虹鳟传染性胰脏坏死病病毒(IPNV)的初步研究

山西省虹鳟试验场用从日本引进的鱼卵孵化的虹鳟稚鱼暴发流行病,死亡率高达90％以上。经组织培养分离到病毒,能在鲑鳟细胞系中产生细胞病变,形成直径0.5—1mm的空斑。感染健康虹鳟稚鱼能复制出与天然发病相同的症状和死亡率。病毒对氯仿不敏感,耐酸、耐热。病毒负染后电镜观察为直径55—65mm的二十面体颗粒,无囊膜,具单层衣壳。经血清学鉴定为传染性胰脏坏死病病毒(Infectious pancreatic necrosis virus简称IPNV)在血清学交叉中和反应中与抗IPN-Sp株的抗血清有强烈的交叉反应,提示可能为IPN-Sp株。

我国对虾暴发性流行病病因初探

我国对虾暴发性流行病病因初探江育林，张奇亚，刘荭，李彦，李正秋（中国科学院水生生物研究所武汉４３００７２）关键词杆状病毒、对虾病毒病、中国对虾、日本对虾ＳＴＵＤＹＯＮＣＡＵＳＥＯＦＩＮＦＥＣＴＩＯＮＳＤＩＳＥＡＥＳＯＦＰＥＮＡＥＩＤＳＨＲＩＭＰＩＮＣ...

用酶联免疫吸附试验快速检测虹鳟的传染性胰脏坏死病病毒

我国于1987年从进口的虹鳟中分离了传染性胰脏坏死病病毒(Infectious pancreatic necrosis virus简称IPNV),并进行了血清学鉴定。由于病鱼没有特有的临床症状,所以迅速查找鱼体内特异性的病毒是十分必要的。本文报道了用酶联免疫吸附试验(ELISA)

草鱼免疫应答的初步研究

研究了草鱼在不同水温条件下受抗原刺激后其中和抗体的变化。15℃培养条件下中和抗体上升缓慢,9周内滴度低于1:8;20℃时,3周后抗体可上升到1:256,最高达1:5270,而在25℃时,1周中和抗体即达到1:570,最高可达1:20000以上。并探索了从草鱼血清中提纯抗体的条件,研究其抗体的特性。草鱼血清中的抗体为大分子蛋白,容易解离为抗原性相同,分子量近似于人IgG的较小分子,含有较多的二硫键,具有类似IgM的某些特性。

病毒感染的草鱼细胞产生类干扰素物质的研究

某些草鱼细胞系在双链RNA病毒诱导下能产生一种抗病毒蛋白,并存在“超诱导”现象。这种抗病毒蛋白耐热、耐酸,对脂溶剂和核酸酶的作用不敏感,但其抗病毒活性能被胰蛋白酶破坏,160 000g超速离心不沉降。这种抗病毒蛋白对病毒感染细胞的抑制作用具有宿主特异性和广谱抗病毒特性。它是通过细胞内的RNA和蛋白质合成途径抑制病毒增殖的。该抗病毒蛋白在生物学特性、理化特性和抗病毒机制等方面均类似于人干扰素。

鲤痘疮病病原的电镜观察初报

痘疮病是鲤越冬前后常见的疾病。过去由于该病在池塘中流行不广,危害也不大,因而未引起足够的重视。近年来由于网箱养鱼等高密度养殖技术的推广,该病日益常见而且严重。本文报道了患痘疮病鲤鱼组织的电镜观察。

对虾养殖，环境，病害─—记第二届亚洲水产养殖病害学术讨论会

对虾养殖，环境，病害─—记第二届亚洲水产养殖病害学术讨论会中国科学院水生生物研究所江育林１９９３年１０月底，在泰国召开了第二届亚洲水产养殖病害会议。我作为ＩＤＲＣ和亚洲水产学会的特邀代表参加了这次会议。现将大会有关情况向大家作一汇报。一、历史和背景早...

对虾养殖、环境、病害(二)

附表一:目前从患病的对虾体内分离到的一些病毒 BP(Baculovirus Penaei)桃红对虾杆状病毒 长270nm,直径74nm,感染肝胰腺和前中肠上皮组织。在细胞核里有嗜伊红包涵体(三角形)。引起幼虾和未成年虾(氵蚤)状幼体和糠虾期急性死亡。 宿主:桃红对虾、边缘对虾、白脚对虾、兰对虾、白对虾、褐对虾。 BMNV(Virus of Baculoviral Midgut GlandNecrosis)中肠腺坏死杆状病毒。长310nm,直径72nm,

对虾养殖、环境、病害(一)

1993年10月底,在泰国召开了第二届亚洲水产养殖病害会议。我作为IDRC和亚洲水产学会的特邀代表参加了这次会议。 会议提出了一个大会专题口号:“水产动物的健康与环境(Aquatic Animal Health and the En-vironment)”。这表明众多的科学工作者们已经认识到疾病与环境的关系非常密切,如果不改善环境,水产动物的健康就得不到保证,病害会越来越多,产量会受到制约。因此,控制病害与改善环境是不可分割的。如果不从环境着手,仅从病原与发病机理上去研究,发生一种病,就寻找一。

旅客携带和邮寄水产品传入疫病的风险分析

近年来我国进出境口岸频繁截获旅客携带和邮寄的水产品。为防止有害生物传入,规范进境旅客携带物、邮寄物的查验工作,便于针对性监管,对活的、冰冻的、初加工的和深加工的水产品传入病原的风险分别进行了评估。评估结果表明:携带活的水产品入境是高风险行为,应当严格禁止;初加工和深加工的水产品传入疾病的风险非常低,其风险在可以接受的水平以下;冰冻水产品的传入疫病风险较低,但影响因素很多,难以得出一个统一的风险标准,建议采取较为保守的措施。本文根据SPS协议,对这四类水产品提出了相应的风险管理方案。

从台湾地区进口甲鱼蛋传入疫病的风险评估

近年来,随着海峡两岸贸易的增长,来自台湾地区的甲鱼蛋输入量猛增。为了在促进两岸贸易的同时,防止有害生物传入,保护大陆地区养殖业安全和人民健康,根据世界贸易组织SPS协定的有关原则,对从台湾地区输入的甲鱼蛋携带的霍乱弧菌等10种细菌和甲鱼虹彩病毒等8种病毒进行了风险分析。评估结果表明:从台湾地区输入甲鱼蛋的主要风险是蛋表面在自然条件下可能被病原性微生物,如细菌和病毒等污染。这些病原可能会随着甲鱼蛋传播到大陆地区,造成疾病流行,或者危害人类健康。虽然其风险不高,但一旦传入,会造成一定的负面影响,其中有些病原也会引起严重后果,因而必须进行适当监管。监管重点是控制蛋表面污染的微生物。基于风险评估,本研究提出了3个风险管理备选方案。

中国虹鳟鱼病毒病(IPN)的分离和鉴定

<正> 1986年和1987年,山西省虹鳟试验场用从日本进口的鱼卵孵化的虹鳟稚鱼暴发急性流行病,死亡率高达90％以上。其主要症状为全身发黑,眼突出,腹部澎涨,鳍条和皮肤充血;在体内,肝、脾发白,消化道内无食物,常充满乳白色或黄色的粘液。经组织培养分离到病毒,能在冷水鱼细胞中引起细胞病变,病毒量可达10~θTCID50/0.1ml。感染了病毒的细胞用1％营养琼脂复盖后可形成直径1～2毫米的空斑。

沼泽绿牛蛙病毒的分离及其细胞感染的初步研究

沼泽绿牛蛙病毒的分离及其细胞感染的初步研究张奇亚，李正秋，江育林，梁绍昌，桂建芳（中国科学院水生生物研究所，武汉４３００７２）关键词沼泽绿牛蛙（美国青蛙），病毒，细胞感染ＰＲＥＬＩＭＩＮＡＲＹＳＴＵＤＩＥＳＯＮＶＩＲＵＳＩＳＯＬＡＴＩＯＮＡＮＤＣＥＬ...

进口锦鲤暴发病病原的nested-PCR鉴定

为了查明锦鲤暴发性疾病的病因 ,将患病锦鲤的脑、肝、脾和肾等组织悬液接种到CO、CK和EPC等鱼类细胞系中培养 ,均未发现细胞病变 ;从病灶中取样进行病原菌的分离和培养 ,证明锦鲤有副溶血弧菌和嗜水气单胞菌的感染。制备锦鲤疱疹病毒 (KHV)的 2对引物KHV9/ 5F和KHV9/ 5R ,KHV1和KHV2 ,用嵌套式聚合酶链式反应 (nested -PCR)在脑和脾脏组织的抽提物中扩增出长度为 4 12bp的特异性的DNA片段。将该片段的nested -PCR扩增产物纯化后 ,克隆、测序。用NCBI -Blast软件将测序结果在Genebank中进行搜寻、比较 ,结果发现与注册号为AF4 1180 3的KHV基因序列的一部分片段有 99%的同源性。因此初步判断这次锦鲤暴发性疾病是由KHV引起的 。

锦鲤疱疹病毒的检测与人工感染试验

基于在美国和以色列普通鲤鱼和锦鲤中分离了一种新的疱疹病毒,命名为锦鲤疱疹病毒(KHV)或鲤鱼肾炎鳃坏死病毒(CNGV).本文根据GenBank登记的KHV序列设计了两对特异性引物,在我国患病的锦鲤样品中检测到该类病毒DNA.经对PCR产物进行克隆测序,结果表明与GenBank登记序列完全一致.用组织匀浆上清人工感染健康锦鲤,并从试验感染鱼组织中检测到KHV病毒DNA.该结果表明KHV或CNGV已经传播到我国,应引起重视.

鱼病毒性神经坏死病病毒(VNNV)不同基因型鉴别方法的建立及在VNN检疫和监测中的应用

从GenBank中查找出乙型野田村病毒组中海水鱼类各病毒的序列,并用Sequencher多重序列比较软件将其分到条纹神经坏死病毒(stripedjacknervousnecrosisvirus,SJNNV)组、条纹星鲽神经坏死病毒(barfinfloundernervousnecrosisvirus,BFNNV)组、红点石斑鱼神经坏死病毒(redspottedgroupernervousnecrosisvirus,RGNNV)组和虎斑东方神经坏死病毒(tigerpuffernervousnecrosisvirus,TPNNV)组4个基因型的组别中。用DNAsis序列比较软件比较同一基因型各基因序列之间的同源性,均在85%以上;不同基因型之间序列的同源性,均在66%以下。结合Premier引物设计软件和Sequencher序列多重比较软件,设计了4对引物,采用逆转录聚合酶链式反应(RT PCR)来鉴别这4个不同的基因型。对从深圳口岸进境的产地为台湾的海水鱼苗和广东、福建两省养殖的主要海水鱼类进行检疫和监测,结果在进境的海水鱼苗中检出有RGNNV基因型的VNNV,在福建和广东省养殖的石斑鱼成鱼和鱼苗的病鱼体内均检测到RGNNV基因型的VNNV,对上述扩增产物基因序列进行比较,相似性均在96.5%以上,推导出的氨基酸序列与玛拉巴石斑鱼神经坏死病毒(MNNV)序列相似性均为100%。

用RT-PCR法快速检测鲤春病毒血症病毒基因

用逆转录多聚酶链式反应 (RT PCR)方法快速、灵敏、特异地检测鲤春病毒血症病毒(SVCV) ,根据SVC病毒糖蛋白基因序列设计的引物经过RT PCR和半嵌套PCR(semi nested PCR)可扩增出SVC病毒核酸中的 71 4bp和 60 6bp片段。与其他弹状病毒IHNV、VHSV、PFRV没有交叉 ,具有特异性。灵敏度检测 ,表明不小于 1 0 0 0个病毒就可检测出阳性结果。本文还对复性温度 ,引物 ,Mg2 +,Tag酶以及反转录酶的浓度对检测结果的影响进行了探讨。

国内养殖鱼类和进境鱼卵中传染性造血器官坏死病毒(IHNV)的检测及基因分析

用传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)的反转录聚合酶链及该方法在来自国内养殖场的患病牙鲆和虹鳟及进口的匙吻鲟鱼卵中检测出IHNV,同时对扩增出的IHNV的DNA片段进行了序列分析。结果表明,从国内养殖的牙鲆和虹鳟中分离出的IHNV与IHNV的标准株RB-1株在序列上都具有98.1%的同源性,推导出在氨基酸序列上分别具有97%和99%的同源性。从进口匙吻鲟鱼卵中分离的IHNV与RB-1株在序列上都具有92.5%的同源性,推导出氨基酸序列有93%的同源性。系统发育树分析结果表明,从国内发病的养殖虹鳟中分离出的IHNV与进口匙吻鲟鱼卵中检测到的IHNV在进化上关系较为密切。