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软土层未打穿的桩承式路堤现场实测研究 被引量:26
1
作者 徐正中 陈仁朋 陈云敏 《岩石力学与工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第11期2336-2341,共6页
以申苏浙皖高速公路为工程背景,对软土层未打穿的桩承式路堤进行现场实测研究。共选取2个管桩断面作为试验观测断面,在填筑时及填筑完成后对桩托板和桩间土上的土压力、路基沉降及下卧层沉降进行监测,并与软土层打穿时的实测结果作比较... 以申苏浙皖高速公路为工程背景,对软土层未打穿的桩承式路堤进行现场实测研究。共选取2个管桩断面作为试验观测断面,在填筑时及填筑完成后对桩托板和桩间土上的土压力、路基沉降及下卧层沉降进行监测,并与软土层打穿时的实测结果作比较。研究表明:桩间距越大,桩体荷载分担比越小;软土层未打穿时荷载分担比为61.4%~75.5%,比打穿时小一些;软土层打穿与未打穿时的土拱高度都为桩托板净间距的1.0~1.4倍;软土层未打穿时桩土不均匀沉降比打穿时大;路堤填筑完成后的沉降约占总沉降的30.0%;下卧层沉降约占路堤总沉降的60.0%。将现场试验结果与4种理论方法的计算结果进行比较,评价各种方法的适用性。 展开更多
关键词 土力学 桩承式路堤 工程实例 设计方法 荷载分担比 沉降
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托板桩处理路堤技术现场试验研究 被引量:4
2
作者 徐正中 陈仁朋 陈云敏 《浙江大学学报(工学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1484-1488,共5页
针对软土地基上路堤快速施工并严格控制沉降的要求,以台缙高速公路为工程背景,利用设置试验段的方法,对托板桩处理路堤技术进行了现场试验研究.选取3个典型断面安装了各种监测仪器,在填筑时及填筑完成后一段时间内对各断面的土压... 针对软土地基上路堤快速施工并严格控制沉降的要求,以台缙高速公路为工程背景,利用设置试验段的方法,对托板桩处理路堤技术进行了现场试验研究.选取3个典型断面安装了各种监测仪器,在填筑时及填筑完成后一段时间内对各断面的土压力、沉降及深层水平位移进行了监测.现场试验结果表明,土拱效应与桩土差异沉降有关,只有当差异沉降达到一定值后,路堤中才有明显的土拱效应;桩土桩体荷载分担比在65%~80%,并随着托板面积置换率的增大而增大;各断面沉降量较小,且稳定较快;路基深层水平位移较小. 展开更多
关键词 基础工程 托板桩处理路堤 现场试验 荷载分担比 沉降 水平位移
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微生物学实验教学中存在的问题与探索 被引量:3
3
作者 徐正中 殷月兰 +3 位作者 陈祥 孙林 孟闯 焦新安 《教育教学论坛》 2017年第52期274-275,共2页
"微生物学实验"是高校生物学专业的重要基础课程之一,但是在传统微生物学实验教学过程中,仍然存在各个实验相互独立、学生参与性不强及考核方式单一等一系列问题,从而影响实验课的教学效果。文章在总结了前人教学经验的基础上... "微生物学实验"是高校生物学专业的重要基础课程之一,但是在传统微生物学实验教学过程中,仍然存在各个实验相互独立、学生参与性不强及考核方式单一等一系列问题,从而影响实验课的教学效果。文章在总结了前人教学经验的基础上,从优化实验内容、改变教学方式及完善考核方法等方面进行改革探索,进行综合性、探究性实验以提高教学质量。 展开更多
关键词 微生物学 实验 综合性 探究性
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燃煤硫排放系数的研究及脱硫要求的确定 被引量:10
4
作者 徐正中 《热力发电》 CAS 北大核心 1994年第3期3-9,15,共8页
通过煤中硫在燃烧过程中排放率的实验研究,得出硫排放率与飞灰中钙、镁、铝、铁含量的加权值有很好的相关性,建立了燃煤硫排放系数与灰中碱性物含量的关系式及图表,对确定煤燃烧所引起的SO_2污染和脱硫措施的选择具有实用价值。
关键词 燃煤 硫排放系数 锅炉
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SNOX烟气双脱新工艺 被引量:1
5
作者 徐正中 《环境工程》 CAS CSCD 北大核心 1993年第6期34-37,共4页
SNOX双脱新工艺是利用催化反应将NOx转化成氮气,将SO2转化成浓硫酸产品,并较充分地利用余热,是干式,节能型,较好利用硫资源的方法,在欧,美引起相当的重视。本文按1992年4月发表的300MW全尺寸大型装置运行情... SNOX双脱新工艺是利用催化反应将NOx转化成氮气,将SO2转化成浓硫酸产品,并较充分地利用余热,是干式,节能型,较好利用硫资源的方法,在欧,美引起相当的重视。本文按1992年4月发表的300MW全尺寸大型装置运行情况的报导编写。 展开更多
关键词 催化反应 SNOX 烟气 双脱工艺
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桩承式加筋路堤技术与复合地基 被引量:2
6
作者 徐正中 陆世昶 《科技通报》 2008年第2期209-212,共4页
桩承式加筋路堤技术相对于传统地基处理技术是一种比较新的形式,近几年在国内得到越来越广泛的应用。它与复合地基有很多相似之处,但又不同与复合地基,两者容易混淆。本文从不同侧面,讲述了它们之间的联系和区别,为区分这两种基础形式,... 桩承式加筋路堤技术相对于传统地基处理技术是一种比较新的形式,近几年在国内得到越来越广泛的应用。它与复合地基有很多相似之处,但又不同与复合地基,两者容易混淆。本文从不同侧面,讲述了它们之间的联系和区别,为区分这两种基础形式,进而更合理地利用它们,提供一些有益的参考。 展开更多
关键词 基础工程 地基处理 桩承式加筋路堤 复合地基
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γ-干扰素试验和皮试变态反应对检测奶牛结核病的比较 被引量:29
7
作者 陈祥 徐正中 +6 位作者 时振华 范峰 蒋锁俊 孟闯 黄根成 单锋丽 焦新安 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期97-100,共4页
目的评价γ-干扰素试验、单纯颈部皮试变态反应和比较皮试变态反应检测在牛结核病检疫过程中的效果。方法在牛结核病检疫过程中,953头奶牛同时进行γ-干扰素试验和单纯颈部皮试变态反应检测,其中的190头奶牛进行了比较变态反应试验。结... 目的评价γ-干扰素试验、单纯颈部皮试变态反应和比较皮试变态反应检测在牛结核病检疫过程中的效果。方法在牛结核病检疫过程中,953头奶牛同时进行γ-干扰素试验和单纯颈部皮试变态反应检测,其中的190头奶牛进行了比较变态反应试验。结果在同步进行γ-干扰素试验和单纯颈部皮试变态反应检测的953头奶牛中,两者的阳性符合数为147头,阳性符合率为63.8%(294/461),两者的阴性符合数为639头,阴性符合率为88.4%(1 278/1 445);在进行比较皮试变态反应的190头奶牛中,γ-干扰素试验与比较皮试变态反应的阳性符合数为3头,阳性符合率为75%(6/8),阴性符合数为185头,阴性符合率为99.5%(370/372);单纯颈部皮试变态反应与比较皮试变态反应的阳性符合数为4头,阳性符合率为72.7%(8/11),阴性符合数为183头,阴性符合率为99.2%(366/369)。结论单纯颈部皮试变态反应有较高的检出率;同单纯颈部皮试变态反应相比,比较皮试变态反应有较好的特异性;γ-干扰素试验在保持较高灵敏度的同时,具有较好的特异性。 展开更多
关键词 牛结核 γ-干扰素试验 单纯颈部皮试变态反应 比较皮试变态反应
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桩承式加筋路堤关键问题研究 被引量:47
8
作者 陈仁朋 徐正中 陈云敏 《中国公路学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第2期7-12,共6页
利用弹塑性有限元方法研究了桩承式加筋路堤应用中的几个关键问题,包括桩承式路堤的沉降组成和分布规律、适用条件、荷载分担比的影响因素等。具体研究了未打穿软土层情况下不同路堤高度时的路堤沉降规律,在打穿和未打穿2种情况下荷载... 利用弹塑性有限元方法研究了桩承式加筋路堤应用中的几个关键问题,包括桩承式路堤的沉降组成和分布规律、适用条件、荷载分担比的影响因素等。具体研究了未打穿软土层情况下不同路堤高度时的路堤沉降规律,在打穿和未打穿2种情况下荷载分担比随桩托板尺寸、桩间距、路堤高度等因素的变化规律及土工格栅的作用。结果表明:路堤沉降主要取决于桩端以下软土层的压缩;荷载分担比随桩托板尺寸和路堤高度的增加而增大,随桩间距的增加而减小;土工格栅对荷载分担比和路堤沉降影响都不大。 展开更多
关键词 道路工程 桩承式加筋路堤 有限元方法 沉降 荷载分担比 土拱效应
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牛γ-干扰素ELISA检测方法的建立与初步应用 被引量:16
9
作者 陈祥 牛中伟 +5 位作者 徐正中 孟闯 孙林 黄金林 潘志明 焦新安 《中国动物传染病学报》 CAS 2010年第4期54-59,共6页
以纯化的rHis-BoIFN-γ制备兔多抗血清,辛酸—硫酸铵两步法对体内诱生的抗rBoIFN-γ单抗腹水进行纯化,用美洲商陆素(Pokeweed mitogen,PWM)刺激奶牛全血产生的分泌性天然BoIFN-γ筛选出与之反应最佳的单抗5E11。将单抗5E11以40μg/mL浓... 以纯化的rHis-BoIFN-γ制备兔多抗血清,辛酸—硫酸铵两步法对体内诱生的抗rBoIFN-γ单抗腹水进行纯化,用美洲商陆素(Pokeweed mitogen,PWM)刺激奶牛全血产生的分泌性天然BoIFN-γ筛选出与之反应最佳的单抗5E11。将单抗5E11以40μg/mL浓度包被,与1∶3 000倍稀释的兔抗rHis-BoIFN-γ多抗血清(13.8μg/mL)配对,以1∶6 000稀释的商品化酶标羊抗兔IgG为指示抗体,建立了BoIFN-γ抗原捕获ELISA检测方法,该方法可以检出2.56 U/100μL(30.5 pg/100μL)的rHis-BoIFN-γ、8U/100μL的rBac-BoIFN-γ和1U/100μL的分泌性天然BoIFN-γ。以商品化试剂盒作为平行对照,将获得的奶牛临床检测血浆样品使用BoIFN-γ抗原捕获ELISA法进行检测,结果显示两种方法检测符合率达到83.9%。本研究建立的BoIFN-γ抗原捕获ELISA检测方法可有效检测分泌性IFN-γ,为进一步开发BoIFN-γELISA检测试剂盒奠定了基础。 展开更多
关键词 Γ-干扰素 抗原捕获ELISA 单克隆抗体
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重组牛白细胞介素4的原核表达及其单克隆抗体研制 被引量:7
10
作者 陈祥 张成全 +4 位作者 徐正中 孟闯 黄金林 潘志明 焦新安 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期653-656,共4页
目的:原核表达重组牛白细胞介素4(rBoIL-4)并制备针对抗rBoIL-4的单克隆抗体(mAb)。方法:通过PCR从重组质粒pSP73-BoIL-4中扩增BoIFN-γ基因,分别克隆入表达载体pGEX-6p-1和pET-30a(+)中,构建重组菌并对其进行诱导表达、纯化和鉴定。以... 目的:原核表达重组牛白细胞介素4(rBoIL-4)并制备针对抗rBoIL-4的单克隆抗体(mAb)。方法:通过PCR从重组质粒pSP73-BoIL-4中扩增BoIFN-γ基因,分别克隆入表达载体pGEX-6p-1和pET-30a(+)中,构建重组菌并对其进行诱导表达、纯化和鉴定。以纯化的融合蛋白rHis-BoIL-4为免疫原,用纯化的rGST-BoIL-4为筛选抗原,应用淋巴细胞杂交瘤技术,研制抗rBoIL-4的mAb。结果:获得表达BoIL-4基因的重组菌BL21(pGEX-6p-1-BoIL-4)和BL21(DE3)(pET-BoIL-4),重组蛋白相对分子质量(Mr)的大小分别为39 000和19 000,且以包涵体的形式存在。获得7株可稳定分泌抗rBoIL-4 mAb的细胞株,命名为2B8、4A10、5D6、5D8、7G10、8B7和10F8,这些mAb腹水的效价依次为5 000、160 000、10 000、640 000、5 000、40 000和40 000,mAb亚类均为IgG1。Dot-ELISA的结果表明,7株mAb只与融合蛋白rHis-BoIL-4和rGST-BoIL-4起反应,而不与其他重组细胞因子和对照细菌起反应,显示出良好的特异性。Western blot试验显示,7株mAb均能与相应的融合蛋白发生反应,出现特异性条带。同时7株mAb均能与BoIL-4的标准品起反应。结论:7株抗rBoIL-4的mAb均具有高度的特异性,为进一步研究其在牛的免疫调控、牛疫病的致病机制及其诊断中的应用奠定了基础。 展开更多
关键词 重组牛白细胞介素4 原核表达 单克隆抗体
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重组牛γ-干扰素单克隆抗体的研制 被引量:14
11
作者 张成全 陈祥 +6 位作者 牛中伟 杨卫冲 徐正中 孟闯 潘志明 黄金林 焦新安 《中国动物传染病学报》 CAS 2009年第4期15-19,共5页
为制备针对重组牛γ-干扰素(rBoIFN-γ)的单克隆抗体(mAb),以纯化的原核表达融合蛋白rHis-BoIFN-γ为免疫原,用纯化的rGST-BoIFN-γ为筛选抗原,应用淋巴细胞杂交瘤技术,研制抗rBoIFN-γ的mAb。结果获得13株稳定分泌抗BoIFN-γmAb的细胞... 为制备针对重组牛γ-干扰素(rBoIFN-γ)的单克隆抗体(mAb),以纯化的原核表达融合蛋白rHis-BoIFN-γ为免疫原,用纯化的rGST-BoIFN-γ为筛选抗原,应用淋巴细胞杂交瘤技术,研制抗rBoIFN-γ的mAb。结果获得13株稳定分泌抗BoIFN-γmAb的细胞株,命名为1C12、1F7、1G5、3E6、4D5、5E11、5G4、6F8、6G6、7E9、8D3、8F8和9G11。腹水的效价除单抗9G11外,其余效价都在1∶80 000以上;除5G4mAb亚类为IgG2b外,其余均为IgG1。Dot-ELISA结果表明,所得单抗只与融合蛋白rHis-BoIFN-γ和rGST-BoIFN-γ反应,而不与其它重组细胞因子和对照细菌反应,显示其良好的特异性。Western blot显示所获单抗能与相应的融合蛋白发生反应,出现特异性条带。同时所获单抗均能与牛IFN-γ标准品反应。13株单抗均为针对rBoIFN-γ的特异性mAb,为进一步研究rBoIFN-γmAb在牛的免疫调控、牛疫病的致病机制及其诊断中的应用奠定基础。 展开更多
关键词 重组牛γ-干扰素 原核表达 单克隆抗体
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鸡γ-干扰素在杆状病毒系统中的表达 被引量:2
12
作者 戴华 季琰 +3 位作者 郑佳玉 徐正中 潘志明 焦新安 《生物技术通讯》 CAS 2009年第6期810-813,共4页
目的:获得具有生物学活性的重组鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)。方法:应用RT-PCR方法扩增ChIFN-γ基因cDNA,将其克隆入杆状病毒表达系统的转移载体pFastBac1,构建重组质粒pFast-ChIFN-γ,通过位点特异性转座,将ChIFN-γ基因整合到Bacmid穿梭载... 目的:获得具有生物学活性的重组鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)。方法:应用RT-PCR方法扩增ChIFN-γ基因cDNA,将其克隆入杆状病毒表达系统的转移载体pFastBac1,构建重组质粒pFast-ChIFN-γ,通过位点特异性转座,将ChIFN-γ基因整合到Bacmid穿梭载体中,构建重组质粒pBac-ChIFN-γ并转染昆虫细胞Sf9,采用间接免疫荧光试验(IFA)、ELISA试验鉴定重组ChIFN-γ的表达,通过细胞病变抑制法检测重组蛋白的抗病毒活性。结果:IFA、ELISA与细胞病变抑制试验结果显示,重组ChIFN-γ在杆状病毒系统中获得表达,其抗病毒活性达5×103~1×104U/mL。结论:重组ChIFN-γ的获得为其开发应用提供了重要的生物材料。 展开更多
关键词 鸡γ-干扰素 杆状病毒 重组蛋白
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音乐学科教育教学理论探究——评《音乐学科教育学》
13
作者 管成峰 徐正中 栾珍珍 《中国教育学刊》 CSSCI 北大核心 2016年第1期119-119,共1页
学科教育学是在20世纪开辟出来的学术领域,美国是世界上研究学科教育学最发达的国家,其国内在20世纪30年代就出现了各学科教育学的博士论文。我国在"文革"结束之后实施改革开放政策,同时积极地开展各学科教育学的研究和教学工作,并由... 学科教育学是在20世纪开辟出来的学术领域,美国是世界上研究学科教育学最发达的国家,其国内在20世纪30年代就出现了各学科教育学的博士论文。我国在"文革"结束之后实施改革开放政策,同时积极地开展各学科教育学的研究和教学工作,并由首都师范大学发起在北京召开了我国第一届学科教育学研讨会,音乐学科教育学也因此得以建立。 展开更多
关键词 学科教育学 首都师范大学 教育教学理论 教学工作 博士论文 教育学理论 达尔克罗兹 学科基础理论 普通音乐教育 课外音乐活动
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高校网络舆情安全评估指标体系刍议 被引量:1
14
作者 徐正中 高华亭 《中国校外教育(中旬)》 2018年第5期190-190,共1页
由于互联网交流便捷、信息多元、方式互动、传播迅速,高校网络舆情的复杂性、敏感性、微妙性已经越来越强。如果管理不力,往往会给社会舆论安全乃至国家的稳定、和谐带来极其消极的影响。由此,必须积极探究高校网络舆情的成因及其主要特... 由于互联网交流便捷、信息多元、方式互动、传播迅速,高校网络舆情的复杂性、敏感性、微妙性已经越来越强。如果管理不力,往往会给社会舆论安全乃至国家的稳定、和谐带来极其消极的影响。由此,必须积极探究高校网络舆情的成因及其主要特征,明确影响高校网络舆情安全的目标、要素、布局结构和动态变化规律,科学构建高校网络舆情安全指标体系。 展开更多
关键词 高校网络舆情 成因 主要特征 安全指标体系
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深化行政体制改革 加快公共政府建设 被引量:1
15
作者 徐正中 《中共郑州市委党校学报》 2006年第5期42-43,共2页
当前我国改革进入攻坚阶段,公共治理时代的到来需要构建一个为公民提供有效的公共产品和公共服务的政府。公共政府的构建需要深化行政体制改革,不断地进行制度创新、转变职能、改革机构,同时还需要公民的充分参与和监督。深化行政体制... 当前我国改革进入攻坚阶段,公共治理时代的到来需要构建一个为公民提供有效的公共产品和公共服务的政府。公共政府的构建需要深化行政体制改革,不断地进行制度创新、转变职能、改革机构,同时还需要公民的充分参与和监督。深化行政体制改革、建设公共政府是一项复杂的系统工程,需要在党的领导和全体公民的努力下经过长时期才能实现。 展开更多
关键词 公共政府 行政体制改革 公共服务
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大学生科技创新能力培养和山东高校专利工作现状分析及对策研究
16
作者 田静萍 李磊 +2 位作者 邱哓劼 贾文丽 徐正中 《黑龙江科技信息》 2014年第12期84-84,86,共2页
高校专利数据可以较好地反映高校科技创新活动的变化。通过对山东省高校的专利数量、专利质量等数据进行调查分析,可以有效地把握高校科技创新活动的本质与规律,为促进山东省高校培养科技创新人才发展提出对策,便于相关部门及时了解高... 高校专利数据可以较好地反映高校科技创新活动的变化。通过对山东省高校的专利数量、专利质量等数据进行调查分析,可以有效地把握高校科技创新活动的本质与规律,为促进山东省高校培养科技创新人才发展提出对策,便于相关部门及时了解高校科技创新动态,为出台扶持高校发展的政策提供科学依据和决策参考,从而进一步促进国家科技创新体系建设。 展开更多
关键词 高校 专利 创新
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山东省社会养老服务产业化发展现状及对策研究
17
作者 徐正中 管成峰 田静萍 《改革与开放》 2015年第16期86-86,88,共2页
当前,中国已经步入并将长期处于老龄化社会,山东省作为全国第二人口大省,面临的老龄化形势尤为严峻。本文选择山东省济南市、青岛市、烟台市三个地区,对全省的养老服务体系进行实地调研,分析全省养老服务产业化存在的问题,探索解决问题... 当前,中国已经步入并将长期处于老龄化社会,山东省作为全国第二人口大省,面临的老龄化形势尤为严峻。本文选择山东省济南市、青岛市、烟台市三个地区,对全省的养老服务体系进行实地调研,分析全省养老服务产业化存在的问题,探索解决问题的方案和对策。 展开更多
关键词 山东省 社会养老服务 产业化 现状
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粮食购销政策调整对收购资金封闭运行的影响与对策——对湖南省益阳等市的调查
18
作者 徐正中 李卫娥 《农业发展与金融》 1999年第12期18-20,共3页
今年国务院对粮改政策措施进行了进一步完善,对粮食购销政策进行了适当调整。购销政策的调整对国有粮食购销企业的经营将产生什么影响,这些影响与农发行收购资金封闭运行有什么关系,封闭运行管理如何适应政策调整所引发的新要求,为研究... 今年国务院对粮改政策措施进行了进一步完善,对粮食购销政策进行了适当调整。购销政策的调整对国有粮食购销企业的经营将产生什么影响,这些影响与农发行收购资金封闭运行有什么关系,封闭运行管理如何适应政策调整所引发的新要求,为研究探讨这些问题,在夏粮收购旺季我们对湖南省益阳、长沙等市的粮食购销情况进行了调查。一、粮食购销政策调整对企业经营的影响(一)调整保护价收购范围给早灿稻产区粮食企业经营带来较大困难。国家规定"适当调整保护价收购范围,南方早灿稻从2000年新粮上市起退出保护价收购范围"。 展开更多
关键词 收购资金封闭运行 政策调整 粮食购销政策 保护价收购 农发行 湖南省 粮食购销企业 收购量 国有粮食企业 优质稻
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线上线下混合式教学模式在微生物学课程中的应用 被引量:31
19
作者 郑成坤 徐正中 +1 位作者 殷月兰 焦新安 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第8期136-138,共3页
微生物学是生命科学领域的一门重要专业基础课。随着信息技术的飞速发展,线上线下混合式教学模式在高校中得到广泛的探索与实践。为了提升微生物学教学效果,笔者在扬州大学生物科学与技术学院进行了微生物学教学改革,将线上线下混合式... 微生物学是生命科学领域的一门重要专业基础课。随着信息技术的飞速发展,线上线下混合式教学模式在高校中得到广泛的探索与实践。为了提升微生物学教学效果,笔者在扬州大学生物科学与技术学院进行了微生物学教学改革,将线上线下混合式教学模式应用于微生物学课程中。在精选教材、优化教学内容和建设"微生物学"在线课程基础上,开展了线上线下混合式教学模式的实践。结果表明:混合式教学模式有效提高了学生的自主学习能力,显著提升了微生物学课程的教学质量。 展开更多
关键词 微生物学 混合式教学 教学改革 在线课程 自主学习 慕课
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梅花鹿γ干扰素双单抗夹心ELISA方法的初步建立 被引量:3
20
作者 解晓莉 徐正中 +4 位作者 孟闯 单锋丽 单法 陈祥 焦新安 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期989-992,共4页
为利用抗牛γ干扰素(BoIFN-γ)特异性单克隆抗体(MAb)建立检测梅花鹿γ干扰素(CerIFN-γ)的双抗体夹心ELISA检测方法,本研究通过RT-PCR方法从双阳型梅花鹿外周血淋巴细胞总RNA中扩增出CerIFN-γcDNA,通过原核表达系统表达重组CerIFN-γ... 为利用抗牛γ干扰素(BoIFN-γ)特异性单克隆抗体(MAb)建立检测梅花鹿γ干扰素(CerIFN-γ)的双抗体夹心ELISA检测方法,本研究通过RT-PCR方法从双阳型梅花鹿外周血淋巴细胞总RNA中扩增出CerIFN-γcDNA,通过原核表达系统表达重组CerIFN-γ蛋白(rHis-CerIFN-γ);通过间接ELISA方法评价其与抗BoIFN-γMAb的反应性,筛选出与之反应最佳的两株MAb建立双抗体夹心ELISA检测方法。基因序列比对显示CerIFN-γ(JQ408441)与BoIFN-γ的同源性为95.6%,氨基酸序列的同源性为91.6%;SDS-PAGE检测结果显示CerIFN-γ在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效可溶性表达,大小为23 ku;间接ELISA结果显示42株MAb中有15株与rHis-CerIFN-γ反应性较好,其中1C12和5E11两株抗体结合活性最高;采用MAb 1C12为捕获抗体,以生物素标记的MAb 5E11为检测抗体建立的用于检测CerIFN-γ的双抗体夹心ELISA方法可检出3.05 ng/100μL的rHis-CerIFN-γ。本研究所建立的检测CerIFN-γ双抗体夹心ELISA方法,为进一步研究CerIFN-γ及相关疾病提供了实验手段。 展开更多
关键词 梅花鹿γ干扰素 单克隆抗体 夹心ELISA
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