纳豆抗氧化肽对H2O2诱导HEK293细胞氧化应激损伤的保护作用

目的评价纳豆肽的抗氧化能力以及对对H_(2)O_(2)诱导HEK293细胞氧化应激损伤的保护作用。方法首先以1,1-二苯基-2-三硝基苯(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基(DPPH·)、2,2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐[2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)ammonium salt,ABTS]阳离子自由基(ABTS^(+)·)、羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(·O^(2-))清除能力以及总还原能力为指标,测定酶解得到纳豆肽粗品的抗氧化能力。利用超滤技术对纳豆肽进行分离,测定分离后各组分在不同浓度下对DPPH·及ABTS^(+)·清除活性。将活性最强的两个组分作为纳豆抗氧化肽,测定其对H_(2)O_(2)诱导氧化损伤HEK293细胞抗氧化酶含量的影响,评价其对氧化损伤HEK293细胞的保护效果。结果纳豆肽粗品在8.00 mg/mL时具有良好的DPPH·、ABTS^(+)·、·OH和·O^(2-)清除能力以及总还原能力。超滤后得到了相对分子质量分别大于30、10~30、3~10、小于3 kDa的4个纳豆肽组分,其对DPPH·及ABTS^(+)·清除活性均随着质量浓度的增加呈现上升趋势,特别是在8 mg/mL时,相对分子质量为3~10 kDa和小于3 kDa组分表现出最强的抗氧化活性,后续的细胞试验表明,这两个组分能够显著提高氧化应激下HEK293细胞的存活率。在300μg/mL的剂量范围内,小于3 kDa组分的纳豆抗氧化肽可使细胞存活率恢复至未损伤时的水平,而3~10 kDa组分也使损伤细胞的存活率提高了40.8%。同时,纳豆抗氧化肽均能提高氧化损伤HEK293细胞中的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(glutathione peroxidase,GPX)和过氧化氢酶(catalase,CAT)等抗氧化酶的含量,<3 kDa组分和3~10 kDa组分的纳豆抗氧化肽分别使SOD含量提高了49.52%和50.80%,GPX含量提高了49.52%和50.81%,CAT含量提高了93.64%和91.97%。结论纳豆肽具有抗氧化潜力,纳豆抗氧化肽可以有效地缓解H_(2)O_(2)诱导的HEK293细胞的氧化应激损伤,为纳豆抗氧化肽在功能食品中的应用提供理论依据。

黑木耳多糖与乳清分离蛋白分子间作用力的研究

目的研究黑木耳多糖与乳清分离蛋白分子间的作用力。方法本研究利用化学键解离剂处理黑木耳多糖-乳清分离蛋白复合物,通过可见光吸收光谱、傅里叶红外光谱、荧光光谱技术检测其浊度及二级、三级结构变化,分析维系该复合物的主要作用力,并利用离子交换色谱进行单糖组成成分分析,结合分子对接技术预测其结合位点。结果浊度结果表明,氢键和疏水相互作用是维持复合物稳定的主要作用力;红外光谱、荧光光谱检测发现,尿素、十二烷基硫酸钠的添加改变了复合物的二级和三级结构,再次证明复合物间的主要作用力为氢键和疏水相互作用;黑木耳多糖的单糖成分主要为甘露糖;分子对接结果显示,甘露糖主要通过氢键与乳清分离蛋白的组氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、色氨酸等氨基酸残基结合。结论本研究揭示了黑木耳多糖通过氢键及疏水相互作用与乳清分离蛋白结合,并预测结合位点在组氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、色氨酸等氨基酸残基处,研究结果为黑木耳多糖-乳清分离蛋白复合物在酸性环境中的应用提供了理论基础。

酶解与发酵联合处理对黑木耳成分及生物活性的影响

为探究黑木耳液经过酶解与发酵联合处理后的成分和生物活性的变化,将黑木耳液利用纤维素酶、果胶酶酶解,再利用接种比例1:1的植物乳杆菌(L.plantarum)与发酵乳杆菌(L.fermentum)进行发酵,测定经酶解与发酵联合处理前后木耳液的成分变化,通过傅立叶红外光谱(FTIR)和原子力显微镜(AFM)表征其结构;对其抗氧化活性,体外抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性进行评价;建立H_(2)O_(2)诱导RAW264.7细胞氧化损伤模型,通过检测抗氧化酶含量来评价不同质量浓度木耳发酵液对细胞氧化损伤的保护作用,以及对RAW264.7细胞增殖、吞噬效果及细胞因子释放量的影响。结果表明,木耳发酵液中总糖含量由未处理木耳液的170.57 mg·g^(-1)提高到539.14 mg·g^(-1),同时,蛋白质含量由未处理木耳液的15.00 mg·g^(-1)提高到81.28 mg·g^(-1);FTIR光谱分析结果表明,木耳发酵液中-OH峰明显变宽;原子力显微镜结果显示,木耳发酵液的三维结构呈密集的谷堆状,木耳中的多糖水解生成了较多小分子的糖,支链含量增多并聚集成团;黑木耳发酵液质量浓度为0.5 mg/mL时,其α-淀粉酶抑制率较木耳液相比提高了2.39倍;在黑木耳发酵液质量浓度为5 mg/mL时,其胆酸盐结合能力是黑木耳酶解液和木耳液结合胆酸盐能力的1.37倍和2.66倍。木耳发酵液显著提高了RAW264.7细胞的增殖和吞噬能力,并对氧化损伤的RAW264.7细胞具有保护效应。酶解与发酵联合处理显著提高了黑木耳活性成分的功能,为黑木耳产品的深入开发研究提供了理论依据。

酸奶粉冲调复原性的探讨

讨论了加水量、水温、稳定剂种类和添加量对酸奶粉复原性的影响。结果表明,冲调酸奶粉时,酸奶粉浓度为15%、水温为0℃或室温,添加0.05%羧甲基纤维素(CMC)、0.10%瓜尔豆胶和0.10%魔芋胶时,得到的酸奶风味、色泽、组织结构等符合酸奶产品质量要求,此时酸奶粉的冲调性也最佳。

水提法从芝麻中提取蛋白质和油提取条件的优化

本文研究了利用水提法从芝麻中提取蛋白质和油时，ｐＨ值、温度、提取时间、固液化等因素对提取率的影响．并在单因素试验的基础上，用响应曲面分析（ＰＳＡ）法优化了提取条件，得到了最佳工艺条件为ｐＨ８．６０、温度４８．５℃、时间７２分钟，此时蛋白质的提取率为９３．３％．

从L-乳酸菌酸菜发酵液中初步分离肽类抑菌物质

从L-乳酸菌酸菜发酵液中经硫酸铵盐析、透析、CM Sephadex C-25凝胶柱层析等操作,分离提取肽类抑菌物质,通过琼脂扩散法检测其活性为1.83×103IU/g,经尿素-SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,发现有三条清晰条带,相对分子量分别为3500、14000、22000。结果说明该酸菜发酵液中确实存在抑菌活性物质,为从酸菜发酵液中分离产生抑菌活性物质的菌株,并进行纯培养发酵生产天然防腐剂奠定了基础。

利用RSM法优化副干酪乳杆菌HD1.7产细菌素发酵培养基

用RSM法以MRS培养基为基础对副干酪乳杆菌HD1.7的液体培养基进行优化。首先采用Plackett-Burman试验设计筛选显著因子,确定了影响细菌素产生的主要成分:牛肉膏、葡萄糖、酵母粉;运用最陡爬坡试验逼近最大细菌素产生区域;利用RSM法对培养基进行优化。试验结果表明培养基最佳配方为酵母粉0.26%、牛肉膏0.88%、蛋白胨1.5%、葡萄糖2.45%、Mg-SO40.06%、K2HPO40.2%、吐温80 0.1%、MnSO40.005%、NaC l 0%。

乳酸黄瓜的腌制

本文对乳酸黄瓜的腌制方法进行了研究和探讨。利用多菌株乳酸菌菌液腌制黄瓜 ,不仅使酸黄瓜的酸味更加纯正 ,而且提高了营养价值 ,本方法适合于酸黄瓜等生产企业技术升级和产品内在质量的提高。

枯草芽孢杆菌HD132产生的α-淀粉酶性质的初步研究

文章对枯草芽孢杆菌B.subtilis Ki-2-132的UV诱变菌株HD132发酵产生的α-淀粉酶进行了初步研究,结果表明:在实验条件下,枯草芽孢杆菌HD132比BF7658产生的α-淀粉酶活力高,α-淀粉酶的最适温度为60℃、最适pH值为6.0,Ca2+对酶有一定的激活作用,而Cu2+、Fe2+和Fe3+强烈抑制α-淀粉酶的活性。

响应面法优化植物乳杆菌发酵产胆盐水解酶的培养基成分

以胆盐水解酶的活性为响应值,采用响应面设计分析法对植物乳杆菌发酵产胆盐水解酶培养基的成分进行优化。获得最佳培养基组成(g/L):葡萄糖19.40、蛋白胨17.05、大豆蛋白胨14.00、乙酸钠1.82、K2HPO42.00、酵母浸粉6.00、柠檬酸氢二铵1.00、Mg-SO40.87、MnSO40.45、L-半胱氨酸0.5、吐温-80 2.2mL/L。在该优化条件下,胆盐水解酶产量为(7.02±0.28)U/mL,较单因素优化前提高了6.44倍。所得数学模型的预测值与实验观察值相符,能够预测不同培养条件下植物乳杆菌发酵产胆盐水解酶产量的变化。

芝麻油生产方法的比较

生产芝麻油的方法主要有小磨法、压榨法、有机溶剂漫出法,近些年又有学者研究用酶法来生产芝麻油。主要介绍这四种芝麻油的生产方法及特点。

响应面法优化海藻酸钙包囊的制备条件

在单因素实验的基础上,利用响应面法对海藻酸钠-羧甲基纤维素钠/氯化钙-壳聚糖(SA-CMC/CaCl2-CA)液芯包囊制备过程中的6个因素进行优化工艺。应用Plackett-Burman实验设计筛选出凝胶反应时间、海藻酸钠(SA)浓度和羧甲基纤维素钠(CMC)浓度是影响包囊机械压力的3个主要因素;采用最陡爬坡实验接近最大响应区域,确定中心点条件CMC1.05%,SA 0.66%,凝胶反应时间21 min;最后利用Box-Behnken实验设计确定中心组合实验,建立模型,绘制响应面曲线,获得最佳工艺条件为:CMC浓度1.08%,SA浓度0.66%,凝胶反应时间21.19min;此时机械压力的最大预测值为15.46N,与实际值15.32N接近。

“以制度为引导”思想下理工类高校教师教学评价体系的建立与完善

大学教育质量保障核心在于教师,教师工作内容复杂,教学内容千差万别。如何建立完善教师教学评价体系,既保障大学教师教学内容的个性化,又能够客观评价区分教师的教学水平,引导教师对自身工作加以改进,自我完善,达到以制度引导人、培养人,逐步培养出名师、大家、大师的目的,是一所大学的重要建设内容,也是实现大学办学目标、培养人才的重要途径。

现代生物技术背景下酶工程课程体系改革实践

酶工程是高校生物技术、生物工程及食品科学与工程专业的基础课,随着生物技术的发展其内涵发生了明显的改变。从课程体系、教学方式、教学手段、考核方式、双语课程建设五个方面,探索了酶工程课程体系改革的路径,以体现现代生物技术背景下酶工程科学技术内容。

纳豆芽孢杆菌发酵菜用大豆中总黄酮的提取及其降血脂效果评价

本研究以菜用大豆等外品为原料,通过纳豆枯草芽孢杆菌发酵来提高其总黄酮含量,为提高菜用大豆产品的附加值提供理论支持。实验利用纳豆芽孢杆菌对菜用大豆等外品进行发酵,以发酵产品中总黄酮含量为评价指标确定纳豆发酵的最优条件,通过D101型大孔树脂对提取的总黄酮进行纯化,采用芦丁比色法测定总黄酮含量。体内实验分为肥胖预防实验和缓解实验:以C57BJ/6L小鼠为模型,预防实验在饲喂高脂饲料的同时,灌胃总黄酮提取物溶液(50 mg/kg·d);缓解实验是利用高脂饲料建立起肥胖小鼠模型后,灌胃低、中、高剂量的总黄酮提取物溶液(分别为20、50和100 mg/kg·d)。通过小鼠体重、血脂以及促炎因子等指标评价总黄酮溶液的降脂效果。结果表明,菜用大豆发酵生产黄酮的最佳条件为:枯草芽孢杆菌接菌量为1.15×1011 CFU/100 g菜用大豆,发酵温度37℃,发酵时间24 h,后熟时间12 h,此时纳豆总黄酮得率为4.30 mg/g菜用大豆;测得该粗提物中黄酮含量为22.1%;预防实验组给予黄酮处理后,小鼠体重和Lee's指数与正常对照组相比均无显著差异(P>0.05)。缓解实验中高、中、低剂量黄酮提取物处理组小鼠血清中甘油三酯(TG)含量分别为313.10±10.12、310.39±31.76和310.1±10.20 nmol/L,与正常对照组(330.80±34.36 nmol/L)无显著差异(P>0.05);黄酮各组灌胃干预后,小鼠血清总胆固醇(TC)、白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量均较高脂模型组显著下降(P<0.05)。结论:利用纳豆芽孢杆菌发酵菜用大豆提高了其总黄酮含量,该黄酮提取物具有预防和缓解高脂饮食小鼠血脂升高的效果。

杏鲍菇多糖组分的分离纯化及结构鉴定

目的对含有岩藻糖(fucose,Fuc)的杏鲍菇多糖进行分离纯化,并分析其结构。方法通过水提分级醇沉得到60%乙醇醇沉杏鲍菇多糖(Pleurotus eryngii polysaccharides,PEP)。杏鲍菇多糖经离子交换层析和凝胶层析分离纯化,采用凝胶渗透色谱法(gel permeation chromatography,GPC)测定PEP各组分的相对分子质量;高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)检测岩藻糖;傅里叶变换红外光谱(fourier transform infrared spectrum,FT-IR)、X-射线衍射(x-ray diffractometer,XRD)分析、原子力显微镜(atomic force microscope,AFM)观察等方法对PEP各组分进行结构表征。结果PEP经分离纯化得到PEP-1、PEP-2和PEP-3共3种多糖组分,分子量依次为1.585×10^(6)、4.266×10^(4)和1.995×10^(3)Da。岩藻糖存在于PEP-1组分中;FT-IR显示PEP-1和PEP-2存在C-O-C键拉伸和吡喃环构型;PEP-2存在β型糖苷键,PEP-3为β-葡聚糖。XRD结果显示3个组分多糖结晶指数分别为38.89%、47.22%和20.00%。AFM观察结果显示,PEP-1整体呈现流星状结构,多糖粒子聚集;PEP-2为链状螺旋结构且以小球状体聚集;PEP-3呈现小螺旋棒状结构。结论PEP分离纯化得到3个组分多糖,岩藻糖存在PEP-1组分中。

副干酪乳杆菌HD1.7产生抗菌物质的初步研究

对从乳酸菌酸菜发酵液中分离到的能产生抑菌物质的菌株进行了鉴定,并对该菌的发酵产物进行了提取和性质研究。经形态学、生理生化与16SrDNA序列分析鉴定该菌株为副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)。抑菌谱试验表明:除酵母菌外,该抑菌物质对革兰氏阳性、阴性菌和多种致病菌均有较强的抑制作用。经有机溶剂萃取法获得了抑菌物质的粗提物,胰蛋白酶水解证明抑菌物质具有蛋白质性质,尿素-SDS-PAGE不连续凝胶电泳法测得抑菌物质的分子量为14000左右。

纳豆芽孢杆菌发酵菜用大豆中纳豆激酶的提取及其性质分析

以菜用大豆为原料,直投式纳豆芽孢杆菌作为发酵剂,纳豆激酶活力作为评价指标,通过单因素和正交试验优化纳豆激酶发酵工艺条件;通过盐溶、硫酸铵分段盐析、二乙氨乙基(DEAE)阴离子交换柱分离纯化纳豆激酶,并采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)确定其分子质量,并进行酶学性质和体外溶栓效果分析。结果表明,菜用大豆发酵生产纳豆激酶的最佳条件为:每100 g蒸煮菜用大豆接入1.15×10^11 CFU/g直投发酵剂,发酵温度37℃、发酵时间36 h、后熟时间18 h时,此时纳豆激酶活力可达2326.60 IU/g。纳豆激酶的分子质量介于25~35 kDa之间,最适作用温度、pH值分别为37℃、8.0,当温度低于40℃、pH值在6.0~8.0时较稳定;体外溶栓实验表明纳豆激酶具有良好的体外溶栓效果。

PPAR-γ及其调节剂与脂肪代谢的关系研究进展

肥胖及其带来的高血压、糖尿病等一系列代谢性疾病已经为人们所关注。关于引起肥胖的机制已经有大量的报道,过氧化物酶增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptors,PPARs)家族成员对肥胖及脂代谢调节作用的研究取得了一些进展,过氧化物酶增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)及其激活因子/抑制因子在脂肪代谢、各类炎症和免疫反应中发挥了极其重要的作用。本文介绍了PPAR-γ对脂肪形成过程中的调控作用,以及PPAR-γ激动剂/拮抗剂与脂代谢的关系,为深入研究PPAR家族在肥胖发生过程中的作用机制及控制措施提供参考。

鱼鳞水解胶原蛋白在蛋糕和灌肠中的应用

通过蛋糕焙烤和灌肠加工实验,对鱼鳞水解胶原蛋白在蛋糕和灌肠中的应用效果进行研究。结果表明,适量添加鱼鳞水解胶原蛋白可以提高蛋糕的成品率和蛋糕的比容,增加灌肠制品的成品率,提高灌肠的持水力,并能获得感官品质良好的蛋糕和灌肠制品。在本实验条件下,鱼鳞水解胶原蛋白在蛋糕和灌肠中的最佳添加质量分数分别为3%和2%。