牛皮革PCR鉴别方法研究

本研究比较了不同的DNA提取方法,最终运用苯酚-氯仿抽提法成功地从牛皮革样品中提取获得质量较高的DNA,建立了牛皮革DNA的提取方法。该方法充分考虑了皮革材料的特殊性,利用裂解缓冲液释放皮革中的核酸,采用高浓度盐溶液除去溶液中的蛋白质,用苯酚、氯仿混合溶液进一步除去蛋白,最终获得纯化的皮革DNA。根据牛线粒体基因序列设计特异性的扩增引物,成功地从皮革样品DNA中扩增出271 bp的牛内源基因片段。本方法通过分析皮革样品中的遗传学信息来鉴定皮革种类,特异性强、灵敏度高,可广泛应用于皮革的鉴别与分类中。

高效液相色谱法测定洗发护发类化妆品中米诺地尔

采用反相高效液相色谱法测定洗发护发类化妆品中米诺地尔的含量。试样经质量分数为1%三氯乙酸溶液提取,MCX固相萃取小柱净化,在C18柱上以质量浓度为2 g/L的己烷磺酸钠溶液（pH 3.0）和乙腈为流动相进行梯度洗脱,紫外检测波长为230 nm。该方法在质量浓度为0.2-20μg/mL范围内线性关系良好,加标回收率为83.1%-97.7%,相对标准偏差为2.9%-6.6%,检出限为1 mg/kg。该方法适用于洗发护发类化妆品中米诺地尔的测定。

叠氮丙啶-实时荧光聚合酶链式反应-高通量测序技术鉴定冷链食品中多种病原菌

目的 应用叠氮丙啶-实时荧光聚合酶链式反应-高通量测序技术鉴定冷链食品中多种病原菌,构建病原菌分子进化树。方法 以冷链食品中的沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌、副溶血性弧菌、单核细胞增生李斯特氏菌5种病原菌作为研究对象,应用叠氮丙啶-实时荧光聚合酶链式反应技术作为冷链食品中病原菌检测初筛手段,应用微生物培养法以及生化鉴定仪器法进行方法比对与结果验证,运用高通量测序以及分子进化树构建作为冷链食品中所分离病原菌的种属地位确证方法。结果 叠氮丙啶-实时荧光聚合酶链式反应技术成功扩增了冷链食品中生活状态病原菌的特征性核酸片段,排除了死亡细菌以及阴性对照菌的干扰,病原菌检出限可达到1×10^(3)CFU/mL,一次反应可检测42份试样,可以在18 h内完成检测工作。在冷链食品中病原菌抽样检测调查中,随机采集的751份冷链食品,共检出62株病原菌,病原菌总体检出率为8.3%(62/751)。通过后续的16S rRNA测序以及葡萄球菌属、弧菌属以及李斯特菌属分子进化树的构建,成功溯源了金黄色葡萄球菌的污染来源并完成病原菌种属定位。结论 本方法特异性好、灵敏度高、检测通量高,为冷链食品及相关食品中病原菌的精确检测与溯源分析提供新的思路与方法。

冷链食品行业发展现状及建议

文章阐述了我国冷链食品产业概况,分析了冷链食品质量安全主要问题,提出了完善冷链食品法律法规和标准体系、加大行政监管和服务力度、建设现代化的冷链物流体系和构建冷链食品信息预警系统四项对策措施,对加强冷链食品物流体系建设,健全相关法规标准,强化冷链食品监管,提高冷链食品质量安全具有重要意义。

高效液相色谱法测定化妆品中乙内酰脲

建立了高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-PDA)测定化妆品中乙内酰脲的方法。取1.0g样品,加入10mL乙腈,均质、离心、上清液浓缩、水溶解后,用C18固相萃取小柱净化,用水定容。经C18液相色谱柱分离,以甲醇和水为流动相,梯度洗脱,检测波长为210nm。在1～20mg/L范围内,色谱峰面积与乙内酰脲的质量浓度线性关系良好,相关系数为0.999 8,平均回收率为85.6%～95.5%,相对标准偏差4.1%～5.2%,方法检出限为0.08mg/kg。该法被成功用于水剂化妆品和霜类化妆品中乙内酰脲的测定。

蜂蜜中转基因成分启动子和终止子的多重实时荧光PCR法检测

为能高效率定位蜂蜜中的转基因可疑阳性样品,以10种转基因启动子和终止子(花椰菜花叶病毒35S启动子(pCaMV35S)、农杆菌的胭脂碱合成酶基因终止子(tNOS)、玄参花叶病毒的35S启动子(p FMV35S)、农杆菌的胭脂碱合成酶基因启动子(pNOS)、玉米泛素基因的启动子(pUbi)、烟草的花蕊特异性TA29的基因发育调节启动子(pTA29)、豌豆二磷酸核酮糖羧化酶基因的终止子(tE9)、章鱼碱合成酶终止子(t OCS)、谷氨酰胺转移酶7终止子(tg7)、花椰菜花叶病毒终止子(tCaMV35S))为研究靶标,进行10种启动子和终止子的引物和探针组合筛选、反应条件优化、灵敏度测定、质控品测试比对等实验,建立3组多重实时荧光PCR反应体系,并将其应用于市售蜂蜜的检测。结果表明:建立的3组多重实时荧光PCR反应体系能精准检出目的基因,其灵敏度分别为0.01、0.04、0.04 ng/μL;14种转基因质控品的测试显示多重实时荧光PCR和单重实时荧光PCR的检测结果一致;40份市售蜂蜜的筛查中,有两份蜂蜜检出pCaMV35S和tNOS,其余未检出,该方法大大提高了检测效率。该方法为蜂蜜中转基因成分的检测提供了快筛快检技术,同时也适用其它产品转基因成分的检测。

粉煤灰气相-水解法制备纳米白炭黑

以粉煤灰为主要原料,采用气相-水解法制备纳米白炭黑,并对所得产品进行微观结构分析。先将粉煤灰按常规沉淀法制得白炭黑,再将白炭黑与氟化钙和浓硫酸混合加热生成四氟化硅气体,将该气体通入由氨水和分散剂组成的溶液中进行水解而制得纳米白炭黑。TEM和FTIR分析表明,采用分散剂SDS或CTAB制备的纳米白炭黑粒径较小,球形规整,未出现团聚现象,且具有较高的纯度。

中国乌骨鸡微卫星位点LEI0258多态性研究

应用微卫星位点LEI0258研究我国乌骨鸡的遗传多态性与分子进化。以8种乌骨鸡和4种黑羽鸡为研究材料,通过基因分型与测序,构建中介网络图,分析乌骨鸡的遗传多样性并探讨其起源。240份样品共检测到67个等位基因,片段长度为181～507 bp。乌骨鸡保持着与黑羽鸡相当的遗传变异水平,观察杂合度、期望杂合度和多态信息含量分别为0.813、0.962、0.957。经测序鉴定出38个等位基因,部分等位基因为个别乌骨鸡品种所特有。10个等位基因与25种已知MHC血清型相匹配。基于侧翼区变异信息的中介网络图将38个等位基因分为6条进化枝,未发现乌骨鸡特有的进化枝。研究结果为乌骨鸡的保种选育与开发利用及起源进化研究提供了理论基础。

高效液相色谱-串联质谱法测定鸡肉中利巴韦林的含量

利巴韦林为合成的核苷类广谱抗病毒药,可用于病毒性感冒、肺炎、肝炎、出血热等病症的治疗.2012年12月我国爆发“速生鸡”事件,曝光鸡在饲养过程中被违规喂食利巴韦林、金刚烷胺等抗病毒药物.违禁抗病毒药物的滥用不仅造成鸡肉风味和品质的下降,更会导致细菌耐药性的发生和药物残留,并通过食物链影响人类健康和破坏生态平衡,

超声诊断孤立性肠系膜上动脉夹层动脉瘤合并胡桃夹综合征1例

孤立性肠系膜上动脉夹层动脉瘤临床极为少见，而同时合并胡桃夹综合征则更罕见报道。本文报道孤立性肠系膜上动脉夹层动脉瘤合并胡桃夹综合征的彩色多普勒超声表现，与增强计算机断层扫描成像血管造影（computel-izedtomographyangiography，CTA）对照，并系统复习相关文献，总结诊断要点。

广西地方鸡微卫星位点LEI0258多态性研究

通过微卫星位点LEI0258基因分型和基因测序,分析6个广西地方鸡品种的遗传变异并构建中介网络图,研究广西地方鸡的遗传多样性与分子进化。结果表明,120份样品经基因分型,检测到38个等位基因,长度为181~507 bp,等位基因205出现的频率最高(0.125),其次是275(0.113)、310(0.100)和251(0.067)。广西地方鸡保持着较高的遗传多样性水平,观察杂合度、期望杂合度和多态信息含量分别为0.800、0.943和0.936。经测序鉴定出39个等位基因,其中9个为首次发现。11个等位基因与已知的21种血清型相对应。基于侧翼序列变异信息的中介网络图显示,39个等位基因分为3个进化枝,红原鸡的部分基因存在于这些进化枝中,提示红原鸡可能是广西地方鸡的主要祖先。

扫描电镜结合X射线能谱仪在皮革鉴定中的应用

利用扫描电镜和X射线能谱仪对牛皮革、羊皮革、猪皮革肉面纤维束和人造革底基纤维进行了形态结构观察和元素分析。结果表明:皮革肉面纤维束与人造革底基纤维在形态结构与元素组成等方面存在着显著性差异,可以用于皮革的鉴定中。

食品接触材料中3种致病菌的多重荧光PCR检测

建立并优化食品接触材料中金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和副溶血性弧菌3种致病菌的多重实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法,评价此方法的特异性和灵敏度,并模拟阳性样品进行检测。结果显示,该方法特异性良好,检测灵敏度均能达到10~3 CFU/mL,为食品接触材料的微生物检测提供技术保障。

皮革肉面纤维束与人造革底基纤维的扫描电镜观察和X射线能谱分析

对多种天然皮革肉面纤维束及人造革底基纤维的形态结构进行了扫描电镜(SEM)观察,并且利用X射线能谱仪(EDS)对上述多种纤维进行了元素分析。结果表明,皮革肉面纤维束与人造革底基纤维在元素组成与形态结构等方面存在着显著性差异。本研究方法与理论可为皮革的鉴别与分类等提供参考依据。

彩色多普勒超声在肝脏占位性病变中的诊断价值

目的探讨彩色多普勒超声在肝脏占位性病变诊断中的临床价值。方法对62例经CT或者病理检查证实的肝脏占位性病变患者(其中原发性肝癌的18例,转移性肝癌14例,肝血管瘤22例,肝硬化增生结节8例)采用彩色多普勒超声进行检查。结果原发性和转移性肝癌患者血流灌注指数(DPI)、阻力比(RR)值均显著高于肝血管瘤以及肝硬化增生结节患者(P<0.05),肝硬化增生结节患者门静脉充血指数(PCI)、肝总血流量(TLBF)值均显著高于其他肝脏占位性病变患者(P<0.05)。结论彩色多普勒超声可提供多个血流参数指标,显著提高对肝脏占位性病变的诊断和鉴别水平。

餐饮食品中6病原菌叠氮丙啶-定量聚合酶链反应检测方法开发与检验数据分析

目的建立叠氮丙啶-定量聚合酶链反应法(propidiummonoazide-quantitativepolymerasechain reaction,PMA-qPCR)快速检测餐饮食品中6病原菌的方法。方法开发6种病原菌前增菌通用型培养基,采用热裂解方法提取样品DNA,采用PMA技术鉴别活菌与死菌,运用分子生物学技术检测样品中目标菌的特异性基因片段,建立病原菌的PMA-qPCR检测方法,开展餐饮食品样品病原菌筛查检测。结果本方法特异性良好,灵敏度较高, 1533份餐饮食品样品中检出病原菌71株,检出率为4.63%(71/1533)。结论本研究运用PMA-qPCR开展病原菌活菌检测技术研究,所建立研究方法可广泛应用于餐饮食品及相关食品中病原菌的快速筛查检测,具有较好的应用前景和现实意义。

如何实施精准扶贫

长期以来．扶贫开发工作存在着贫困对象不准、情况不明、扶贫资金指向不准的问题，“撒胡椒面”、“扶富不扶贫”等现象也不同程度存在．造成扶贫资金流失，扶贫开发效果大打折扣。因此，“精准扶贫”的提出对新时期扶贫开发工作具有十分重要的意义。

餐饮及相关食品中病原菌活菌多重实时荧光PCR检测方法的研究与开发

为了应对餐饮等食品中病原菌快速检测的需求、研究建立病原菌筛查方法,选取痢疾志贺氏菌(Shigella dysenteriae)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)、产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)、沙门氏菌(Salmonella)、蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)、大肠埃希氏菌O157∶H7(Escherichia coli O157∶H7)、单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)等9种病原菌开展多重实时荧光PCR方法研究工作。为了节约预增菌时间与提升检测效率,研发了适用于多种病原菌预增菌的通用型培养基,采取高温裂解法提取菌液核酸,利用PMA染料灭活死亡细菌DNA,筛选出活菌DNA,采用多重实时荧光PCR技术检测目标菌,该方法可在16 h内完成检测,对于目标病原菌的检测低限可达103 CFU·mL^-1。

彩超诊断妇科疾病300例分析

目的:探讨彩色多普勒超声检查对妇科急症的诊断价值。方法:对收治的300例经病理证实的妇科急症患者的超声声像图进行分析和总结。结果:300例妇科急症中与超声诊断结果相符的283例,符合率为94.3%;其中诊断宫外孕符合率为95.0%(152/160);卵巢黄体破裂符合率为93.2%(55/59);卵巢囊肿蒂扭转符合率为93.3%(42/45);急性盆腔炎符合率为94.2%(34/36)。结论:彩色多普勒超声诊断妇科急症准确率高,且操作简便迅速、无痛苦,可作为妇科急症诊断的首选方法。

餐饮食品中蜡样芽孢杆菌的实时荧光PCR检测方法研究

文章研究开发了一种可在18 h内完成餐饮食品中蜡样芽孢杆菌检验的方法。本研究采用胰酪胨大豆多黏菌素肉汤培养基培养蜡样芽孢杆菌,通过热裂解法提取菌液DNA,运用实时荧光PCR法检测样液中的蜡样芽孢杆菌基因成分,建立了完整系统的餐饮食品中蜡样芽孢杆菌的检测方法,方法的检出限达0.01 ng/μL的蜡样芽孢杆菌DNA,整个检测过程在18 h内完成。文章将方法应用于市场售卖餐饮食品中蜡样芽孢杆菌的筛查检测,结果表明,在抽样检验的315份餐饮食品中有25份样品(25/315,检出率为7.93%)中检测出蜡样芽孢杆菌特异性基因成分。该方法具有检测时间短、效率高,一次PCR反应可同时检测90份样本,方法适合于餐饮食品等食品中蜡样芽孢杆菌的高通量筛查检测。