热休克法抑制第一次卵裂实现草鱼雌核发育的细胞学观察

用组织切片方法系统地观察了草鱼卵被经辐射处理的鲤精子激活后进行第一次卵裂的发育过程。实验表明 :在 2 4℃孵化水温下草鱼卵在被激活后 2 4min进入第一次卵裂前期 ,2 7— 30min处于中期 ,33min进入后期。由此可知被激活的草鱼卵子在第 2 4min时已经完成染色体的复制 ,使草鱼卵子雌核染色体人工加倍的最佳时期是在被激活后的 2 7— 30min这一时间区段内。此外 ,用不同热休克温度和不同的热休克强度处理已完成染色体复制的被激活草鱼卵 ,表明草鱼卵经 41℃处理 2min可得到较高比例的基因纯合型雌核发育二倍体鱼。

彭泽鲫染色体数目及倍性的细胞遗传学分析

对彭泽鲫 (Carassiusauratusvarietypengze)肾细胞染色体的数目统计分析表明 ,彭泽鲫染色体组是由15 0条基本染色体和若干条小的超数染色体组成。染色体组型按着丝粒位置 15 0条基本染色体可分为四组 ,每组中同源染色体的组数与已知二倍体鲫鱼的同源染色体组数一致。每个染色体小组均由三条同源染色体组成。在亚端部着丝粒染色体组 (st)的第三号染色体组的三条同源染色体的短臂上均有非常明显的随体 ,可作为彭泽鲫是三倍体的细胞遗传学证据。彭泽鲫肾细胞的DNA相对含量是二倍体红鲫肾细胞DNA相对含量的 1 5 5倍 ,与染色体实验结果一致。这些研究结果表明 ,彭泽鲫是一种三倍体鲫鱼 ,其染色体数目为 3n =15 0 +,核型公式为3n =33m +5 1sm +33st+33t [动物学报 49(1) :10 4～ 10 9,2 0 0 3]。

急性髓系白血病患者骨髓中WT1的表达及其对预后的影响

目的:探讨急性髓系白血病(AML)患者骨髓中WT1的表达及其与疗效和预后的相关性。方法:采用实时荧光定量PCR检测75例初诊AML患者(非APL)治疗各阶段骨髓WT1的拷贝数和内参因子(GADPH)的拷贝数,以NQ比值=WT1基因拷贝数/内参基因拷贝数计算WT1的表达水平,并对临床特征、诱导化疗后完全缓解(CR)率、2年总生存率(OS)及无事件生存率(EFS)进行了分析。结果:治疗前WT1的表达水平与年龄、性别、基因突变、FAB分型及预后分组等无明显相关性。治疗前WT1高表达患者的CR率为65.4%(17/26),低表达患者的CR率为93.9%(46/49),两组比较差异有统计学意义(χ~2=8.25,P=0.004);两组患者2年总生存与无事件生存率的差异均有统计学意义(P<0.05),高表达组OS及EFS率均低于低表达组;诱导化疗后约1个月、3个月及6个月时,WT1水平较初治时下降1个数量级以上的患者组,其两年总生存明显升高(P<0.05)。结论:骨髓WT1的表达水平可作为AML患者(非APL)疗效及预后评估的有效指标。

天然蚕蛹抗菌肽对鲜猪肉的防腐抑菌效果研究

以天然蚕蛹抗菌肽为防腐液处理鲜猪肉,检测结果表明,浓度在0.05%时对乳酸菌、微球菌、葡萄球菌抑菌效果分别为89.0%、94.3%、98.8%。鲜猪肉经该防腐液处理后在室温下能贮藏7d。

伴CD4、CD7表达的AML患者免疫表型特点及其分子生物学和细胞遗传学特征

目的:探讨伴CD4、CD7表达的AML病人免疫分型特点及分子生物学和细胞遗传学特征。方法:应用四色流式细胞术,以CD45设门,检测304例病人白血病细胞的免疫表型;RT-PCR方法检测WT1、MDK、ETO、PMLRaRa、BCR-ABL分子生物学标志;R显带技术分析白血病细胞核型变化。根据免疫分型结果,将病人分为3组:伴CD7表达的AM L组,伴CD4表达的AM L组(CD4组),无T系抗原表达的AM L组(common AM L组)。结果:CD7组患者HLA-DR表达率和表达量均高于无T系抗原表达AM L组,CD34、CD33表达率高于无T系抗原表达AM L组和CD4组;CD4组患者CD15、CD64的表达率和表达量均高于CD7组和无T系抗原表达AM L组,CD33表达率、表达量高于无T系抗原表达AML组,差异有统计学意义(P<0.05);CD7组患者WT1表达低于无T系抗原表达AML组,差异有统计学意义(P<0.05),在CD7组患者未发现PML-RaRa表达。伴有CD4、CD7表达的AM L组正常核型的比例高于无T系抗原表达AM L组。伴有CD7表达的AM L患者中无1例发生t(15;17)。结论:伴有CD7表达的AML的白血病细胞来源于前体细胞,被阻滞在造血发育的早期阶段;伴有CD4表达的AML白血病细胞起源于相对成熟的阶段,高表达CD33、CD64、CD15;伴有CD7、CD4表达的AML无特异性的细胞遗传学改变。根据CD4、CD7的表达量和强度,联合髓系标志可定量检测AML病人MRD。

对伊马替尼反应差的慢性髓系白血病患者换用第Ⅱ代酪氨酸激酶抑制剂的疗效观察

目的:探讨第一代酪氨酸激酶抑制剂(TKI)伊马替尼治疗初治慢性髓系白血病慢性期(CML-CP)患者疗效差(疗效欠佳、失败或不耐受)时换用第2代TKI的时机及疗效。方法:观察2009年2月至2012年2月间9例初治CM L-CP患者应用伊马替尼后(3例不耐受,6例治疗失败或欠佳)换用第Ⅱ代TKI治疗的效果及副作用。结果:3例不耐受患者换第2代TKI后均获得了满意的疗效,均在换用3个月达到完全细胞遗传学缓解(CCyR),分别在3至6个月达到主要分子生物学缓解(MMR),疗效均达到欧洲白血病网(ELN)指南的疗效满意标准,但有1例患者在用药3个月后出现胸水而暂时停药,仍持续缓解。6例疗效不理想患者中2例经伊马替尼治疗失败的患者换用第2代后仍疾病进展,其中1例有效但耐受性差,进展至加速期后进行了单倍体造血干细胞移植获治愈;1例治疗失败,发生急变,在化疗后因严重感染去世;另4例疗效欠佳患者均在换用第2代TKI后3-12个月内达到了MMR,疗效满意,已分别持续CMR 12-36月。结论:CML-CP患者在伊马替尼疗效不满意时应尽早换用第2代TKI治疗,而且越早越受益,有可能获得最佳疗效。

金鱼Vsx1基因结构及其内含子多态性分析

Vsx1是第一个在金鱼中发现的编码含有同源异型框(homeodomain)和CVC结构域蛋白的基因。该基因在胚胎发育的不同阶段在胚胎的不同区域和不同组织中表达,并已经证明它在视网膜视锥双极细胞的分化和正常功能的维持中具有重要作用。为了进一步研究该基因在不同发育阶段组织特异性表达的调节机制,实验用PCR方法分析了金鱼Vsx1的基因组结构和内含子多态性。结果表明:金鱼Vsx1基因由5个外显子和4个内含子组成,与斑马鱼、人、小鼠的Vsx1基因结构相同。4个内含子中,第一内含子有两种序列差异明显的类型,但第二、三、四内含子无明显差异。第一内含子的一种类型比另外一种类型多39个碱基,这39个碱基中包括了真核生物增强子的核心序列。这一观测结果提示金鱼Vsx1第一内含子可能与该基因的发育阶段特异性和组织特异性表达调节有关。同时,第一内含子序列的明显差异也为分析Vsx1不同等位基因或基因拷贝的表达活性,以及组织特异性表达调节方式提供了合适的探针序列。

荔枝果肉多酚的提取与分离

以荔枝果肉为试验材料,以多酚含量为评定参数,提取分离其中的多酚物质。以乙醇溶液为提取溶剂,通过单因素试验和正交试验,考察了浓度、提取时间、料液比、提取温度、浸提次数等影响提取率的几个重要因素,得出影响果肉中多酚提取的因素由大到小依次为,提取时间>料液比>乙醇浓度>提取温度,最佳工艺条件为,乙醇浓度70%,料液比1∶11,浸提时间6 h,浸提温度40℃,浸提2次,而且荔枝果肉多酚主要以多酚的多聚体为主,其次是低聚体和单体。

蚕丝胶蛋白可食性包装薄膜的制备

研究蚕丝胶蛋白可食性包装膜的制备,实验结果表明:以蚕丝胶蛋白加水磁力搅拌加热,拌速180r/min,并添加0.02%食用消泡剂消泡,制成蚕丝胶蛋白可食性包装薄膜液,用吐温80(0.05mL/100cm2)涂于不锈钢板上刮板成膜,于60℃电热鼓风干燥箱干燥2.0h,膜抗拉强度达4.68MPa。

行政事业单位国有资产管理的强化研究

新型发展趋势下,我国整体经济进入新常态,无形中对行政事业单位的发展情况提出严格要求。尤其是在行政事业单位职能处于不断扩大的情况下,实际管理的资产规模大、数量多。国有资产在保障业务高效稳定运转方面发挥关键作用,一旦发生管理水平低的现象,就会严重影响公共服务质量。这就要求行政事业单位积极承担职责,实际操作时结合国有资产管理要求,按照制定好的管理体制内容,制定并实施针对性的管理方案,真正做到及时发现解决问题,进一步提高国有资产管理效果。本文将行政事业单位国有资产管理现状作为切入点,结合产生各类问题的原因展开阐述,针对提高行政事业单位国有资产管理的强化效果的重要措施进行探讨。

政府采购与事业单位国有资产管理研究

在我国,政府采购和行政机关的国有资产管理具有内在联系。论述政府采购与国有资产管理的相互关系,阐明两者的内在联系,研究意义重大。本文着重对行政机关的国有资产管理制度进行剖析,简单地说明其与政府采购之间的关系,同时,也为推动二者的协调可持续发展,提出一些有益的意见和措施,希望能帮助有关部门更好地做好相关的管理工作,达到长期的发展目标。

流式细胞术动态监测微小残留病在非清髓异基因造血干细胞移植治疗急性白血病患者中的意义

目的:研究非清髓造血干细胞移植(NST)前后采用流式细胞术(FCM)动态监测微小残留病(MRD),以预测移植后急性白血病(AL)复发的意义,为临床早期干预提供指导。方法:回顾性研究2011年1月至2015年12月在军事医学科学院附属医院血液科行NST的成人AL患者51例,对所有患者移植前骨髓形态学完全缓解(CR)期内,移植前35 d内、移植后1、2、3月内,以后每3月至移植后2年、2年后每6个月内采集骨髓监测MRD。低水平MRD组(A组)共33例(移植后每次检测MRD<0.2%),高水平MRD组(B组)共18例(移植后动态监测MRD,至少1次≥0.2%)。结果:移植后2组2年累计复发率分别为6.1%和50%(P=0.001)。多因素分析表明:移植后M RD≥0.2%是AL移植后复发的独立的高危因素,高水平MRD组复发风险是低水平MRD组的5.84倍(P=0.036)。移植后复发组与未复发组的死亡率分别为81.8%和46.3%(P=0.036)。结论:非清髓异基因造血干细胞移植治疗急性白血病中,采用FCM动态监测MRD是预测移植后早期复发的重要方法,移植后MRD≥0.2%可作为白血病早期复发的预警,以及指导临床早期给予干预措施的重要依据。

与脊椎动物脑室空间模式形成相关的两个基因座位

通过对金鱼雌核发育单倍体胚胎的活体观察及切片观察,发现单倍体胚胎脑的空间模式发育存在正常与不正常两种不同的表型．正常脑胚胎与自交二倍体胚胎脑的表型一致,具有正常的前脑、中脑、后脑结构,且各脑室的边界清楚．不正常脑胚胎没有明显可见的脑室结构．正常脑和不正常脑胚胎数目的比例为1∶3,说明金鱼脑的空间模式形成与两个不同的基因座位有关．由于实验中排除了在这两个基因座位上同时存在突变基因的可能性,1∶3的比例反映的不是基因型,而是这两个基因的表达状态；说明这两个基因在单套染色体组中只有50%的表达概率,其表达调控机制建立在两套染色体的基础之上,受二倍体依赖型基因表达调控机制的控制．

24例伴8号染色体三体原发性急性髓系白血病发病的特点及预后

目的:探讨伴8号染色体三体("8三体")的原发性急性髓系白血病(AML)的发病特点及预后。方法:收集24例伴8三体的原发性AML患者的临床资料,分析初诊时血常规指标、FAB分型、染色体、基因与缓解率和疾病转归的相关性。结果:除1例未予以化疗外,余23例均接受1-2个疗程的标准诱导化疗方案。3例M3达到CR1,至今均无病存活,5年存活率100%。在20例非M3中12例达CR1(60%),4例部分缓解(PR,20%),4例未缓解(NR);3年内5例复发(RL)(41.7%),经再诱导化疗后3例达CR2,2例NR。除1例CR1后失访外,其余19例非M3平均随访26.2(1.5-84)月,9例死亡(均系未缓解或CR1后复发患者),3年无病生存(DFS)率及总生存(OS)率分别为21%和31.5%;2例CR1后行同胞HLA全相合异基因外周血造血干细胞移植(allo-HSCT),至今仍无病存活(58和66个月)。除M3、移植及未化疗患者外,余18例初诊白细胞计数(WBC)<10×109/L者较WBC≥10×109/L者OS长(P=0.03),DFS也较长(P=0.002);经1-2诱导化疗达CR1患者OS较长(P=0.002)。结论:8三体在原发性M5中发病率高于其它亚型,而且预后不良。发病时WBC≥10×109/L为高危因素。8三体合并RARA+的M3患者生存期长。伴8三体原发性AML达CR后尽可能行allo-HSCT。8三体可能增加非M3的预后风险,合并FLT3、MLL、HOX11、C-kit和NPM1等对预后有重要影响。

口腔黏膜下纤维性变癌变的分子机制研究进展

口腔黏膜下纤维性变(oral submucous fibrosis,OSF)是一种慢性进行性、隐匿性的口腔黏膜疾病。它的发展与咀嚼槟榔高度相关,最终向口腔鳞状细胞癌演变,目前被国际癌症研究中心认定为癌前状态。由于OSF癌变过程极其复杂,癌变机制尚不明确,多数学者认为该病为多种因素共同影响的结果。因此,本文主要对OSF癌变的分子机制最新研究进行归纳总结,旨在了解OSF癌变规律,为早发现、早诊断、早治疗OSF癌变提供理论参考,为后期基础研究、临床治疗提供分子治疗依据。

如何在初中化学教学中培养学生的核心素养

化学学科的核心素养包括宏观辨识与微观探析、变化观念与平衡思想、证据推理与模型认知、科学探究与创新意识、科学精神与社会责任五个方面的内容,教师只有以明确认知化学核心素养为基础,并针对性地开展教学活动,才能达到有效培养学生核心素养的目的。基于核心素养背景下,化学教师有必要以实际教学为基础,改革教学模式,为提高学生对化学实验的兴趣、态度以及能力奠定坚实的基础。

混合表型急性白血病患者免疫表型特点及临床预后特征分析

目的:回顾性分析31例混合表型急性白血病(MPAL)患者的实验室结果和临床资料,以总结和探讨基于免疫表型结果的MPAL各亚型生物学特性及疗效和预后特征。方法:选择2013年7月至2019年1月经本院诊治的MPAL患者,分析初诊时细胞形态学、免疫分型、细胞遗传学、分子生物学(MICM)及血常规等数据,病例随访截至末次出院时间。结果:31例患者中,男性19例,女性12例,中位年龄41(12-76)岁;依据免疫分型结果,参照EGIL积分,髓-T混合表型16例(髓-T组),髓-B混合表型9例(髓-B组),T-B混合表型5例(T-B组),髓-T-B三系混合表型1例。各亚型比较,抗原表达特征为髓-B组HLA-DR阳性率、表达率最高,T-B组CD2阳性率显著高于髓-T组,同时T-B组CD7、cCD3(胞浆CD3)表达率高于髓-T组,髓-B组和T-B组全部病例均阳性表达cCD79a;T-B组中位WBC(81.92×10^(9)/L)显著高于其他两组(P<0.05);92.6%的病例WT1定量结果高于10^(-4),髓-B组WT1表达水平显著低于其他两组(P<0.01),9例髓-B患者中,5例BCR-ABL阳性。28例随访患者中,21例达到完全缓解,首次获得完全缓解的中位时间为32.5(9-75)d,中位随访时间16个月(21天-6年);分组结果显示,髓-B组完全缓解率为88.9%,中位总生存时间为40个月,均高于其他两组,T-B组完全缓解率和3年总生存率相对较低(50.0%,0)。结论:MPAL患者高表达WT1基因,基于免疫表型的MPAL各亚型有其独特的抗原表达特征。相较于髓-T和T-B患者,髓-B患者可获得较高的缓解率,预后良好。

牙周病患者种植修复研究进展

种植牙具有对余留牙无损伤、咀嚼效能高且舒适美观等优点,能提高失牙患者生活质量,增加幸福感,已倍受患者青睐,并逐步成为缺失牙患者的优先选择。牙周炎是牙齿丧失的主要原因,也是种植体周围炎发生并导致种植失败的关键因素,这主要是因为牙周致病菌作用于机体的结果。选择恰当的种植材料及掌握好种植时机在种植修复术中起着关键作用。

骨缺损患者种植术式研究进展

种植修复在缺失牙修复的应用中渐居主导地位,骨质缺损修复效果是影响种植成功率的因素之一。行植骨术也存在一定的风险,发生并发症。所以选择恰当的植骨手术方式需结合患者自身情况而定,进而提高植骨及种植成功率。本文结合国内外最新研究来阐述种植修复植骨术式的相关研究。

非清髓性异基因造血干细胞移植治疗急性髓系白血病疗效及预后因素分析

目的:回顾性分析本中心改良非清髓性异基因造血干细胞移植治疗首次完全缓解期中危急性髓系白血病的疗效和并发症,并分析预后因素。方法:收集2004年8月至2021年4月在解放军总医院第五医学中心进行亲缘HLA全相合非清髓性异基因造血干细胞移植的50例首次完全缓解期中危急性髓系白血病患者的临床资料,观察造血恢复、供体植入及并发症情况,计算总生存率、无白血病生存率、治疗相关死亡率、累积复发率,并对影响预后的因素进行统计学分析。结果:移植后患者中性粒细胞和血小板中位恢复时间分别为10(6-16)和13(6-33)d。移植后1个月,22例(44%)患者形成完全供体嵌合体,22例(44%)形成混合嵌合体,其中18例在1-11个月逐渐转变为完全供体嵌合体,维持混合嵌合体状态4例。急性移植物抗宿主病总发生率为36%,其中II-IV级发生率为18%,中位发生时间为移植后45(20-70)d;慢性移植物抗宿主病总发生率为34%,其中局限型、广泛型分别为20%、14%;感染、间质性肺炎和出血性膀胱炎的发生率分别为30%、10%和16%。患者5年总生存率、无白血病生存率、治疗相关死亡率和累积复发率分别为68%、64%、16%和20%。回输CD34+细胞数量的增加缩短了中性粒细胞以及血小板恢复时间(r=0.563,r=0.350);回输CD34+细胞数量能够显著影响广泛型慢性移植物抗宿主病的发生(OR=1.36,95%CI:1.06-1.84,P=0.024)。结论:改良非清髓性异基因造血干细胞移植用于治疗中危急性髓系白血病首次完全缓解患者疗效肯定,但尚需进一步扩大病例数对影响预后的因素进行深入研究。