高铜对肉鸡肾脏线粒体抗氧化功能的影响

本文旨在了解高铜对肉鸡肾脏线粒体抗氧化功能的影响。选用1日龄科宝肉仔鸡120只,随机分成4组,分别喂以对照日粮(Cu 11 mg/kg,对照组)和高铜日粮(Cu 110 mg/kg,高铜Ⅰ组;Cu 220 mg/kg,高铜Ⅱ组;Cu 330 mg/kg,高铜Ⅲ组),检测梯度剂量硫酸铜在不同的饲喂时间(12日龄、24日龄、36日龄、48日龄、60日龄)肉鸡肾脏线粒体超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)的指标。结果显示:高铜Ⅱ组与高铜Ⅲ组SOD、GSH-PX、MDA都呈现代偿性升高,然后有降低的趋势。提示日粮中铜浓度达到220 mg/kg时,肾脏线粒体功能紊乱。

miRNA:一种新的基因表达调节子

在动植物基因组中广泛存在一类非编码蛋白的RNA基因,产生长度大约为21～24个核苷酸的RNA,它们被命名为microRNA(miRNA)。这是一类具有调节其他基因表达活性的小RNA。在生物的发育过程中发挥着重要作用。本文对这种基因表达调节途径的发现、机制功能及研究方法和现状作简要概述。

实验性小鼠蓖麻毒素中毒的血液学试验

为研究蓖麻毒素中毒对小鼠的血液生化指标影响,选择体重15g左右小鼠36只,随机分成3组,肌肉注射蓖麻毒素0.1mL/kg体重。攻毒前及攻毒后2h、4h、6h后采血,制备血涂片观察红细胞形态学变化,同时以血常规学方法检查血液生化指标。结果表现为攻毒4h后,红细胞出现变形和融合现象;血小板在攻毒2h后变化差异显著;白细胞在4h后变化差异显著;红细胞比积变化差异显著;血糖显著降低;ALT、AST、ALP显著增加。

犬皮肤病的诊断与防治措施

犬的皮肤病是临床发病率较高、病理过程长、类症鉴别难度大的疾病，其致病因素较为复杂，且种类繁多，仅凭经验或肉眼观察难以做出正确诊断。目前，虽然很多动物医院拥有先进的检验设备，但因操作技术水平不高，对多种病原认识不足，常常出现假阳性或假阴性结果，故导致临床治疗效果不佳，甚至拖延病情造成医源性并发症。

一例德国牧羊犬巴贝斯虫病的诊治

犬巴贝斯虫病是严重危害警犬、军犬及宠物犬健康的虫媒性血液原虫病之一，在蜱滋生的地区春、夏、秋季均可发病。现将临床遇到的1例德国牧羊犬巴贝斯虫病的诊治情况报告如下。

真核细胞内的铜转运及平衡机制研究进展

以果蝇为例,阐述了铜在动物体内的摄入、分配、排泄以及转录水平调控过程。果蝇细胞对铜的摄取主要通过金属反应转录因子MTF调节转运蛋白Ctr与金属硫蛋白m t之间的表达调控铜离子的摄取。进入胞浆内的铜主要通过ATX1、CCS和Cox17这3种铜伴侣蛋白经3条不同途径进行转运和调节。金属硫蛋白与P型ATP7酶在铜的排泄中起重要作用。

一起山鸡多杀性巴氏杆菌病的诊断与防制

1发病情况 2008年10月8日，广东省某养鸡场饲养的5000羽110日龄左右的山鸡发病，病初每天死亡20～40只，后来每天死亡200多只，病程较短，从出现症状到死亡仅0．5～2．0天。随即前来就诊。

铜对肉鸡肝细胞线粒体膜通透性及呼吸的影响

为进一步了解铜对生物体的生物学效应,选用硫酸铜作为铜源,向即时分离的肉鸡肝细胞线粒体培养液内加入终浓度分别为5、10、20μmol/L的铜(以铜计),孵育10 min后,观察肝细胞线粒体膜通透性及呼吸的变化。结果显示,铜对线粒体膜通透性转换孔有较显著的影响,造成线粒体不同程度的肿胀,表现为线粒体悬液在540 nm处的吸光值下降,且铜浓度越高,吸光值下降越明显,在孵育6 min后3种浓度的吸光值下降百分比差异显著(P<0.05)。随着铜浓度的升高,线粒体呼吸逐渐减弱,RCR、P/O、OPR均显著降低(P<0.05),这些变化可能是微量元素铜对生物机体产生毒害作用的本质原因之一。

激活标签法及其在植物基因工程上的应用

激活标签法是新近发展起来的一种用于基因分离和鉴定的方法。它通过诱变使特定内源基因发生过量表达,而产生显性功能获得型突变,从而对基因进行鉴定和分析。因为具有独特的性质已使其成为发现新基因和进行基因功能分析的有效工具。本文综述了激活标签法的原理、研究现状和在植物基因工程上的应用。

高铜日粮对肉鸡肝细胞线粒体呼吸功能的影响

采用玉米-豆粕型日粮研究铜(源于硫酸铜)对肉鸡肝细胞线粒体呼吸功能的影响。在对照组(Cu11mg/kg)基础上设3个高铜组(110mg/kg、220mg/kg和330mg/kg,分别对应为:试验组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),试验60d,在不同时间点(12、24、36、48、60日龄)采集肝脏提取线粒体。随着饲养时间的延长,对照组和试验Ⅰ组肝脏线粒体呼吸功能有增强的趋势。在48日龄之前,试验Ⅱ和Ⅲ组肝脏线粒体呼吸功能也有增强的趋势,但幅度较小,48日龄以后,肝脏线粒体呼吸功能呈现下降趋势,特别是60日龄的试验Ⅲ组。高铜日粮能影响肉鸡肝细胞线粒体的呼吸功能,日粮铜浓度为110mg/kg时,能增强线粒体的呼吸功能,但较高的铜浓度日粮则损害线粒体的呼吸功能。

不同剂量的蛋氨酸铜对肉鸡免疫器官发育和病理变化的影响

选用1日龄健康AA肉仔鸡120只系统研究日粮中添加高剂量的蛋氨酸铜对肉鸡免疫器官发育、铜含量和病理变化的影响。将肉仔鸡随机分成4组，使用蛋氨酸铜作为铜源，饲喂玉米豆粕型基础日粮，对照组饲料铜含量为11mg／kg，3个试验高铜组分剐为：110、220、330mg／kg，试验至60日龄结束。在36日龄，各组随机屠宰6只鸡，计算免疫器官的质量指数；测量60日龄各组免疫器官的铜含量并观察其组织病理变化。结果显示，添加110-330mg／kg的蛋氨酸铜不同程度地降低了免疫器官的质量指数，极显著地增加了其铜残留量，各免疫器官的病理组织学变化不明显。结果表明，免疫器官中铜含量随日粮铜添加水平升高而升高，日粮中蛋氨酸铜质量浓度达到330mg／kg都不会引起肉鸡免疫器官明显的病理性损伤。

应用聚合酶链反应快速检测沙门氏菌

利用聚合酶链反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｃｎ，ＰＣＲ）技术检测沙门氏菌。根据沙门氏菌鞭毛素Ｉ相抗原基因，设计了一对各长２０个碱基的引物，扩增２６９ｂｐ的片段。并用８个标准标沙门氏菌株和３个阴性菌株检查引物特异性，结果完全相符。采用５０μＬ体积，ＮＴＰｓ２００μｍｏｌ，引物各１μｍｏｌ，ｍｇ＋＋３ｍｍｏｌ，Ｔａｑ酶２Ｕ。循环温度为９７℃７ｍｉｎ予变性后；９４℃１ｍｉｎ，６０℃１ｍｉｎ，３５个循环后再延伸７２℃７ｍｉｎ。经电泳分析，灵敏度可达每毫升检出１０４个细胞，经二次扩增后，灵敏度还可提高。实验共检查了３０个可疑样品，检出率明显高于生化检查和免疫学方法检查。

铜对肉鸡肝细胞线粒体H_2O_2生成的影响

选用硫酸铜作为实验铜源,向即时分离的肉鸡肝细胞线粒体溶液内加入不同浓度的铜,孵育不同时间后,以2′,7′-二氯二氢荧光磺为荧光指示剂,琥珀酸盐为底物,以SOD为催化剂观察在不同抑制剂存在下肝细胞线粒体H2O2生成的变化。结果显示:分别用10μmol/L Cu(试验组Ⅰ)、20μmol/L Cu(试验组Ⅱ)和30μmol/L Cu(试验组Ⅲ)孵育线粒体10 min后,其过氧化氢生成速率显著高于对照组(0μmol/L)(P<0.01)。此外各组的起始H2O2含量也随铜浓度的升高和孵育时间的延长而增加。结果表明,Cu2+对线粒体H2O2的生成有显著影响,不但可以提高线粒体中的基准H2O2含量,而且能加快H2O2的生成速率,铜浓度越高,孵育时间越长,生成速率越大,说明铜可诱导体内的氧化反应,或降低体内的抗过氧化作用,促使线粒体氧化呼吸链中电子的漏出,在SOD催化下,H2O2生成增多并加快。这种现象的发现可能是微量元素铜对生物机体造成毒害作用的原因之一。

用荧光探针JC-1检测铜对鸡肝细胞线粒体膜电位的影响

选用硫酸铜作为实验铜源,向肉鸡肝细胞悬液中加入不同剂量的铜(铜终浓度分别为5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L),孵育15 min后,利用新型荧光探针JC-1标记肉鸡肝细胞线粒体,在流式细胞仪上检测JC-1荧光强度的变化,观察铜对肉鸡肝细胞线粒体膜电位(△Ψm)变化的影响。结果显示:正常肝细胞线粒体维持较高的膜电位,JC-1在线粒体内形成聚合物的红色荧光占主导地位。用不同浓度的铜处理肝细胞可导致线粒体膜电位下降,JC-1聚合物分解成单体,红色荧光强度减弱,并具有时间依赖性。此结果表明,铜(Ⅱ)能导致肉鸡肝细胞线粒体膜电位下降,暗示铜对体细胞的毒害作用可能是通过瓦解机体细胞线粒体膜电位来实现的。

高铜日粮对肉鸡肝细胞线粒体呼吸链复合物活性的影响

在对照组(Cu 11 mg/kg,A组)基础上设高铜组3个(110 mg/kg、220 mg/kg和330 mg/kg,分别对应为试验组B、C、D),试验期为60 d,在12、24、36、48、60日龄采集肝组织,提取线粒体,测定线粒体复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ的活性变化。结果表明,11 mg/kg和110 mg/kg铜日粮添加组线粒体复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ的活性呈增加趋势。220 mg/kg和330 mg/kg铜日粮添加组肉鸡肝细胞线粒体复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ活性减弱,但主要在试验后期,尤其是48日龄之后,比对照组和各组内的试验前期下降明显(P<0.05)。说明高铜日粮在一定程度上对线粒体复合物活性是有利的,但过高的铜添加到日粮中(≥220 mg/kg)可降低肉鸡肝细胞线粒体呼吸链复合物的功能活性。据此可以推测,线粒体是机体铜过量状态下侵害的靶部位之一,而且能作用于线粒体各个复合物,造成线粒体呼吸功能减弱,呼吸链中电子传递发生故障,从而影响线粒体功能的正常发挥。