一种具有纤溶活性的枯草杆菌蛋白激酶的初步研究

从纳豆和豆豉中分离、筛选出２株能产生明显纤溶活性的枯草杆菌蛋白激酶（简称枯激酶）的枯草杆菌菌株（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ）。并用两种柱层析（ＳｅｗｐｈａｄｅｘＧ－１００和ｂｅｐｈａｅｒｙｌＳ－２００）纯化出纯的酶。测定出其分子量３０２００Ｄ，ＰＩ为８．６±０．３，同时进行了家兔的动物实验。结果表明对家兔实验性血栓有显著的溶解作用。在一定范围内，表明有很好的量－效关系。因此枯激酶的深入研究，有可能开发成一种新的溶栓药物。

赤爱胜蚯蚓(Eisenia Foetida Sarigny)纤溶酶的研究Ⅱ药理学作用

对蚯蚓纤溶酶进行了哈白兔体内、体外溶栓、抗凝试验,分别以蛇毒抗栓酶和尿激酶不同剂量组作对照试验,均有显著的溶解血栓功能.另外,蚯蚓纤溶酶溶解天然血块,对纤维蛋白原含量及凝血时间影响的药理学试验,结果证明蚯蚓纤溶酶具有溶栓与抗凝作用.

赤爱胜蚯蚓(Eisenib Foetide Sorigng)纤溶酶的研究 1.提取纯化和生物化学性质

采用35％和65％的饱和硫酸铵分级沉淀法,获得蚯蚓纤溶酶活性蛋白,并对其纤溶酶的分子量,纤溶酶对其底物专一性,温度对纤溶酶的影响,纤溶酶最适pH值和pH值稳定性,纤溶酶的等电点,抑制剂对蚓蚯纤溶酶的影响几方面的测定,从而确定了蚯蚓纤溶酶的生物化学性质。

含人抗体恒定区基因的酵母表达质粒的构建

本文主要报告了用以表达人-鼠嵌合抗体基因的酵母表达载体的构建、筛选与鉴定的研究结果.作者利用高度表达的酵母质粒YEP_(51),与含人抗体恒定区基因的pSV_2gptHuG_4两个质粒为材料,构建成可以供表达任何小鼠单克隆抗体的可变区基因,以构成嵌合的人-鼠抗体基因,用酶切回收插入DNA片段、原位和斑点杂交法对重组质粒予以鉴定和筛选,获得了pYEP-H重组的酵母表达载体.

美洲鲽抗冻蛋白基因的克隆及在E.coli中的表达

本文报告了美洲鲽抗冻蛋白基因的克隆及在E.coli中表达的研究,以质粒P^(CT5)作为抗冻蛋白基因的供体,p^(ORF-2)作为表达载体。用HpaⅡ酶从质粒p^(CT5)上切下抗冻蛋白基因片段,再经Bal 31酶,绿豆核酸酶处理,连接上BglⅡ接头,然后插入到p^(ORF-2)的BglⅡ位点上,借助于p^(ORF-2)上的β-半乳糖苷酶基因的活性,使含正确插入抗冻蛋白基因的克隆呈现出蓝色菌落,共获得4000多个转化子,其中有201个蓝色克隆。对于50个蓝色克隆提取质粒DNA,电泳后发现均大于p^(ORF-2)。用BglⅡ消化后,可以发现有300—1500bpDNA片段,同时确定了抗冻蛋白基因在p^(ORF-2)中的插入方向,对于正确插入的克隆作出部分限制性内切酶图谱,测定出插入的抗冻蛋白基因片段的DNA序列,然后将重组质粒从E.coli MH1000菌株转化到E.coliTK1046中,研究分析表达产物,SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳结果证明插入的抗冻蛋白的基因已表达,有明显的融合蛋白带,分子量大于β-半乳糖苷酶、是由大肠杆菌的外膜蛋白F,抗冻蛋白和β-半乳糖苷酶组成。融合蛋白含量占总蛋白的20％左右。

美洲拟鲽抗冻蛋白基因在E.coli中表达的研究

本文阐述了美洲拟鲽抗冻蛋白基因在E.coli中表达的研究。用Hpa Ⅱ酶切pCT5质粒,分离出抗冻蛋白基因片段,再经Bal引酶、绿豆核酸酶处理,并连接上Bgl Ⅱ接头,插入到pORF-2表达质粒的BglⅡ位点上,筛选出正确插入方向的转化子,称pORF-AF。并对pORF-AF质粒作出部分限制性酶切图谱,测定出插入基因的DNA序列,同时用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析检测插入基因,在E.coli TK1046中的表达产物,发现在电泳图谱上有明显的融合蛋白带,分子量大于标准蛋白β-半乳糖苷酶是由大肠杆菌外膜蛋白F、抗冻蛋白和β-半乳糖苷酶组成。融合蛋白含量占总的菌体提取蛋白20％左右。

人鼠嵌合抗体重链基因转染小鼠骨髓瘤细胞的初步研究

本文介绍了通过人鼠嵌合抗体重链基因转染小鼠骨髓瘤J558L的研究,较详尽地阐述了用原生质体融合法将重组的人鼠嵌合抗体重链基因转染到S558L骨髓瘤细胞中,并用ELISA法检测转染子的过程和方法。同时简要地说明了影响转染率的一些因素。

基于TMS320C5509的数字内插波束形成器的实现研究

针对数字波束形成中高精度定向需要较高采样频率的要求,研究了1种数字内插波束形成技术,并在TMS320C5509上予以实现。结合C55x系列DSP结构的特点,对比分析了C54x系列和C55x系列循环缓冲区实现的异同,给出了C55x上循环缓冲区实现的代码实例及优化说明。最后在软件仿真器上进行了仿真,证实了程序的正确性和数字内插技术的有效性。

基于C167的点阵液晶显示的设计与实现

介绍了微控制器C167CR和液晶显示控制器ST7920的特点,给出了基于CPLD(Complex Pro-grammable Logic Device)实现并口直接访问的硬件接口方案。在KeilμVision3集成开发环境下采用C语言编写了ST7920的驱动控制程序和液晶显示程序,成功地实现了中文、字符和图形的显示,具有较强的可移植性。

纳豆芽孢杆菌(Bacillus subtilis natto)固体发酵生产γ-PGA

γ 多聚谷氨酸是一种生物可降解的高分子材料 ,可应用于许多领域 ,因此受到普遍的重视。目前γ PGA液体发酵水平为 5 0～ 60g L。报告了用大豆固体发酵生产γ PGA的方法 ,其中包括 :菌种的筛选 ,发酵和提纯方法 ,高压液相法测定含量和SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定。结果 :BacillussubtilisnattoHW_1发酵活性为 1 1 5g kg大豆。γ_PGA的纯度为 95 %以上 ,分子质量为31 6kDa。另外可在大豆固体发酵生产纳豆激酶的同时生产回收γ PGA ,既可以降低产品成本 ,又可以开发应用γ PGA。

移动P2P分布式信任模型设计

移动P2P网络的开放性和松耦合特性使得节点恶意攻击行为普遍存在,而现有基于声誉的信任模型大都基于"信誉值高的节点评价推荐越可信"的假设,无法识别恶意节点动态策略性攻击行为。针对这一问题,将社会网络相关理论引入信任系统,提出一种基于社会距离的信任模型(SD2Trust)。该模型区分了服务可信度和推荐评价可信度,用多维结构同型性描述向量刻画节点网络地位和行为特征,根据社会距离确定推荐节点集和推荐信誉计算权重,综合信任考虑了诋毁风险。理论分析和实验结果表明,该模型能有效对抗恶意节点动态策略攻击行为。

金针菇功能性蛋白的研究进展

主要综述了近年关于金针菇功能性蛋白,即核糖体失活蛋白、真菌免疫调节蛋白、金针菇毒素(一种成孔溶细胞素)的分离纯化及其性质,它们的生物学作用与作用机制和它们可能的应用及展望。

γ-多聚谷氨酸的生物合成及其相关基因

综述了γ 多聚谷氨酸 (γ PGA)的研究进展。γ PGA是一种高分子可降解生物材料 ,目前 ,高产菌株的产量为 5 4 45～ 5 8 0 8g L ,多用E 培养基 ,发酵温度为 37℃ ,影响产率的因素为碳源、NaCl浓度、通气量和金属离子。用超滤和乙醇沉淀的方法提取分离纯化γ PGA。讨论了γ PGA生物合成机制及其相关基因的克隆、定位和功能。最后简述了γ

金针菇免疫调节蛋白的研发与应用

综述了近年关于金针菇功能性蛋白之一即金针菇免疫调节蛋白的性质、分离纯化及其抗癌、抗过敏、抗增殖、刺激免疫细胞产生多种细胞因子和免疫调节等功能的研究进展,并介绍了金针菇免疫调节蛋白的作用机制、开发应用领域以及前景展望。

刚性圆柱体上圆阵波束形成性能分析

以环绕在刚性圆柱体上的均匀圆阵为阵列模型,分析了刚性圆柱体对圆阵响应的影响,在声场分解所得到的相位模式空间,推导了相位模式波束形成阵列和延迟求和波束形成阵列的白噪声增益和指向性指数的定量表达式,分析了它们在不同频率段的变化规律。在存在和不存在刚性圆柱体两种情况下,对两种阵列性能进行了对比分析。研究了圆阵与圆柱体之间存在间隙时对阵列接收信号及阵列性能的影响。仿真结果表明,在两种情况下相位模式波束形成处理都具有频率不变的指向性,但在低频段牺牲了阵列的鲁棒性;延迟求和波束形成处理在整个频率段具有较好的鲁棒性,但随频率的降低其波束指向性下降,直至变成各向同性阵列。存在刚性圆柱体时,两种阵列鲁棒性均有了一定的提高,前者的指向性不变,而后者的指向性得到了提高。圆阵与圆柱体之间的间隙会降低阵列在高频段的鲁棒性。

一种具有纤溶活性的枯草杆菌蛋白激酶的研究──Ⅰ高产酶菌株的筛选与鉴定

本文主要阐述了一种具有纤溶活性的枯草杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ）蛋白激酶产生菌株的筛选与鉴定的研究结果。作者从初筛的１２株Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｌｉｌｉｓ菌中，通过对固体发酵和液体发酵所产生的枯草杆菌蛋白激酶，用琼脂糖－纤维蛋白平板法测其活性，经比较不同菌株的活性，筛选出两株高产酶菌株：Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓＨＷ—１２和Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓＨＷ—３。同时对菌体和菌落形态特点、生理生化反应进行了鉴定，认为Ｂ．ＳｕｂｔｉｌｉｓＨＷ－１２菌株可用来做为发酵生产该酶的菌种。

鲤鱼生长激素基因的PCR扩增、克隆及其序列比较

从鲤鱼(Cyprinus carpio)脑垂体中分离其总RNA,经反转录成为第一条链cDNA。以第一条链cDNA为模板,以合成的两段29个寡聚核苷酸为引物,再经过PCR扩增,合成了鲤鱼的生长激素基因,并把其克隆到大肠杆菌表达载体(p^(Blue-scriptⅡ KS+/-))上。序列分析和限制酶切图谱表明所克隆的鲤鱼生长激素基因的开放读框含有630bp,编码210个氨基酸,其中含有22个氨基酸的信号肽和188个氨基酸的成熟GH序列。我们所克隆的鲤鱼GH基因与Koren发表的鲤鱼GHcDNA的序列在编码区完全一致,但是与Chao发表的鲤鱼GHcDNA比较,在编码区核酸序列和氨基酸序列的同源性分别为95.6％和96.7％。

精子作载体的转基因鱼研究

本文报道了以精子为载体将美洲拟蝶抗冻蛋白基因导入罗非鱼卵，构建转基因鱼的方法，此法简单易行。斑点杂文和ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｌｏｔ杂交结果表明，外源基因的整合率为１８．１％，与其它方法构建转基因鱼的外源基因整合率相近。

阿拉伯木聚糖(Arabinoxylan)的开发利用

详细介绍了从稻糠中提取的阿拉伯木聚糖的组成、生化性质、药学作用及其在临床治疗和保健中的应用。

金针菇免疫调节蛋白基因表达及活性初步研究

目的对金针菇免疫调节蛋白(fungal immunomodulatory protein fromflammulina velutipes,FIP-fve)基因进行原核表达及活性测定。方法通过RT-PCR得到FIP-fve,构建pUC19-FIP-fve,和表达质粒pET30-FIP-fve,转化大肠杆菌DE3(BL21),经IPTG诱导,表达产物纯化后进行活性试验。结果该基因在DE3(BL21)中获得了大量表达。表达产物能促进巨噬细胞吞噬功能(P<0.01)、明显增加小鼠血清中IFN-γ的含量(P<0.01)及抑制小鼠移植性S180肉瘤的生长,其抑瘤率分别为31.84%(P<0.05)和36.04%(P<0.05)。结论表达蛋白具有活性,这对于将其开发为免疫调节、抗过敏、抗肿瘤新药具有重要意义。