌症患者26.5%,118人完成调查访视,随访率为45.9%。癌症长期生存者生存质量的影响因素主要是肿瘤类型、TNM分期、治疗方式、治疗相关并发症和生活方式。结论:应密切关注癌症长期生存者的生存质量,加强癌症患者的随访,重视癌症的诊疗规范和综合治疗。