蝙蝠蛾拟青霉Cs-4提取物对链脲佐菌素诱导2型糖尿病小鼠的降血糖作用及机制研究

研究蝙蝠蛾拟青霉Cs-4提取物(PHAE)的降血糖活性及其作用机制。建立链脲佐菌素(STZ)诱导2型糖尿病C57BL/6J小鼠模型,考察PHAE灌胃处理对糖尿病模型小鼠糖脂代谢相关指标的影响。在此基础上,利用小鼠胰岛杂交瘤细胞MIN6初步探讨其作用机制。结果表明,与模型组相比,连续20d灌胃PHAE(1000、3000 mg/kg)可显著提高糖尿病小鼠体重和血清胰岛素水平(p<0.05),并显著降低其空腹血糖、血清胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白水平(p<0.05)。此外,PHAE可刺激MIN6细胞增殖、促进分泌胰岛素并且显著上调Epac2蛋白表达。实验结果提示,蝙蝠蛾拟青霉Cs-4提取物具有降血糖和调血脂活性,其降糖活性可能与其作用于胰岛细胞并促进胰岛素分泌有关,这一研究结果为蝙蝠蛾拟青霉的深入研究开发提供一定的数据依据。

急性肺栓塞84例临床观察

肺栓塞是内源性或外源性栓子堵塞肺动脉或分支引起肺循环障碍的临床综合征,发生肺出血或坏死者称为肺梗死。急性肺栓塞的临床表现多种多样,常规检查无特异性,极易误诊漏诊,因此需提高对肺栓塞的认识和警惕性,

持续腰池引流加冬非合剂治疗蛛网膜下腔出血临床观察

目的探讨持续腰池引流加冬非合剂治疗蛛网膜下腔出血的疗效。方法选择符合诊断标准的住院观察病例210例,随机分为持续腰池引流加冬非合剂治疗组(A组),持续腰池引流治疗组(B组),常规内科治疗组(C组),每组各70例,采用1995年第四届全国脑血管病学术会议修订的神经功能缺损程度积分和病残程度改善情况评定疗效。结果A组治愈率44.29%,总有效率88.57%;B组治愈率31.43%,总有效率81.43%;C组治愈率22.86%,总有效率54.29%。A组高于B组(P<0.05),B组高于C组(P<0.05),A组高于C组(P<0.01)。3组分别比较,差异均有统计学意义。结论持续腰池引流加冬非合剂治疗组优于持续腰池引流治疗组,更优于常规内科治疗组。

支气管肺泡灌洗术联合注药在肺部感染患者中的应用价值

目的观察支气管镜下肺泡灌洗术联合注药治疗肺部感染的临床应用价值。方法 100例肺部感染患者随机分为灌洗组和对照组,每组50例。2组均接受常规治疗,灌洗组在内科常规治疗的基础上,通过支气管肺泡灌洗联合注药,对以上2组治疗效果进行评价分析。结果灌洗组有效率明显高于对照组(P<0.05)。呼吸道症状好转时间和平均住院日均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论支气管镜下肺泡灌洗术联合注药在肺部感染患者的治疗中起到协同治疗作用,可显著提高治愈率,缩短病程,值得临床推广应用。

多元化考核模式在微生物学课程中的探究

近年来,多种现代化在线教学方式日趋成熟,并在新冠疫情初期学生“停课不停学”的实施中发挥了重要作用[1]。由于不同教学模式下课程所设定的教学实施内容和方式各有不同,传统粗放的、片面的教学评价方式已不能满足智慧教育视域下的课程评价[2]。因此,构建适宜的教学评价体系对于保障混合式教学模式的顺利推进具有至关重要的作用[3]。微生物学是生命科学相关领域的核心主干课程,其教学目标不仅在于引导学生掌握微生物学的基本知识,还应该注重学生自主学习能力、灵活应用能力和创新能力[4]。为此,构建合理的混合式教学评价体系对于科学考核微生物学教学效果尤为重要。

细脚拟青霉RCEF4339原生质体制备工艺优化

采用多种化学计量学方法优化并建立细脚拟青霉RCEF4339最优原生质体制备工艺。首先,采用单因素优化策略筛选得到细脚拟青霉原生质体制备的最适酶为溶壁酶、其浓度为2 mg/mL、酶解温度32℃、酶解时间3 h、pH 7.0、渗透压稳定剂0.9 mol/L KCl。其次,应用Plackett-Burman设计试验筛选得到影响原生质体生成量的关键因素(酶解时间、pH值和酶解温度)。最后,通过Box-Behnken设计试验对3个关键因素进一步优化。建立多元二次回归模型拟合Box-Behnken设计试验结果,并采用响应面法考察各因素间的交互作用。与此同时,进一步建立神经网络模型,并通过遗传算法寻优,经过上述优化过程获得了细脚拟青霉的最适原生质体制备工艺:渗透压稳定剂为0.9 mol/L的KCl缓冲液,溶壁酶酶解浓度2 mg/mL,酶解时间为3.4 h,酶解温度为28.0℃,pH值为6.0。按照该最优条件制备细脚拟青霉原生质体,其原生质体生成量为4.398 2×10~7个/mL,而原生质体再生率为31.25%,表明采用化学计量学方法优化细脚拟青霉原生质体制备工艺是可行的。

细脚拟青霉腺苷酸琥珀酸合酶基因的克隆与表达分析

腺苷酸琥珀酸合酶(ADSS)为细脚拟青霉(Paecilomyces tenuipes)有效成分腺苷合成代谢途径的关键酶,而细脚拟青霉中腺苷酸琥珀酸合酶基因Ptadss的克隆与序列分析鲜见相关报道。本文在细脚拟青霉转录组测序结果的基础上,利用PCR技术克隆得到该菌Ptadss基因的cDNA序列,对Ptadss基因及其编码的蛋白进行生物信息学分析(相关理化性质、结构域、亲水性-疏水性、亚细胞定位、信号肽和高级结构等),并构建PtADSS与相关微生物ADSS的系统进化树。同时,采用实时荧光定量PCR技术,分析Ptadss基因在不同发酵阶段的细脚拟青霉菌丝体中的表达量,以初步明确该基因的表达量对于细脚拟青霉腺苷含量的影响。结果表明:克隆得到的Ptadss基因的ORF序列为1 670bp。该基因编码的蛋白的基本性质为:423个氨基酸残基、相对分子量为46.7 663kDa、等电点(pI)为5.59,含58个磷酸化位点,且该蛋白为定位于细胞质中的非分泌性和非跨膜的疏水性蛋白。结构预测结果表明该蛋白是由α-螺旋、β-转角、延伸链和无规则卷曲组成的复杂结构。序列分析结果提示,细脚拟青霉Ptadss基因与Cordyceps confragosa腺苷酸琥珀酸合酶基因同源性最高,可达91%。结合其他微生物的ADSS氨基酸序列构建系统树,结果表明细脚拟青霉与Cordyceps confragosa亲缘关系较近。另经对不同发酵阶段的细脚拟青霉中Ptadss的表达量及腺苷含量分析结果表明:Ptadss基因的表达水平与菌丝体中腺苷含量存在正相关性。

课程思政视域下的微生物学课程教学模式研究

微生物学课程是生命科学相关领域的一门核心专业基础课程,其教书育人成效对人才培养尤为重要。在深入挖掘大量思政元素的基础上,利用线上线下混合式教学模式开展了微生物学课程思政教学改革,较好地提高了学生的学习积极性、爱国热情、民族自豪感、职业责任感等,所取得的成功经验可为在生命科学相关专业课程中顺利开展课程思政教学改革提供参考。

多元协同模式在微生物学课程中的应用

微生物学是生命科学相关领域的一门理论性与实用性并重的学科。为了提高学生们的自主学习能力,本文利用了多元协同教学模式开展微生物学课程教学。与传统的讲授式教学模式相比较,多元协同教学模式可较好地提高学生的出勤率、课业成绩、微生物学知识的实际应用能力,激发学生的学习兴趣和主动性,也受到了学生们的普遍认可。

纤维堆囊菌发酵液中埃博霉素含量的HPLC法分析

采用反馈神经网络结合遗传算法(BPANN-GA)对高效液相色谱(HPLC)法同时测定纤维堆囊菌(Sorangium cellulosum)代谢物中埃博霉素A(Epo A)和埃博霉素B(Epo B)含量的条件进行优化,采用均匀设计(U132)方案对流动相中乙腈的体积分数、色谱柱温度和流动相的pH等3个因素进行实验设计;以色谱函数(COF)值为优化指标,运用双层反馈神经网络建立色谱优化函数(COF)值,考察因素间的预测模型,采用Levenberg-Marquardt backpropagation算法对所建立的神经网络预测模型进行训练,以逼近度(Da)为优化参数,选择预测模型的最适隐含层节点数.最优预测模型预测的COF值与实验值之间的相关系数(R)达到0.98165,采用遗传算法在实验考察范围内进行全局寻优,得到最优化的HPLC分析条件:流动相中乙腈体积分数为29.2%,色谱柱温度为34℃,流动相pH为4.23.在此最优条件下对纤维堆囊菌代谢产物进行HPLC分析,结果表明,该方法对两种埃博霉素色谱峰均具有较好的分离度.

埃坡霉素高产菌株的选育

采用紫外-亚硝酸盐复合诱变法对纤维堆囊菌(Sorangium cellulosum)ATCC15384进行诱变,结合红霉素抗性筛选,筛得一株遗传稳定的埃坡霉素高产菌株纤维堆囊菌UN16H127,埃坡霉素A(EpoA)和埃坡霉素B(EpoB)的产量为289.9和25.14μg/L,总产量(EpoA+EpoB,315.04μg/L)是出发菌株的23.8倍。

转角质细胞生长因子-2基因红花研究

【目的】构建转角质细胞生长因子-2基因(KGF2)红花,为KGF2药用蛋白的生产奠定了基础。【方法】利用融合PCR方法扩增人源KGF2基因与拟南芥油体蛋白Oleosin基因的融合基因,将融合基因克隆至表达载体pOP上,构建了重组质粒pOP-OL-KGF2,采用冻融法将质粒pOP-OL-KGF2转入根癌农杆菌EHA105中,通过农杆菌介导法转化红花,采用PCR检测筛选转基因红花阳性植株,SDS-PAGE检测Oleosin-KGF2融合蛋白的表达情况。【结果】成功构建了植物特异表达载体pOP-OL-KGF2,转染后共获得了12株转基因红花植株,其中2株鉴定为阳性,阳性率为17%,对转化植株进行DNA水平检测和蛋白水平检测,可知KGF2基因已经整合进红花基因组中,且有所表达。【结论】成功获得转KGF2基因的红花株系。

“世界咖啡”式研讨教学在“微生物学”课堂的应用

“世界咖啡”模式研讨是一种国外常用的集体讨论方式,可以引发共识或共同思考,进而解决问题。本研究将“世界咖啡”模式研讨引入“微生物学”的课堂教学中,弥补了传统课堂教学活动的不足,学生在学习基本知识的同时,也锻炼了思辨能力、交际能力和组织能力,为高校其他课程的教学改革提供新思路。

红花花瓣总RNA提取方法的比较研究

红花花瓣富含多糖、多酚和花色素苷等次生代谢产物,严重影响花瓣总RNA的提取。为探索适合红花花瓣总RNA的提取方法,以4种红花不同时期的花瓣为材料,通过对4种RNA提取方法,即RNA提取试剂盒、RNAiso Plus试剂法、改良的CTAB法和SDS法进行比较研究。结果表明:RNAiso Plus试剂法效果最好,提取的总RNA完整性好,纯度高、浓度高。通过RT-PCR验证,所提取的RNA达到基因克隆和实时定量PCR等分子生物学实验要求。

细胞与免疫学实验教学改革探析

细胞与免疫学实验是生物学实验教学体系的重要组成部分,随着各高校人才培养目标对大学生动手能力和创新思维要求的进一步提高,高校生物学相关专业的细胞与免疫学实验的内容和教学方式必然要发生相应的变化,探讨新形势下细胞与免疫学实验教学模式改革对于提升生物学整体实验教学质量具有非常重要的意义。从改革实验教学内容、改进实验教学手段以及强化实验考核3个方面,探讨如何提高细胞与免疫学实验教学效果,以期为培养基础素质好、综合能力强的农业生物学高水平人才提供科学保证。

下颌前伸式矫治器治疗阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征研究现状及进展

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea and hypopnea syndrome,OSAHS)的临床表现为夜间频发的上气道阻塞和呼吸障碍,伴发日间嗜睡、疲倦等。其病因主要是上气道形态的变化和神经肌肉等因素。下颌前伸式矫治器(mandibular advacecment devices,MADs)是治疗轻、中度OSAHS的有效方法,其主要机制改变上气道形态,进而引起上气道流体力学的改变。笔者对下颌前伸式矫治器治疗阻塞性睡眠呼吸暂停低道气综合征的疗效、适应证、副作用、上气道形态变化、矫治器的下颌定位、上气道液体力学改变的研究进行综述。

持续腰池引流加亚冬眠疗法治疗蛛网膜下腔出血的临床疗效观察

目的:探讨持续腰池引流加亚冬眠疗法治疗蛛网膜下腔出血的疗效。方法:选择符合诊断标准的住院观察病例90例,随机分为持续腰池引流加亚冬眠疗法治疗组(A组),持续腰池引流治疗组(B组),常规内科治疗组(C组),每组各30例,采用1995年全国第四届脑血管病学术会议修订的神经功能缺损程度积分和病残程度改善情况评定疗效。结果:A组治愈率40·00%,总有效率90·00%;B组治愈率26·67%,总有效率80·00%;C组治愈率13·33%,总有效率53·33%。A组优于B组(P<0·05),B组优于C组(P<0·05),A组优于C组(P<0·01)。三组分别比较,均有显著差异。结论:持续腰池引流加亚冬眠疗法治疗组优于持续腰池引流治疗组,更优于常规内科治疗组。

生物学研究生在新农科背景下的培养模式探索

结合吉林农业大学实际情况,阐述了生物学研究生培养模式现状,分析了生物学研究生培养存在的问题,并提出了具体的改革举措,以期为我国生物学研究生培养模式改革提供参考与建议。

论劳务派遣制度在人力资源管理中所起到的作用

随着知识经济和人才流动的快速发展,越来越多的企业采用劳务派遣制雇佣员工,本文就劳务派遣这种特殊的人力资源外包形式的内容、特点及不足之处做了详细的分析,并提出了一些解决方法。

红花转录物组中筛选的Unigene100791基因克隆、生物信息学分析及功能预测

目的:克隆红花Unigene100791基因,研究其表达情况;并对该基因的特性进行生物信息学分析,为后续红花代谢调控及提高红花油产量,使其满足食品工业市场需求奠定理论基础。方法:从红花转录物组数据库中筛选得到转录因子Dof相关基因Unigene100791的中间片段;利用RNAiso plus试剂法提取红花种子总RNA,利用RT-PCR方法反转录得到红花种子c DNA;采用3'Race方法从红花种子中克隆Unigene100791基因的全长序列;通过生物信息学方法对其全长基因进行分析,构建该基因与相关物种的系统进化树,研究其蛋白序列的同源性及其理化性质与结构特征,预测其生物学功能。结果:成功克隆了红花Unigene100791基因,其基因全长1274 bp;开放阅读框981 bp,编码326个氨基酸,理论分子质量约为35026.5 u,理论等电点9.5,带正电残基27个,带负电残基18个,序列含有典型的加尾信号poly(A);红花Unigene100791基因编码产物与烟草Dof2.4-1亲缘关系较近,属于Dof超家族,此蛋白存在信号肽,不存在跨膜结构。结论:成功克隆了红花Unigene100791基因,并对其编码的蛋白质进行了生物信息学分析。