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细胞更新对慢性饮酒大鼠胃黏膜适应性细胞保护的影响 被引量:1
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作者 戈应滨 杜军 +2 位作者 田苏平 李卫星 顾洛 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期74-78,i002,共6页
目的 :以低浓度酒精作为弱刺激 ,通过慢性饮酒的大鼠动物模型 ,探讨慢性饮酒和大鼠胃粘膜适应性细胞保护作用之间的关系 ,以及胃粘膜细胞更新的作用。方法 :分别在饮酒不同时程的大鼠胃内灌注 2ml10 0 %酒精 ,分析胃粘膜的损伤情况。以... 目的 :以低浓度酒精作为弱刺激 ,通过慢性饮酒的大鼠动物模型 ,探讨慢性饮酒和大鼠胃粘膜适应性细胞保护作用之间的关系 ,以及胃粘膜细胞更新的作用。方法 :分别在饮酒不同时程的大鼠胃内灌注 2ml10 0 %酒精 ,分析胃粘膜的损伤情况。以流式细胞术、免疫组化和计算机图像处理技术观察大鼠胃粘膜的细胞增殖和凋亡 ,探讨胃粘膜的细胞更新情况。结果 :①纯酒精可使大鼠的胃体和胃窦出现溃疡和出血 ,饮用 6 % (v/v)酒精 3~ 14d的大鼠这种现象明显减轻 ,饮用 6 % (v/v)酒精 1d和 2 8d的大鼠则无改变。②饮用 6 % (v/v)酒精 3~ 14d的大鼠胃粘膜细胞更新加快 ,而饮酒 2 8d大鼠胃粘膜细胞凋亡增加 ,细胞增殖减少。结论 :细胞更新加快是适度低浓度酒精刺激引起的胃粘膜适应性细胞保护作用的重要原因 ,低浓度酒精刺激超过一定时限可引起胃粘膜萎缩性病变的趋势 ,使胃粘膜抵抗能力降低。 展开更多
关键词 适应性细胞保护 细胞更新 胃粘膜 细胞凋亡 酒精
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大鼠胃底腺胃蛋白酶原单特异性抗体的制备
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作者 戈应滨 顾洛 杜军 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期109-110,120,F003,共4页
目的 :建立一种胃蛋白酶原的单特异性抗体的制备方法 ,进行胃蛋白酶原的研究。方法 :从大鼠胃蛋白酶原氨基酸序列中选择第 2 97~ 314号氨基酸 ,合成多肽链作为抗原免疫家兔 ,得到抗血清。用蛋白印记检测 (Western Blot)、酶联免疫吸附... 目的 :建立一种胃蛋白酶原的单特异性抗体的制备方法 ,进行胃蛋白酶原的研究。方法 :从大鼠胃蛋白酶原氨基酸序列中选择第 2 97~ 314号氨基酸 ,合成多肽链作为抗原免疫家兔 ,得到抗血清。用蛋白印记检测 (Western Blot)、酶联免疫吸附测定(EL ISA)及免疫组化染色检测抗体的特异性及效价。结果 :Western Blot和免疫组化染色显示 ,得到的抗体对胃蛋白酶原有单特异性。抗体的效价 EL ISA反应达到 1∶ 10 0 0 0 0 ,免疫组化染色可达到 1∶ 5 0 0 0 0。结论 :用合成多肽链为抗原制备的胃蛋白酶抗体 ,具有单特异性和较高的抗体效价 ,可用于免疫组化、Western Blot、EL ISA等方法 。 展开更多
关键词 抗体 合成多肽 胃底腺 胃蛋白酶原 单特异性抗体 制备
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胃蛋白酶C基因在大鼠胃底腺发育过程中上皮细胞内的表达
3
作者 戈应滨 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期464-466,F002,共4页
目的研究胃蛋白酶原基因C在大鼠胃底腺发育过程中上皮细胞的表达。方法采用地高辛标记的RNA探针,用原位杂交的方法研究了大鼠胃底腺中胃蛋白酶C产生细胞的个体发育。结果大鼠胃腺在胚胎18.5天开始出现,但没有形态分化,胃蛋白酶的mRNA在... 目的研究胃蛋白酶原基因C在大鼠胃底腺发育过程中上皮细胞的表达。方法采用地高辛标记的RNA探针,用原位杂交的方法研究了大鼠胃底腺中胃蛋白酶C产生细胞的个体发育。结果大鼠胃腺在胚胎18.5天开始出现,但没有形态分化,胃蛋白酶的mRNA在出生后3.5天首次被原位杂交法检出,其蛋白酶产生细胞在出生后8周发育成熟,胃蛋白酶的mRNA表达在主细胞和颈黏液细胞内,其发育可分为4个阶段①胚胎18.5天至出生后0.5天;②出生后3.5天至2周;③出生后3周至4周;④出生后8周。在胃底腺发育过程中,胃蛋白酶mRNA的表达至局限于某种特定的细胞,这些细胞的分布具有明确的阶段特异性。结论认为在发育生物学的研究中,胃蛋白酶C可作为胃上皮细胞分化的分子标志。 展开更多
关键词 胃蛋白酶原C 个体发育 基因表达 胃底腺 原位杂交 大鼠
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慢性饮酒大鼠胃粘膜的适应性细胞保护作用 被引量:14
4
作者 李卫星 杜军 +2 位作者 田苏平 顾洛 戈应滨 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期322-324,F003,共4页
目的:观察胃内灌注纯酒精对慢性饮酒大鼠胃粘膜的损害,并探讨慢性酒精刺激对大鼠胃粘膜细胞更新的影响及其在适应性细胞保护作用中的意义。方法:以6%(V/V)的酒精作为大鼠饮水的惟一来源,分别在大鼠饮酒的不同时程内胃内灌注100%酒精,观... 目的:观察胃内灌注纯酒精对慢性饮酒大鼠胃粘膜的损害,并探讨慢性酒精刺激对大鼠胃粘膜细胞更新的影响及其在适应性细胞保护作用中的意义。方法:以6%(V/V)的酒精作为大鼠饮水的惟一来源,分别在大鼠饮酒的不同时程内胃内灌注100%酒精,观察大鼠胃粘膜的损伤情况。同时用免疫组化和计算机图像处理技术观察饮酒不同时程的大鼠胃粘膜的细胞增殖和凋亡,了解其细胞更新的情况。结果:100%酒精灌胃后大鼠胃粘膜的损伤和对照组相比,饮酒后1天的大鼠胃粘膜改变差异无显著性,饮酒后3~14天大鼠的胃粘膜损伤有显著性降低,饮酒后28天的大鼠差异又无显著性。饮酒3~14天的大鼠胃粘膜的细胞增殖和凋亡同步增加,提示在此时期内胃粘膜的细胞更新增强。结论:适当低浓度酒精反复刺激可以促进胃粘膜的细胞更新并引起大鼠胃粘膜的适应性细胞保护作用。 展开更多
关键词 胃粘膜损伤 适应性细胞保护 细胞更新 酒精 大鼠
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神经肽在中枢和外周对大鼠胃粘膜血流量的调节作用 被引量:6
5
作者 顾洛 许宏俐 +5 位作者 闫长栋 田苏平 杜军 程光 戈应滨 李栋生 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期383-388,共6页
目的 :系统研究降钙素基因相关肽 (CGRP)、胃泌素 17(G17)、蛙皮素 (Bom)、甲基脑啡肽 (Met enk)、神经肽Y(NPY)和生长抑素 (SS)在中枢及外周对胃粘膜血流量 (GMBF)的影响及内源性NO在神经肽所致GMBF增加效应中的作用。方法 :采用氢气... 目的 :系统研究降钙素基因相关肽 (CGRP)、胃泌素 17(G17)、蛙皮素 (Bom)、甲基脑啡肽 (Met enk)、神经肽Y(NPY)和生长抑素 (SS)在中枢及外周对胃粘膜血流量 (GMBF)的影响及内源性NO在神经肽所致GMBF增加效应中的作用。方法 :采用氢气清除法测定GMBF以及近胃动脉灌注和侧脑室微量注射神经肽技术。结果 :①近胃动脉灌注CGRP和G17(5、5 0和 10 0pmol·min-1)均明显地、剂量依赖性地增加GMBF ,其中CGRP作用最强。事先静脉注射NO的生物合成阻滞剂L NAME ,可分别完全和部分阻断CGRP和G17的这一效应。②近胃动脉灌注5 0和 10 0pmol·min-1剂量的Bom和Met enk时 ,GMBF显著增加 ;L NAME可完全抑制Bom增加GMBF的效应 ,但仅部分阻断Met enk引起的效应。③近胃动脉灌注NPY(5、5 0和 10 0 pmol·min-1)可使GMBF明显降低 ,此作用具量效关系 ;SS(5 0和 10 0 pmol·min-1)亦可使GMBF明显降低。④侧脑室注射 10 μgCGRP和G17可使GMBF显著增加 ;L NAME可完全阻断CGRP的此效应 ,但仅部分阻断G17所致的GMBF增加效应。⑤侧脑室注射NPY(10 μg)可显著降低GMBF。 结论 :神经肽在大鼠GMBF的调节中具有十分重要的作用。在神经肽所致GMBF增加效应中 。 展开更多
关键词 神经肽 中枢 大鼠 胃粘膜血流量 调节作用 一氧化氮 消化系统 生理功能
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慢性酒精刺激对大鼠下丘脑及伏核内β-内啡肽含量的影响 被引量:10
6
作者 沈红芬 戈应滨 +3 位作者 朱学江 张小虎 王自正 袁孝如 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期293-294,324,共3页
目的 :观察在长期低浓度酒精处理后及撤除酒精给药的过程中 ,大鼠下丘脑及伏核中 β 内啡肽含量的变化 ,探讨酒精对 β 内啡肽系统的影响及其在酒精依赖过程中的作用。 方法 :以 6 % (v/v)的酒精作为大鼠饮水的唯一来源 ,分别取大鼠在... 目的 :观察在长期低浓度酒精处理后及撤除酒精给药的过程中 ,大鼠下丘脑及伏核中 β 内啡肽含量的变化 ,探讨酒精对 β 内啡肽系统的影响及其在酒精依赖过程中的作用。 方法 :以 6 % (v/v)的酒精作为大鼠饮水的唯一来源 ,分别取大鼠在饮酒和撤除酒精不同时程的下丘脑及伏核标本 ,用放免法测定每克组织中 β 内啡肽的含量。同时用顶空气相色谱法测定大鼠在饮酒过程中不同时段血中的酒精浓度。结果 :下丘脑及伏核的 β 内啡肽含量在长期 (4周 )饮用酒精后无明显变化 ,在撤除酒精后的 2~ 4天明显升高 ,1周后恢复正常。动物血中酒精浓度在摄入酒精的不同时段无明显差异。结论 :酒精影响下丘脑及伏核中 β 内啡肽的含量是低浓度反复多次刺激的结果 ,撤药后伏核内 β 内啡肽的高含量是动物产生依赖的重要原因。 展开更多
关键词 Β-内啡肽 伏核 下丘脑 慢性酒精中毒
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长期摄入低浓度酒精对大鼠胃黏膜热休克蛋白表达的影响 被引量:5
7
作者 杜军 田苏平 +2 位作者 顾洛 李卫星 戈应滨 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期474-475,F002,共3页
目的:探讨长期低浓度酒精刺激对大鼠胃黏膜热休克蛋白70(HSP70)表达的影响,及其在适应性细胞保护作用中的意义。方法:以6%的酒精水溶液作为大鼠饮水的唯一来源,用免疫组化技术观察饮酒不同时程中大鼠胃黏膜HSP70阳性细胞的分布情况,并... 目的:探讨长期低浓度酒精刺激对大鼠胃黏膜热休克蛋白70(HSP70)表达的影响,及其在适应性细胞保护作用中的意义。方法:以6%的酒精水溶液作为大鼠饮水的唯一来源,用免疫组化技术观察饮酒不同时程中大鼠胃黏膜HSP70阳性细胞的分布情况,并对不同的胃腺细胞通过形态学观察或HSP70与增殖细胞核反应抗原(PCNA)免疫双重染色进行鉴定。结果:正常对照组大鼠的主细胞呈HSP70弱阳性反应。饮用酒精水溶液1天的大鼠,胃腺表面黏液性细胞呈HSP70强阳性反应,主细胞弱阳性反应。饮用3~14天的大鼠,HSP70阳性细胞分布于胃黏膜表面、胃腺颈部和胃基底部,胃腺颈部HSP70阳性细胞经PCNA和HSP70免疫双重染色证实为胃腺干细胞。饮用28天的大鼠HSP70阳性细胞分布区域和饮用1天的大鼠相同。结论:适当低浓度的酒精刺激可引起胃黏膜干细胞HSP70的表达,并可能在大鼠胃黏膜的适应性细胞保护机制中起重要作用。 展开更多
关键词 低浓度酒精 大鼠 胃黏膜 热休克蛋白
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染料木黄酮对人乳腺癌细胞肌动蛋白细胞骨架和黏附能力的影响 被引量:6
8
作者 宋鸣子 戈应滨 +2 位作者 范玲玲 李迎春 顾洛 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期424-427,I0001,共5页
目的:体外研究染料木黄酮(genistein)对人乳腺癌细胞(MDA-MB-435)肌动蛋白细胞骨架及黏附能力的影响。方法:不同浓度染料木黄酮(12.5、25.0、50.0和100.0!mol/L)孵育MDA-MB-435细胞24h。用FITC标记的鬼笔环肽标记F-肌动蛋白,分别用荧光... 目的:体外研究染料木黄酮(genistein)对人乳腺癌细胞(MDA-MB-435)肌动蛋白细胞骨架及黏附能力的影响。方法:不同浓度染料木黄酮(12.5、25.0、50.0和100.0!mol/L)孵育MDA-MB-435细胞24h。用FITC标记的鬼笔环肽标记F-肌动蛋白,分别用荧光显微镜和流式细胞仪技术分析肌动蛋白细胞骨架的重组情况;噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞对人工重组基膜的黏附能力。结果:不同浓度染料木黄酮均导致细胞内肌动蛋白细胞骨架发生解聚,同时细胞内F-肌动蛋白排列和分布及细胞形态发生明显改变;此外,染料木黄酮可明显降低MDA-MB-435细胞对人工重组基膜的黏附能力,其效应呈剂量依赖性。结论:染料木黄酮在体外可抑制乳腺癌细胞的黏附能力,其作用可能与其诱导肌动蛋白细胞骨架重组有关。 展开更多
关键词 染料木黄酮 细胞骨架 黏附 乳腺癌细胞(MDA-MB-435)
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Pepsinogen C Gene Expression in Epithelial Cells of Rat Stomach During Development
9
作者 戈应滨 《Developmental and Reproductive Biology》 2002年第2期88-94,共7页
Pepsinogens are zymogens of pepsins,aspecific proteases working as digestive enzymes in vertebrate stomach,of which biological and molecular properties have been extensively studied.Several exhaustive studies have bee... Pepsinogens are zymogens of pepsins,aspecific proteases working as digestive enzymes in vertebrate stomach,of which biological and molecular properties have been extensively studied.Several exhaustive studies have been performed in the pepsinogen producing cells in developing rat stomachs,but little is known about the expression of pepsinogen gene in these cells.In this study,the ontogeny of pepsinogen producing cells in rat fundic glands was studied by in situ hybridization using a digoxigenin-labeled RNA probe.The rat gastric epithelium was stratified but was morphologically undifferentiated at the stage of 18.5 days of gestation.The pepsinogen mRNA was expressed both in chief cells and mucous neck cells in adult rats,which was first detected by in situ hybridization in the stomach of the rats at 3.5 days after birth.The development of pepsinogen producing cells could be classified into four stages:(1) 18.5 days of gestation to 0.5 day after birth;(2) 3.5 days to 2 weeks after birth;(3) 3~4 weeks after birth;(4) 8 weeks after birth.Pepsinogen expression is strictly limited to these cells,the distribution of which shown a developmental stage-specific manner.We concluded the pepsinogen C could offer excellent molecular markers of differentiation during stomach epithelial cellulur development. 展开更多
关键词 pepsinogen C ONTOGENY gene expression fundic gland in situ hybridization RAT
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慢性酒精刺激对大鼠伏核EEG及脑电功率谱的影响 被引量:6
10
作者 沈红芬 张小虎 +3 位作者 朱学江 戈应滨 高兴亚 袁孝如 《中国神经科学杂志》 CSCD 2002年第1期446-450,共5页
观察慢性酒精刺激过程中大鼠伏核EEG及功率谱的变化 ,探索酒精依赖的神经机制。在伏核埋植记录电极后 ,给大鼠饮用 6 %酒精水溶液 30d。用脑电图机及计算机信号采集系统记录及分析饮酒期间及停饮后的伏核EEG及功率谱。结果表明 :在慢性... 观察慢性酒精刺激过程中大鼠伏核EEG及功率谱的变化 ,探索酒精依赖的神经机制。在伏核埋植记录电极后 ,给大鼠饮用 6 %酒精水溶液 30d。用脑电图机及计算机信号采集系统记录及分析饮酒期间及停饮后的伏核EEG及功率谱。结果表明 :在慢性饮酒过程中 ,α节律明显减小 ,散在的高幅慢活动δ波和θ波逐渐增多 ,功率谱分析表明δ频段功率百分比明显增加 ,而θ频段功率百分比明显减少 ,总功率减少。停饮后 ,出现棘波和棘慢综合波 ,并持续增多 ,δ频段功率百分比逐渐减少 ,而θ和α频段功率百分比逐渐增加 ,总功率增加 ,约在停饮 9~ 10d ,脑电逐渐恢复正常。提示 :伏核EEG和脑电功率谱的变化在一定程度上可反映慢性酒精刺激及撤除刺激对神经系统的影响。 展开更多
关键词 脑电图 脑电功率谱 慢性酒精刺激 大鼠 伏核 EEG 影响
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八年制医学生临床和科研能力培养的思考 被引量:45
11
作者 杜军 戈应滨 顾洛 《南京医科大学学报(社会科学版)》 2007年第1期78-80,共3页
八年制医学教育是中国医学教育的新起点,现在正处于试行阶段。在2006年第三届中国八年制医学教育峰会上专家指出,八年制培养的学生应具有较强的临床实践技能和初步的科学研究能力,为发展潜力远大,创新能力和国际竞争力强的临床医学专门... 八年制医学教育是中国医学教育的新起点,现在正处于试行阶段。在2006年第三届中国八年制医学教育峰会上专家指出,八年制培养的学生应具有较强的临床实践技能和初步的科学研究能力,为发展潜力远大,创新能力和国际竞争力强的临床医学专门人才。笔者就八年制学生临床与科研能力的培养模式与培养目标进行了分析探讨,期望能对八年制医学教育学制改革提供一些有益的信息。 展开更多
关键词 医学教育 八年制 临床 科研
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一氧化氮对糖尿病小鼠近端结肠动力有抑制作用 被引量:3
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作者 杜军 候艳 +3 位作者 刘景丽 刘晓燕 冯伟燕 戈应滨 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1109-1112,共4页
目的:研究一氧化氮(NO)对糖尿病小鼠近端结肠收缩功能的作用。方法:制备C57小鼠糖尿病(DM)模型,用硝酸还原酶法检测近端结肠组织NO水平;用免疫印迹法分析近端结肠组织nNOS和iNOS的含量;用免疫荧光染色观察近端结肠中nNOS的分布;用MD-200... 目的:研究一氧化氮(NO)对糖尿病小鼠近端结肠收缩功能的作用。方法:制备C57小鼠糖尿病(DM)模型,用硝酸还原酶法检测近端结肠组织NO水平;用免疫印迹法分析近端结肠组织nNOS和iNOS的含量;用免疫荧光染色观察近端结肠中nNOS的分布;用MD-2000生物信号采集分析系统观察NO前体L-精氨酸(L-Arg)、nNOS的抑制剂7-硝基吲唑(7-NI)、iNOS的抑制剂氨基胍(AG)对糖尿病小鼠近端结肠离体肌条肌张力的影响。结果:nNOS主要分布在近端结肠肌层和黏膜下层,DM组nNOS蛋白和NO水平与正常组比较显著升高,未发现有iNOS蛋白表达。DM组小鼠近端结肠肌张力较正常组降低,但收缩频率无改变。L-Arg可显著抑制正常组和DM组小鼠近端结肠肌的张力,7-NI可显著增强正常组和DM组小鼠近端结肠的肌张力,而加入AG前后结肠张力均无显著变化。所有药物对结肠收缩频率无影响。结论:NO抑制结肠平滑肌收缩能力可能是糖尿病结肠动力功能障碍的重要原因,其作用与nNOS在近端结肠表达增多相关。 展开更多
关键词 糖尿病 NO NNOS 肌张力
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急、慢性乙醇处理后大鼠伏核内cAMP反应元件结合蛋白磷酸化的变化 被引量:3
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作者 李菁 李跃华 +3 位作者 张小虎 朱学江 戈应滨 袁孝如 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期147-152,共6页
采用免疫组织化学的方法 ,检测急性、慢性乙醇作用及戒断后大鼠伏核内cAMP反应元件结合蛋白(cAMPresponseelementbindingprotein ,CREB)磷酸化的变化。结果显示 ,急性腹腔注射乙醇后 15min ,伏核内磷酸化CREB(phospho CREB ,p CREB)蛋... 采用免疫组织化学的方法 ,检测急性、慢性乙醇作用及戒断后大鼠伏核内cAMP反应元件结合蛋白(cAMPresponseelementbindingprotein ,CREB)磷酸化的变化。结果显示 ,急性腹腔注射乙醇后 15min ,伏核内磷酸化CREB(phospho CREB ,p CREB)蛋白明显增加 ,3 0min后达高峰 ,至 1和 6h后仍明显高于对照组。而慢性饮乙醇溶液显著降低大鼠伏核内 p CREB蛋白含量 ,在撤除乙醇后 2 4、72h时 ,伏核内p CREB蛋白含量仍明显较低 ,戒断后 7d ,恢复到正常水平。结果表明 ,急性乙醇处理增加伏核内CREB磷酸化作用 ,而慢性乙醇作用则降低伏核内CREB磷酸化作用 。 展开更多
关键词 乙醇 伏核 CAMP反应元件结合蛋白
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不同浓度酒精对慢性饮酒大鼠胃黏膜细胞增殖的影响 被引量:4
14
作者 孙阳 杜军 +1 位作者 陈敏 戈应滨 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期348-350,J001,共4页
目的:探讨不同浓度酒精刺激对慢性饮酒大鼠胃黏膜细胞增殖的影响及其在适应性细胞保护作用中的意义。方法:分别以1%、3%、60A、12%和24%(V/V)的酒精水溶液作为大鼠饮水的唯一来源,饮用3天后,再向胃内灌注100%酒精,观察大鼠胃黏膜... 目的:探讨不同浓度酒精刺激对慢性饮酒大鼠胃黏膜细胞增殖的影响及其在适应性细胞保护作用中的意义。方法:分别以1%、3%、60A、12%和24%(V/V)的酒精水溶液作为大鼠饮水的唯一来源,饮用3天后,再向胃内灌注100%酒精,观察大鼠胃黏膜的损伤情况。同时用免疫组化法检测增殖性细胞核抗原(PCNA)的表达,应用计算机图像处理技术观察饮酒不同时程的大鼠胃黏膜的细胞增殖和凋亡以了解其细胞更新的情况。结果:与对照组相比,100%酒精灌胃后大鼠胃黏膜的损伤情况如下,饮用1%和3%酒精的大鼠差异无显著性,而饮用6%和12%酒精的大鼠的胃黏膜损伤显著性降低,但饮用24%酒精的大鼠差异无显著性。饮用6%和12%酒精的大鼠胃黏膜的细胞增殖显著增加,提示胃黏膜的细胞更新增强。结论:慢性饮酒大鼠胃黏膜的细胞更新增强可引起胃黏膜的适应性细胞保护作用,此作用和饮用的酒精浓度有关。 展开更多
关键词 胃黏膜损伤 细胞更新 适应性细胞保护 酒精
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PC12细胞化学缺氧复氧损伤与缺氧诱导因子1表达的关系(英文) 被引量:5
15
作者 王斌 倪永兵 +4 位作者 王娟 李华 严虹 戈应滨 肖继皋 《中国神经科学杂志》 CSCD 2004年第2期99-104,共6页
目的 研究缺氧诱导因子 1(HIF1)在PC12细胞化学缺氧复氧损伤中的作用。方法在培养液中加入和去除氯化钴模拟化学缺氧和复氧 ,以乳酸脱氢酶 (LDH)漏出和细胞超微结构改变作为细胞损伤指标 ,观察化学缺氧和复氧后不同时间细胞损伤和HIF1... 目的 研究缺氧诱导因子 1(HIF1)在PC12细胞化学缺氧复氧损伤中的作用。方法在培养液中加入和去除氯化钴模拟化学缺氧和复氧 ,以乳酸脱氢酶 (LDH)漏出和细胞超微结构改变作为细胞损伤指标 ,观察化学缺氧和复氧后不同时间细胞损伤和HIF1α蛋白变化。结果  在氯化钴模拟化学缺氧实验中 ,LDH漏出明显增加 ,8h达高峰 ,随后逐渐下降 ,电镜结果与LDH改变相一致 ,HIF1α蛋白表达在化学缺氧后 2 ,4 ,8和 12h均明显增加 ,8h达高峰 ,提示化学缺氧 8h后细胞损伤逐渐减轻可能与HIF1α蛋白水平升高有关。在模拟复氧实验中 ,LDH和细胞形态学改变都显示化学复氧 8h细胞损伤最为严重 ,而HIF1α蛋白表达在化学复氧 4和 8h均明显下降 ,提示细胞化学复氧损伤可能与HIF1α蛋白水平下降有关。 结论 HIF1对神经细胞化学缺氧复氧损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 PC12细胞 化学缺氧复氧损伤 缺氧诱导因子1 表达
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褪黑素对高糖刺激人视网膜色素上皮细胞诱导型一氧化氮合酶表达的影响 被引量:4
16
作者 曹鎏 洪瑾 +3 位作者 帅捷 马健 袁志兰 戈应滨 《眼科新进展》 CAS 2007年第7期492-495,共4页
目的研究褪黑素对高糖刺激体外培养的人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的影响。方法培养人RPE细胞,分为对照组、甘露醇组、高糖组和高糖+褪黑素组,... 目的研究褪黑素对高糖刺激体外培养的人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的影响。方法培养人RPE细胞,分为对照组、甘露醇组、高糖组和高糖+褪黑素组,作用48h后,光镜观察细胞形态;MTT法检测细胞活性;免疫荧光染色法和Western blot检测RPE细胞中iNOS的蛋白表达。结果MTT检测结果表明高糖可以抑制RPE细胞增生,加入褪黑素后,抑制作用减弱;免疫荧光染色法和Western blot检测结果表明,与对照组相比,高糖组iNOS蛋白表达明显增高,加入褪黑素后,iNOS表达被显著抑制。结论高糖可以抑制RPE细胞增生,诱导RPE细胞iNOS的表达上调,而褪黑素可减轻细胞损伤。 展开更多
关键词 高糖 诱导型一氧化氮合酶 视网膜色素上皮细胞 褪黑素
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金雀异黄素对缺氧诱导的人ARPE-19细胞VEGF表达的抑制作用 被引量:4
17
作者 周青 袁志兰 +1 位作者 戈应滨 王斌 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期576-579,共4页
目的:研究长期缺氧对体外培养的人ARPE鄄19细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的诱导作用,以及金雀异黄素(genistein,Gen)对其表达的影响初步研究。方法:使用半定量RT鄄PCR和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测ARPE鄄19细胞中VEGFmRNA和蛋白的表... 目的:研究长期缺氧对体外培养的人ARPE鄄19细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的诱导作用,以及金雀异黄素(genistein,Gen)对其表达的影响初步研究。方法:使用半定量RT鄄PCR和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测ARPE鄄19细胞中VEGFmRNA和蛋白的表达,分析不同浓度Gen以及PD98059、TyrphostinA25对ARPE鄄19细胞缺氧24h诱导的VEGF表达的影响。结果:①正常对照组有少量VEGF表达,缺氧24h可明显提高ARPE鄄19细胞VEGFmRNA和蛋白的表达,分别为9.566±1.528和2.636±0.499倍;②Gen可明显抑制缺氧诱导ARPE鄄19细胞中VEGFmRNA和蛋白的表达,且呈浓度依赖性(P<0.05);③PD98059、TyrphostinA25也可抑制低氧诱导的VEGF的产生,但抑制作用没有Gen(200μmol/L组)明显。结论:Gen可抑制长期缺氧诱导的ARPE鄄19细胞VEGF表达,并可能是通过抑制p42/p44MAPK途径和HIF鄄1途径共同抑制VEGF的产生,提示Gen对视网膜新生血管的形成具有预防和潜在的临床治疗价值。 展开更多
关键词 缺氧 ARPE-19 金雀异黄素 VEGF
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血管内皮生长因子mRNA表达及ARPE-19细胞增生与缺氧的诱导效应 被引量:2
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作者 周青 陈志钧 +3 位作者 赵丽 戈应滨 王斌 袁志兰 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第19期3712-3714,共3页
目的:研究缺氧对人视网膜色素上皮细胞-19(ARPE-19)的增生和血管内皮细胞生长因子表达的诱导作用。方法:实验于2004-10/2005-12于南京医科大学生理学实验室完成。实验材料:ARPE-19细胞购自美国American Type Culture Collection。实验... 目的:研究缺氧对人视网膜色素上皮细胞-19(ARPE-19)的增生和血管内皮细胞生长因子表达的诱导作用。方法:实验于2004-10/2005-12于南京医科大学生理学实验室完成。实验材料:ARPE-19细胞购自美国American Type Culture Collection。实验方法及分组:ARPE-19细胞被暴露在含体积分数为0.05的CO2和0.95的N2的缺氧培养缸中培养为缺氧组。同代同一培养瓶中传代的细胞在常氧情况下培养,作为正常对照组。实验评估:2,12,24,36h后,光镜下观察ARPE-19细胞形态学变化,采用四甲基偶氮唑盐法检测两组ARPE-19细胞增殖的情况;用半定量反转录聚合酶链反应检测两组ARPE-19细胞血管内皮细胞生长因子mRNA的表达。结果:①缺氧对ARPE-19细胞增殖的影响:ARPE-19细胞缺氧组2,12,24,36hA值均比正常组明显增高,除缺氧2h外,其他各时间点均能明显诱导ARPE-19细胞增殖(P<0.05)。②缺氧对血管内皮生长因子mRNA表达的影响:缺氧组血管内皮生长因子mRNA表达明显增高,缺氧2,12,24,36h血管内皮生长因子mRNA表达均高于正常对照组(1.567±0.080,1.868±0.176,5.061±0.407,1.748±0.277,0.603±0.017,P<0.05,n=8),并且呈时间依赖性,在24h达到表达最高峰。结论:缺氧可以促进ARPE-19细胞增殖和血管内皮生长因子mRNA表达增加,为研究缺血缺氧性视网膜疾病提供了一个新的思路,即控制缺氧造成的视网膜色素上皮细胞增殖和血管内皮细胞增殖对治疗缺血缺氧性视网膜疾病是绝对必要的。 展开更多
关键词 缺氧 色素上皮 血管内皮生长因子 组织构建
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肌动蛋白磷酸化在溶血磷脂酸致乳腺癌细胞迁移中的作用 被引量:2
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作者 杜军 杨郁 +1 位作者 戈应滨 顾洛 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期609-612,共4页
目的:研究肌动蛋白磷酸化在溶血磷脂酸(LPA)致乳腺癌细胞(MDA-MB-231)肌动蛋白细胞骨架重构及细胞迁移中的作用。方法:10μmol/LLPA孵育MDA-MB-231细胞4h,用Transwell法检测细胞迁移速度;用Western blot及免疫印迹技术检测细胞内骨架组... 目的:研究肌动蛋白磷酸化在溶血磷脂酸(LPA)致乳腺癌细胞(MDA-MB-231)肌动蛋白细胞骨架重构及细胞迁移中的作用。方法:10μmol/LLPA孵育MDA-MB-231细胞4h,用Transwell法检测细胞迁移速度;用Western blot及免疫印迹技术检测细胞内骨架组分及胞浆组分中肌动蛋白的分布改变;用二维电泳法分离并比较细胞内骨架组分及胞浆组分中磷酸化和非磷酸化的肌动蛋白含量。结果:10μmol/L浓度的LPA可明显增加MDA-MB-231细胞迁移速度。LPA处理后细胞内F-肌动蛋白含量明显增加,而肌动蛋白总量并未出现明显变化。此外,LPA处理还可明显升高细胞内胞浆组分中磷酸化的肌动蛋白量;在骨架组分中,肌动蛋白仅以磷酸化的形式存在,且含量在LPA刺激前后无明显差异。结论:LPA可促进乳腺癌细胞的迁移能力及细胞骨架发生聚合,其作用可能与其改变细胞胞浆中肌动蛋白的磷酸化水平有关。 展开更多
关键词 LPA 细胞骨架 迁移 肌动蛋白 乳腺癌细胞(MDA-MB-231细胞)
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高糖刺激人视网膜色素上皮细胞诱导型一氧化氮合酶表达及与p38 MAPK信号通路关系 被引量:2
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作者 洪瑾 袁志兰 +1 位作者 帅捷 戈应滨 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期970-973,F0003,共5页
目的:观察高糖刺激体外培养的人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelium,RPE)细胞表达诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的作用及其与p38信号通路(p38 mitogen activated protein kinase,p38 MAPK)... 目的:观察高糖刺激体外培养的人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelium,RPE)细胞表达诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的作用及其与p38信号通路(p38 mitogen activated protein kinase,p38 MAPK)的关系,从而进一步探讨糖尿病视网膜病变的发病机制。方法:培养人RPE细胞,分为对照组、高糖组、高糖+SB203580组和甘露醇组,采用四甲基氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力,免疫荧光染色法观察RPE细胞中磷酸化p38 MAPK和iNOS的蛋白表达。结果:①MTT检测结果:高糖可以抑制RPE细胞增殖,加入特异性p38 MAPK抑制剂SB203580预处理后,抑制作用减弱;②免疫荧光法检测结果:与对照组相比,高糖组磷酸化p38 MAPK,iNOS蛋白表达明显增高;加入SB203580预处理后,iNOS表达被显著抑制。结论:高糖能够抑制RPE细胞增殖,通过活化p38 MAPK信号通路刺激RPE细胞iNOS的表达,在糖尿病视网膜病变的发生发展中起重要作用。 展开更多
关键词 高糖 RPE iNOS p38 MAPK
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