基于Oncomine数据库探讨METTL3在胃癌中的意义

目的 探讨METTL3在胃癌中的表达及意义。方法 收集Oncomine数据库中关于METTL3的数据信息,对其在胃癌中的作用进行统计分析。利用Kaplan-Meier Plotter进行患者生存周期分析。结果 经过筛选,涉及mRNA METTL3在正常胃组织和胃癌组织表达差异的研究共4项(其中按照病理分为9项,共包含346例组织样本),与对照组相比,METTL3在346例胃癌组织中高表达(P<0.05)。METTL3表达量与胃癌总体生存呈负相关,METTL3表达水平越高则患者总体生存率越低(P<0.05)。根据胃癌Lauren分型探讨,发现肠型胃癌以及混合型胃癌中METTL3的表达情况与生存时间之间关系不大(P>0.05)。弥漫型胃癌中,METTL3的表达水平与预后具有相关性,且METTL3表达水平高的患者生存更获益(P<0.05)。针对HER2阳性的胃癌,METTL3的表达水平与胃癌患者预后呈负相关(P<0.05)。结论 mRNA METTL3在胃癌组织中高表达,且与胃癌预后有关,可能为肿瘤药物的开发提供重要理论依据,但需要更多的研究进行探讨。

榄香烯乳对大肠癌HCT-116细胞侵袭及miR-155表达的影响

目的观察榄香烯乳对人大肠癌细胞迁移、侵袭的影响,并探讨其可能机制。方法采用不同浓度的榄香烯乳处理人大肠癌HCT116细胞后,以划痕试验方法检测癌细胞迁移能力,以Transwell方法检测癌细胞侵袭能力,采用荧光实时定量PCR方法检测癌细胞miR-155 mRNA水平。结果人大肠癌HCT116细胞经榄香烯乳处理后,迁移和侵袭力均明显下降,且呈剂量依赖性(P<0.05)。榄香烯乳处理组miR-155 mRNA水平明显下调,且呈浓度依赖性。结论榄香烯乳可降低人大肠癌细胞侵袭能力,下调miR-155 mRNA表达是其重要机制之一。

表没食子儿茶素没食子酸醋对人胃癌细胞迁移、袭和FoxM1基因表达的影响

目的观察表没食子儿茶素没食子酸醋(表没食子儿茶素没食子酸醋,EGCG)对人胃癌细胞迁移、侵袭的影响,并探讨其可能机制。方法采用不同浓度的EGCG处理人胃癌BGC823细胞后,以划痕试验方法检测癌细胞迁移能力,以Transwell方法检测癌细胞侵袭能力,采用蛋白质印迹方法检测FoxM1基因蛋白水平变化。结果人胃癌BGC823细胞经EGCG处理后,迁移和侵袭能力均明显下降,且呈剂量依赖性(P<0.01)。EGCG处理组FoxM1基因蛋白水平明显下调,且呈浓度依赖性。结论 EGCG可降低人胃癌细胞侵袭能力,下调FoxM1基因表达,是其重要机制之一。

RNA干扰假基因Cripto-3表达对大肠癌细胞增殖和侵袭的影响

目的:探讨RNA干扰下调假基因Cripto-3(Cr-3)对人大肠癌细胞SW480增殖和侵袭的影响。方法:将大肠癌细胞随机分为5组:空白对照组,空载对照组,siRNA转染组(5 nmol/L组、10 nmol/L和20 nmol/L组)。将Cr-3小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染人大肠癌SW480细胞后,采用实时荧光定量PCR检测Cr-3表达水平;分别采用平板克隆形成实验和Transwell法检测大肠癌细胞的增殖和侵袭能力。结果:与空白对照组和空载对照组比较,siRNA转染组Cr-3表达水平均明显下降,且呈浓度依赖性(P<0.05),癌细胞克隆形成和穿过滤膜的细胞均明显减少,且与浓度相关(P<0.05)。结论:假基因Cr-3在大肠癌细胞增殖侵袭中起着重要的作用,可能是大肠癌诊疗中的一个重要靶点。

替吉奥联合紫杉醇脂质体与替吉奥联合紫杉醇在晚期胃癌化疗中疗效及不良反应观察

目的:观察采用替吉奥联合紫杉醇与替吉奥联合紫杉醇脂质体联合方案在晚期胃癌化疗中疗效及不良反应的对比观察。方法:选择晚期胃癌患者40例,分为采用替吉奥联合紫杉醇脂质体方案的治疗组与采用替吉奥联合紫杉醇的对照组。3周为1个周期,至少完成2个周期,按RECIST1.1标准评价客观疗效,按NCI CTC3.0毒性评价标准不良反应。结果:所有患者均可评价疗效,无治疗相关性死亡事件发生,两组治疗有效率差异无统计学意义(P>0.05)。消化道反应、血液学毒性、过敏、外周神经毒性、肝肾功能损害等不良反应差异无统计学意义(P>0.05),但是对照组患者的脱发、肌肉及关节痛的发病率明显高于治疗组患者(P<0.05)。结论:替吉奥联合紫杉醇脂质体与替吉奥联合普通紫杉醇治疗晚期胃癌均取得了满意的临床疗效,两种治疗方案效果差异无统计学意义(P>0.05),但前者能够降低患者不良反应发病率,减轻化疗反应。

RNA干扰miR-106a对前列腺癌细胞增殖和侵袭的影响

探讨miRNA-106a(miR-106a)对前列腺癌细胞增殖和侵袭的影响。方法 以人前列腺癌PC-3细胞为模型,应用miRNA-106a小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染处理后,采用荧光实时定量PCR检测miR-106a水平,采用软琼脂集落培养试验检测癌细胞的锚着不依赖性增殖能力,采用Transwell方法检测癌细胞侵袭能力。结果 miR-106a siRNA转染组癌细胞miR-106ab表达水平明显被抑制,且与时间和浓度相关。与空白对照组比较,miR-106a siRNA转染组细胞所形成的软琼脂集落数和穿膜细胞数明显减少,且呈浓度依赖性。结论 miR-106a siRNA转染可明显下调前列腺癌细胞的增殖和恶性侵袭能力。

双极晶体管发射结电流趋热效应及其对结温测量的影响

研究了当双极晶体管芯片有源区出现热斑时流经其发射结的电流的趋热行为及其对用ΔＶＢＥ法测量结温的影响，提出了一种快速判定器件有源区温度分布均匀性的办法。

Studies on Lead Tungstate Crystal

The growth of lead tungstate(PWO)single crystals and their luminescence properties such as light yield,scintillation decay time,and transmittance were reported.The colourless PWO single crystal has been obtained by using the presyntheses powder.Ba,Nb,and Mg ions were doped in the crystals and the Ba-doped crystal has a relatively short decay time.Annealed crystal was found having a better transmission spectrum than that of unannealed one.

国内外急诊患者转诊前安宁疗护需求筛查工具的研究进展

使用筛查工具及时评估急诊患者的安宁疗护需求,可为患者转诊提供决策依据,有助于患者及时接受安宁疗护服务。该文对国内外适用于急诊患者转诊前的安宁疗护需求筛查工具进行综述,描述其研制方法、评分标准和应用现状等内容,并比较分析现有筛查工具的特点及不足,旨在为相关工具的本土化开发及应用提供参考。

RNA干扰下调FoxM1基因表达对胰腺癌细胞化疗敏感性的影响

目的探讨RNA干扰下调叉头转录因子M1（Forkheadboxprotein M1，FoxMl）基因小干扰RNA（smallinterferingRNA，siRNA）对胰腺癌细胞化疗药物敏感性的影响及分子机制。方法设计合成3个FoxM1siRNA，转染人胰腺癌Panc-1细胞后采用定量PCR方法筛选下调FoxM1mRNA效果最好的siRNA；然后以该siRNA转染Panc-1细胞后，分别以实时定量PCR检测各组细胞FoxM1mRNA表达情况；以不同浓度siRNA转染胰腺癌细胞后，分别以MTT法检测吉西他滨（20nM，Gemcitabine）对各组细胞生长和化疗敏感性的影响；以蛋白质印迹方法检测Akt磷酸化情况。结果3个siRNA均明显下调FoxM1mRNA水平，以S3效果最好。MTT结果显示，Con-A＋Gem组、Con—B＋Gem组、siRNA（3．125nM）＋GemsiRNA、siRNA（6．25nM）＋Gem、siRNA（12．5nM）＋Gem组抑制率分别为17．78％、17．56％、35．39％、52．81％及70．98％。蛋白质印迹检测发现，siRNA转染组Akt磷酸化水平明显下调。结论FoxM1基因siRNA可促进胰腺癌细胞化疗敏感性，通过下调Akt磷酸化水平可能是其重要机制之一，但其内在的分子机制尚需进一步探讨。

超顺磁性纳米榄香烯对大肠癌HCT-116细胞增殖、侵袭及微小RNA-155表达的影响

目的 观察超顺磁性纳米榄香烯对人大肠癌细胞增殖和侵袭的影响,并探讨其可能机制.方法 制备超顺磁性纳米榄香烯,采用不同浓度的超顺磁性纳米榄香烯处理人大肠癌HCT116细胞后,以噻唑蓝（MTT）法检测癌细胞增殖,以Transwell方法检测癌细胞侵袭能力,采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）方法检测癌细胞微小RNA（miR）-155 mRNA水平.结果 超顺磁性纳米榄香烯对人大肠癌HCT116细胞增殖具有一定的抑制作用.在2.5～25.0 mg/L浓度范围内,超顺磁性纳米榄香烯对癌细胞的抑制与浓度呈正相关（r =0.685）;Transewell结果显示,空白对照组、不同浓度（5、10、20 mg/L）超顺磁性纳米榄香烯处理组细胞穿过滤膜的细胞分别为（44.8±1.5）、（32.2±1.3）、（18.2±1.5）和（8.6±1.2）个.FQ-PCR结果显示,与空白对照组比较,超顺磁性纳米榄香烯组miR-155 mRNA水平明显下调,且呈浓度依赖性（P＜0.01）.结论 超顺磁性纳米榄香烯可降低人大肠癌细胞增殖、侵袭能力,下调miR-155是其重要机制之一.

榄香烯超顺磁性隐形纳米脂质体对肿瘤Hep-2细胞克隆形成和侵袭的影响

目的 观察榄香烯超顺磁性隐形纳米脂质体对人肿瘤细胞克隆形成和侵袭的影响.方法 制备榄香烯超顺磁性隐形纳米脂质体,采用不同浓度的榄香烯超顺磁性隐形纳米脂质体处理人喉癌Hep-2细胞后,以平板克隆形成方法检测癌细胞克隆形成,以Transwell方法检测肿瘤细胞侵袭能力.结果 平板克隆实验结果显示,对照组、不同浓度（2.5、5.0、10.0 mg/L）榄香烯超顺磁性隐形纳米脂质体处理组克隆形成数分别为（102±8）、（82 ±5）、（57±6）和（25 ±3）个.Transewell结果显示,空白对照组、不同浓度（2.5、5.0、10.0 mg/L）榄香烯超顺磁性隐形纳米脂质体处理组细胞穿过滤膜的细胞分别为（123 ±8）、（89±7）、（60±6）和（35 ±5）个.结论 榄香烯超顺磁性隐形纳米脂质体可抑制人喉癌细胞克隆形成和侵袭,具有潜在的应用价值.

树突状细胞联合细胞因子诱导的杀伤细胞对人大肠癌SW620细胞增殖和端粒酶活性的影响

目的 探讨细胞因子从大肠癌癌患者外周血贴壁单个核细胞（PBMCs）诱导的树突状细胞（DC）与杀伤细胞（CIK）对人大肠癌SW620细胞增殖的作用及分子机制.方法 用大肠癌患者大肠癌组织裂解物（肿瘤抗原）致敏经粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）、肿瘤坏死因子（TNF）-α及白细胞介素（IL）-4等诱导PBMC产生的DC.用干扰素（IFN）-γ、IL-2和人CD3单克隆抗体（hCD3mAb）等诱导该PBMC的悬浮细胞产生CIK细胞.用6孔板将DC-CIK细胞与SW620细胞在同一培养体系内经分别培养24、48、72 h.以噻唑蓝（MTT）法检测癌细胞增殖；以抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）-酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测癌细胞端粒酶活性；采用Western blot法检测人端粒酶逆转录酶（hTERT）蛋白.结果 大肠癌细胞经DC-CIK处理72 h后,空白对照组和DC-CIK-a 、DC-CIK-b组相对增殖率分别为（95.6±2.2）％、（73.5±1.8）％、（51.8±1.6）％；端粒酶活性检测发现,空白对照组24、48、72 h端粒酶活性分别为1.568±0.078、1.535±0.056和1.527±0.039;DC-CIK-a组24、48、72 h端粒酶活性分别为1.356±0.056、1.108±0.039和0.578±0.028；DC-CIK-b组24、48、72 h端粒酶活性分别为1.181 ±0.075、0.718±0.039、0.386±0.036.Westernblot检测发现,与空白对照组比较,DC-CIK-a组和DC-CIK-b组hTERT蛋白水平明显下调.结论 DC-CIK细胞可明显抑制大肠癌细胞增殖；抑制端粒酶活性是其重要机制之一.

RNA干扰下调假基因Cripto-3表达对大肠癌细胞增殖和侵袭的影响

目的 观察小干扰RNA（siRNA）下调假基因Cripto-3（Cr-3）对人大肠癌细胞增殖和侵袭的影响.方法 构建Cr-3 siRNA（S1、S2和S3）,分别以3个siRNA转染大肠癌SW-620细胞后,采用荧光实时定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测筛选出效果最好的siRNA.SW-620细胞分为3组：空白对照组（con-a）、空载质粒对照组（con-b）和Cr-3 siRNA组（siRNA）,其中,siRNA组以Cr-3 siRNA转染处理.用噻唑蓝（MTT）方法检测癌细胞增殖,以Transwell方法检测癌细胞侵袭能力,并作统计学分析.结果 S1、S2和S3均能下调Cr-3 mRNA的表达,有效率分别为83.5％、61.6％和42.8％,说明S1效果最好.以S1转染大肠癌SW620细胞株后,MTT结果显示,72 h con-a、con-b和siRNA组相对增殖率分别为（0.927 ±0.037）％、（0.922 ±0.035）％、（0.663 ±0.018）％ （P ＜0.05）；Transwell结果显示,con-a、con-b和siRNA组穿膜细胞数分别为（38 ±4）、（40±3）和（8±1）个（P＜0.05）.结论 假基因Cr-3在大肠癌细胞增殖侵袭中起着重要的作用；采用RNA干扰下调Cr-3表达可抑制大肠癌细胞增殖和侵袭.

环状RNA circ_0076704下调对人胃癌细胞迁移和侵袭的影响

目的观察下调环状RNA circ_0076704表达对人胃癌细胞迁移侵袭力的影响。方法胃癌BGC823细胞分为3组:circ_0076704小干扰RNA(siRNA)组(circ_0076704-siRNA)、阴性对照小干扰RNA组(Con-B)和空白对照组(Con-A)。其中,胃癌SCG7901细胞siRNA组以circ_0076704-siRNA转染处理。采用荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)检测3组细胞中circ_0076704的mRNA水平,采用划痕试验检测细胞迁移,以Transwell方法检测细胞的侵袭能力。结果与Con-A和Con-B组比较,siRNA组癌细胞细胞circ_0076704 mRNA水平降低。迁移试验结果显示,Con-A、Con-B和siRNA组划痕间距分别为(298±10)、(315±11)、(658±11)μm(P<0.05);Transwell结果显示,Con-A、Con-B和siRNA组穿膜细胞数分别为(125.0±2.5)、(118.0±2.6)和(58.0±1.6)个(P<0.05)。结论circ_0076704在胃癌细胞中高表达,且与癌细胞迁移侵袭相关。

RNA干扰下调人滋养层细胞表面抗原-2基因表达对前列腺细胞侵袭及尿激酶纤溶酶原激活物蛋白的影响

目的 观察人滋养层细胞表面抗原-2（Trop-2）基因对人前列腺细胞侵袭的影响,并探讨其分子机制.方法 采用TROP-2基因小于扰RNA（siRNA）转染处理人前列腺PC-3细胞后,分别采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）和Western blot检测TROP-2基因mRNA和蛋白水平;采用Transwell小室法试验检测癌细胞侵袭能力;采用Western blot法检测癌细胞尿激酶纤溶酶原激活物（uPA）蛋白变化.结果 siRNA转染组细胞TROP-2基因mRNA和蛋白水平明显下调,且呈浓度依赖性（P＜0.01）.siRNA转染组穿过滤膜的细胞数明显下降,且呈浓度依赖性（P＜0.01）.Transwell小室试验结果显示,Con-A、Con-B、siRNA（5nmol/L）、siRNA（10 nmol/L）、siRNA（20 nmol/L）组穿膜细胞数分别为（128.16 ±3.89）、（127.58 ±3.56）、（102.56 ±3.28）、（76.38 ±3.25）和（39.89±3.18）个.Western blot结果显示,TROP-2 siRNA转染组uPA蛋白表达明显下调,且与浓度相关.结论 TROP-2基因在人前列腺癌细胞侵袭中发挥重要的作用,采用siRNA转染可抑制前列腺细胞侵袭,下调uPA表达,是其重要机制之一.

配对相关同源框-1基因过表达对人胰腺癌细胞侵袭及上皮-间充质转化的影响

目的观察配对相关同源框-1（Prrx-1）基因过表达对胰腺癌细胞侵袭及上皮-间充质转化（EMT）的影响。方法培养人正常胰腺导管上皮细胞HPDE6-C7和3株胰腺癌细胞AsPC-1、BxPC-3和CFPAC-1，采用Westernblot方法检测Prrx-1蛋白表达。采用Prrx-1基因过表达慢病毒载体转染胰腺癌BxPC-3细胞，构建高表达Prrx-1基因过表达BxPC-3细胞（简称Prrx-1过表达细胞）后，采用Westernblot方法检测癌细胞Prrx-1蛋白水平；采用显微镜观察癌细胞形态；采用Westernblot方法检测各组癌细胞中上皮标志物E-钙黏蛋白（E—cadherin）和间叶标志物波形蛋白（Vimentin）蛋白；采用Transwell方法观察癌细胞侵袭能力。结果Westernblot检测结果显示：Prrx-1蛋白在HPDE—C7细胞不表达，而在AsPC-1、BxPC-3和CFPAC-1均高表达。选取BxPC-1进一步研究。采用Westernblot方法检测结果显示，与空载对照组比较，Prrx-1过表达组细胞Prrx-1基因蛋白水平明显升高；形态学观察结果显示，Prrx-1基因过表达组细胞出现EMT改变；Westernblot检测结果显示，与空载对照组比较，Prrx-1过表达组细胞E—Cadherin表达下调，Vimentin表达上调；Transwell方法检测发现，空载对照组和Prrx-1过表达组穿膜细胞数分别为（89±5）个和（139±8）个（P〈0．05）。结论Prrx．1过表达可促进人胰腺癌细胞迁移和侵袭能力，其机制可能与促进EMT有关。

RNA干扰下调PLK1基因对恶性黑素瘤细胞侵袭和失巢凋亡的影响

目的探讨RNA干扰技术下调PLK1基因对恶性黑素瘤细胞侵袭的影响和可能机制。方法用PLK1小干扰核糖核酸分子（siRNA）转染人恶性黑素瘤A375细胞后，分别用实时定量PCR和Western印迹法检测PLK1mRNA和蛋白表达，Transwell方法检测细胞侵袭能力，以平板集落形成方法了解癌细胞集落形成情况，分别用琼脂糖凝胶电泳和TUNEL方法检测癌细胞失巢凋亡情况。结果恶性黑素瘤A375细胞经PLK1 siRNA转染后，PLK1mRNA和蛋白表达明显下调；siRNA转染组癌细胞生长明显受到抑制。与空白对照组和脂质体对照组比较，siRNA细胞转染组侵袭性明显下降。失巢凋亡检测发现，琼脂糖凝胶电泳出现明显的梯度图谱。TUNEL结果显示，PLK1 siRNA可诱导恶性黑素瘤A375细胞凋亡，siRNA细胞转染组较空白对照组和脂质体对照组凋亡指数明显升高[3．86％±0．35％（3．125nmol／LsiRNA组），7．35％±0．36％（6．250nmol／LsiRNA组），17．56％±0．38％（12．500nmol/L siRNA组）比1．15％±0．25％和1．18％±0．22％），均P〈0．01]。结论PLK1 siRNA可抑制恶性黑素瘤细胞的侵袭，其机制可能与诱导失巢凋亡有关。

配对相关同源框1蛋白在不同胰腺组织表达及临床意义

目的探讨配对相关同源框1（Prrxl）表达基因在不同胰腺组织的表达及临床意义。方法收集诊断明确的80例胰腺癌组织、10例慢性胰腺炎组织以及8例正常胰腺组织，采用免疫组织化学方法探究Prrxl表达，并分析与胰腺癌临床参数相关性。结果免疫组织化学检测显示，Prrxl在胰腺癌组织中阳性表达为52．5％（42／80）、高于正常胰腺组织的12．5％（1／8）和慢性胰腺炎组织的20．0％（2／10）。进一步分析显示，Prrxl蛋白高表达与胰腺癌患者年龄、肿瘤脉管淋巴管侵犯、淋巴结转移、TNM分期及5年生存率明显相关（P〈0．05），而与患者性别、肿瘤位置、分化程度及肿瘤的浸润深度无明显相关（P〉0．05）。结论Prrxl与胰腺癌侵袭转移明显相关。

假基因Cripto-3 mRNA在人大肠癌组织中的临床意义

目的 探讨假基因Cripto-3（Cr-3）在人大肠癌组织中的临床意义.方法 收集人大肠癌和正常大肠黏膜组织,采用荧光实时定量聚合酶链反应法检测组织中mRNA水平,分析其表达与患者性别、肿瘤发生部位、分化程度、浆膜侵袭、淋巴结转移及Duke＇s分期的相关性,并作统计学处理.结果 在大肠癌组织中Cr-3阳性率为75.0％ （27/36）,在正常大肠黏膜组织中,Cr-3阳性率为0％ （0/36,P＜0.05）.进一步发现Cr-3阳性率分别与浆膜层侵袭、淋巴结转移和Duke＇s分期有关（P＜0.05）;而与患者性别、肿瘤发生部位和分化程度无关（P＞0.05）.结论 假基因Cr-3可能是大肠癌基因诊断和治疗中重要靶点之一.