房地产公司项目实施阶段工程造价精细化管理分析

随着各地房地产公司的不断发展,现阶段不同类型的房地产项目广泛兴起建设。项目实施阶段的材料、工艺、能源等多方面通常需要消耗大量的造价,影响项目的整体实施建造效果,房地产公司应采取合理措施加以精益管控。因此房地产公司项目实施阶段工程造价精细化管理分析受到广泛关注,相关理论研究及实践探索大量涌现。基于此,简单分析项目工程的精细化管理价值,深入探讨常见的管理问题与相关管理要点,以供参考。

血管钙化抑制因子BMP-7的研究进展

血管钙化是一个主动可调控的心血管系统异位钙化过程,目前尚无可逆转的有效干预手段。血管钙化和骨形成具有共同的调控机制,骨形态发生蛋白7(bone morphogenetic protein 7,BMP-7)可维持血管平滑肌细胞的收缩表型抑制血管钙化。同时,BMP-7可刺激成骨细胞分化过程,增加骨形成,减少骨吸收降低异位钙化压力。该文系统综述BMP-7影响血管钙化的作用与机制及其目前的临床应用现状。这将有助于以BMP-7为新的分子标志物与潜在药物靶标,研发早期诊断试剂盒及治疗药物,以期实现血管钙化的早期预防与干预,改善患者预后。

运用单克隆抗体分析流感病毒H1亚型HA蛋白的抗原表位

目的对甲型流感病毒H1亚型血凝素蛋白的抗原表位进行分析。方法以前期获得的97株抗H1亚型HA抗原的单克隆抗体为研究工具,用间接ELISA方法对不同亚型的血凝素抗原进行反应,将H1亚型HA蛋白的抗原表位进行粗分类,用ELISA阻断试验对抗原表位进行细分类。选取两类抗原表位的抗体,通过计算机模拟分析抗体与抗原结合的结构域,推测抗体结合的具体氨基酸位点。结果根据抗体的交叉反应性不同,将流感病毒H1亚型的HA的抗原表位分为8类;根据ELISA阻断试验的初步结果,H1亚型HA抗原的抗原表位又被细分为15类,通过计算机模拟分析预测的抗体与流感病毒HA抗原结合的氨基酸位点结果与ELISA阻断试验结果相吻合。结论证明流感病毒H1N1亚型HA抗原上至少含有15个抗原表位,且通过ELISA阻断试验和计算机模拟分析得到了相互印证,为流感病毒血凝素HA抗原表位预测方法的完善及通用疫苗的研制提供了实验数据。

基于微尺度表层特性的不锈钢焊接件锈蚀分析

针对1Cr18Ni9Ti不锈钢焊接件表面锈蚀现象,分析了锈蚀处的表层成分及金相组织,研究了不同的抛光打磨及钝化处理方法对不锈钢焊接件耐蚀性的影响。结果表明:打磨方法不当或是打磨不彻底导致焊缝及其热影响区产生的贫铬层未能完全去除,局部Cr含量明显下降,是不锈钢焊接件表面产生锈蚀的主要原因。在锈蚀原因分析的基础上提出了防护措施。

一种高效表达小干扰RNA载体的构建研究

目的:用mir30前体骨架来构建高效表达小干扰RNA载体。方法:通过基因合成的方法,将mir30前体骨架进行全长基因合成,并在合成的mir30前体骨架中引入合适的酶切位点用于外源发夹DNA的克隆,然后将之克隆到含U6启动子的表达载体中。将针对绿色荧光蛋白(greenfluo-rescent protein,GFP)的小干扰RNA克隆到以上表达载体中,通过转染及Western blot来检测新的小干扰RNA表达载体的基因沉默效率。结果:同目前常用的含polIII的小干扰RNA表达载体相比较,用mir30前体骨架表达针对GFP的小干扰RNA的表达载体可以明显抑制GFP的表达。结论:用mir30前体骨架构建的小干扰RNA表达载体可高效表达外源小干扰RNA。

基于数值模拟的大型铝合金构件焊接变形分析与控制

针对大型5A06铝合金焊接构件焊缝数量多,焊接变形量大,焊接变形复杂的特点,开展结构工艺性分析,并采用Simufact Welding进行数值模拟分析,预测工件的变形方向和变形量。通过采用反变形法、设计合理的焊接装配顺序、优选焊接参数等措施,解决了构件焊接变形大,精度难以控制的难题。

人endostatin、K5及endostatin-K5重组腺病毒载体的构建及其表达

目的:人endostatin、K5及endostatin-K5基因克隆,重组腺病毒载体的构建及其表达产物体外活性检测。方法:采用PCR方法扩增基因,通过酶切连接方法将3种基因片段克隆到腺病毒shuttle载体pAd5-CMV-H1H2-MCS-6His中;用磷酸钙沉淀法分别将经PacI酶切的表达人endostatin、K5及endostatin-K5的腺病毒shuttle载体与PacI酶切的腺病毒骨架共转染HEK293细胞;用CsCl密度梯度离心法纯化制备病毒;用重组腺病毒感染HeLa细胞并在不同时间点收获蛋白,Western blot检测24h、48h和72h的蛋白表达量;通过MTT方法检测蛋白对ECV-304生长抑制作用。结果:成功制备表达人endostatin、K5及endostatin-K5重组腺病毒载体;Westernblot可以检测到蛋白表达,蛋白表达量随病毒感染HeLa细胞的时间延长而逐渐增高;由重组腺病毒所表达的3种蛋白对ECV304细胞均有明显的生长抑制作用。结论:由含有人en-dostatin、K5及endostatin-K5基因的重组腺病毒载体所表达的蛋白对ECV-304生长具有明显的抑制作用。

肿瘤血管生成调节与肿瘤治疗

肿瘤血管生成是一个非常复杂的过程,涉及到多种因子的调节。针对肿瘤血管生成的治疗对策在目前肿瘤治疗中具有十分重要的意义。本文就影响肿瘤血管生成的各种调节因子、抗血管生成的主要治疗靶标及研发现状作一综述,为肿瘤治疗的抗血管生成新靶标的设计研究提供信息。

甲型H1N1流感病毒血凝素单克隆抗体轻链和重链可变区基因的巢式PCR扩增及序列分析

目的:采用巢式PCR对甲型H1N1流感病毒血凝素单克隆抗体的轻链和重链基因进行扩增,对获得的基因进行序列分析,并找出克隆鼠Igκ轻链和重链可变区基因的通用方法。方法:设计22对扩增鼠Igκ轻链可变区和重链可变区基因的引物,对6株鼠抗人甲型H1N1流感病毒血凝素单克隆抗体的轻链和重链可变区基因进行克隆并测序,与NCBI公布的鼠免疫球蛋白序列比对分析。结果:巢式PCR方法可以有效避免单克隆抗体克隆过程的假基因,并且得到的单克隆抗体的氨基酸序列均符合鼠免疫球蛋白可变区特征。结论:建立了克隆鼠免疫球蛋白轻链和重链可变区基因的通用方法,为后期克隆鼠源性单克隆抗体的可变区基因提供了基础,并为研究甲型H1N1流感病毒血凝素与抗体的结合位点提供了实验数据。

基于有限元分析的新型片弹簧制造技术

介绍了一种新型片弹簧的结构特点及弹簧载荷-变形要求,分析了其制造难点,通过ANSYS有限元软件分析刚度特性,讨论了相关参数变化对其性能的影响,并通过实验验证了有限元模型的正确性。通过调整尺寸参数及热处理过程控制,使弹簧尺寸及特性曲线符合使用要求。

复杂薄壁筒体组装焊接工艺

分析产品的结构特点及奥氏体不锈钢的焊接特点,针对筒体结构复杂、壁薄、刚性差、外形尺寸大、同轴度及圆度要求高等技术难点,制定了合理的组装焊接工艺方案,设计可调节组装工装,采取有效焊接控制措施,解决了加工制造中的技术难题。

H1亚型流感病毒HA蛋白单克隆抗体的制备及部分特性鉴定

目的:制备针对H1亚型流感病毒HA蛋白的单克隆抗体(mAb),并分析其反应特性。方法:分别以2009年甲型H1N1、季节性A1流感病毒裂解疫苗为免疫原,常规法免疫、融合、克隆化,获得各抗原特异性mAb。应用ELISA、HI试验和Western blot等技术研究mAb的反应性和特异性。结果:获得稳定分泌抗H1亚型流感病毒HA蛋白的杂交瘤细胞97株。其中株特异性mAb39株,29株具有HI活性;亚型特异性mAb7株,5株具有HI活性;2009年流行株与季节性A1、A3流行株共同抗原的mAb16株,9株具有HI活性;针对流感病毒共同抗原mAb35株,22株具有HI活性。结论:两种疫苗均具有较好的免疫原性和免疫保护活性,这些mAb的获得为流感病毒株特异、亚型特异性诊断试剂盒及流感病毒通用诊断试剂盒的制备提供了实验资料,为进一步研究H1N1流感病毒HA的抗原表位奠定了基础。

白癜风患者血清前黑素小体蛋白17自身抗体的检测

目的获取重组前黑素小体蛋白17(Pmel 17)并用于检测白癜风患者血清中Pmel 17自身抗体的分布。方法通过RT-PCR从原代黑素细胞中获得人的Pmel 17基因,先后插入克隆载体pMD19-T和表达载体pGEX-4T-1,以构建重组质粒。IPTG诱导Pmel 17蛋白表达后以亲和层析法进行纯化。间接ELISA检测白癜风患者血清中抗Pmel 17自身抗体的阳性率。结果重组质粒经测序,与预期设计完全一致,同时Pmel 17蛋白成功表达和纯化。ELISA检测进展期白癜风患者血清中抗Pmel 17自身抗体阳性率为22%,稳定期白癜风患者阳性率仅为2%,健康对照组未检测到抗Pmel 17自身抗体,进展期和稳定期阳性率差异具有统计学意义。结论成功表达了Pmel 17重组蛋白,证明Pmel 17自身抗体与白癜风的疾病严重程度有一定关系。

碟形弹簧制造工艺优化

碟形弹簧能以小变形承受大载荷,使用范围越来越广泛。本文以蝶形弹簧为研究对象,针对制造合格碟形弹簧的难题,结合理论和试验分析了碟形弹簧的力学性能,对其结构尺寸及热处理工艺进行了优化。该方法对类似碟形弹簧的制造具有指导意义。

利用寻边器测量深孔尺寸的方法

介绍了一种光电式寻边器、数控车床和工业内窥镜在位高效测量深孔尺寸的方法,该方法利用了寻边器高精度和数控车床具有较高重复定位精度等优点。寻边器通过转接头固定在镗杆上,在孔口端面对刀,移动Z轴到达被测尺寸附近,通过内窥镜观察寻边器接触情况,通过机床读数快速得到孔深值。

人canstatin基因重组腺病毒载体的构建及其病毒制备

目的：利用HEK293细胞内同源重组法构建带有绿色荧光蛋白报告基因的人血管能抑素（canstatin）重组腺病毒载体,扩增并纯化重组腺病毒颗粒.方法：PCR法扩增canstatin全长基因,克隆至pGEM-T载体,经酶切和测序证实后,亚克隆到穿梭质粒pAd5-CMV中,获得穿梭质粒pAd5-CMV/canstatin.用PacI酶单独酶切穿梭质粒pAd5-CMV/canstatin和腺病毒E3区带有绿色荧光蛋白表达元件的腺病毒骨架载体,采用标准的磷酸钙方法共转染HEK293细胞.7~10d后收获细胞裂解物,在HEK293细胞中扩增,病毒颗粒经氯化铯密度梯度离心纯化后,分光光度计检测重组病毒滴度.结果：测序证实pEGM-T/canstatin基因片段与GenBank公布的can-statin基因序列一致.重组腺病毒质粒转染293细胞后24h观察到绿色荧光,病毒纯化后制备出高滴度重组腺病毒（病毒滴度为2.0×1015pt/L）.结论：成功构建了表达canstatin基因的重组腺病毒载体并制备了重组腺病毒颗粒,为研究该基因在肿瘤治疗中的作用奠定了基础.

噬菌体文库与计算机模拟筛选H1N1流感病毒血凝素结合位点的比较

目的:对H1N1流感病毒血凝素HA的抗原表位初步筛选。方法:用噬菌体展示文库对2株抗体的结合位点进行筛选,将筛选的抗原位点结合HA序列进行多肽合成,免疫小鼠制备单克隆抗体,通过分子生物学手段对4株抗体的轻链和重链可变区基因进行调取,通过计算机模拟抗体序列结合的抗原的结构域,推测抗体结合的氨基酸位点。结果:噬菌体文库筛选得出抗体的结合序列富含组氨酸和精氨酸,将针对多肽的单克隆抗体的序列和前期获得的2株抗HA单克隆抗体的序列比对分析,发现A1-8和anti-14p结合的HA抗原序列相一致,H1-13和anti-11p结合的HA抗原序列相一致。结论:通过将噬菌体展示文库技术和计算机模拟预测抗原抗体结合,可以有效筛选抗原表位,为流感病毒HA抗原表位预测方法的完善提供理论基础。

二甲双胍对人膀胱癌细胞能量代谢的调控作用分析

目的:检测二甲双胍对人膀胱肿瘤细胞能量代谢的作用及分子机制。方法:将膀胱肿瘤细胞分为4组,分别用终浓度为0、20、40、60 mmol/L的二甲双胍处理,比色法检测各组葡萄糖的消耗和乳酸的生成,用ATP检测试剂盒检测各组ATP水平,用JC-1膜电位检测试剂盒检测二甲双胍对膀胱肿瘤细胞膜电位的影响,通过real-time PCR检测己糖激酶2(HK2)和电压依赖性阴离子通道(VDAC)的mRNA表达水平,采用Western印迹检测每组中HK2、VDAC、磷酸化信号转导与转录激活因子3(p-STAT3)的蛋白表达水平变化。结果:在20 mmol/L二甲双胍下,膀胱肿瘤细胞葡萄糖消耗增加,乳酸产生受到抑制,ATP产生和细胞线粒体膜电位降低,HK2、VDAC和p-STAT3的表达降低。结论:二甲双胍可能通过抑制HK2、VDAC和p-STAT3的表达来阻断膀胱肿瘤的糖酵解和线粒体功能,这为研究二甲双胍对肿瘤的抑制作用机制奠定了理论和实验基础。

烟酸和烟酸受体激动剂在动脉粥样硬化中的研究进展

心脑血管疾病是人类的死因之首,动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)是其发生的病理基础。他汀类药物有明确的降血脂功效,可改善As,但其对某些高脂血症患者无效,长期使用可引发严重不良反应。烟酸(niacin,NA)可通过激动其受体GPR109A,产生独特降脂、抗炎、保护内皮作用,与他汀类联用,可明显改善As。该文从烟酸抗As作用、烟酸受体、新型受体激动剂、与他汀类联合用药四个方面,综述了烟酸与烟酸受体研究进展,以期为基于烟酸受体激动剂的抗As药物研发提供新思路。