乙醇及二甲基亚砜对人γδT细胞和αβT细胞凋亡与细胞活性的影响

目的 观察不同浓度的乙醇及二甲基亚砜 (DMSO)对人γδT细胞和αβT细胞凋亡与细胞活性的影响。方法 分别用结核杆菌低分子多肽抗原 (Mtb Ag)、CD3单抗(CD3mAb)刺激正常人外周血单个核细胞 ,分别获得Mtb Ag激活的T细胞 (αβT细胞为主 )及CD3mAb激活的T细胞(γδT细胞为主 ) ;用不同浓度的乙醇及二甲基亚砜分别作用于γδT细胞和γδT细胞 4、2 4h后 ,应用Annexin V FITC/PI染色 ,流式细胞术检测不同T细胞亚群的凋亡 ,应用四唑盐(MTT)法检测T细胞的活性。结果 Mtb Ag激活的T细胞中γδT细胞比例可达 70 %～ 90 % ;CD3mAb激活的T细胞中γδT细胞比例 >90 % ;与对照组相比 ,除浓度为 1 0 %及 2 0 %的DMSO作用于γδT细胞 2 4h的诱导凋亡作用明显 (P <0 0 5 )及浓度为 2 0 %的DMSO作用于γδT细胞 4h对细胞活性抑制明显 (P <0 0 5 )外 ,低浓度乙醇及DMSO(≤ 2 0 % )对人γδT细胞和γδT细胞的诱导凋亡作用及对细胞活性的抑制作用均无显著性 (P >0 0 5 ) ;与对照组相比 ,除 5 0 %乙醇作用于γδT细胞 4h及 5 0 %DMSO作用于γδT细胞 4h诱导细胞凋亡作用不明显 (P >0 0 5 )外 ,高浓度乙醇和DMSO(5 0 % )对γδT细胞和γδT细胞的诱导凋亡作用及对细胞活性的抑制作用均增加 (P <0 0 5 )。结论?

神经酰胺对人γδT细胞和αβT细胞的诱导凋亡作用

目的 :观察神经酰胺对人γδT细胞和αβT细胞的诱导凋亡作用。 方法 :用结核杆菌低分子多肽抗原 (Mtb Ag)和CD3单抗 (CD3mAb)分别刺激正常人外周血单个核细胞 ,获得Mtb Ag激活的T细胞 (γδT细胞为主 )及CD3mAb激活的T细胞(αβT细胞为主 ) ;用不同浓度的神经酰胺 (C2 Cer)分别作用于γδT细胞和αβT细胞 ,培养 3h后收获细胞 ,应用Annexin V FITC/PI染色 ,流式细胞术检测不同亚群T细胞的凋亡 ,应用四甲基噻唑氮蓝 (MTT)比色法检测T细胞的活性。结果 :Mtb Ag激活的T细胞中γδT细胞比例可达 70 %～ 90 % ,CD3mAb激活的T细胞中αβT细胞比例 >90 % ;与对照组比较 ,低浓度的C2 Cer(≤ 1 0 μmol/L)对人γδT细胞和αβT细胞的诱导凋亡作用和细胞活性抑制作用均不明显 (P >0 .0 5 ) ;而高浓度的C2 Cer对γδT细胞和αβT细胞的诱导凋亡作用和细胞活性抑制作用存在显著差异 :1 0 0 μmol/L的C2 Cer诱导γδT细胞、αβT细胞凋亡比例分别增加 1 0 .4 % (P >0 .0 5 )及 73.5 % (P <0 .0 1 ) ,活细胞区 (R1区 )的细胞比例分别为对照组的 88.1 % (P >0 .0 5 )和7.8% (P <0 .0 1 ) ;而 5 0 0 μmol/L时诱导γδT细胞和αβT细胞凋亡比例分别增加 71 .9%和 73.8% (P <0 .0 1 ) 。

临床实验室管理学课程教学实践与探索

临床实验室管理学是随着检验医学的发展而产生的一门新兴学科,是检验医学的重要组成部分。为了适应学科发展需要,在临床实验室管理学课程的教学实践中,对任课教师选择、教学安排、教材选择等方面进行探索,并获得较好教学效果。

PKC在结核杆菌抗原诱导人γδT细胞凋亡中的作用

采用Annexin-V-FITC/PI染色流式细胞术检测细胞凋亡的方法,分别观察Mtb-Ag(10.0μg/ml)刺激特异性激活的人γδT细胞不同时间凋亡情况,并研究Rottlerin(PKC抑制剂)预处理对Mtb-Ag诱导γδT细胞凋亡的影响。结果显示Mtb-Ag刺激3h、6h、12h、24h均可显著诱导γδT细胞凋亡(P<0.01),凋亡细胞比例在44.21%～51.76%之间;Mtb-Ag诱导γδT细胞凋亡可被Rottlerin(40.0μmol/L)抑制,凋亡抑制率为98.6%。提示PKC途径参与Mtb-Ag激发活化的γδT细胞凋亡过程。

医学双语教学研究与探索

本文从医学双语教学的涵义、开展医学双语教学的必要性及所面临问题与解决方法等方面进行研究与探索,希望能为医学双语教学的深入开展提供有益的参考。

有关多媒体教学的几点思考

随着计算机的广泛普及,校园网的建设逐步完善,多媒体教学将会在未来的教学活动中发挥越来越重要的作用。作者结合近几年来多媒体教学的实践,就多媒体教学的优点及存在问题和对策提出自己的认识和思考。

有关多媒体教学的几点思考

随着计算机的广泛普及，校园网的建设逐步完善，多媒体教学将会在未来的教学活动中发挥越来越重要的作用，在本文中作者将近几年来对于多媒体教学的一些认识和思考记录下来，与大家进行交流，。

p38及PI3K在结核杆菌抗原再刺激诱导人γδT细胞凋亡信号转导中的作用

目的：建立结核杆菌抗原（Mtb-Ag）再刺激活化的人γδT细胞凋亡模型；应用信号分子阻断剂观察p38及PI3K信号传导途径在Mtb-Ag再刺激诱导γδT细胞凋亡中的作用。方法：用3种浓度Mtb-Ag分别再刺激培养15～25天的Mtb-Ag激活的人T细胞（MtbAT）24小时后，应用Annexin-V-FITC／PI染色流式细胞术（FCM）检测γδT细胞凋亡；用Mtb-Ag（10．0μg／ml）分别再刺激MtbAT3、6、12和24小时后，观察γδT细胞凋亡情况；预先用SB203580（p38途径抑制剂）及LY294002（PI3K途径抑制剂）分别处理MtbAT60分钟，观察Mtb-Ag（10．0μg／m1）再刺激3小时后γδT细胞凋亡情况。结果：与对照组相比，10．0和20．0μg／ml MtbAg均显著诱导γδT细胞凋亡（P〈0．01），凋亡细胞比例分别增加35．63％及38．83％，且此二种浓度MtbAg在诱导γδT细胞凋亡方面无显著性差异（P〉0．05）；与对照组相比，10．0μg/ml Mtb-Ag再刺激MtbAT3、6、12和24小时均可显著诱导γδT细胞凋亡（P〈0．01），凋亡细胞比例在44．21％～51．76％之间；且Mtb-Ag再刺激MtbAT3小时实验组与再刺激MtbAT 24小时实验组相比，在诱导γδT细胞凋亡方面无显著性差异（P〉0．05），后者的凋亡细胞比例仅比前者增加7．55％；Mtb-Ag再刺激诱导γδT细胞凋亡可被SB203580（80．0μmol／L）及LY294002（10．0μmol／L）抑制，凋亡抑制率分别为91．6％及43．1％。结论：采用Mtb-Ag（10．0μg／m1）再刺激活化的γδT细胞3小时的方法，可建立Mtb-Ag再刺激活化的人γδT细胞凋亡模型；信号分子阻断剂的实验证明，p38途径及PI3K途径均参与了Mtb-Ag再刺激已活化γδT细胞凋亡过程。

蛋白激酶C在乙醇诱导人γδT细胞凋亡中的作用

目的:观察蛋白激酶C(prote in k inase C,PKC)在乙醇诱导人γδT细胞凋亡中的作用。方法:用结核杆菌多肽抗原(M tb-Ag)刺激正常人外周血单个核细胞,获得M tb-Ag激活的T细胞(γδT细胞为主);采用Annexin-V-FITC/PI染色流式细胞术观察不同浓度乙醇对人γδT细胞凋亡诱导情况,并观察Rottlerin(PKC抑制剂)预处理对乙醇诱导γδT细胞凋亡的影响。结果:4.0%的乙醇作用结核杆菌抗原活化的γδT细胞4 h、12 h、24 h均可显著诱导γδT细胞凋亡(P<0.01);5.0μmol/L和40.0μmol/L Rottlerin可显著抑制4.0%乙醇诱导γδT细胞凋亡(P<0.01),凋亡抑制率分别为75.17%和58.95%。结论:PKC途径参与乙醇诱导人γδT细胞凋亡信号传导。

某医院2012-2013年242株肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶及整合子耐药基因检测

目的了解肺炎克雷伯菌主要的β-内酰胺酶和整合子耐药基因型,明确其耐药特性。方法回顾性分析我院2012年1月至2013年5月临床分离的242株肺炎克雷伯菌药敏结果,聚合酶链反应(PCR)检测其β-内酰胺酶及整合子耐药基因。结果 242株肺炎克雷伯菌对16种抗生素存在不同程度的耐药,其中氨曲南、头孢唑啉、氨苄西林/舒巴坦、头孢曲松和头孢他啶耐药率较高,分别为76.86%、65.70%、63.64%、62.40%和59.92%;亚胺培南、丁胺卡那、厄他培南和哌拉西林/他唑巴坦较为敏感,分别为17.77%、18.88%、18.88%和23.55%。PCR结果显示,ESBLs基因阳性155株,占64.05%,主要为TEM型和SHV型,两者均存在的菌株有114株,占产ESBLs基因菌株的73.55%(114/155)。其次为KPC基因86株,占35.54%;此外AmpC基因43株,占17.77%,全部为DHA型。整合子基因128株,占52.89%,以整合子1(intI-1)为主,共检出120株,占49.59%。结论我院肺炎克雷伯菌耐药情况严重,主要的耐药基因型为TEM型、SHV型、KPC和intI-1。

PCR-SBT 与 IMS-ELISA 法在强直性脊柱炎患者 HLA-B27检测中的比较

目的：比较聚合酶链反应-直接测序法（polymerase chain reaction sequence-based typing，PCR-SBT）和磁珠酶联免疫法（immunomagnetic separation and enzyme-linked immunosorbent assay，IMS-ELISA）检测人类白细胞抗原 B27（human leukocyte antigen B27，HLA-B27）在强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）临床诊断中的价值。方法应用 PCR-SBT法和 IMS-ELISA 法对120例疑似 AS 患者外周血进行 HLA-B27检测。以 SPSS17.0软件的配对χ^2检验和受试者工作特征曲线下面积对两种方法检测 HLA-B27在 AS 诊断中的价值进行评价。结果120例疑似 AS 患者中，PCR-SBT 和 IMS-ELISA 法 HLA-B27检测阳性率分别为45.83％（55／120）和37.50％（45／120）。两种方法检测 HLA-B27差异有统计学意义（χ2＝59.455，P ＝0.000）。PCR-SBT 法敏感度和特异度分别为96.36％和96.92％；IMS-ELISA 法的敏感度和特异度分别为69.09％和89.23％。两者的 AUC 分别为0.966和0.792。结论与 IMS-ELISA 法相比，在 AS 的临床诊断中PCR-SBT 法检测 HLA-B27的敏感度和特异度更高，方法更优。

冠心病新危险因素在预测冠状动脉病变严重程度中的价值研究进展

冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）发病率在我国呈逐年上升趋势。随着20世纪60~80年代美国所进行的控制冠心病危险因素和改进心肌梗死治疗的努力,目前冠心病已经呈现出病死率下降的趋势[1]。冠心病的危险因素错综复杂,现已知传统的危险因素如高脂血症、高血压、糖尿病、高龄、吸烟、男性等在临床研究方面已受到重视。

基于病案分析的临床生物化学综合性实验教学的探讨

目的:探讨基于病案分析的临床生物化学综合性实验对培养医学检验专业高级人才的作用。方法:在本科医学检验专业实验教学中开展基于病案分析的临床生物化学综合性实验,并对其分析和总结。结果:学生除了掌握临床生物化学基本操作技能外,还提高了学习兴趣,熟悉了查阅文献资料的方法,促进了相互间的团结协作,增强了综合分析和解决问题的能力。结论:基于病案分析的临床生物化学综合性实验对于培养医学检验专业高级人才具有重要作用。

淋巴瘤组织中线粒体DNA突变的研究

目的通过检测恶性淋巴瘤组织中线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)的突变,以探讨mtDNA突变在恶性淋巴瘤发生中的作用。方法提取38例恶性淋巴瘤组织及其对应患者外周血白细胞的DNA,经PCR扩增部分mtDNA片段,PCR产物直接测序法测定mtDNA序列。以外周血淋巴细胞测序结果作为对照,确定肿瘤组织mtDNA的突变。结果18例(47.4%)恶性淋巴瘤组织中发现25个突变,25个突变发生在15个核苷酸位点,其中21个突变位于mtDNA的D-Loop区,4个突变位于mtDNA的编码区,D-Loop发生变异的频率是编码区的4.26倍。13个(13/25,52%)突变位于mtDNA多态性位点。结论恶性淋巴瘤组织中存在mtDNA的突变,mtDNA突变可能与淋巴瘤的发生、进展有一定关系。

有关多媒体教学的几点思考

随着计算机的广泛普及，校园网的建设逐步完善，多媒体教学将会在未来的教学活动中发挥越来越重要的作用。作者结合近几年来多媒体教学的实践，就多媒体教学的优点及存在问题和对策提出自己的认识和思考。

腺苷脱氨酶的临床价值及其应用进展

腺苷脱氨酶(ADA)在某些疾病的早期诊断、治疗以及发病机制的研究中越来越受到关注。血清ADA活性是反映肝损伤的敏感指标,浆膜腔积液中ADA的测定在良恶性鉴别诊断上有重要价值。脑脊液ADA检测还可作为中枢神经系统疾病诊断和鉴别诊断的重要指标。近年研究表明ADA在结核病、糖尿病、恶性血液疾病、自身免疫性疾病的诊断及预后中也有重要价值。

聚合酶链反应-直接测序法在强直性脊柱炎患者HLA-B27检测中的应用

目的探讨聚合酶链反应-直接测序法(polymerase chain reaction sequence-based typing,PCR-SBT)检测人类白细胞抗原B27(human leukocyte antigen B27,HLA-B27)在强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)临床诊断中的价值。方法应用PCR-SBT法和临床常用的IMS-ELISA法对120例疑似AS患者外周血进行HLA-B27检测。以SPSS17.0软件的配对χ2检验和受试者工作特征曲线下面积对两种方法检测HLA-B27在AS诊断中的价值进行评价。结果 120例疑似AS患者中,PCR-SBT和IMS-ELISA法HLA-B27检测阳性率分别为45.83%(55/120),37.50%(45/120)。两种方法检测HLA-B27有统计学差异(P=0.031)。PCR-SBT法敏感度和特异度分别为96.36%,96.92%;IMS-ELISA法的敏感度和特异度分别为69.09%,89.23%。两者的AUC分别为0.966和0.792。结论与传统的IMS-ELISA法相比,在AS的临床诊断中PCR-SBT法检测HLA-B27的敏感度和特异度更高,方法更优。

医学检验综合实验课程的设计与实践

提出了一种基于病案分析为基础的医学检验综合实验教学方法、实验教学目标、实验项目设置以及实验考核评价体系,深入分析了实验教学对人才培养的巨大促进作用,同时综合实验的开设提高了教师队伍的综合素质,创新了实验指导模式。教学实践证明,综合实验课程内容得到了学生广泛的欢迎,对学生的学习积极性、主动性、综合判断能力、团结协作能力、分析解决问题能力有明显的促进和提高。