异基因造血干细胞移植术后免疫性溶血性贫血诊治问题与对策

随着异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)成功率显著提升及日益广泛的应用,造血重建后不同阶段合并免疫性溶血性贫血(HA)诊治成为常见的临床问题。由于病因不同于非Allo-HSCT相关的HA,建立Allo-HSCT术后免疫性HA的诊治思路已成为儿童Allo-HSCT术后管理的重要问题之一。本文将对Allo-HSCT后免疫性HA诊治面临的问题和相应对策进行论述。

MTHFR C677T基因多态性与儿童急性淋巴细胞白血病大剂量甲氨蝶呤治疗不良反应的相关性研究

目的:研究亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T基因多态性对儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)大剂量甲氨蝶呤(MTX)治疗后不良反应的影响。方法:收集中山大学孙逸仙纪念医院儿科2018年11月至2020年10月收治的69例ALL患儿的临床资料,分离患儿外周血白细胞,用数字荧光分子杂交测序法进行MTHFR基因分型;观察大剂量MTX治疗后的不良反应,同时监测MTX血药浓度,分析MTHFR基因多态性对治疗不良反应及MTX血药浓度的影响。结果:中高危ALL患儿中,与野生组(CC基因型)比较,MTHFR C677T突变组(CT+TT基因型)患儿发生白细胞减少(OR=2.38)、中性粒细胞减少(OR=2.2)、血红蛋白减少(OR=1.83)、肝功能损害的风险高(OR=1.98)。然而,MTHFR C677T突变组与野生组在24、48及72 h的MTX血药浓度无明显差异。多因素分析结果显示,MTX血药浓度(48 h)、ALL临床危险度分级、MTHFR C677T基因多态性是影响大剂量MTX治疗不良反应的危险因素。结论:MTHFR C677T基因突变与ALL患儿大剂量MTX治疗后骨髓抑制和肝功能损害存在相关性。

GZ-2002急性淋巴细胞白血病化疗方案治疗非高危儿童急性淋巴细胞白血病多中心协作临床研究

目的探讨多中心合作开展小儿急性淋巴细胞白血病（ALL）化疗的可能性和提高ALL治愈率的新策略。方法协作组由广州市7家大型医院组成,各单位指定负责人1人,并设立专职资料管理员1人。协作组邀请香港中文大学威尔斯亲王医院为顾问单位。各单位对符合入选标准的新诊断标准危险型（SR）和中度危险型（IR）ALL患儿均采用GZ-2002 ALL化疗方案,所有病例按细胞形态学、免疫学和细胞遗传学分型。根据发病时的年龄、外周血白细胞、第8天的泼尼松反应、t（9：22）或t（4;11）、BCR/ABL和MLL/AF4融合基因,以及化疗第33天是否完全缓解确定临床类型。GZ-2002方案以BFM2002方案为基础,总疗程共104周,由诱导期、巩固期、再诱导期和维持期组成。结果 2002年10月~2009年6月,协作组共收治ALL患儿617例,随访至2009年10月31日,中位随访时间44.5个月（范围：4~84个月）。按协作组诊断标准,把儿童ALL分为SR、IR和高危型（HR）。入组采用GZ-2002 ALL化疗方案的SR和IR患儿共446例,男227例,女169例;年龄1~14岁（中位年龄6岁）。诱导期的总完全缓解率为99.8%（445/446）。SR组3年和5年无事件生存率（EFS）分别为（90.5±5.0）%和（82.0±4.0）%。IR组3年和5年EFS分别为（88.0±6.0）%和（78.0±5.0）%,两组差异均有显著性意义（P〈0.05）。至随访终止日,共随访到回复病例413例,占总例数的92.6%。可随访例数中无事件生存者339例（82.1%）,其中停药无病生存者267例（78.8%）,进入维持阶段72例（21.2%）。有＂事件＂者78例（18.9%）,其中复发47例（11.4%）,非复发死亡20例（4.8%）。远期毒副作用8例（1.9%）,第2肿瘤3例（0.7%）;复发者已死亡24例（含6例复发后放弃）,带病存活23例。死亡的中位时间为治疗后7.9个月（1.5~23个月）。失访33例,其中停药后失访5例,维持期间因出国、搬家、原联络地址变更和回原籍（广东省以外）等共28例。结论 GZ-2002 ALL化疗方案的疗效满意,广州地区多中心协作的模式是成功的,这种协作模式对推动我国开展更大规模的协作提供了宝贵的经验。

异基因外周血造血干细胞移植治疗重型β地中海贫血

目的评估异基因外周血造血干细胞移植（allo-PBSCT）治疗β地中海贫血（β地贫）的临床疗效和合并症。方法allo-PBSCT治疗9例小儿重型β地贫，男4例，女5例；年龄2～14岁（中位数9．0岁）。同胞供者8例，亲属供者1例；供者年龄3～33岁（中位数13岁）；男6例，女3例。HLA全相合7例，5／6相合1例，4／6相合1例。供者皮下注射G-CSF 5μg／（kg·d）×5d，用CS3000 Plus血细胞分离机采集PBSC。预处理方案以白消胺（Bu，14～20mg／kg）、环磷酰胺（CTX，160～200mg／kg）和马抗胸腺细胞球蛋白（ATG，90mg／kg）为基础，6例加用噻替哌（TT）、2例马法兰（Melph）和氟哒拉宾（Fludarabine）。移植物抗宿主病（GVHD）预防方案有：①单独环孢素（CsA）方案（2例）；②CsA＋短程甲氨蝶呤（MTX）方案（4例）；③CsA＋短程MTX＋霉酚酸酯（MMF）方案（3例）。受者获得的有核细胞（NC）数10．4（4．7～18．4）×10^8／kg，CD34^＋细胞数6．7（2．1～14．9）×10^6／kg，CFU-GM 14．2（3．5～42．9）×10^5／kg。结果8例患儿植入，1例同胞HLA 4／6相合患儿于2次PBSCT后d＋60才自体恢复。aGVHD6例，cGVHD4例。CsA、MTX联合MMF方案者尤cGVHD发生，而CsA或CsA＋MTX的6例中发生cGVHD4例。随访时间11～67个月（中位数31个月），总生存率6／9例，无病生存（EFS）6／9例。结论allo-PBSCT是治疗地贫的有效临床方法。

21例β－地中海贫血患儿的临床和基因诊断

目的探讨β－地中海贫血患儿的临床和基因类型的关系。方法用反向点杂交法（ＲＤＢ）诊断患儿的基因突变点。临床按表现和血生化分为重、中间、轻３型。结果１６例重型患儿中，３例基因表型为β°纯合子，β°或β°／β＋双重杂合子１３例。５例中间型者中，４例基因表型为β°／β＋双重杂合子，１例为非典型β地中海贫血杂合子。结论β－地中诲贫血的临床类型与基因突变点密切相关。

急性淋巴细胞白血病并中枢神经系统白血病的诊断与治疗

目的 探讨急性淋巴细胞性白血病 (ALL)并中枢神经系统白血病 (CNSL)的诊断与治疗及影响发病和预后的因素。方法 对 1990～ 1999年收治 117例ALL并CNSL 3 1例临床资料进行回顾分析。结果 CNSL发生距确诊ALL的中位数时间为 8个月 ,高危型组发生率 ( 5 4 .8%)明显高于标危型组 ( 2 3 .7%)。 3 1例CNSL中以脑脊液 (CSF)异常作出诊断远比临床症状多。CNSL治疗效果显示 ,大剂量氨甲喋呤 +三联鞘注 +四氢叶酸钙解救组 (HDMTX +IT +FC)优于阿糖胞苷 +氨甲喋呤 +地塞米松三联鞘注组 (IT) ,与颅脑放疗 +鞘注组 (CR +IT)相当。结论 为避免诊断假阳性造成的过度治疗 ,CSF仅有幼稚细胞而白细胞计数正常者诊断CNSL应慎重 ,HDMTX +IT +FC是治疗CNSL的有效措施。

脐带血、新生儿外周血混合移植治疗1例重型β-地中海贫血

【目的】观察脐带血、新生儿外周血混合的造血干细胞移植治疗 1例重型 β 地中海贫血的疗效和副作用。【方法】采集 1例产前HLA配型相合男性 (XY)胎儿的脐带血 5 3mL ,并于供者娩出后 5h内抽取未作任何药物“动员”的新生儿外周血 2 8mL。测定脐带血、新生儿外周血的各项造血指标。重型 β 地中海贫血女性 (XX)患儿经总量马利兰 2 0mg/kg ,环磷酰胺 2 0 0mg/kg ,马法兰 90mg/m2 和抗胸腺淋巴细胞球蛋白 90mg/kg组成的方案预处理后 ,输入HLA相合同胞的脐带血5 3mL和新生儿外周血 2 8mL ,患儿共获得有核细胞数 5 7× 10 7/kg ,CFU GM 4 93× 10 5/kg ,CD3 4+ CD3 8-细胞 3 1× 10 5/kg。【结果】术后 14d中性粒细胞绝对值 >0 5× 10 9/L ,34d血小板 >2 0× 10 9/L ,聚合酶链—反向点杂交检测患儿术后为 β 6 5 4杂合子 ,性染色体从术前的XX转变为XY。术后 14d起脱离红细胞输注 ,血红蛋白从 86 g/L稳步升至 110g/L以上。现已脱离地中海贫血状态存活 197d。供者于生后 9个月内的追踪观察表明生长发育正常。【结论】新生儿外周血中含有一定量的造血干 /祖细胞 ,对脐血细胞数量不足者 。

铁螯合剂在地中海贫血治疗中的临床应用

珠蛋白生成障碍性贫血（地贫）是由一种或一种以上珠蛋白基因突变或缺失，导致珠蛋白肽链合成受抑制而引起的溶血性贫血。我国主要分布在长江流域以南的各省，

62例广东籍轻型β地中海贫血的临床和基因研究

目的：探讨广东籍轻型β地中海贫血的临床和基因突变类型的关系。方法：按临床上有否贫血，分为小细胞低色素性贫血组和小细胞低色素无贫血组，比较两组的血液学、血红蛋白电泳结果和基因突变点的特点。结果：典型β地中海贫血患者４５例（占７２．６％），主要是ＣＤ４１－４２或ＣＤ１７等β０表型的杂合子。１７例（２７．４％）属小细胞低色素无贫血组，红细胞脆性检查１５例中６例正常，本组基因突变主要是ＴＡＴＡｂｏｘ－２８或βＥ２６等β＋表型的杂合子。结论：广东籍β地中海贫血轻型患者的临床表现具有不同性，与其基因型有关。平均红细胞体积（ＭＣＶ）、平均血红蛋白量（ＭＣＨ）。

G-CSF促进造血干细胞移植后造血重建的作用观察

12例接受造血干细胞移植治疗的重型 β地中海贫血患儿 ,年龄从 2 5岁～ 11 5岁 ,男 8例 ,女 4例。其中脐血移植 (UCBT) 8例 ,外周血干细胞移植 (PBSCT) 4例。病人以配对方法分为 2组进行观察。A组病人于移植后 +1天起用 (8～10 ) μg/kg·dG -CSF(格兰诺赛特 ) ,B组则于移植后 +5天起使用 ,剂量同上。A组患者获得的有核细胞 (NC)UCB平均为 8 2× 10 7/kg ,PBSC 5 1× 10 8/kg ;B组相对为 5 8× 10 7/kg和 12 5× 10 8/kg。两组的预处理方法基本相同 ,包括马利兰 (14～ 2 0 )mg/kg ,环磷酰胺 (16 0～ 2 0 0 )mg/kg和抗淋巴细胞球蛋白 (90～ 110 )mg/kg。 8例加马法兰 90mg/m2 ,另 2例改为噻替哌 6mg/kg和氟达拉宾 15 0mg/m2 。两组的植入例数均为 5例 ,脱地贫状态生存均为 4例。但中性粒细胞 (ANC)≥ 0 5× 10 9/L时间A组为13 3天 ,B组为 17 9天 ;血小板计数 (PLT) >2 0× 10 9/L时间A组为 2 2天 ,B组为 5 1天 ;植入后不依赖红细胞输注的时间A组(n =4)为 15 5天 ,B组 (n =4)为 44天。两组在重建造血前均发生了感染。G

β地中海贫血患儿生长落后与甲状腺功能关系的探讨

为分析甲状腺功能状态在β地贫生长落后患儿中的变化，以探讨甲状腺功能在患儿生长的价值。我们对27例β地贫患儿（重型21例，中间型6例）进行了身高（H）、体重（W）、血红蛋白（Hb）、血清铁蛋白（SF）、三碘甲腺原氨酸（Ts）和甲状腺素（L4）的测定。结果患儿的H、W、Hb均低于正常儿（P＜0．05）；SF高于正常儿（P＜0．05）；Ts、T4在5岁以下组（20例）为正常（P＞0．05），在5岁以上组（7例）低于正常（P＜0．05）。我们认为β地贫患儿的生长落后与长期贫血有关，“甲低”为亚临床型，甲状腺激素水平的低下不仅是生长落后的加重因素。铁的长期沉积比单次检测更有意义。

溶血再障危象

溶血再障危象(aplastic crisis)属临床少见急症,是指慢性溶血性疾患在慢性溶血过程中,由于某些诱因作用,突然导致骨髓短暂的造血功能停滞,临床上表现短期内贫血突然加重或(和)伴有出血的急性征象.与急性再生障碍性贫血不同,本病虽表现凶险,但常为自限性、病程短、预后佳.

地中海贫血患儿血清特异性群体反应性抗体对脐血造血干细胞增殖、分化能力的影响(英文)

背景：已有报道证实群体反应性抗体在实体器官移植受者排斥反应中起着重要作用，并且与植入物功能衰竭呈正相关。目的：实验拟观察反复输血地中海贫血患儿血清中特异性群体反应性抗体对脐血造血干，祖细胞增殖、分化能力的影响。设计、时间及地点：体外细胞学实验，于2006—01／2007—08在中山大学附属第二医院医学研究中心完成。材料：5份健康足月产妇脐带血，每份80～100mL。反复输血地中海贫血患儿的群体反应性抗体血清样本。5份健康儿童AB分型血清样本。6份阳性抗凝静脉血样本10mL。方法：采用聚蔗糖泛影葡胺梯度离心法分离脐带血单个核细胞。将1×10^5脐血单个核细胞与分别与健康儿童AB血清50uL、0，50，100uL不同浓度群体反应性抗体血清混合后，再将上述细胞混合物与兔补体共同孵育进行半固体集落培养。主要观察指标：倒置显微镜下观察并计数共培养第7，14天总集落数和各种集落数。结果：脐血造血干，祖细胞受群体反应性抗体血清作用后，其半固体集落培养的总集落数以及各种集落数均有不同程度的下降，其中总集落数和粒单系集落形成单位的下降数，经统计学处理差异具有显著性意义（P〈0．01）：群体反应性抗体血清量与总集落、粒单系集落形成单位、粒红单核巨核系集落形成单位、红系爆式集落形成单位、巨核系爆式集落形成单位、巨核系集落形成单位之间的肯德尔相关分析呈负相关，经统计学处理差异有显著性意义（P〈0．05）。结论：特异性群体反应性抗体对脐血造血干／祖细胞的增殖、分化能力具有抑制作用，并且抑制作用与群体反应性抗体剂量相关：群体反应性抗体剂量越大，抑制作用越强。

HLA-E基因与allo-HSCT移植效果关系的研究

目的:探讨HLA-E基因与异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)效果的关系。方法:用PCR-SSP方法分别检测22对allo-HSCT供者及受者的HLA-E基因型,并分2组:供受者HLA-E相合组和供受者HLA-E不合组。比较2组在移植后植入率、移植物抗宿主病(GVHD)、免疫重建、自体恢复或恶性病复发等方面的差异。结果:22对移植病例的供受者中,共检出3个HLA-E等位基因,分别为E*0101、E*01031和E*01032,未检出E*0102和*0104。供受者HLA-E相合组9对,供受者HLA-E不合组13对。两组在移植后植入率、GVHD、免疫重建、自体恢复或恶性病复发等无统计学差异。结论:HLA-E基因多态性与allo-HSCT移植效果未见相关性。

4-去甲氧柔红霉素治疗小儿急性淋巴细胞白血病10例分析

自１９９５年１２月以来，我们采用４去甲柔红霉素（ＩＤ）联合ＶＬＤｅｘ方案治疗小儿急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）１０例，取得良好疗效，报道如下。一、材料和方法１对象初治１例，男性；难治性９例，男８例，女孩１例。年龄从８个月至１０岁。难治标准为下诸项中...