7个脂肪代谢相关基因因果突变位点在西门塔尔牛中分布特征及与乳成分性状关联分析

西门塔尔牛是世界著名的乳肉兼用型品种,探究牛肉脂肪代谢相关基因与乳成分之间的关系,对该品种的双向选育具有重要意义。本实验以213头西门塔尔牛为研究对象,选择7个与牛肉脂肪代谢相关的基因SREBP1、FABP3、FABP4、MC1R、LXR-α、FASN和GH,对已报道的因果突变位点进行基因分型,并与乳成分性状进行关联分析。群体遗传分析结果表明:FABP3、FASN和GH基因处于中度多态性(0.25<PIC<0.5),其余基因均为低度多态性(PIC<0.25)。关联分析结果显示:FABP3基因GG型的乳糖率比CC型高3.35%(P<0.05);此外,MC1R、FASN、GH基因的因果突变位点分别与西门塔尔牛乳脂率和乳糖率、尿素氮、体细胞数性状显著关联(P<0.05)。由以上可知,7个与牛肉脂肪代谢相关基因因果位点在西门塔尔牛群体中均有多态性,并且有5个因果位点与乳成分性状显著相关,根据生产需要可以作为乳肉兼用型西门塔尔牛双向选育的分子标记。

山羊生长激素基因5′调控区的多态性分析

以鲁北白山羊、引进波尔山羊、纯繁波尔山羊以及鲁北白山羊与波尔山羊的杂交一代、回交一代共计 2 74个个体为研究材料 ,用两对引物分别扩增山羊生长激素 (GH)基因 5′区的 2 6～ 2 39bp以及 2 2 5～ 4 2 9bp片段 ,扩增产物经SSCP分析发现均存在多态性。在 2 6～ 2 39bp片段上 ,波尔山羊及杂交后代以AA型个体占多数 ,而鲁北白山羊则BB型个体较多 ;在 2 2 5～ 4 2 9bp片段上 ,所有种群均以CC型个体较多。对两个片段的纯合型 (AA ,BB ;CC ,DD)分别克隆测序发现 :(1) 2 6～ 2 39bp片段上AA型在第 6 0位发生了C→T的突变 ,第 2 11位发生碱基C的丢失 ,(2 ) 2 2 5～ 4 2 9bp片段上 ,DD型存在 3处突变 ,分别为 2 6 4位由T→C ,2 92位由T→A ,372位由C→T。上述结果为首次实验证实山羊生长激素

脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)ferritin基因克隆及表达分析

采用RT-PCR及RACE技术获得了总长度为755bp的脊尾白虾ferritin基因cDNA序列。该基因序列5’和3’的非编码区分别为112bp和146bp,开放阅读框497bp,推测编码169个氨基酸,预测蛋白分子量19.1kDa,等电点5.46,该基因命名为Ecfer基因。利用Neighbor-joining法构建系统进化树分析结果表明,Ecfer基因氨基酸序列与无脊椎动物中的甲壳动物聚为一支(同源性为64%—67%)。此外,Ecfer基因氨基酸序列与脊椎动物铁蛋白H链同源性为53%—57%。采用荧光定量RT-PCR研究Ecfer基因在组织中以及经WSSV刺激后血淋巴、肝胰腺中的表达变化情况。研究结果表明,Ecfer在肝胰腺、卵巢、肌肉、鳃和血淋巴中均有分布。注射WSSV后3h和6h,肝胰腺和血淋巴Ecfer基因表达较对照组均显著上调(P<0.05),并具有显著的时间差异性。说明Ecfer基因可能参与了脊尾白虾抵抗WSSV入侵的免疫反应。

山羊生长激素基因部分序列的PCR-SSCP分析

以鲁北白山羊、波尔山羊和波尔山羊与鲁北白山羊的杂交一代、回交一代共计 2 74个个体为研究材料 ,对山羊生长激素基因 5′调控区 - 4 0 6～ - 1 93片段进行PCR扩增 ,扩增产物经SSCP分析发现存在多态性。结果表明发现波尔山羊及杂交后代以AA型占多数 ,而鲁北白山羊则BB型个体较多 ,基因型频率在品种间存在显著差异 (P <0 .0 5 )。对该片段的两种纯合型克隆测序发现 :AA型在第 6 0位发生了C→T的突变 ,第 2 1

山羊IGFBP-3基因的遗传分析及其与经济性状的关系

用PCR-RFLP技术对7个山羊群体的501个个体进行了检测,结果发现:每个群体均存在XspⅠ多态,表现为3种基因型,均以杂合型AG居多,以GG最少,等位基因A和G在每个群体中基本稳定,7个群体均处于Hardy-weinberg平衡状态(P>0.05),且基因型在群体间的分布也不存在显著差异(P>0.05)。序列分析表明:扩增片段包括山羊IGFBP-3基因的部分exon2、完整intron2和exon3及部分intron3,与奶山羊、绵羊、奶牛相应序列的同源性依次为99.1%、98.1%、94.1%。同时与经济性状的最小二乘分析表明:波尔山羊及其杂交后代的该位点与断奶体质量和眼肌面积有关(P<0.05),对3月龄体长和胸围有极显著影响(P<0.01),与10月龄体长、胸围和12月龄体长相关(P<0.05),AG基因型均显著或极显著地大于GG型,且呈现AG>AA>GG的趋势。

几丁质结合蛋白基因克隆、表达与纯化

该研究通过聚合酶链反应(PCR)方法从假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas sp.)DL-6菌株中成功克隆了几丁质结合蛋白基因。PCR测序结果表明,该基因全长1 596 bp,编码531个氨基酸,其理论分子质量为58.517 ku,等电点(p I)4.35,命名为CBP58(GenBank登录号KF234016)。结构域分析结果表明,该蛋白包括1个33家族碳水化合物结合模块(CBM),2个类型3几丁质结合域(Cht BDs);用Insight II 2005软件以同源建模的方法构建CBP58蛋白CBM33结构域的三维结构模型,Ramachandram图谱检测和三维结构评估显示模型结构合理,整体相容性较为可信;将CBP58基因构建到p ET23b载体,并转化至大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中诱导表达;利用镍柱亲和层析纯化获得重组蛋白。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测显示目的蛋白可溶表达,为后期几丁质结合蛋白(CBP)的生化性质表征奠定理论基础。

大学生竞技健美操男单难度动作的选编分析——以湖南省为例

采用录像分析法,文献资料法对2005年-2006年湖南省大学生竞技健美操比赛男单项目共13套动作的难度动作数量、组别、分值、排列顺序等项目进行统计分析。结果表明:湖南省大学生健美操男单难度动作的选编基本符合规定,但是在动力性力量难度动作选择上缺乏新意;在静力性力量中出现单一的难度动作;在跳跃类难度动作的选择上缺乏多样性。说明湖南省大学生竞技健美操水平与最新发展趋势还存在一定的差距。

维生素E和裂壶藻对中国对虾生长及TLR/NF-κB表达水平的影响

以中国对虾为实验动物,在基础饲料中添加不同含量的VE和裂壶藻,配制成3种试验饲料,即B组(1%裂壶藻)、C组(400mg/kgVE)、D组(400mg/kgVE+1%裂壶藻),以基础饲料为A组(对照饲料),进行为期1个月的饲养。应用实时定量PCR方法研究了不同浓度的VE对中国对虾血液、肌肉及肝胰腺中TLR、NF-κB基因表达的影响。结果表明:1)饲料中添加裂壶藻和VE与对照组相比显著提高中国对虾体长、体质量、特定生长率和成活率,并且2种都添加的D组效果更显著(P<0.05)。2)饲料中添加裂壶藻和VE比对照组显著降低血液、肝胰腺和肌肉中TLR、NF-κB基因的表达水平,且VE和裂壶藻联合对免疫基因的调控能力更加显著(P<0.05)。这些结果表明饲料中添加400mg/kgVE+1%裂壶藻能显著促进中国对虾生长,提高存活率及对TLR、NF-κB两种免疫功能基因的调控能力。

异搏定和能量合剂对肠缺血再灌注所致肝损伤的保护作用

【目的】通过建立肠缺血—再灌注的动物实验模型,研究异搏定、能量合剂对大鼠肠缺血—再灌注所致肝损伤的作用。【方法】将32只Wistar大白鼠,随机分为A、B、C、D四组。B、C、D三组分别与再灌注前静注生理盐水、异搏定、能量合剂注射液,以A组为对照。测定所有动物血清中ALT,AST和LDH含量,血清和肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛活性(MDA),肝组织中细胞色素C氧化酶活力和肝组织细胞中Ca2+浓度。采用HE染色法检测肝组织细胞凋亡的百分率。【结果】C、D两组肝组织及血清中各项指标均接近A组(P>0.05),与B组比较差异显著(P<0.05～0.01);肝组织病理切片光镜观察C、D两组肝组织细胞仅轻度受损,而B组肝细胞中重度损伤。【结论】这些结果表明:缺血前静脉给予适量异搏定、能量合剂对大鼠肠缺血—再灌注致肝损伤有明显保护作用.

慢性病毒性肝炎、肝硬化患者血糖代谢紊乱的因素探讨

目的 探讨慢性病毒性肝炎、肝硬化患者血糖代谢紊乱的影响因素。方法 采用葡萄糖氧化酶 -过氧化物酶法 ,测定慢性病毒性肝炎、肝硬化患者的空腹血糖 ,并分析年龄、性别、病程对糖代谢的影响。结果 (1 )慢性肝炎与肝硬化所致的肝原性糖尿病发生率在年龄、性别、病程长短方面的差别均具有显著性意义 (均P <0 0 1 ) ;而低血糖的发生率在上述各方面的差别均无显著性意义 (P >0 0 5) ;(2 )慢性肝炎和肝硬化组肝原性糖尿病和低血糖的发生率在e抗原阳性与e抗原阴性者间差别均有显著性意义 (P<0 0 5) ;(3)两组患者肝原性糖尿病发生率间的差别有显著性意义 (P <0 0 1 ) ,低血糖发生率间的差别亦有显著性意义 (P <0 0 1 )。结论 性别、年龄、病程是慢性病毒性肝炎。

普通高校体育专业大学生术科自主学习能力培养的初探

自主学习是当今教育研究的重要课题。在课程论领域,培养学生自主学习能力被作为一项重要的课程目标;在教学论领域,自主学习被视为一种重要的教学方法;而在学习论领域,自主学习被看成是一种有效的学习方式[1]。自主学习是适应时代发展的一种学习方式,也是当前体育课程改革应该倡导的学习方式之一,教师应注重对学生自主学习能力的培养,为学生今后的生存发展与终身学习的需要打好基础。文章在对自主学习含义理解的基础上,分析了影响体育专业学生术科自主学习能力的因素,探讨了引导和培养体育专业学生术科自主学习能力的方法。

山羊GH基因5'调控区的单核苷酸多态性研究

以鲁北白山羊、引进波尔山羊、纯繁波尔山羊以及鲁北白山羊与波尔山羊的杂交一代、回交一代共计274个山羊个体为研究材料,采用PCR-SSCP方法对山羊生长激素基因5'调控区的225～429bp片段进行多态性分析,发现该片断存在多态性。对两种纯合型(CC、DD)个体分别进行测序分析后发现,DD型存在3处突变,分别为264位由t→c,292位由t→a,372位由c→t。

常用细菌染色方法的改良

常用的细菌染色法有革兰染色、抗酸染色等。其中有些方法操作复杂,不易掌握,本文对上述两种染色方法进行改进,试验结果显示,改进方法后不仅操作简便,而且染色效果好。

城市垃圾热解技术探讨

本文在概述了中国城市垃圾处理现状、介绍了现有城市垃圾处理技术，对各种热解工艺进行了简要的评述，提出了一种先进的垃圾热解熔融新工艺，并对该工艺的特点、先进性和经济性等问题进行了分析和介绍。

肾综合征出血热并发肝损伤57例临床分析

目的:探讨本地区肾综合征出血热(HFRS)合并肝损伤的临床特点。方法:收治HFRS患者61例,对并发肝损伤患者57例的肝功能进行回顾性分析。结果:57例HFRS患者均有不同程度的肝损伤且发生在各期,表现为转氨酶不同程度的升高。结论:肾综合征出血热早期即可出现肝损伤,以转氨酶不同程度升高为特征,肾综合征出血热病程早期进行保肝降酶治疗,有助于病情的恢复。

纳米中药04对抗生素所致小鼠肠道菌群失调的调节作用

目的 :应用纳米中药作为微生态调节剂治疗抗生素所致的菌群失调。方法 :观察治疗前后小鼠肠道菌群、粪便及毛发的变化。结果 :显示治疗前后菌群失调有明显的改善 ,粪便由稀便转为正常 ,毛发也与治疗前相比有较大改善。结论 :纳米中药 0

体育双语教学“三觉教学法”实验研究

根据体育双语实践课的开放性、灵活性和可塑性特点,笔者创设了"三觉教学法"方案。并通过"三觉教学法"与英语课堂教学的教学实验对比,得出此教学法是有助于单词记忆的可行方法。

复方丹参注射液联合甘利欣治疗慢性乙型肝炎的临床研究

目的:观察复方丹参注射液联合甘利欣治疗慢性乙型肝炎病人的肝功能、肝纤维化指标的变化。方法:按照随机、对照原则分为两组,治疗组复方丹参注射液250ml静滴联合5%葡萄糖250ml加甘利欣150mg静滴治疗2个月,对照组5%葡萄糖250ml加甘利欣150mg静滴治疗2个月。结果:两组治疗前后肝功能改善、肝纤维化指标变化,两组比较差异有显著性(P<0.05)。结论:复方丹参注射液联合甘利欣治疗慢性乙型肝炎优于单用甘利欣注射液。

大鼠小肠缺血再灌注致肝损伤机制的初步探讨

目的 :通过动物实验 ,探讨小肠缺血再灌注大鼠肝脏的改变。方法 :应用连续监测法测定血清 AL T、AST及 L DH;用化学比色法测定 SOD、MDA。结果 :大鼠小肠缺血再灌注可以导致肝脏功能的损伤。表现为 AST、AL T、L DH升高 ;血及肝组织中 SOD减少 ,MDA含量增加 ;肝组织细胞 Ca2 +浓度增高。结论 :大鼠小肠缺血再灌注时肝脏有一定的损伤。其机制与钙超载、氧自由基活性增强等因素有关。