2020—2022年安徽省猪圆环病毒2型和3型流行情况调查

为了解安徽省猪圆环病毒病(PCVAD)流行情况,2020—2022年于安徽省13个定点监测点采集950份病原学样品和650份血清学样品,采用荧光PCR方法进行猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)病原检测,采用间接ELISA方法进行PCV2抗体检测。结果显示:安徽省PCV2抗体阳性率逐年升高,大型养殖场的抗体阳性率显著高于中、小型养殖场(P<0.05);PCV2病原阳性率呈下降趋势,PCV3呈上升趋势,且同一年份的PCV2病原阳性率均显著高于PCV3(P<0.05);屠宰场的PCV2和PCV3病原阳性率均显著高于养殖场(P<0.05);大型养殖场的PCV2和PCV3病原阳性率均显著高于小型养殖场(P<0.05)。结果表明:安徽省PCVAD防控取得一定成效,但是PCV2仍存在广泛感染,PCV3愈加流行,屠宰场和大型养殖场感染风险高。建议持续做好PCV2免疫工作,加强屠宰场的风险监测及大型养殖场的饲养管理和生物安全管理,严防PCV2和PCV3在养殖和屠宰环节流通传播。

2023年安徽省3种引发猪群繁殖障碍疫病病毒污染情况调查

为了解安徽省3种引发猪群繁殖障碍疫病病毒的污染情况,2023年10—11月从安徽省16个市的101个屠宰场和20个无害化处理场收集了2110份猪淋巴结组织样品,采用荧光定量RT-PCR方法,对猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、盖塔病毒(GETV)进行了检测。结果显示:CSFV、PRRSV、GETV的个体阳性率分别为0.19%、5.32%、5.86%,110份PRRSV阳性样品中,42份为类NADC30核酸阳性;屠宰场CSFV、PRRSV、GETV的场点阳性率分别为0.99%、41.58%、39.60%,PRRSV和GETV在皖北、皖南、皖中3个地区均有检出,而CSFV仅在皖南地区检出;无害化处理场CSFV、PRRSV、GETV的场点阳性率分别为10.00%、35.00%、10.00%;屠宰场和无害化处理场单一污染群占比分别为39.60%和25.00%,混合污染群占比分别为20.79%和15.00%。结果说明:安徽省猪瘟防控效果较好,而PRRSV和GETV污染面较广,且存在病原混合污染,类NADC30-PRRSV为安徽省田间流行的优势毒株。建议持续追踪PRRSV变异情况,做好疫苗免疫;加强对蚊、蠓等吸血节肢动物活动区域的消毒灭源工作,防控GETV传播;加大养殖密集地区的猪群疫病监控及调运监管力度。

安徽省牛羊布鲁氏菌病监测工作现状调研

为全面了解安徽省牛羊布鲁氏菌病监测工作现状,通过实地走访和书面调研相结合方式开展了为期3个月的调研。调研发现:安徽省牛羊布鲁氏菌病流行率总体较低(0.22%),但各年份的个体阳性率有差异;在种畜场、商品代饲养场、散养户以及屠宰场、交易市场等场点均检出阳性样品;有3个地级市未建设市级兽医实验室,9个县级实验室没有正式运行,实验室现有人员平均配备数量只达到了实际需要的60%左右;全省各级兽医实验室工作经费普遍不足,缺少稳定来源;人间布鲁氏菌病病例数量和地域范围整体呈上升和扩大趋势,病例以养殖相关从业人员为主。总体来看,安徽省牛羊布鲁氏菌污染面较广,兽医实验室监测能力不足,对高危职业人群的布鲁氏菌病防护宣传不到位。因此,在全省牛羊饲养业稳定发展的形势下,应持续加强牛羊布鲁氏菌病监测和对高危职业人群的防护宣传,重视兽医实验室经费投入和专业技术人员配备,以确保布鲁氏菌病监测工作顺利开展,稳定提升重点地区重点环节的监测能力。

猪繁殖与呼吸综合征的感染特性与防控分析

猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是影响全球猪业生产的病毒性疫病之一,我国又将其称“蓝耳病”。PRRS是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRS virus,PRRSV)感染引起的,在我国广泛流行,给养猪业造成严重经济损失。由于PRRSV能够引起猪只的免疫抑制,从而增加细菌性继发感染的几率,进而影响其它疫苗的免疫效果,此外,PRRSV抑制宿主免疫反应有利于PRRSV持续感染。当前商品化疫苗不能同时满足有效性和安全性,弱毒活疫苗的应用,进一步提高了PRRSV变异和重组的几率,使得PRRS成为世界上最具有挑战性的病毒性传染病之一。本文总结分析了PRRS防控难点,针对不同状况下猪群提出防控建议,以期为PRRS防控和净化提供思考。

安徽省兽医系统实验室建设现状分析

安徽省作为畜牧业大省,动物防疫任务繁重,兽医系统实验室责任重大。该文对近年来安徽省兽医系统实验室的建设现状、存在问题及发展思路进行总结分析,以期为持续推进安徽省兽医实验室建设和发展提供参考。

安徽省猪蓝耳病疫苗临床免疫效果调查

[目的]为科学、客观评价猪蓝耳病疫苗临床应用效果,对猪蓝耳病防控工作提供参考依据;[方法]选择安徽省40家规模养殖场,对目前市场上常用的4种蓝耳病疫苗分别为普通蓝耳灭活疫苗、高致病性蓝耳病灭活疫苗、国产弱毒疫苗与进口蓝耳病弱毒疫苗进行疫苗使用情况的调查;[结果]受蓝耳病污染的猪场使用弱毒疫苗免疫效果较好,普通灭活疫苗效果不明显,高致病性灭活疫苗针对猪蓝耳病阴性猪群免疫效果较好;[结论]弱毒疫苗效果较好,但接种后可在体内增毒。猪蓝耳病的预防关键要加强饲养管理,采取综合防控的措施。

猪繁殖与呼吸综合征病毒安徽株的分离与鉴定

从安徽地区的发病猪场的病料中,分离到3株致Marc-145细胞病变的病毒（命名为AH1、AH2、AH3）,负染电镜观察结果可见直径约50 nm的有囊膜的球形病毒粒子,细胞超薄切片可见病毒粒子分散在细胞浆内,直径为40～80 nm。理化特性研究结果表明,3株分离毒均对氯仿、乙醚、甲醛、温度（56℃）敏感;间接免疫荧光试验结果显示,分离株与美洲型PRRS阳性血清反应,发出强特异性荧光;对分离毒株Nsp2基因序列分析发现：安徽分离毒株Nsp2基因存在两处共90个碱基缺失现象,与JXA1 PRRSV变异株亲缘性最近。初步鉴定该分离株为高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒。

安徽省一起非洲猪瘟疫情的暴发调查

2018年9月,安徽省铜陵市某猪场暴发非洲猪瘟疫情。为查明疫情可能的来源、波及范围,继而提出有针对性的预防控制建议,对该猪场的饲养管理、猪群发病现状以及相关流行病学关联场点进行了现场调查。调查发现,此次暴发可能由饲喂泔水引起。由此建议:暂时关闭辖区内生猪屠宰场,并进行彻底消毒;停止疫情相关区域生猪及其产品调运;监测受威胁区猪场,做好生物安全防护;停止饲喂泔水,并做好餐厨剩余物的无害化处理工作。

复方氨基比林注射液的双波长差示分光光度法测定

本文介绍用双波长差示分光光度法测定兽药复方氨基比林注射液中氨基比林和巴比妥的含量，稀释液为０．０１ｍｏｌ／Ｌ的盐酸和ｐＨ＝１０的氨－氯化氨缓冲液，测定波长为２３９ｎｍ，２６６ｎｍ，２７９ｎｍ。回收率氨基比林的ＲＳＤ为０．９４％，巴经妥的ＲＳＤ为０．７％。样品测定经ｔ值检验，Ｐ＞０．５无显著差异。

安徽省猪生殖与呼吸综合征病毒的分子流行病学调查

从2006-2008年采自安徽省的高致病性猪生殖与呼吸综合征病毒的病料中扩增得到7株PRRSVORF5基因序列,并进行了序列分析和抗原位点预测。结果表明,安徽省的地方PRRSV流行毒株与VR-2332、CH-1a、JXA1毒株的氨基酸同源性为85.1%-86.1%、90.5%-92.5%、96.5%-98.5%;安徽省地方分离株之间氨基酸同源性较高,介于97.0%-98.5%之间。与2006年以前获得的毒株相比,安徽省流行毒株与JXA1、TZ、CXN-1等高致病性毒株具有相同的氨基酸突变位点（G9→C9、S16→F16、S35→N35、V94→A94、V185→A185）,这些关键氨基酸位点的变异可能导致PRRSV毒力增强。对GP5蛋白表面抗原位点的预测发现,安徽省地方分离株与JXA1株存在6个主要抗原位点;与VR-2332、CH-1a毒株相比,由于抗原表位氨基酸位点的突变（A27→V27,L39→I39,V185→A185,I189→L189）导致了抗原位点抗原性发生了变化。遗传进化树分析显示,安徽省地方流行毒株与JXA1、TZ等毒株具有较近的亲缘关系,推断2006-2008年安徽省流行的PRRSV毒株由同一毒株演化而来,且变异程度不大。

犬传染性肝炎的研究近展

犬传染性肝炎(Infetious Canine Hepatitis)是由犬传染性肝炎病毒引起的犬的一种急性传染病。本病在1930年前就有报道。1947年,Rubarth首先对本病进行了较深入的研究。1954年,Cabass等用犬肾细胞首次将本病毒分离成功。1959年,Kapsenberg又通过了交叉补反等证明该病毒属腺病毒属。之后,在病原学、流行病学。

紫外-可见分光光度法在《中华人民共和国兽药典》二○○○年版一部中的应用

从紫外 -可见分光光度法在兽药检测方面应用的基本原理及其应用实例等方面 ,阐述了《中华人民共和国兽药典》(一部 )二○○○年版收载的应用紫外 -可见分光光度法检测的各类化学药品和抗生素类原料药及制剂 ,按照吸收系数测定、定性鉴别、检查以及含量测定等分类总结 。

基质固相分散萃取-高效液相色谱法检测鸡组织中均三嗪类药物残留

本研究建立了基于基质固相分散萃取（MSPD）-高效液相色谱紫外检测法（HPLC／UVD）的同步检测鸡组织中地克珠利和妥曲珠利残留的快速、高效和经济的新方法。正交试验优化后的基质固相分散萃取的最佳条件如下，预混有地克珠利和妥曲珠利混合标准溶液的0．5g鸡组织匀浆在研钵中与2gC18填料研匀，静置2～5min后装萃取柱；萃取柱自底层到上层依次装入玻璃棉、1．5g无水Na2SO4、样品混合物、0．5g无水Na2SO4；压紧后依次用8mL正己烷、8mL甲醇水溶液（1：4，V／V）淋洗，8mL甲醇洗脱，收集洗脱液，50℃旋转蒸发，0．5mL流动相溶解，过0．22μm滤膜后进样检测。最佳色谱条件为C18分析柱（250mm×4．6mmi．d．，5μm）；流动相：0．05mol／L H3PO4-三乙胺（pH3．0）-乙腈（40＋60）；流速：1．0mL／min；检测波长：240nm，AUFS=0．05；进样体积：20μL；柱温：20℃。该检测方法的定量线性范围为50～1000μg／L。在50、500和1000ng／g的添加水平，地克珠利和妥曲珠利从鸡组织中的回收率范围为71．1％～84．0％，相对标准偏差的范围为3．8％～12．1％；同时方法的日内和日间相对标准偏差范围为3．70％～6．77％。地克珠利的检出限为8ng／g（肌肉）和10ng／g（肝、肾），妥曲珠利的检出限为7ng／g（肌肉）和10ng／g（肝、肾）；地克珠利的定量限为12ng／g（肌肉）和15ng／g（肝、肾），妥曲珠利的定量限为10ng／g（肌肉）和15ng／g（肝、肾）。

同时检测2种均三嗪类抗球虫药物残留的样品前处理方法的比较

以均三嗪类抗球虫药物地克珠利和妥曲珠利的鸡组织残留样品为研究对象,采用高效液相色谱(HPLC)分离,紫外(UV)检测,采用乙腈萃取-蒸发浓缩、乙腈萃取-固相萃取(SPE)、基质固相分散萃取(MSPD)和MSPD-SPE4种方法对鸡组织中含地克珠利和妥曲珠利残留的样品的前处理效果进行了比较。前3种方法的平均回收率均达到70%以上,能满足残留分析的要求。其中MSPD方法与其他方法相比,节约时间60%以上,节约溶剂也达60%。鉴于此,采用基质固相分散萃取作为鸡组织样品的前处理方法,建立了鸡组织中地克珠利和妥曲珠利残留的MSPD-HPLC/UV同时分析检测方法。在优化的色谱条件下,方法的线性范围为50～1000μg/L;在50,500,1000μg/kg的添加水平下,地克珠利和妥曲珠利在鸡组织中的回收率为71.13%～84.02%,相对标准偏差(RSD)为3.76%～12.11%;方法的日内和日间测定的RSD范围为3.70%～6.77%。地克珠利和妥曲珠利的检出限均小于10μg/g,定量限均小于20μg/kg。该方法在准确度、精密度上均达到了残留分析的要求。

鸡组织中地克珠利和妥曲珠利残留HPLC检测方法的建立

建立了同时检测鸡组织中地克珠利和妥曲珠利残留的高效液相色谱。经乙腈提取，正己烷脱脂，旋转蒸发浓缩后，以0．05mol／L磷酸／三乙胺（pH3．0）：乙腈（40：60）作为流动相，反相高效液相色谱-紫外检测法检测，检测波长240nm。鸡组织中地克殊利和妥曲珠利的回收率分别为92．0％～102．0％和83．4％～89．0％，变异系数为5．9％～12．2％，地克珠利和妥曲珠利的检测限分别为0．012mg／kg和0．010mg／kg，在0．05～110mg／L质量浓度范围内呈良好的线性相关。该法样品处理简单，可同时检测地克珠利和妥曲珠利的残留，且准确度和精密度均符合残留分析的要求。

鸭产蛋下降-死亡综合征的临床诊断与病原的初步鉴定

2010年3～11月间,安徽省部分规模养鸭场流行以产蛋下降和死亡为特征的急性、热性鸭传染病,主要感染成年种鸭或蛋鸭,病理变化则以心肌出血、卵巢肿大、出血和坏死为特征。通过鸡胚接种、传代培养和RT-PCR鉴定,从发病鸭体内分离1株黄病毒。对其NS1基因扩增并测序,发现其与坦布苏病毒亲缘关系非常近,核苷酸同源性达94.2%。动物回归试验结果表明:该病毒能引起蛋鸭产蛋下降和卵巢病变。证明鸭黄病毒在我国对鸭的高度致病性,并开始在规模鸭场蔓延和流行,应当引起有关部门和兽医工作者的高度重视。

鸡肝中4种氟喹诺酮类药物残留量的回收率测定

采用高效液相色谱(HPLC)法,对诺氟沙星、环丙沙星、洛美沙星和恩诺沙星等 4种药物在鸡肝中的残留量进行阳性添加和回收率测定试验。结果线性良好,检测灵敏度为 10μg·kg-1, 4种药物的回收率和相对标准偏差(RSD)分别为诺氟沙星 78. 75%, 13. 73%;环丙沙星 74 .72%, 12 .02%;洛美沙星 76 .77%, 15 .89%;恩诺沙星 72. 79%, 11. 10%。

铽增敏高效液相色谱柱后衍生荧光检测法同时检测鸡肉中的三种氟喹诺酮类药物残留

基于氟喹诺酮类药物与铽离子形成配合物后的荧光增强作用,建立了同时检测鸡肉中氟喹诺酮类（FQs）药物环丙沙星、诺氟沙星和恩诺沙星残留的Tb^3＋增敏高效液相色谱（HPLC）柱后衍生荧光检测方法。优化的实验条件如下：流动相为0.05mol/L醋酸/醋酸钠缓冲液（pH6.0）-乙腈（体积比为89∶11）,色谱柱为Hypersil BDS-C18,柱温40℃,流速0.8mL/min;Tb^3＋浓度为8×10^-5mol/L;衍生反应温度40℃,衍生泵流速0.5mL/min;荧光检测激发波长271nm,发射波长545nm。实验结果表明,将上述3种药物以1.0,10.0,50.0,100.0ng/g水平添加到鸡肉后的回收率范围为66.3%-88.0%,相对标准偏差（RSD）均小于15.0%。定量分析的线性范围为0.1-500ng/mL,方法的日内和日间RSD均小于13.0%;最低检出限分别为0.05（环丙沙星）、0.05（诺氟沙星）和0.08（恩诺沙星）ng/g,比前人报道的非衍生高效液相色谱荧光检测法检测FQs药物的灵敏度有极大的提高。该项研究为FQs药物多残留检测提供了灵敏度更高的新方法。

安徽省北部地区猪高热病流行病学调查

2008年7月,安徽省北部地区生猪出现疫病,表现为不食、高热等特征,为查明病因,进行流行病学调查,同时采集发病猪群样品进行病原学和血清学检测。结果137份血清样品中,HPRRSV、PRRSV、PPV带毒率分别为25.5%、23.4%、37.9%;PRRSV、SIV(H1N1、H3N2)抗体阳性率分别为86.5%、9.49%和3.65%,仔猪CSFV抗体免疫合格率为50%;6份组织样品中HPRRSV、PRRSV、CSFV、PRV、PPV带毒率分别为50%、100%、66.7%、33.3%、33.3%。表明引起本次猪病为PRRSV、CSFV、PPV等多种病原体混合感染。

猪O型口蹄疫合成肽疫苗及猪O型口蹄疫高效灭活疫苗免疫效果对比试验

使用猪O型口蹄疫合成肽疫苗与猪O型口蹄疫高效灭活疫苗免疫30-40日龄商品猪,免疫采用正向间接血凝试验、液相阻断ELISA及VP1结构蛋白抗体ELISA检测免疫前和首次免疫后14d、28d、35d、42d、56d及二次免疫后7d、14d、28d抗体水平。同时,对接种疫苗的实验猪进行免疫应激观察。结果显示:注射合成肽疫苗试验猪未出现不良免疫副反应;采用正向间接血凝试验检测,两种疫苗免疫抗体合格率差异不显著;运用液相阻断ELISA及VP1结构蛋白抗体ELISA进行检测,注射合成肽疫苗试验猪二免7d后抗体水平快速上升,抗体检测合格率达到73%-100%。与注射高效灭活苗组比较表明:合成肽疫苗临床使用的安全性较高,免疫抗体合格率明显优于猪O型口蹄疫高效灭活苗。