脑源性神经营养因子在牦牛与黄牛端脑不同区域的表达与分布

目的探讨高原牦牛与平原黄牛端脑中脑源性神经营养因子(BDNF)表达与分布,探讨BDNF功能发挥与高原低氧适应性之间的关联。方法选取牦牛和黄牛各5只,应用Real-time PCR、Western blotting及免疫组织化学技术对BDNF在牦牛和黄牛端脑的额叶、颞叶、顶叶、枕叶、大脑白质以及海马中的含量与分布进行了定量与定性分析。结果Real-time PCR结果表明,在牦牛与黄牛端脑中,BDNF mRNA均在颞叶皮质中的表达量最高,海马次之,其后依序为顶叶皮质,枕叶皮质和额叶皮质,在大脑白质中的表达量最低。Western blotting结果表明,BDNF蛋白在牦牛颞叶皮质中含量最高,海马次之,其他组织含量由高到低依次为顶叶皮质、额叶皮质、大脑白质,枕叶皮质中含量最低。BDNF蛋白在黄牛端脑颞叶皮质中含量最高,海马次之,其余组织含量由高及低依次为顶叶皮质、枕叶皮质、额叶皮质,大脑白质中蛋白含量最低。免疫组织化学结果表明,BDNF蛋白在牦牛和黄牛端脑中的阳性表达情况基本相似,主要分布在额叶皮质、颞叶皮质、顶叶皮质、枕叶皮质的颗粒细胞和神经胶质细胞,大脑白质的神经胶质细胞以及海马的锥体细胞层和多形细胞层,在端脑皮质区的马丁诺提细胞和海马的分子细胞层中有少量分布。结论BDNF mRNA和蛋白在牦牛和黄牛端脑不同区域中均有表达,但表达量存在差异,推测与端脑不同分区的特定功能密切相关。牦牛端脑中的表达水平除枕叶皮质外,均高于黄牛,推测与其生存的高原低氧环境有关,BDNF在动物机体适应低氧环境过程中可能发挥着增强低氧耐受性和保护机体内环境稳态等重要功能。

牦牛小脑不同区域神经营养素-4及其受体的表达特征与定位研究

神经营养素-4(NT-4)及其神经营养性酪氨酸激酶受体2(NTRK2)在小脑神经元存活、生长以及功能方面发挥着重要作用。为探讨NT-4和NTRK2在牦牛高原低氧适应中的作用,本研究以高原牦牛(Bos grunniens)和平原黄牛(Bos taurus)小脑为研究对象,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白免疫印迹技术(WB)、苏木精-伊红染色(HE)和免疫组织化学(IHC)对NT-4和NTRK2在牦牛与黄牛小脑不同区域中的表达分布进行分析。qRT-PCR和WB结果表明,NT-4基因和蛋白在牦牛小脑半球皮质中表达量最高,显著高于其他组织(P<0.05);NTRK2基因和蛋白在牦牛小脑蚓部皮质中表达量最高,显著高于其他组织(P<0.05)。与黄牛相比,牦牛NT-4蛋白在小脑各区域中的表达均显著高于黄牛(P<0.05);牦牛NTRK2蛋白在蚓部髓质和小脑半球髓质中的表达量低于黄牛或无差异,其余区域均显著高于黄牛(P<0.05)。IHC结果显示,NT-4和NTRK2蛋白阳性表达特征基本一致,皮质区主要分布于分子层的篮状细胞、浦肯野细胞层以及颗粒细胞层,而髓质区则散在分布于神经胶质细胞以及神经纤维中。由上述结果可知,NT-4和NTRK2在小脑各区域的表达差异可能与其参与脑组织生理功能以及适应高原低氧环境有关。在低氧环境下,NT-4和NTRK2通过上调激活相关通路以发挥内源性神经保护作用,进而保护脑组织免受低氧损伤。本研究结果可为探究牦牛脑组织低氧适应机制提供基础。

神经生长因子及其受体在高原牦牛与平原黄牛端脑中的比较分析

为探究神经生长因子(NGF)及其高亲和力受体酪氨酸蛋白激酶A(TrkA)在高原牦牛(Bos grunniens)与平原黄牛(Bos taurus)端脑组织中表达与分布的差异,本研究采集不同海拔地区的成年牦牛与黄牛端脑不同组织(n=5),利用免疫组织化学技术(IHC)、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)以及蛋白免疫印迹技术(WB)对NGF和TrkA在牦牛与黄牛端脑各区中的定位特征及表达水平进行比较。IHC结果显示,两种因子在牦牛与黄牛端脑各区中的分布与定位特征基本一致,主要在神经元胞质、神经胶质细胞及血管内壁中表达,其蛋白免疫阳性反应强度整体表现为牦牛高于黄牛。qRT-PCR结果显示,牦牛的NGF基因表达量在额叶皮质、大脑白质及枕叶皮质中低于黄牛或无差异,在其余区域中显著高于黄牛(P<0.05);TrkA基因表达量仅在大脑白质中与黄牛无显著差异,其余区域中显著高于黄牛(P<0.05)。WB结果显示,牦牛的NGF蛋白表达量仅在大脑白质中低于黄牛,其余区域均显著高于黄牛(P<0.05);牦牛的TrkA蛋白表达量在额叶皮质、大脑白质及枕叶皮质中低于黄牛或无差异,其余区域中显著高于黄牛(P<0.05)。综上,两种因子在牦牛端脑部分组织表达上调可能与低氧刺激有关,推测二者在低氧条件下协同发挥内源性神经保护作用,以维持动物机体正常的生理活动。本研究结果为进一步探究NGF和TrkA在牦牛低氧适应性方面发挥作用提供了理论依据。

中间体2-氯-4-氟-5-硝基苯甲酸的新合成方法

探索中间体2-氯-4-氟-5-硝基苯甲酸的新合成方法。从4-氟苯胺出发,经过盐酸-双氧水体系氯化、重氮化、氰化、硝化-水解串联反应共4步得到2-氯-4-氟-5-硝基苯甲酸,纯度96.2%,总收率59.2%。新合成方法原材料易得、条件温和,具有工业化应用前景。

N-Ac-PGP通过激活TLR4诱导巨噬细胞的M1极化并提高慢性阻塞性肺疾病炎症水平

目的:探究N-乙酰化脯氨酸-甘氨酸-脯氨酸(N-acetylated proline-glycine-proline,N-Ac-PGP)通过Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)诱导巨噬细胞M1极化对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)炎症反应的影响。方法:检测COPD患者痰液中N-Ac-PGP和M1型巨噬细胞炎性细胞因子的表达。体外培养人单核细胞白血病细胞THP-1,使用佛波脂(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)诱导使之分化为M0型巨噬细胞,然后使用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和N-Ac-PGP诱导M0型巨噬细胞极化为M1型。采用RTqPCR和Western blot法分别检测巨噬细胞表面标志物CD11b、CD45、CD86和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的mRNA和蛋白表达水平。使用ELISA检测M1型巨噬细胞炎性细胞因子肿瘤坏死因子α(tu-mor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6和IL-23的水平。最后抑制TLR4通路,再次检测巨噬细胞的极化情况。结果:N-Ac-PGP与M1型巨噬细胞炎性细胞因子表达量呈显著正相关。PMA处理THP-1细胞成功诱导分化为M0型巨噬细胞。LPS和N-Ac-PGP处理后M1型巨噬细胞的标志蛋白表达显著增加(P<0.05),证明经过LPS和N-Ac-PGP处理的M0型巨噬细胞向M1型极化。同时,炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-23的表达上调(P<0.05)。进一步的实验中,TLR4抑制剂与N-Ac-PGP联用逆转了N-Ac-PGP对M0型巨噬细胞向M1型极化的促进作用,也显著降低了炎性细胞因子的表达水平(P<0.05)。结论:N-Ac-PGP通过激活TLR4诱导的巨噬细胞M1极化促进COPD炎症反应。

脑红蛋白在赛加羚羊脑组织中的表达与定位

目的赛加羚羊(Saiga antelope)是小种群栖息在荒漠和半荒漠地带的国家及世界濒危保护动物,其野生种群极为罕见。为了探讨赛加羚羊的低氧耐受性与脑红蛋白(NGB)的相关性,以1只因难产而死的雌性赛加羚羊为对象,各组织样品重复取样3次,对赛加羚羊脑组织在适应低氧过程中脑红蛋白的分布情况与表达规律进行了研究。方法利用免疫组织化学和Real-time PCR技术,检测NGB在赛加羚羊脑组织顶叶、额叶、颞叶、枕叶、下丘脑、海马、梨状叶、扣带回、纹状体和丘脑中分布特征和表达量。结果免疫组织化学染色结果表明,NGB在赛加羚羊脑组织的各部位均有阳性表达,在大脑皮质顶叶、额叶、颞叶和枕叶中发生阳性反应的细胞多为颗粒细胞和马丁诺蒂细胞;海马中的颗粒细胞层、锥体细胞层和分子细胞层均可见NGB的阳性表达,其中锥体细胞层阳性反应着色最强;梨状叶和下丘脑中的NGB阳性表达主要发生在多型细胞中;NGB在扣带回的颗粒细胞和胶质细胞中均有阳性表达,主要表达于颗粒细胞中;NGB在纹状体中的阳性表达主要定位于颗粒细胞;NGB在丘脑中的阳性表达可见于多型细胞和神经胶质细胞,且多型细胞的阳性物质着色明显。Real-time PCR结果表明,NGB在赛加羚羊脑组织不同区域中均有表达,在大脑皮质的额叶中表达量最高,顶叶表达量次之,且表达量均显著高于脑组织其余区域(P<0.05);其中,海马、下丘和丘脑中的表达量显著高于其余区域(P<0.05);梨状叶表达量显著高于颞叶、枕叶、扣带回和纹状体(P<0.05);颞叶和枕叶的表达量显著高于扣带回和纹状体(P<0.05);在扣带回和纹状体中的表达量最低(P>0.05)。结论赛加羚羊脑组织不同区域NGB的表达在长期适应低氧环境过程中存在一定的选择性差异,额叶和顶叶对低氧具有相对最高的耐受度,海马等次之,纹状体对低氧耐受度相对最弱,这可能与脑组织不同区域的特定功能有关。

银洲湖高速公路跨深湛铁路特大桥转体试转探析

在跨越既有铁路桥梁施工中,连续梁转体施工技术尤为重要,不仅能够减少对既有线路运营的影响,还能够确保施工安全与施工质量。连续梁转体施工时试转是非常重要的工序,结合银洲湖高速公路TJ03标新建深湛铁路跨线桥转体梁施工项目,对其进行转体试转测试,并对试转过程数据进行收集分析,为该工程正式转体提供了试验数据支撑。不仅有利于该工程正式转体过程中遇到的问题及时进行解决,对可能发生的风险提前规避,还为后续转体桥项目试转施工提供经验与借鉴。

虚拟现实技术在高中物理教学中的应用探究

鉴于核心素养培养的时代要求,物理教学正面临着前所未有的挑战。为应对这一挑战,必须寻求与之相适应的新型教学手段与方式。而虚拟现实技术的飞速发展,为教学改革带来了全新的机遇。经过对虚拟现实技术的深入分析,总结出其在物理教学中的渗透路径。最后以《平抛运动》教学为例,进行了实证研究,结果表明,应用虚拟现实技术可以有效推动中学物理教学的改革,进而发展学生的核心素养。这一技术的应用,不仅丰富了教学手段,也提升了教学质量,对于培养具有创新精神和实践能力的学生具有重要意义。

指向科学探究的项目式学习在高中物理教学中的应用思路及案例分析

新一轮的高中物理课程改革,要求物理老师在教学中强化学生在课堂上的主导作用,教学过程需要以学生的整体发展为核心,因此,在新时代下,中学物理教学需走出“灌输式”的传统,更多地采用项目式的教学方式。文章首先对科学探究及“项目式”教学的含义进行了说明,然后对高品质地进行项目式教学的具体流程进行描述。在此基础上,通过一个具体的实例,对高中物理教师如何通过项目式教学来提升自己的课堂教学质量进行了较为详尽的探讨,以期,对相关教育工作者提供经验借鉴。

金鱼体内吡虫啉及其代谢产物的检测方法

本研究采用高效液相色谱-质谱联用法建立了金鱼体内吡虫啉及其代谢产物的测定方法。选用Eclipse C18柱,甲醇-0.1%甲酸作为流动相进行梯度洗脱,离子源为ESI源,选择离子扫描模式(SIM)进行检测,利用外标法进行分析和定量。经质谱数据分析,吡虫啉在金鱼体内的代谢产物主要有吡虫啉脲、烯式吡虫啉、5-羟基吡虫啉和6-氯烟酸。上述方法中吡虫啉、吡虫啉脲、烯式吡虫啉、5-羟基吡虫啉、6-氯烟酸质量浓度与峰面积间的线性相关系数均大于0.99,相对标准偏差分别为3.41%、1.98%、3.79%、2.84%和2.64%。提取方法进行优化后,选用了乙酸乙酯∶水(2∶1,V/V)对金鱼组织进行提取,上述5种物质的平均添加回收率分别为96.08%、99.77%、85.25%、87.24%和100.23%。该方法的精密度和准确度都较高,线性相关性好,可用于金鱼体内吡虫啉及其代谢产物的定量分析。

血管内皮生长因子B在牦牛间脑和脑干相关组织的表达与定位

目的了解牦牛间脑和脑干不同区域血管内皮生长因子B(VEGF-B)的表达及分布特征,探讨其与低氧适应性之间的关系。方法选取5头健康牦牛,按照脑大体解剖结构进行分区并采集间脑和脑干相关组织,具体包括垂体、丘脑、下丘脑、延髓和脑桥5个部位。利用Real-time PCR、Western blotting及免疫组织化学技术对VEGF-B在牦牛间脑和脑干相关区域的表达与定位进行研究。结果牦牛间脑和脑干相关组织中VEGF-B mRNA表达水平最高的部位为垂体,显著高于其他部位(P<0.05),其余表达水平依次为下丘脑、丘脑和延髓,脑桥表达量最低;牦牛间脑和脑干相关组织VEGF-B蛋白表达水平除丘脑高于下丘脑外,其余部位表达水平与mRNA表达趋势一致。免疫组织化学结果显示,与阴性对照组相比,VEGF-B蛋白阳性物质主要分布于上述各类细胞的胞质。其中,垂体中VEGF-B阳性着色主要表达于嗜酸性细胞中;丘脑和下丘脑中VEGF-B阳性着色主要集中于多形细胞;延髓和脑桥中VEGF-B阳性反应主要集中在神经元胞体中。结论VEGF-B蛋白在牦牛间脑和脑干中均有表达,可能与其所担负的抗细胞凋亡、“生存因子”以及血管再生等功能密切相关;间脑和脑干不同区域的表达差异可能与各区域的组织特异性及其功能差异有关。

浅谈科研档案的利用与保密

本文针对科研单位科研档案利用与保密工作矛盾统一的辩证关系,从档案业务工作、人员意识、规章制度、制度落实、服务保障、队伍建设等方面进行浅要论述,确保科研档案管理工作朝着更加规范化和标准化的方向迈进,不断提升科研档案的利用与保护水平。

四川泡菜中降解亚硝酸盐乳酸菌的筛选鉴定及其应用

从四川传统泡菜中分离疑似乳酸菌170株,通过溶钙力测定获得33株产酸力较强的菌株,然后对其进行亚硝酸盐降解力初筛试验,得到5株具有较强降解亚硝酸盐能力的菌株,再采用控制pH值的方法从中筛选出1株酶降解亚硝酸盐作用明显的菌株N2,该菌株按0.1%(v/v)接种量接种于含125 mg/L NaNO2、pH 6.4和添加有2%CaCO3(w/v)的MRS培养基中,于30℃、120 r/min振荡培养72 h,对NaNO2的降解率达90.81%。菌株N2经形态学、生理生化特征及16S rDNA序列分析被鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。接种菌株N2发酵泡菜,测定发酵过程中泡菜pH值、亚硝酸盐含量,与自然发酵泡菜比较,菌株N2应用于发酵泡菜中降解亚硝酸盐的效果显著。

植物乳杆菌纯种半固态发酵泡菜工艺条件的研究

对产细菌素植物乳杆菌P158纯种半固态发酵泡菜工艺条件进行了研究。采用正交试验设计,并应用模糊数学综合评判法进行感官评价,确定泡菜产品的最佳工艺参数。结果表明,产细菌素植物乳杆菌纯种半固态发酵泡菜的最佳工艺参数为:盐4%、糖3%、接种量0.1%、发酵温度34℃。在该工艺条件下,制备的泡菜产品口味纯正,品质良好,为泡菜发酵生产探索了一条新路。

辣椒优良自交系间遗传差异的分子分析

作物自交系间遗传差异的分析与评价是杂种优势育种和杂交育种成功的基础。鲜食尖椒类(Capsicum an-nuumvar.longum)品种是我国辣椒生产的主要品种类型之一。针对我国鲜食尖椒的育种目标,以国内外10份尖椒优良自交系为材料,利用相关序列扩增多态性(SRAP)和简单序列重复(SSR)标记技术对其进行了遗传差异分析。结果显示:SRAP技术具有较高的位点和多态性检测能力,平均每次检测的位点数和多态性位点数分别为34个和10个,是SSR的10倍和5倍;辣椒自交系间基于SRAP标记的遗传距离和基于SSR标记的遗传距离之间的相关程度较低(r=0.144);基于SRAP标记和SSR标记联合数据计算的遗传距离,10个尖椒自交系被分为3大类,这种分类结果与辣椒杂种优势育种实践相一致。本研究结果表明,SRAP具有较高的遗传分析效力;基于不同分子标记遗传分析结果的差异与标记间共享位点的多少有关;10个尖椒自交系的分类结果可用于指导育种实践。

一种安全有效的合成芳基异氰酸酯的方法

将伯芳胺或其溶液滴加到双 (三氯甲基 )碳酸酯溶液中 ,经回流反应合成了相应的芳基异氰酸酯。与光气法相比 ,该法是一种安全、方便、环境友好、收率 (87.6 %～ 98.2 % )及纯度 (93.6 %～99.1% )

非硫光气法合成一些难合成的芳基异硫氰酸酯

在三乙烯二胺存在下,芳胺与二硫化碳反应先生成芳胺基二硫代甲酸盐,然后与双(三氯甲基)碳酸酯(BTC)反应,可用于制备苯环上连接了硝基、三氟甲基或者两个以上卤素等吸电子基团的难合成芳基异硫氰酸酯,收率达到71%～95%。

高密度球形Ni(OH)_2的表面修饰

为提高镍电极的导电性 ,在电极制作过程中需添加一定量的导电剂 ,通过混合添加的导电剂 ,受工艺条件的限制 ,其均匀性和利用率不是十分理想。通过化学方法 ,利用动态积分进料工艺在Ni(OH ) 2 的表面包覆上了一层钴的化合物 ,经SEM分析观察 ,包覆层分布均匀 ,与基体结合牢固、稳定。采用包覆钴化合物的Ni(OH ) 2 制备的镍电极 ,经 0 .3C及 1.0C充放电测试表明 ,其充电电压低 ,放电平台高 ,比容量大 ,大电流充放电效率及活性材料的利用率得到了明显的改进。

辣椒抗疫病的遗传与育种

辣椒疫病是在世界范围内严重危害辣椒的重要病害之一。几十年来 ,许多辣椒生产国开展了抗疫病育种和包括抗病性遗传分析在内的相关研究。笔者对近年来有关辣椒疫病病原、辣椒对疫病的抗性、抗病性的生理生化机制、抗病性的遗传、抗病基因的 QTL定位与克隆、抗病性鉴定和抗病育种方面的研究进展进行了综述 。

月季品种资源的分类与评价

以引进的13个月季品种资源为试材,采用方差分析和系统聚类法对其进行了分类与评价。结果表明:13个月季品种在花色、叶片大小等性状上存在显著差异,反映出所调查资源丰富的遗传多样性;基于8个数量性状的聚类分析,在遗传距离2.91处,将13月季个品种分为4组,其中1号品种单独为一组,5、13、6号品种聚为一组,3、7、12号品种聚为一组,2、8、9、10、11、4号品种为一组。1号月季品种蔓生、低矮,花小,花繁密,是良好的地被资源;5、6、13号株高较高,花大,枝条数目中等,是良好的切花品种资源;其余品种可用于道路美化或花坛应用。