玉屏风多糖脂质体对雏鸡肠黏膜及淋巴组织形态结构的影响

为探讨玉屏风多糖脂质体对雏鸡肠黏膜相关淋巴组织形态结构的影响,将150只13日龄雏鸡随机分成5组,玉屏风多糖脂质体低、中、高剂量组(100、200、400 mg/kg)、玉屏风多糖组(200 mg/kg)和空白对照,在试验1 d^7 d和14 d^21 d喂食添加药物的日粮,空白对照组喂食普通日粮。每周称重,在试验第30天时,各组选取12只雏鸡处死并采集十二指肠、空肠、回肠及盲肠扁桃体,中性福尔马林固定,常规石蜡切片,HE染色,测量与计算小肠各段绒毛高度、绒毛高度与隐窝深度比值、小肠上皮与固有层淋巴细胞数量和盲肠扁桃体淋巴滤泡面积。结果显示,各组雏鸡体重无明显差异(P>0.05);与空白对照组相比,玉屏风多糖和玉屏风多糖脂质体各剂量组均显著或极显著增加小肠绒毛高度、绒毛高度与隐窝深度的比值、小肠上皮内和固有层淋巴细胞数量以及促进盲肠扁桃体淋巴细胞的成熟和增殖(P<0.05或P<0.01),且高剂量玉屏风多糖脂质体的效果更佳。说明玉屏风多糖脂质体能有效促进雏鸡肠黏膜相关淋巴组织的生长发育及免疫调节。

急性非洲猪瘟的实验病理学研究

旨在通过对非洲猪瘟临床病理学和组织病理学的研究,探讨病理学变化与疾病发生发展的内在关系及其病理机制。选用体重20 kg左右的长白猪13头,肌内注射非洲猪瘟病毒毒株Pig/HLJ/18,剂量10^(2)HAD_(50)·mL^(-1)。试验期间的死亡猪,全部进行系统剖检和取材,制备石蜡切片,苏木素伊红染色。建立病理学评价标准,病变(无序分类变量)用频率和百分比表示,病变程度(有序分类变量)按各组织器官的不同病变进行分级和评分。结果表明,发病猪符合非洲猪瘟急性、热性、高传染性等临床特征,发病率100%,病死率100%。病死猪表现败血症典型特征,尸体易腐败,血凝不良或溶血,尸僵不全。主要病理损伤为出血性坏死性淋巴结炎、急性炎性脾肿(败血脾)、脑水肿、肺水肿和肺实变等。脾和淋巴结是非洲猪瘟病毒攻击的靶器官,病变最为显著,出现时间最早,持续时间最长,发生频率最高。病理变化以血液循环障碍尤为突出,包括水肿、充血、淤血、出血、梗死和弥散性血管内凝血等多种病理表现,出血性病变为其最主要的特征。非洲猪瘟病毒引发的以淋巴细胞渗出为主的炎症反应贯穿始终,在病程的中后期表现更为明显。结果提示,急性非洲猪瘟的主要病理过程为典型的免疫/炎症级联反应和严重的全身血液循环障碍,共同导致急性非洲猪瘟的高发病率和高死亡率。

非洲猪瘟病毒感染致胃肠道损伤的病理学观察

为了进一步研究非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)对猪胃肠道造成的损伤,试验选用体重为20 kg左右的长白猪18头,随机分为试验组(13头)和空白对照组(5头),试验组肌肉注射ASFV毒株Pig/HLJ/18,5 mL/头(病毒含量为1×10^(2)HAD_(50)/mL),空白对照组注射等剂量的生理盐水。对试验期间死亡的猪全部进行病理学解剖和组织学观察,采集胃、十二指肠、空肠、回肠、肠系膜淋巴结等器官/组织,进行固定、包埋、制作石蜡切片、H.E.染色,对病变器官/组织进行病理学观察和组织学分析,按照各器官/组织的病变程度进行评分,建立病变评分标准。结果表明:ASFV对胃肠道造成的损伤主要以黏膜充血、水肿,以及黏膜下层大量浆细胞、淋巴细胞浸润和坏死为主,肠系膜淋巴结呈多灶性出血性坏死性淋巴结炎;按照各器官/组织病变程度总分值排序,从高到低依次为回肠>空肠>胃>十二指肠>肠系膜淋巴结,回肠病变最严重,肠系膜淋巴结病变相对较轻。说明ASFV感染后,猪胃肠道出现的病理损伤主要表现为浆膜的出血与水肿,黏膜脱落,进一步加重了肠道损伤,导致肠道出血,从而引起病猪的迅速死亡。

玉屏风多糖对小鼠派氏结形态结构及其T细胞亚群的影响

通过研究玉屏风多糖(YPF-P)对小鼠派氏结(Peyer’s patches,PPs)形态结构及其T细胞亚群的影响,探讨其对小鼠肠黏膜的免疫调节作用。选取96只SPF小鼠随机分为6组,分别为空白对照组(0.2mL生理盐水)、YPF-P阳性对照组(YPF-P 200mg/kg)、环磷酰胺(cyclophosvnamide,Cy)免疫抑制组(80mg/kg Cy)及YPF-P低、中、高剂量组(100、200、400mg/kg YPF-P),饲喂1周,取小肠PPs,常规切片HE染色后应用图像分析技术检测PPs形态结构的变化;体外培养小鼠PPs淋巴细胞,采用流式细胞术研究PPs中T淋巴细胞亚群的变化。结果表明,YPF-P对小鼠小肠PPs的生长发育具有促进作用,Cy可极显著降低小鼠小肠PPs面积、小肠纵切面面积及PPs面积和小肠纵切面面积的比值(P<0.01),低、中、高剂量YPF-P可在一定程度上缓解Cy对小鼠小肠的损伤作用。同时,YPF-P可显著或极显著提高PPs中CD3^+、CD4^+T淋巴细胞及CD4^+/CD8^+(P<0.05;P<0.01)。结果显示,YPF-P能提高Cy诱导的免疫抑制小鼠的肠黏膜免疫功能,并能促进PPs中相关T淋巴细胞增殖,对小鼠肠黏膜功能具有增强作用。

玉屏风多糖脂质体对雏鸡黏膜免疫的影响

为探讨玉屏风多糖脂质体(YPF-PL)的免疫调节活性,研究其对呼吸道和肠道黏膜免疫功能的影响,以180羽13日龄SPF麻黄鸡作为试验动物,随机分为6组,每组30羽,即玉屏风多糖脂质体高、中、低剂量组(400、200、100 mg/kg/羽),玉屏风多糖对照组(200 mg/kg/羽),免疫对照组和空白对照组,混合饲料给药,连续给药7 d,给药第4天免疫接种禽流感病毒H5N1灭活疫苗;28日龄以同样方式二次给药和二次免疫,42日龄每组随机选10羽处死。试验期间每周采血获得血清,采用HI法检测每周各组雏鸡抗体水平变化,收集肺脏和肠道分泌液,竞争ELISA检测各组肺脏、肠道黏膜免疫主要效应蛋白SIgA含量变化;取空肠和肺组织石蜡包埋、HE染色,光学显微镜下观察肺脏病理组织学变化、空肠杯状细胞、肠绒毛固有层淋巴细胞和黏膜上皮内淋巴细胞变化,测量隐窝深度和绒毛长度,统计V/C值。结果发现,高剂量玉屏风多糖脂质体可增强禽流感疫苗免疫效果,能较长时间维持高水平抗体效价;显著促进肺脏、肠道SIgA分泌(P<0.01);能促进肺脏支气管相关淋巴组织增生,引起肺淋巴细胞归巢明显;空肠杯状细胞、固有层淋巴细胞和黏膜上皮内淋巴细胞数量显著上升(P<0.01),绒毛高度和V/C比值显著升高(P<0.01)。结果提示玉屏风多糖脂质体能够促进雏鸡禽流感疫苗免疫效果,增强机体呼吸道黏膜免疫功能和肠黏膜免疫功能,作用效果优于玉屏风多糖。

玉屏风多糖对小鼠脾脏形态结构及免疫功能的影响

为观察玉屏风多糖(Yupingfeng Polysaccharides,YPF-P)对小鼠脾脏组织结构的影响,探讨玉屏风多糖的复方效应,试验将80只SPF级小鼠随机分成5组(玉屏风多糖组、黄芪多糖组、白术多糖组、防风多糖组、生理盐水组),每天分别按体重200 mg/kg剂量灌服玉屏风多糖及其组方内的黄芪多糖、白术多糖和防风多糖以及生理盐水,连续灌服7 d,第8天剖杀,首先测定脾脏质量和脾脏指数,观察脾脏形态结构和组织学变化;再进行脾脏淋巴细胞体外培养,研究脾脏淋巴细胞活性的变化。结果表明:与生理盐水组相比,除白术多糖组外,其余多糖组小鼠脾脏均呈现不同程度的体积增大、脾脏指数升高,但无显著性差异(P>0. 05);而玉屏风多糖组和黄芪多糖组在脾脏淋巴组织增生和淋巴细胞活性增强的变化上与其他3组间差异极显著(P<0. 01),其中以玉屏风多糖增强作用最为明显。说明玉屏风多糖可促进小鼠脾脏组织增生,增强淋巴细胞活性,能有效增强脾脏免疫功能,且作用优于其组方内各单方多糖。

玉米赤霉烯酮对蛋鸡肝脏损伤作用的研究

为了了解玉米赤霉烯酮(zearalenone, ZEN)对肝脏结构和功能的损伤作用,试验将75只270日龄海兰粉蛋鸡随机分成3组,每组25只,空白对照组饲喂全价基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ组分别将1,2 mg/kg ZEN混入全价基础日粮中饲喂,连续饲喂90 d后剖杀,各组选取6只蛋鸡采集血清检测肝脏功能,肉眼观察肝脏病变并评分,石蜡切片观察肝脏组织学变化。结果表明:与空白对照组比较,试验Ⅰ组蛋鸡血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性极显著升高(P<0.01),试验Ⅱ组天门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)活性极显著升高(P<0.01),总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)含量显著降低(P<0.05);与空白对照组比较,试验Ⅰ、Ⅱ组蛋鸡肝脏病变评分极显著升高(P<0.01);在肝脏病理组织切片中,试验Ⅰ组蛋鸡肝脏出现小泡性脂肪变性,而试验Ⅱ组以肝细胞坏死和纤维化为主。说明ZEN可严重损伤肝脏结构,引起肝细胞变性、坏死和纤维化,并出现相应的肝功能下降。

实验性急性非洲猪瘟肝组织损伤及相关机制的研究

为探讨非洲猪瘟病毒(ASFV)对肝的组织损伤及其病理机制,本试验人工接种ASFV(Pig/HLJ/18毒株,剂量为210 HAD50/mL),复制急性非洲猪瘟病例,观察13头死亡猪肝脏的剖检变化和组织学变化,采用原位PCR方法,对肝内ASFV病毒VP73蛋白进行定位,以免疫组织化学方法对肝组织炎症因子TNF-α、IL-1β、IFN-γ和凋亡因子Bax、Bcl-2的表达进行检测。结果表明,ASFV可对肝的组织结构造成明显损伤,随病程的延长病变逐渐加重,剖检见肝脏淤血、出血,灰白色花斑状炎症灶,胆囊水肿,充血出血。组织学病变以出血和病毒性肝炎为主,肝细胞水肿、坏死和凋亡,淋巴细胞浸润;ASFV主要分布于肝窦、肝小叶汇管区、小叶间质的巨噬细胞;TNF-α、IL-1β、IFN-γ主要在巨噬细胞、肝细胞、血管内皮细胞和少量淋巴细胞中呈阳性表达,其表达强度随损伤程度加重而显著升高(P<0.01);Bax表达升高(P<0.01)的同时Bcl-2表达下降(P<0.01),诱导了细胞凋亡发生。本研究结果提示ASFV通过对肝内单核-巨噬细胞系统的破坏,诱导炎症因子大量释放并激活炎症级联反应,从而造成严重的肝组织损伤。

玉屏风多糖脂质体对雏鸡脾免疫调控的研究

文章旨在探讨玉屏风多糖脂质体(Yupingfeng polysaccharide Liposomes,YPF-PL)的免疫活性,研究其对脾淋巴细胞亚群和脾组织学变化的影响。180只13日龄麻黄鸡随机分为6组,每组30只,即YPF-PL组(100、200、400 mg/kg)、玉屏风多糖(YPF-P)对照组(200 mg/kg)、免疫对照组(仅免疫不给药)和空白对照组,连续两次给药,每次持续7 d,期间进行H5N1亚型禽流感灭活疫苗首免和二免,42 d每组随机选10只剖杀。每周采血获得血清,采用HI法检测各组雏鸡抗体水平变化,MTT法比较YPF-P和不同浓度YPF-PL对鸡脾淋巴细胞的增殖活性,流式细胞术法检测鸡脾T、B淋巴细胞亚群变化,脾组织H.E染色后光镜观察组织学变化。结果显示:高剂量YPF-PL效果最显著,可增强禽流感疫苗免疫效果,能较长时间维持高水平抗体效价;低、中和高剂量YPF-PL能促进脾淋巴细胞增殖(P<0.01);协同ConA作用时,中、高剂量YPF-PL能显著提高鸡脾淋巴细胞刺激指数(P<0.01);YPF-P和低、中、高剂量YPF-PL能够升高CD3+T淋巴细胞和Bu-1+淋巴细胞的比例(P<0.01),显著提高CD4+/CD8+T细胞比值(P<0.01)以及促进脾白髓淋巴细胞增殖发育。结果提示高剂量YPF-PL能够促进雏鸡禽流感疫苗免疫效果,增强机体脾脏免疫功能,作用效果优于YPF-P。

玉屏风散总多糖对小鼠派氏结淋巴细胞活化及功能影响的研究

通过研究玉屏风散总多糖对体外培养小鼠派氏结(Peyer's patches,PPs)淋巴细胞活化和功能变化的影响,探讨其对小鼠肠黏膜免疫应答的作用机制。体外培养小鼠PPs淋巴细胞,MTT法检测PPs淋巴细胞加入Con A协同不同浓度玉屏风散总多糖(0. 5、1、2、4、8 mg/m L)在作用不同时间(0、8、12、16、24、36 h)后的增殖变化; ELISA试剂盒检测细胞因子IL-2、IL-4、IFN-γ的含量变化;流式细胞术研究PPs淋巴细胞中T、B淋巴细胞的比例变化,进行T淋巴细胞的亚群分析。结果发现,不同浓度的玉屏风散总多糖均能增强PPs淋巴细胞的活性,单独作用时,浓度达到1 mg/m L以上,差异极显著(P <0. 01);与Con A刺激组比较,Con A与玉屏风散总多糖协同作用时,浓度达到2 mg/m L以上差异极显著(P <0. 01),且对PPs淋巴细胞增殖活化有明显促进作用(P <0. 01)。同时,玉屏风散总多糖可明显促进小鼠PPs淋巴细胞产生和分泌IL-2、IL-4、IFN-γ,改变PPs淋巴细胞中T、B淋巴细胞的比值,且可显著提高CD4+/CD8+的比值。结果表明,玉屏风散总多糖能显著提高小鼠PPs淋巴细胞活性,增强肠黏膜免疫功能。

玉屏风多糖对小鼠肠黏膜免疫应答和免疫损伤的调控作用

为研究玉屏风多糖对肠黏膜免疫应答和免疫损伤的调控作用,以黄芪多糖为对照药物,以正常小鼠和免疫抑制小鼠为动物模型,150只SPF小鼠随机分为空白对照组、环磷酰胺免疫抑制对照组、玉屏风多糖治疗组、玉屏风多糖阳性对照组和黄芪多糖对照组,每组30只。多糖剂量为200 mg/kg/d,连续灌服7 d,环磷酰胺剂量为80 mg/kg,隔日腹腔注射。检测SIgA、IL-2、TGF-β1和IL-6以及小肠黏膜相关淋巴组织的变化。结果发现,玉屏风多糖和黄芪多糖均可显著提高小鼠SIgA、IL-2、TGF-β1和IL-6水平(P<0.05或P<0.01),小鼠肠上皮细胞增生,杯状细胞增多,肠绒毛长度、宽度和隐窝深度均显著增加(P<0.05或P<0.01),肠上皮细胞间淋巴细胞和黏膜固有层淋巴细胞数量明显增多(P<0.05或P<0.01),肠粘膜下集合淋巴结(PP结)体积增大,淋巴细胞增生。与黄芪多糖比较,玉屏风多糖对肠黏膜免疫应答的正向调节作用更为明显。对免疫抑制小鼠,玉屏风多糖可有效拮抗环磷酰胺诱导的SIgA降低(P<0.05),并可通过调节TGF-β1(P<0.05)和IL-6(P<0.01)水平,调控Th1/Th2漂移状态,缓解环磷酰胺所致的免疫损伤,对免疫抑制小鼠小肠黏膜相关淋巴组织也有明显的保护和恢复作用。结果表明,玉屏风多糖可从多方面调控小鼠肠黏膜的免疫应答,可有效增强肠黏膜免疫功能,缓解和改善免疫抑制小鼠肠黏膜免疫屏障的损伤。

水闸围堰设计及有限元数值模拟

淤泥强度不高,大量堆填土可能导致土坝本身的稳定问题加剧。将原土坝堆填规模减小,采用轻型围堰方案(局部堆填砂+钢板桩方案)可满足设计需求,且能大幅降低造价。本文依托实际工程,使用Plaxis软件进行有限元分析,并结合简化计算结果进行水闸围堰设计方案验算。结果表明,十年一遇水位和波浪力情形下,钢板桩最大位移425mm,最大支撑轴力为694kN,各工况安全性均满足要求。