间接竞争抑制性酶联免疫吸附试验测定豚毒鱼类中河豚毒素的研究

将河豚鱼样品的组织匀浆用０．１％乙酸溶液煮沸２次，合并滤液用乙醚脱脂２次，将水相用０．０５ｍｏｌ／ＬＰＢＳ稀释后（调ｐＨ６．５～７．０）供ＥＬＩＳＡ检测之用。结果表明，本法的最低检出浓度为１．０×１０－３ｍｇ／Ｌ（０．１ｎｇ／检测孔），线性范围为０．０１～１．０ｍｇ／Ｌ，方法的加标回收率为７３．８％～１１７．４％。用传统的小鼠生物试验比较了方法的准确性。测定结果表明，两种方法之间在统计学上无显著性差异（配对ｔ检验，Ｐ＞０．２），并具有良好的相关性（ｒ＝０．９１６）。

抗河豚毒素单克隆抗体的制备及其特性的初步研究

将用合成的匙孔形虫戚血蓝蛋白－甲醛－河豚毒素（ＫＬＨ－ＨＣＨＯ－ＴＴＸ）连接物免疫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系Ｓｐ２／０融合，经３～４次亚克隆，建立了３个稳定分泌抗河豚毒素的杂交瘤细胞株，分别命名为１Ｇ３、４Ｇ３、６Ｄ９。其中１Ｇ３和４Ｇ３分属ＩｇＧ２ｂ亚类，６Ｄ９属ＩｇＧ１亚类。腹水的抗体稀释度为１∶１０５～１：５×１０６。用竞争抑制性酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）测定三种抗体的最低反应浓度为１×１０－３ｍｇ／Ｌ。

收费公路计重定价理论模型

为了遏制超限运输,解决公路通行费征收中的不公平问题,必须改变目前按车型收费的计费模式,实施计重收费。建立计重收费的定价理论模型是推动这种收费方式健康发展的关键。在提出计重收费定义和类型的基础上,根据公路的准公共产品特性,分析了各种价格结构管制定价模式的特点,提出公路收费宜采用非线性的'两部定价'理论模型。结合收费公路费用分摊的具体方法,给出了收费公路计重定价理论模型,并对相关参数进行了标定。该模型已在江苏省和青海省计重收费标准制定中使用。

小叶买麻藤的化学成分

目的：研究小叶买麻藤（Gnetum parvifolium）的化学成分。方法：应用多种柱层析和薄层制备层析等进行分离纯化，通过波谱解析和理化鉴别进行结构鉴定。结果：分离得到10个化合物，分别为：丁香脂素（syringaresinol，Ⅰ）、lehmbacholD（Ⅱ）、高北美圣草素（homoeriodictyol，Ⅲ）、香草酸（vanillic acid，Ⅳ）、gnetuhaininE（Ⅴ）、射干乙素（shegansuB，Ⅵ）、异丹叶大黄素（isorhapontigenin，Ⅶ）、白藜芦醇（resveratrol，Ⅷ）、买麻藤醇（gnetol，Ⅸ）、异丹叶大黄素-3—O-β-D-葡萄糖苷（isorhapontigenin-3-O—β-D—glucopyranoside，Ⅹ）.结论：化合物Ⅰ～Ⅳ为首次从买麻藤属中分得，化合物Ⅴ～Ⅵ为首次从小叶买麻藤中分得。

在昆虫细胞中高效表达蓝舌病毒VP7蛋白作为组特异性诊断抗原

对蓝舌病毒（ Ｂ Ｔ Ｖ） 结构蛋白 Ｖ Ｐ７ 作为组特异性诊断抗原进行了研究。将编码 Ｂ Ｔ Ｖ１３主要组特异性抗原 Ｖ Ｐ７ 的 Ｓ７ｃ Ｄ Ｎ Ａ 插入杆状病毒表达载体ｐ Ｆａｓｔ Ｂａｃ１ ，通过同源重组获得了重组杆状病毒ｒｖ Ｂａｃ Ｂ Ｔ Ｖ Ｐ７ 。用此重组病毒感染昆虫细胞获得 Ｖ Ｐ７ 蛋白的高效表达，表达量可占细胞蛋白总量的１２４ ％ 。 Ｖ Ｐ７ 重组抗原与 Ｂ Ｈ Ｋ２１ 细胞培养的抗原具有一致的抗原性，可与不同血清型 Ｂ Ｔ Ｖ 抗体反应，重组抗原的产量是后者的１００ 倍以上。试验证实：所表达的 Ｂ Ｔ Ｖ１３ Ｖ Ｐ７ 抗原能符合组特异性诊断抗原的要求。

基于非线性有限元法的船舶-冰层碰撞结构响应研究

采用非线性有限元法建立船舶与冰层的三维有限元模型,对船-冰碰撞进行了数值模拟。研究了船舶在不同速度下与不同厚度冰层碰撞的动态结构响应,分析了碰撞冰力的大小、船艏结构的变形损伤和能量变化等特性。得到了船舶初速度、冰层厚度等因素对船-冰碰撞载荷的影响,对分析船舶与冰体碰撞的结构性能具有参考价值。

西湖凹陷X气藏花港组H3段储层特征及影响因素

文中通过岩心观察、镜下薄片、扫描电镜、压汞等资料,深入研究了西湖凹陷X气藏花港组H3段储层岩石组分、物性特征和孔隙结构。结果表明:储层岩性主要为长石岩屑砂岩,储集空间主要为残余原生孔和溶蚀粒间孔,属中—低孔渗、非均质性较强储层;孔隙结构具有细小孔隙、细喉道、细歪度、孔喉分选差及连通性差等特征;储层孔喉类型包括粗孔喉、中孔喉、中—细孔喉型以及细孔喉等4种类型;沉积、成岩及构造作用影响储层发育,沉积作用是影响储层孔隙结构的基础,成岩作用类型及其演化是决定储层孔隙结构特征的关键,构造作用是改善储层的途径。研究成果对研究区储层分类评价及下步天然气勘探开发具有重要的指导意义。

同时表达蓝舌病毒四个主要结构蛋白可装配成病毒样颗粒

为研制蓝舌病毒 (bluetonguevirus ,BTV)基因工程疫苗和进一步研究BTV结构与功能的关系 ,对BTV病毒样颗粒 (VLP)的装配进行了研究。同时在昆虫细胞中表达BTV主要结构蛋白VP7、VP3、VP2与VP5 ,将细胞裂解液超速离心纯化后 ,发现主要存在两种形态的颗粒 :一种与前文报道的病毒核心样颗粒 (CLP)相同 ,直径约为 6 0nm～ 70nm ,蛋白壳厚 10nm～ 15nm ;另一种大小为 70nm～ 80nm ,蛋白壳厚 2 0nm～ 30nm ,与完整空心BTV颗粒形态一致。这些颗粒是由VP2 /3、VP5与VP7组成的 ,不含核酸和其它任何BTV蛋白 ,并且具有诱导中和抗体的活性和血凝活性 ,与预期结果一致。以BTV13VP7与VP3蛋白为内壳 ,以与其基因相比变异较大的BTV10VP2、VP5为外壳 ,成功地实现了VLP装配 ,提示BTV颗粒内壳与外壳蛋白间相互作用引发装配的区域可能是保守的 。

某大跨混凝土连续梁桥拆除技术

针对某一市区跨越航道的桥梁拆除工程,根据现场实际,制定了采用混凝土切割,龙门架吊装、船舶拖运等方法,以及逆于建造施工顺序的梁体对称分块切割的拆除方案。通过有限元建模等计算,验证了方案的可行性,确保了拆除施工过程的安全。桥梁整个拆除过程,对环境影响较小,达到了预期目标。

在昆虫细胞中同时表达蓝舌病毒VP3与VP7蛋白可装配成核心样颗粒

将蓝舌病毒 (BTV) 13型 S7与L3基因同时插入杆状病毒双表达载体 pFastBacDual,获得重组杆状病毒rvBacBTVP37。该病毒在昆虫细胞中同时高水平表达BTV13VP3与VP7蛋白 ,可以高效自动装配出 2 0面体的 6 0～ 70nm空心颗粒。分析表明 ,所获颗粒为空心的BTV核心样颗粒 (CLP) ,其成分为VP3与VP7,不含BTV其它任何蛋白与核酸。这种装配需要VP3与VP7的共同参与 ,二者缺一不可 ,它们均含有相互作用与装配的信息。本研究为BTV病毒样颗粒的装配打下了基础 ,并为BTV结构与功能研究提供了良好模型。

抗蓝舌病毒VP7单克隆抗体的制备及其特性

为了提高蓝舌病毒 (BTV)快速免疫诊断方法的灵敏度和特异性 ,对蓝舌病毒VP7特异性单克隆抗体的制备进行了研究。用纯化BTV1颗粒为免疫原 ,以重组BTV13 VP7为筛选抗原建立了能分泌高效价单抗的 6个杂交瘤细胞株 ,抗体滴度最高可达 1∶32 0 0 0 0 0 0。初步结果表明 ,所获单抗与VP7的结合可被不同型BTV参考血清阻断。随后用单抗与重组VP7抗原初步建立竞争抑制ELISA方法 ,对 2 1份血清进行测定 ,结果与间接ELISA检测结果完全符合 ,有可能用于建立我国BTV快速可靠的新型诊断方法 (竞争ELISA)。

抗SARS-CoV N蛋白单克隆抗体的特异性及其识别抗原表位的初步鉴定

为了明确抗SARS-CoVN蛋白单克隆抗体的特异性,并鉴定其识别表位,首先在E.coli中表达了人类冠状病毒229E(HCoV-229E)和OC43(HCoV-OC4)N蛋白,用Westernblotting和间接免疫荧光方法分别检测了4株抗SARS-CoVN蛋白单克隆抗体(1-1C2、1-1D6、2-8F11和2-2E5)与HCoV-OC43和HCoV-229E及其N蛋白的交叉反应情况,而后应用12种重组截短型SARS-CoVN蛋白对上述4种单克隆抗体的识别表位进行了初步定位。结果显示:(1)在4株抗N蛋白单克隆抗体中,1-1C2、1-1D6和2-2E5不与HCoV-OC43和HCoV-229E及其N蛋白发生交叉反应,为SARS-CoVN蛋白特异性抗体;(2)2-8F11、1-1D6和2-2E5针对的抗原表位位于SARS-CoVN蛋白的aa30-60,1-1C2针对的抗原表位则位于SARS-CoVN蛋白的aa170-184。这一研究为阐明SARS-CoVN蛋白的免疫学特征,建立特异性免疫诊断技术和研究其致病机制提供了必要的依据和材料。

基于非线性有限元法的船舶冰区破冰数值模拟（英文）

应用非线性有限元法进行了破冰船冰区破冰数值模拟。通过比较数值模拟结果和试验结果,对冰体材料模型进行了验证;采用该冰体材料模型,对破冰船以不同航速在不同厚度的层冰中破冰航行时的动态响应进行了数值研究,给出了破冰过程中层冰的变形、冰力的大小以及冰的变形能和动能变化,分析了船速、冰层厚度对破冰阻力的影响。该研究结果对分析破冰船在层冰中破冰时的动态响应特性具有一定的参考价值。

建立和完善公路主枢纽货运系统投资体制

在分析当前我国公路主枢纽货运系统投资体制现状的基础上,对主枢纽的概念进行重新描述,并给出公路主枢纽货运系统的功能定位。根据公共经济学理论对系统要素按投资来源、投资方式进行了合理划分,在充分借鉴国外公路主枢纽货运系统投资体制的前提下,提出了建立和完善社会主义市场经济条件下公路主枢纽货运系统投资体制的具体建议。

都市圈及都市带公路快速客运系统的定位

根据中国都市圈及都市带的形态特征,给出了交通线路的结构特性。采用统计分析的方法,从客流总量、客流组成和客流分布三个方面分析了都市圈和都市带的客流现状和发展趋势。根据各种运输方式的技术经济特征,提出大力发展公路快速客运是现阶段的理性选择;都市带应形成以轨道交通为骨干,以公路交通为主体,以支线航空为补充的综合快速客运系统格局。

东北亚国际运输通道

东北亚次区域是东亚经济区最具合作潜力的地区。但由于朝鲜半岛的政治问题,区域经济一体化合作进展缓慢。运输合作项目是推动东北亚区域经济一体化的一个很好的切入点。确定了东北亚次区域运输通道的交通区和构成,根据东北地区各国的资源禀赋以及政治体制、经济发展水平差异,分析目前运输通道存在的问题。通过相关因素分析,建立了相关的运输预测模型,对2010～2020年各国之间的集装箱运输量进行了预测,并确定了转移量,认为未来东北亚运输通道将存在巨大的运输需求。

买麻藤属植物的化学成分及其药理活性研究进展

目的介绍买麻藤属植物的研究概况和研究进展。方法以最近几年发表的国内外文献为依据,从化学成分和药理作用等方面对买麻藤属植物的研究进展做一综述。结果与结论买麻藤属植物的化学成分结构独特,药理活性多样。买麻藤属植物具有重要价值,对其的研究也将会进入一个新的阶段。

药品生产技术专业群HSE/GMP管理体系结合SEQ教育机制内涵探索

在新时期高职院校“双高计划”建设的背景下,培养符合时代特征和社会需要的具有合格职业技能和职业素养的复合型技能人才,是职业教育教学改革的迫切要求。针对药品生产技术专业群,开展聚焦于安全意识、环保意识、质量意识(简称SEQ)职业素养的培养,有利于学生职业角色转变,提高就业适应力和竞争力,并满足企业需求。分析了国内外研究现状,探讨了从社会层面、行业层面、企业层面、教育层面开展SEQ培养的必要性,提出以现有HSE和GMP管理体系的有机融合为基础,建设SEQ教育情境。开发SEQ教育工作项目,是药品生产技术专业群核心职业素养培养成功的关键所在。

以职业岗位为导向的高职药物制剂课程改革

职业教育的最终目标是培养学生解决生产服务行业实际问题的综合能力。对于高职制药相关专业学生来说,他们未来将在医药行业的一线就业,实践能力非常重要。在确定培养目标的基础上,探索药物制剂课程改革,构建以职业岗位为导向,以学生为主体,以药物制剂综合职业能力为核心的教学体系,培养学生的综合能力。

河豚毒素的定量检测方法研究进展

河豚毒素是一种严重危害人类健康的剧毒天然毒素。本文介绍了包括生物学、理化和免疫化学方法在内的定量检测河豚毒素的主要方法。