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小剂量他达那非治疗骨盆骨折后勃起功能障碍的疗效观察 被引量:8
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作者 汤育新 甘宇 +4 位作者 张晓波 朱湘生 蒋先镇 何乐业 阳建福 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2013年第6期539-541,共3页
目的:评估小剂量他达那非每日给药一次治疗骨盆骨折后勃起功能障碍(ED)的疗效。方法:42例骨盆骨折后ED患者依据外伤后时间分为3组,A组:<1个月组、B组:6~24个月组和C组:>24个月组,每天给予5 mg他达那非连续治疗12周,应用IIEF-5评... 目的:评估小剂量他达那非每日给药一次治疗骨盆骨折后勃起功能障碍(ED)的疗效。方法:42例骨盆骨折后ED患者依据外伤后时间分为3组,A组:<1个月组、B组:6~24个月组和C组:>24个月组,每天给予5 mg他达那非连续治疗12周,应用IIEF-5评分和"性活动日志"(SEP)评估疗效。结果:共34例患者完成研究,3组均对骨盆骨折后ED有一定的疗效。A组SEP1、SEP2和SEP5平均阳性回答率分别为70%、59%、52%,均显著高于B、C组(P均<0.05);12周后,3组IIEF-5评分分别增加(3.20±2.62)、(1.31±1.70)、(0.91±1.87)分,A组显著高于B、C组(P均<0.05)。结论:小剂量他达那非每日给药一次对骨盆骨折后ED有较好的康复作用,外伤后越早使用其疗效越好。 展开更多
关键词 他达那非 勃起功能障碍 阴茎康复 国际勃起功能指数-5 性活动日志
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他达那非不同给药方法治疗勃起功能障碍的疗效观察 被引量:8
2
作者 汤育新 周华波 +3 位作者 彭圣林 蒋先镇 何乐业 李东杰 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2012年第5期472-474,共3页
目的:评估他达那非按需给药和每日给药1次治疗勃起功能障碍(ED)的疗效。方法:随机将ED男性分为按需给药组、每天5 mg他达那非组及每天10 mg他达那非组,治疗周期42 d,应用"性活动日志"来评估疗效,同时监测药物不良反应及重要... 目的:评估他达那非按需给药和每日给药1次治疗勃起功能障碍(ED)的疗效。方法:随机将ED男性分为按需给药组、每天5 mg他达那非组及每天10 mg他达那非组,治疗周期42 d,应用"性活动日志"来评估疗效,同时监测药物不良反应及重要迹象来评估药物安全性。结果:共53例患者完成研究,3组均对ED有较好的疗效,能显著提高性交成功率,并且药物的不良反应相当,均可以耐受。每日给药1次组SEP的5个问题阳性结果与按需给药组类似。结论:每日给药1次与按需给药在增加患者的勃起次数以及性体验满意度方面没有差异。 展开更多
关键词 他达那非 勃起功能障碍 性活动日志 治疗结果
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骨盆骨折后勃起功能障碍 被引量:4
3
作者 汤育新 蒋先镇 +2 位作者 谭靖 黄凯 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期478-479,493,共3页
目的 :探讨骨盆骨折后阴茎勃起功能障碍 (ED)的原因及诊断和治疗方法。方法 :对 2 9例骨盆骨折后ED患者采用Rigiscan阴茎硬度监测、彩色多普勒超声等检查来分析出现ED的原因 ,同时对几种治疗方法进行比较。结果 :2 9例中心因性ED1 例 ,... 目的 :探讨骨盆骨折后阴茎勃起功能障碍 (ED)的原因及诊断和治疗方法。方法 :对 2 9例骨盆骨折后ED患者采用Rigiscan阴茎硬度监测、彩色多普勒超声等检查来分析出现ED的原因 ,同时对几种治疗方法进行比较。结果 :2 9例中心因性ED1 例 ,血管性ED 7例 (静脉性 3例 ,动脉性 4例 ) ,神经源性ED 1 5例 ,混合性ED 6例。2 3例治疗有效 ,其中服用万艾可有效的 2例 ,使用前列腺素E1 (PGE1 )自行阴茎注射的 1 5例 ,使用前列腺素E1 软膏(Befar)的 5例 ,行腹壁下动脉与阴茎背动脉吻合手术 1例。结论 :后尿道部位支配阴茎的神经受损是骨盆骨折后出现ED的主要原因。PGE1 展开更多
关键词 ED1 阴茎 骨盆骨折 诊断 治疗 PGE1 勃起功能障碍 前列腺素E1 神经 软膏 动脉
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应用实时硬度监测结合多普勒超声诊断勃起功能障碍 被引量:2
4
作者 汤育新 刘志中 +3 位作者 蒋先镇 文甲明 陈厚仰 何乐业 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期81-84,共4页
目的:探讨前列腺素E1(PGE1)阴茎海绵体注射后实时阴茎硬度检查仪(Rigiscan)结合多普勒超声技术诊断勃起功能障碍(ED)的价值。方法:1998年1月至2007年12月间的1392例ED患者,使用PGE1阴茎海绵体注射,Rigiscan连续记录1h,观察阴茎勃起情况... 目的:探讨前列腺素E1(PGE1)阴茎海绵体注射后实时阴茎硬度检查仪(Rigiscan)结合多普勒超声技术诊断勃起功能障碍(ED)的价值。方法:1998年1月至2007年12月间的1392例ED患者,使用PGE1阴茎海绵体注射,Rigiscan连续记录1h,观察阴茎勃起情况。使用阴茎彩色超声诊断仪检测阴茎海绵体阴茎深动脉,测量血流参数。结果:1392例患者中阳性反应者1039例,阴性反应者353例。阳性反应者中,PGE1注射剂量为10μg663例,20μg265例,30μg97例,60μg14例,分别检出血管功能障碍89(13.4%)、39(14.7%)、41(42.3%)及10(71.4%)例。Rigiscan检查阴性者血管性ED267例(75.6%)。不同剂量PGE1激发勃起与血管功能障碍比率比较有统计学意义(P<0.001)。结论:前列腺素E1诱导阴茎勃起安全有效。药物激发勃起时,所需药物剂量越大,血管功能障碍的检测率越高。实时硬度监测结合多普勒超声检查能提高血管性ED的诊断准确率。 展开更多
关键词 勃起功能障碍 前列腺素E1 注射 RIGISCAN 多普勒超声
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泌尿系结石术后输尿管支架附壁结石形成的危险因素分析
5
作者 区硕强 吴业泽 +2 位作者 李冠军 张楚龙 汤育新 《中文科技期刊数据库(引文版)医药卫生》 2024年第8期0067-0070,共4页
探讨泌尿系结石术后输尿管支架附壁结石形成的危险因素。方法 选取2022年01月-2023年12月本院就诊的泌尿系结石术后患者50例作为研究对象,收集所有患者临床资料,对患者输尿管支架附壁结石形成情况进行检查,采用单因素、多因素Logistic... 探讨泌尿系结石术后输尿管支架附壁结石形成的危险因素。方法 选取2022年01月-2023年12月本院就诊的泌尿系结石术后患者50例作为研究对象,收集所有患者临床资料,对患者输尿管支架附壁结石形成情况进行检查,采用单因素、多因素Logistic回归分析导致输尿管支架附壁结石形成的影响因素。结果 由单因素分析显示,附壁结石组当中高尿酸血症(血尿酸男>428μmol/L、女>357μmol/L)、蛋白尿、尿红细胞、尿白细胞及尿结晶阳性、双J管留置时间>4周者所占比例高于无附壁结石组(P<0.05);经多因素分析后发现,高尿酸血症、蛋白尿、双J管留置时间>4周是泌尿系结石术后输尿管支架附壁结石形成的独立危险因素。结论 泌尿系结石术后输尿管支架附壁结石形成的因素与高尿酸血症、蛋白尿、留置时间>4周有关。 展开更多
关键词 泌尿系结石 输尿管支架 附壁结石
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应用前列腺素E_1治疗勃起功能障碍176例 被引量:3
6
作者 汤育新 蒋先镇 《湖南医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第4期359-360,共2页
目的 :探讨前列腺素E1 (PGE1 )注射治疗勃起功能障碍 (ED)的疗效。方法 :应用Rigiscan检查筛选出ED患者 176例 ,采用前列腺素E1 ,自行阴茎海绵体注射治疗 ,观察临床疗效。结果 :前列腺素E1 阴茎海绵体注射可使74 .8%的患者性生活得到明... 目的 :探讨前列腺素E1 (PGE1 )注射治疗勃起功能障碍 (ED)的疗效。方法 :应用Rigiscan检查筛选出ED患者 176例 ,采用前列腺素E1 ,自行阴茎海绵体注射治疗 ,观察临床疗效。结果 :前列腺素E1 阴茎海绵体注射可使74 .8%的患者性生活得到明显改善 ;2 3.9%的患者注射药物后感阴茎轻微胀痛 ;未发现异常勃起及海绵体纤维化等副作用。结论 :前列腺素E1 是治疗ED患者的一种安全有效和副作用小的药物 ,Rigiscan能帮助确定PGE1 的注射剂量。 展开更多
关键词 前列腺素E1 治疗 勃起功能障碍
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一氧化氮与良性前列腺增生症 被引量:2
7
作者 汤育新 《国外医学(泌尿系统分册)》 1999年第2期57-59,共3页
本文综述了一氧化氮(NitricOxideNO)、一氧化氮合酶(NitricOxideSynthaseNOS)在良性前列腺增生症(BenignProstaticHypertrophyBPH)所致膀胱出口梗阻(Blad... 本文综述了一氧化氮(NitricOxideNO)、一氧化氮合酶(NitricOxideSynthaseNOS)在良性前列腺增生症(BenignProstaticHypertrophyBPH)所致膀胱出口梗阻(BladderOutletObstruc-tion,BOO)中的研究进展,BPH中NOS活性的变化导致平滑肌张力的变化可能是临床上出现膀胱出口梗阻症状的原因之一。 展开更多
关键词 一氧化氮 一氧化氮合酶 前列腺增生
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多沙唑嗪通过睾丸肾素-血管紧张素系统相关机制显著降低大鼠体内血清睾酮水平
8
作者 汤育新 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2008年第1期93-93,共1页
关键词 睾丸间质细胞 血清睾酮水平 肾素-血管紧张素系统 多沙唑嗪 高血压模型 体内 大鼠 关机
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物理治疗女性性功能障碍的疗效 被引量:14
9
作者 周艳华 李旭红 +3 位作者 孙绍丹 严文广 汤育新 向亚利 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1236-1240,共5页
目的:探讨手法联合电刺激和生物反馈治疗女性性功能障碍的疗效。方法:选取2014年1月至2015年12月在中南大学湘雅三医院康复科门诊就诊的72例女性患者,均诊断为产后性功能障碍,按照数字法随机分为A,B,C 3组,每组24名。A组进行手法治疗,B... 目的:探讨手法联合电刺激和生物反馈治疗女性性功能障碍的疗效。方法:选取2014年1月至2015年12月在中南大学湘雅三医院康复科门诊就诊的72例女性患者,均诊断为产后性功能障碍,按照数字法随机分为A,B,C 3组,每组24名。A组进行手法治疗,B组进行电刺激和生物反馈治疗,C组进行手法联合电刺激和生物反馈治疗。检测3组患者盆底肌肌电位及I,II类肌纤维肌力,并采用问卷调查的方法调查患者治疗前后性生活次数及性高潮次数,比较3组患者治疗前后盆底肌肉功能及性功能客观指标的评分。治疗时间周期为1个月,在治疗结束1个月后进行随访。结果:与A,B两组比较,C组患者盆底电生理指标肌力和肌电位均较高(P<0.05);并且性功能改善情况更优(P<0.05)。结论:对于产后性功能障碍患者,手法治疗联合电刺激和生物反馈能有效促进产后女性性功能障碍的恢复,改善患者性生活质量,值得在临床上推广。 展开更多
关键词 女性性功能障碍 电刺激和生物反馈治疗 手法治疗
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291例睾丸切除术病因分析 被引量:4
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作者 龙智 何乐业 +6 位作者 汤育新 蒋先镇 王津伟 陈文航 张一川 杨驰 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期615-618,共4页
目的:探讨睾丸切除的病因,以及不同年龄和时间段的病因构成比。方法:回顾性分析1993年3月至2014年10月收治的291例睾丸切除患者的病因,比较不同年龄段和不同时间段的病因构成比及其顺位。结果:0~25岁阶段以睾丸扭转坏死(45.8%)、... 目的:探讨睾丸切除的病因,以及不同年龄和时间段的病因构成比。方法:回顾性分析1993年3月至2014年10月收治的291例睾丸切除患者的病因,比较不同年龄段和不同时间段的病因构成比及其顺位。结果:0~25岁阶段以睾丸扭转坏死(45.8%)、隐睾(32.5%)和睾丸肿瘤(16.9%)为主;26~50岁阶段病因以睾丸肿瘤(42.4%)、隐睾(25.9%)和结核(10.6%)为主;51~75岁和〉75岁的年龄组中,前列腺癌是最主要的病因,分别为77.6%和84.0%,睾丸肿瘤(10.2%)也是51~75岁年龄段不容忽视的病因。1993~2009年的病因构成比变化不大,前列腺癌、睾丸肿瘤、隐睾、睾丸扭转坏死分别是导致患者睾丸切除的前4位病因;但2010~2014年睾丸肿瘤上升为第1位,前列腺癌下降到第4位。结论:不同年龄段患者接受睾丸切除的病因有明显的差异。近5年来前列腺癌患者接受去势手术的比例显著减少,可能与社会整体医疗保障水平的提高有关。 展开更多
关键词 睾丸切除术 病因 睾丸肿瘤 隐睾 结核 睾丸扭转坏死 前列腺癌 年龄
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人睾丸特异表达基因TDRG1单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:5
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作者 文甲明 蒋先镇 +3 位作者 汤育新 阳建福 陈厚仰 刘志中 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期230-235,共6页
目的:构建原核质粒表达TDRG1重组蛋白,制备其单克隆抗体(mAb)并鉴定其生物学特性。方法:用逆转录聚合酶链反应法从成人睾丸组织中扩增TDRG1编码序列,将其克隆到pET21原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)内进行诱导表达TDRG1重组蛋白。以... 目的:构建原核质粒表达TDRG1重组蛋白,制备其单克隆抗体(mAb)并鉴定其生物学特性。方法:用逆转录聚合酶链反应法从成人睾丸组织中扩增TDRG1编码序列,将其克隆到pET21原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)内进行诱导表达TDRG1重组蛋白。以纯化后的重组蛋白免疫BALB/C小鼠,利用杂交瘤细胞融合技术制备单克隆抗体(mAb)。ELISA法检测杂交瘤细胞分泌mAb的效价和类型,Western印迹和免疫组织化学染色鉴定mAb的特异性。结果:成功构建了pET21/TDRG1原核表达质粒并获得纯度较高的重组蛋白。筛选出2株能稳定分泌抗TDRG1的单克隆抗体杂交瘤细胞系,其效价比高达1∶1.6×106,免疫球蛋白类型均为IgG1类。Western印迹和免疫组织化学染色显示该mAb能特异结合成人睾丸组织中的TDRG1蛋白。结论:所获得的重组TDRG1蛋白纯度高,免疫抗原性强,并成功制备了抗TDRG1的单克隆抗体。 展开更多
关键词 睾丸基因 TDRG1重组蛋白 单克隆抗体
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利用电子差异展示方法克隆人类睾丸特异性新基因 被引量:3
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作者 尹光明 阳建福 +5 位作者 蒋先镇 汤育新 何乐业 蒋志强 钟狂飙 曾青 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期631-634,共4页
目的克隆一个新的人睾丸特异性基因。方法运用电子差异展示方法筛选人类睾丸特异表达新基因,获得有差异显示的代表新基因的克隆重叠群,挑选其中一个克隆重叠群Hs.180197进行多组织RT-PCR验证该重叠群在人睾丸中的表达。然后从包含该重... 目的克隆一个新的人睾丸特异性基因。方法运用电子差异展示方法筛选人类睾丸特异表达新基因,获得有差异显示的代表新基因的克隆重叠群,挑选其中一个克隆重叠群Hs.180197进行多组织RT-PCR验证该重叠群在人睾丸中的表达。然后从包含该重叠群的IMAGE克隆出发,采用生物信息学方法克隆一个人类新基因的全长cDNA序列。结果新基因全长1197bp,开放阅读框为504~806bp,定位于6p21.1-p21.2,编码由100个氨基酸组成,相对分子质量为10000,等电点为6.81的一个蛋白,该蛋白与已知蛋白无同源性。克隆实验验证该基因阅读框完全正确,推测其可能与精子生成相关,暂命名为TDRG1(testis development related gene1),GenBank登录号为DQ168992。结论电子差异展示方法与实验验证相结合用于发现人类功能新基因是行之有效的。 展开更多
关键词 基因克隆 电子差异展示 逆转录聚合酶反应 睾丸 组织特异表达
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男性泌尿生殖道支原体感染及药敏分析 被引量:5
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作者 伍拓 汤育新 +1 位作者 吴萍辉 谌安君 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第5期104-106,共3页
探讨男性尿道炎患者支原体感染率及其敏感性,为临床治疗支原体感染导致的疾病提供合理用药的参考依据。采用海泰生物的支原体分离鉴定试剂盒,取前列腺液或尿道分泌物,对1 116份疑为泌尿生殖系统感染的男性患者进行了支原体检测和抗生素... 探讨男性尿道炎患者支原体感染率及其敏感性,为临床治疗支原体感染导致的疾病提供合理用药的参考依据。采用海泰生物的支原体分离鉴定试剂盒,取前列腺液或尿道分泌物,对1 116份疑为泌尿生殖系统感染的男性患者进行了支原体检测和抗生素敏感性检测。1 116份男性患者标本中共分离出274株支原体,242株Uu对美满霉素、强力霉素、环丙沙星、司帕沙星、氧氟沙星、阿齐霉素、罗红霉素、交沙霉素、克拉霉素、壮观霉素的敏感率分别为95.1%、94.6%、17%、70.3%、31.1%、76%、77.7%、92.6%、83.5%、43.8%。30株Uu+Mh对美满霉素、强力霉素、环丙沙星、司帕沙星、氧氟沙星、阿齐霉素、罗红霉素、交沙霉素、克拉霉素、壮观霉素的敏感率分别为70%、66.7%、20%、40.1%、26.8%、23.4%、23.4%、50%、23.3%、20%。泌尿生殖道支原体的耐药性监测对指导临床治疗具有重要意义,可以根据药敏结果指导临床合理使用抗菌药物。 展开更多
关键词 支原体感染 解脲脲原体 人型支原体 耐药性
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组织芯片技术检测人睾丸基因TDRG1在睾丸肿瘤组织中的表达 被引量:2
14
作者 陈厚仰 文甲明 +5 位作者 肖小旺 李东杰 郭小亮 龙智 戴英波 汤育新 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期883-886,共4页
目的:探讨人睾丸基因TDRG1在睾丸肿瘤组织中的蛋白表达及其病理学意义。方法:运用组织芯片技术、免疫组化法检测人睾丸特异基因TDRG1在睾丸肿瘤组织和正常睾丸组织中的表达。结果:15例正常人睾丸对照组中11例(73.3%)TDRG1蛋白表达为阳性... 目的:探讨人睾丸基因TDRG1在睾丸肿瘤组织中的蛋白表达及其病理学意义。方法:运用组织芯片技术、免疫组化法检测人睾丸特异基因TDRG1在睾丸肿瘤组织和正常睾丸组织中的表达。结果:15例正常人睾丸对照组中11例(73.3%)TDRG1蛋白表达为阳性;26例精原细胞瘤中7例(26.9%)TDRG1蛋白表达为阳性,7例畸胎瘤中4例(57.1%)TDRG1蛋白表达为阳性。而12例胚胎癌中10例(83.3%)TDRG1蛋白表达为阳性,10例卵黄囊瘤中8例(80.0%)TDRG1蛋白表达为阳性。精原细胞瘤实验组与正常人睾丸对照组相比较,两组间具有极显著性差异(P<0.01)。畸胎瘤实验组与正常人睾丸对照组相比较,两组间具有显著性差异(P<0.05)。而胚胎癌组和卵黄囊瘤组与正常人睾丸对照组相比较,没有显著性差异(P>0.05)。结论:TDRG1蛋白在精原细胞瘤和畸胎瘤的表达水平较正常对照睾丸组织显著降低,TDRG1可能为候选的抑癌基因。 展开更多
关键词 睾丸肿瘤 TDRG1 组织芯片 免疫组织化学
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长段外伤性球尿道狭窄行尿道内切开术的有效性和注意事项 被引量:2
15
作者 谭靖 曾青 +4 位作者 蒋先镇 何乐业 汤育新 蒋志强 汪金荣 《中国内镜杂志》 CSCD 北大核心 2013年第9期897-901,共5页
目的回顾性分析5年中应用球尿道狭窄段内切开术和球尿道狭窄段切除尿道重建术治疗狭窄段〉1cm的外伤性球尿道狭窄病例,评估应用尿道内切开术处理长段球尿道狭窄的有效性。方法收治的86例外伤性球尿道狭窄患者,狭窄段长1~3cm。28例行... 目的回顾性分析5年中应用球尿道狭窄段内切开术和球尿道狭窄段切除尿道重建术治疗狭窄段〉1cm的外伤性球尿道狭窄病例,评估应用尿道内切开术处理长段球尿道狭窄的有效性。方法收治的86例外伤性球尿道狭窄患者,狭窄段长1~3cm。28例行球尿道狭窄段切除尿道重建术,4例术后行持续尿道扩张;58例行球尿道狭窄内切开术,33例术后行持续尿道扩张。所有患者术后通过尿流率检测、尿道狭窄复发等评估手术效果。结果28例患者行球尿道狭窄段切除尿道重建术,1例尿道狭窄复发;58例患者行球尿道狭窄内切开术,16例尿道狭窄复发。术后坚持持续尿道扩张能明显降低尿道内切开术术后尿道狭窄复发的风险。结论尿道内切开术结合术后持续尿道扩张能成为治疗长段外伤性球尿道狭窄的有效手术方式之一。 展开更多
关键词 尿道内切开术 尿道狭窄 尿道扩张
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勃起功能障碍患者阴茎海绵体血浆转化生长因子β1水平变化 被引量:2
16
作者 蒋先镇 +1 位作者 汤育新 伍拓 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期72-73,共2页
关键词 勃起功能障碍 转化生长因子Β1 纤维化
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逆行Holep与传统Holep治疗高危大体积前列腺增生效果比较 被引量:5
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作者 李树人 汤育新 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第18期75-77,共3页
目的比较逆行经尿道前列腺钬激光剜除术(Holep)与传统Hoelp两种方法治疗高危大体积良性前列腺增生(BPH)的效果。方法将202例高危大体积BPH患者随机分为A组102例和B组100例,分别采用传统Holep、逆行Holep治疗,记录两组的手术基本情况及... 目的比较逆行经尿道前列腺钬激光剜除术(Holep)与传统Hoelp两种方法治疗高危大体积良性前列腺增生(BPH)的效果。方法将202例高危大体积BPH患者随机分为A组102例和B组100例,分别采用传统Holep、逆行Holep治疗,记录两组的手术基本情况及并发症,术前及术后3个月行国际前列腺症状评分(IPSS)、生活质量指数(QOL)评分并检查残余尿量(PVR)、最大尿流率(Qmax)。结果两组术后膀胱冲洗时间、留置导尿时间、住院时间及并发症比较均无统计学意义,B组手术时间、术中出血量小于A组(P均<0.05)。与术前比较,术后3个月两组IPSS、QOL评分、PVR降低而Qmax升高(P均<0.05),两组术前术后各指标比较均无统计学意义。结论逆行与传统Holep均可有效治疗高危大体积BPH,但逆行Holep术中出血量少、手术时间短、安全性高。 展开更多
关键词 前列腺增生 大体积 前列腺钬激光剜除 逆行手术 高危人群
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构建p53双荧光报告载体及其功能验证 被引量:1
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作者 谭靖 蒋先镇 +5 位作者 何乐业 蒋志强 汤育新 姚鲲 陈兵海 薛娟 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1135-1140,共6页
目的:构建p53双荧光报告载体,验证其能否模拟野生型p53的生物学活性并适用于高通量筛选。方法:用PCR在p53和萤火虫荧光素酶的开放阅读框两端引入酶切位点并移除p53的终止密码和萤火虫荧光素酶的起始密码,然后将二者插入到由内部核糖体... 目的:构建p53双荧光报告载体,验证其能否模拟野生型p53的生物学活性并适用于高通量筛选。方法:用PCR在p53和萤火虫荧光素酶的开放阅读框两端引入酶切位点并移除p53的终止密码和萤火虫荧光素酶的起始密码,然后将二者插入到由内部核糖体进入位点引导的海肾荧光素酶的上游,从而构建出一个能表达P53萤火虫荧光素融合蛋白的p53FL/IRES/RL双荧光报告载体。转染该报告载体后,检测被表达的P53荧光素融合蛋白是否被MDM2降解、该融合蛋白的亚细胞定位和它对p53特异性启动子的诱导。结果:成功构建出p53双荧光报告载体。该载体在宿主细胞内表达的P53荧光素融合蛋白能被MDM2降解;主要分布于细胞核;具有野生型p53的转录活性。结论:新构建的p53双荧光报告载体p53FL/IRES/RL能有效模拟野生型p53的功能,适用于高通量筛选调节P53蛋白含量的药物、基因或化合物。 展开更多
关键词 高通量筛选 p53 野生型 双荧光载体 转染
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iNOS基因转染对雄激素非依赖性前列腺癌细胞DU145生长的影响 被引量:1
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作者 陈毅夫 蒋先镇 +2 位作者 何乐业 汤育新 龙智 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2012年第8期697-702,共6页
目的:观察诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因转染对雄激素非依赖性前列腺癌细胞DU145生物学行为的影响。方法:将iNOS基因转染到DU145细胞并筛选出阳性细胞进行扩增,并设空载体组和对照组。观察细胞的形态变化,MTT法绘制生长曲线;流式细胞术... 目的:观察诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因转染对雄激素非依赖性前列腺癌细胞DU145生物学行为的影响。方法:将iNOS基因转染到DU145细胞并筛选出阳性细胞进行扩增,并设空载体组和对照组。观察细胞的形态变化,MTT法绘制生长曲线;流式细胞术检测细胞凋亡率;了解NOS抑制剂对转染细胞的影响。结果:转染iNOS后,DU145细胞分泌的NO[(272.50±15.82)μmol/L]显著高于空载体组[(122.00±18.93)μmol/L]和对照组[(121.00±6.98)μmol/L](P<0.05)。流式细胞术检测结果提示转染iNOS组细胞凋亡率[(42.78±2.01)%]明显高于空载体组[(30.65±1.46)%]和对照组[(28.96±1.50)%](P<0.05)。MTT测定结果提示转染组细胞生长较空载体组和对照组减慢(P<0.05),NOS抑制剂可以加快其生长,但无显著性差异(P>0.05)。结论:iNOS基因转染可以使DU145细胞分泌较高浓度的NO,诱导细胞凋亡,抑制细胞生长,为晚期雄激素非依赖性前列腺癌的基因治疗提供一个有效的靶点。 展开更多
关键词 雄激素非依赖性前列腺癌 诱导型一氧化氮 基因转染 细胞增殖
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人睾丸特异表达基因TDRG1 shRNA表达载体的构建及其表达 被引量:1
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作者 彭圣林 阳建福 +6 位作者 陈厚仰 郭小亮 李东杰 周华波 甘宇 蒋先镇 汤育新 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期979-982,共4页
目的:构建人睾丸基因TDRG1的shRNA表达质粒,并研究其在NTERA-2细胞中的表达。方法:设计合成有短发夹结构靶位TDRG1基因的寡核苷酸,经退火成双链,克隆至载体pGPU6/GFP/Neo中,构建TDRG1shRNA表达载体,得到重组质粒TDRG1-shRNA486,TDRG1-sh... 目的:构建人睾丸基因TDRG1的shRNA表达质粒,并研究其在NTERA-2细胞中的表达。方法:设计合成有短发夹结构靶位TDRG1基因的寡核苷酸,经退火成双链,克隆至载体pGPU6/GFP/Neo中,构建TDRG1shRNA表达载体,得到重组质粒TDRG1-shRNA486,TDRG1-shRNA738,TDRG1-shRNA921和一个阴性对照,使用Lipofectamine 2000转染shRNA至NTERA-2细胞,应用RT-PCR法检测转染后NTERA-2细胞TDRG1 mRNA的表达水平。结果:经测序证实,插入的DNA片段的序列与设计序列完全一致。同时筛选到转染TDRG1-shRNA486的NTERA-2细胞TDRG1基因的mRNA表达水平明显抑制。结论:成功构建了人类睾丸基因TDRG1的shRNA表达载体,TDRG1-shRNA在NTERA-2细胞内成功表达。 展开更多
关键词 睾丸基因 TDRG1 RNAI SHRNA NTERA-2细胞
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