轮状病毒致病机制研究进展

轮状病毒是婴幼儿腹泻的主要病原,主要感染位于小肠绒毛中部和上部的成熟肠上皮细胞,导致腹泻.轮状病毒腹泻不是单一机制引起的,腹泻可以看作是病毒扩散和生存的方式,病毒通过引发腹泻而得以复制和扩散,同时腹泻也是宿主的黏膜防御机制,激活机体内源性机制以从肠道清除病毒感染.近年来研究发现轮状病毒的非结构蛋白 NSP4在病毒的致病性中发挥着重要作用,被认为是病毒的肠毒素,能够从内质网转运 Ca^(2+)来增加细胞内 Ca^(2+)浓度,促进氯离子分泌及增加胞质膜的通透性.宿主的肠道神经系统受到刺激后也能够促进肠液的分泌,引发腹泻.本文从病毒和宿主两个方面对轮状病毒的致病机制加以综述.轮状病毒腹泻的防治及疫苗研制均有赖于病毒致病机制的阐明.

轮状病毒NSP4基因在非复制型腺病毒载体中的表达及免疫活性

目的:研究以非复制型重组腺病毒表达人轮状病毒NSP4基因作为新型轮状病毒基因疫苗的可行性．方法:用AdEasy系统构建表达NSP4蛋白的重组腺病毒,并通过形态学观察、PCR、RT- PCR、Southern blot和Western blot等对重组腺病毒进行鉴定．通过滴鼻途径免疫♀小鼠,对免疫后母鼠生产的乳鼠(4日龄)用SA11株轮状病毒灌胃攻击,观察腹泻的产生情况并进行腹泻评级．结果:获得了重组腺病毒rvAdEasyNSP4． Southern blot表明,在重组腺病毒中确有特异性的NSP4基因整合,Western blot证明,目的蛋白得到表达．初次免疫小鼠后血清IgG抗体的滴度可达1:1 000,但阳转率仅为28．5％;再次免疫后,血清抗体阳转率达到了85．7％;第3次免疫后,血清抗体阳转率达到100%．血清IgA 阳转率可以达到71．4％．实验组乳鼠攻毒后腹泻的百分率和腹泻评分(反应腹泻严重程度) 均较对照组低．结论:腺病毒载体可有效表达轮状病毒非结构蛋白NSP4并可有效诱导小鼠免疫反应,这些结果的取得为新型轮状病毒疫苗的研制提供了依据．

人轮状病毒NSP4蛋白的表达及其致小鼠腹泻作用的初步研究

研究人轮状病毒非结构蛋白NSP4在轮状病毒致病性中的作用。分离得到我国人轮状病毒97SZ8株,以谷胱甘肽S-转移酶融合蛋白的形式在大肠杆菌BL-21中表达NSP4蛋白C端86-175氨基酸并用GlutathioneSepharose^(TM) 4B亲和纯化。将纯化蛋白分别以0.4nmol和1.5nmol的剂量腹腔注射新生Balb/C乳鼠,记录腹泻发生和体重变化情况。当注射0.4nmol GST-NSP4_T重组蛋白时,有1只小鼠发生一过性腹泻(1/6),给予1.5nmol重组蛋白时,实验组所有乳鼠都先后出现了腹泻,存在一定的剂量依赖性。本研究初步在新生小鼠建立了一种人轮状病毒腹泻动物模型,该模型有望在人轮状病毒的致腹泻机理、治疗和预防研究中发挥重要作用。

我国人轮状病毒不同基因型NSP4的致病性研究

对我国轮状病毒流行株NSP4基因变异特点的分析表明,NSP4基因主要可分为Wa组和Kun组,在Wa组内可形成三个亚组,形成了4种NSP4基因型。为了进一步阐明人轮状病毒流行株NSP4基因变异与其致病性变化是否存在联系,我们首先利用杆状病毒载体对NSP4蛋白进行表达,获得了对应4种不同NSP4基因型的重组杆状病毒rvBac97B6,rvBac97S34,rvBac97S36和rvBac97SZ8。用这些病毒感染Sf9细胞后,检测细胞内Ca2+浓度的变化,发现与野生型杆状病毒感染细胞相比,重组病毒感染细胞内的Ca2+浓度显著升高,但各个重组病毒之间无显著性差异。在此基础上,我们进一步在E.coli中分别表达纯化了代表Wa和Kun基因分组的97S34和97SZ8流行株的NSP4。分别用纯化的重组NSP4蛋白攻击乳鼠后,发现不同基因型的NSP4蛋白的致腹泻活性没有明显差异,这种作用可被NSP4抗体拮抗,但这种拮抗作用存在基因型特异性。上述结果表明人轮状病毒流行株NSP4氨基酸序列间的变异并没有使其钙调节及致腹泻能力产生改变,在致腹泻作用中发挥关键作用(或决定性作用)的氨基酸位点在不同NSP4基因型间可能是相对保守的。针对NSP4抗体的有效性也为新型轮状病毒疫苗和药物研究提供了线索。

试论校园文化的本质特征

校园文化是代表先进文化前进方向的重要内容,是全校师生员工的精神粮食,是促进人的全面发展的重要条件,是学校生存和发展的重要保证。学校要站在“三个代表”的高度,充分认识加强校园文化建设的重要性和必要性,深刻理解校园文化的本质特征,按“三个代表”要求切实加强校园文化建设,以校园文化铸造学校灵魂,培育学校的价值体系,形成学校的核心竞争力。

轮状病毒非结构蛋白NSP4研究进展

轮状病毒 (rotavirus,RV)是病毒性腹泻的主要病因。NSP4 (nonstructural protein4 )作为轮状病毒的一种非结构蛋白 ,在病毒形态发生和致病性中发挥重要作用 ,近年来日益受到重视。本文就 NSP4的研究进展作一综述。

轮状病毒不同基因型NSP4的免疫原性研究

NSP4作为轮状病毒的致泻相关蛋白,其在疫苗研究中的作用近年来深受瞩目。为比较不同基因型非结构蛋白NSP4的免疫原性,构建了四种基因型的重组表达质粒pCI-9786、pCI- 97S36、pCI-97S34和pCI-97SZ8,在细胞水平进行瞬时表达检测后,进一步免疫小鼠,检测血清IgG 抗体滴度和亚型。结果表明利用真核表达质粒表达的NSP4蛋白既可以诱导体液免疫反应,又可以诱导细胞免疫反应,但以体液免疫为主,不同基因型NSP4具有不同的免疫原性。

中外艺术歌曲创作中的民族音乐元素

一切优秀的中、外艺术歌曲 ,都是在遵循其自身创作规律的同时 ,给其注入了本民族音乐文化元素的情况下产生的。因此 。

2016-2017年度中国大陆流行性感冒监测分析

目的对2016-2017监测年度中国内地流行性感冒的监测结果及流行形势进行分析总结。方法统计"中国流感监测信息系统"以及"突发公共卫生事件信息管理系统"2016-2017监测年度全年中国内地的ILI监测数据以及流感样病例暴发疫情数据。结果 2016-2017监测年度,南方省份流感活动未出现明显的夏季活动高峰,南、北方省份2017年秋冬流感流行季节均早于上一个监测年度,但流行高峰水平低于2015-2016监测年度。整个年度全国的流感流行优势病毒分别就经历了B型、A(H3N2)和甲型H1N1的交替。全国报告的ILI暴发疫情总起数低于2015-2016年度,南方片区高于北方片区。结论各地继续高度重视近期流感病毒活动情况,密切关注全球及我国疫情形势,加强监测数据的分析和利用,跟踪流感病毒的活动水平、变异和耐药性变化,及时开展流感暴发疫情的调查处置和应对工作。

基本乐理中的数学模型

借助音乐律学中的五度音列，纯律音系网组成调式模型，用其严密的数学思维方式解题、验题，用以打破数十年来我国基础乐理教学中依附于西洋体系的程式化格局。

全球B型流感病毒耐药相关突变株NA和HA序列特征分析

目的研究全球B型流感耐药相关突变株的NA和HA序列特征及分子结构特点。方法对我国2008-2012年B型流感病毒进行序列测定和分析,确定耐药相关突变株,进一步利用MEGA5.0软件分析我国与全球其他国家B型流感病毒的耐药相关突变位点和伴随位点的异同,并构建系统进化树,利用RasWin软件在NA、HA蛋白分子模型中展示突变位点。结果我国2008-2012年共发现6株B型流感病毒耐药相关突变株,其携带的NA、HA伴随突变较少,且与国外B型耐药相关突变株的NA、HA序列处于不同的进化分枝上。结论目前发现的B型耐药相关突变株的突变位点多种多样,且我国的B型流感病毒耐药情况与国际情况并不十分一致,这提示加强我国乃至全球B型流感病毒耐药监测的重要性。

2010—2016年度中国流感监测网络质量评估结果分析研究

目的分析2010—2016监测年度中国流感监测网络质量评估得分趋势,探讨质量评估方案在“全面提升我国流感监测网络整体工作质量,促进监测网络整体能力建设”方面的作用。方法对中国流感监测信息系统、突发公共卫生事件管理信息系统和中国国家流感中心实验室数据库中相关信息,以及各省提交的基于评估指标的流感监测年度工作总结等资料进行统计分析,评估各监测单位流感监测工作的综合管理能力水平(监测网络管理、检测能力考核和暴发疫情监测)和每个省流感监测网络工作质量(网络实验室和国家级哨点医院)的量化评分结果。结果2010—2016监测全国31个省、直辖市、自治区及新疆生产建设兵团得分平均分为73.55分。2015—2016年度得分均数最高,为81.04分;80分以上的省份有22个,远高于2010—2011年度的3个省份。6个监测年度中,各项得分均得到不同程度的提升。广义估计方程结果显示,随着时间增加,暴发疫情得分、省级管理得分、哨点医院得分、实验室得分与总分的变化有统计学意义(P<0.05),即每增加一个监测年得分各增加1.6分、3.3分、1.4分、1.8分和3.4分。交互检验结果显示,南方省份和北方省份各项得分随时间的变化趋势基本一致,二者没有交互效应(P>0.05)。结论中国流感监测网络的工作质量逐年提升,质量评估方案对于整个网络的流感监测工作质量提升有促进作用,且对于所有监测单位也是公平的。

人H5N1亚型禽流感病毒安徽株NS1基因的克隆及在原核系统的表达

利用RT-PCR方法,从人H5N1亚型禽流感病毒安徽株扩增到了NS1基因,对其进行了克隆、序列测定和分析,并在原核系统高效表达和纯化了NS1蛋白.进化分析表明,A/Anhui/01/2005毒株与近些年国内分离的水禽H5N1病毒进化关系更为接近.NS1与福建、湖南分离的禽流感病毒同源性最高,分别达到99.1%和98.2%.序列分析表明,与病毒的致病性相关的92位氨基酸为Asp,与病毒的细胞因子抗性相关的80～84位氨基酸发生缺失,与断裂/多聚腺苷酸化特异性因子结合的基序改变为GFEWN,和病毒致死性相关的PL基序为ESEV.随后在大肠杆菌高效表达并纯化了NS1蛋白.Ns1基因及其编码产物的特性分析以及在原核系统的表达,为进一步研究NS1的致病机制和抗病毒药物研制奠定了基础.

含间隙翅翼机构的动力学仿真及研究

微扑翼飞行器翅翼机构中的运动副间隙是必要的,也是不可避免的。采用Dubowsky的冲击副模型对含间隙翅翼机构的动力学问题进行了仿真,重点研究了间隙的大小、翅翼的拍打频率及机构中弹簧刚度对机构的动态响应影响。研究表明,间隙越大则混沌现象越明显,而拍打频率和弹簧刚度的影响却比较复杂,随着参数的增加,可能会使混沌现象增强,也可能会使混沌现象减弱。所得到的结果为进一步研究翅翼运动与空气间的耦合作用、翅翼机构的设计、制造和控制奠定了基础。

复制缺陷型重组腺病毒rvAdG1VP7免疫学效果的研究

目的 对 1株可表达A组轮状病毒主要结构抗原VP7的重组腺病毒rvAdG1VP7的体内免疫学效果进行研究。方法 通过灌胃和滴鼻 2种途径对BALB/c小鼠进行免疫 ,并对免疫后小鼠体液和黏膜免疫进行分析。结果 初次免疫后 ,2组小鼠均有应答 ,但血清IgG抗体滴度及阳转率不同。再次免疫后 ,显示出明显的加强效果。除了血清IgG外 ,小鼠还产生了较强的针对轮状病毒的血清IgA。滴鼻组在肺灌洗液和肠匀浆液中均可检测到SIgA ,灌胃组仅在肠道检测到SIgA。滴鼻组的免疫学效果明显优于灌胃组。对滴鼻组小鼠肺灌洗液IgG/SIgA的阳转率进行了比较 ,发现IgG的应答水平明显高于SIgA。免疫后小鼠血清中IgG的动态观察表明 ,抗体可长期持续至少半年以上。 结论 重组腺病毒载体rvAdG1VP7所取得的良好免疫学效果 ,为我国具有自主知识产权的新型轮状病毒基因工程疫苗的进一步研制奠定了基础。

慢性咳嗽儿童呼出气一氧化氮检测的临床意义

目的评估呼出气一氧化氮检测在儿童慢性咳嗽病因诊断中的价值。方法选择2011年1月-2012年9月在本院儿科呼吸专科门诊明确诊断为慢性咳嗽的患儿86例。进行FeNO检测及血IgE、肺功能、变应原皮肤点刺试验的检查。绘制ROC曲线评价FeNO对CVA的诊断价值,分析诊断CVA的最佳界值。结果诊断为CVA42例,其他病因44例。CVA组患儿FeNO、血清总IgE、过敏原阳性比例均明显高于其他病因组。应用FeNO诊断CVA的ROC曲线下面积为0.917,FeNO最佳界值为22.5 ppb,此时的灵敏度为83.5%,特异度为89.9%。结论不同病因慢性咳嗽患儿的FeNO水平存在显著性差异,FeNO对CVA的诊断具有较高的灵敏度和特异性。

厄尔尼诺-南方涛动现象与流行性感冒联系的系统评价

目的调查分析既往及正在执行的厄尔尼诺-南方涛动现象(El Ni1o-Southern Oscillation,ENSO)与流行性感冒关联的相关研究,并评价ENSO对流行性感冒相关指标(如流感流行高峰的出现时间、流感样病例报告人数等)的影响,为进一步开展天气及气象因素影响流感病毒传播研究提供依据和建议。方法计算机检索MEDLINE,EMBASE,Science Direct,HEED、中国生物医学文献数据库(CBMdisc)、万方学位论文全文数据库,查找1988~2016年10月已发表的关于ENSO与流行性感冒联系的文献,并运用循证医学方法进行文献数据提取和分析。结果共检索到78篇文献,其中符合纳入标准的已发表文献10篇。二次文献研究显示,出现ENSO与流感大流行的发生,流感高峰的出现时间,流感样病例就诊数及重症死亡数都有较大关联,且El Ni1o和La Ni1a现象对流感相关指标的影响也不尽相同。结论从纳入研究的已发表文献分析结果来看,ENSO与流行性感冒相关指标之间有较强的相关性。

试论管理三要素

自从人类以社会组织形式分工、合作从事生产和生活开始,"管理"就已起源.直至如今往后,管理都将是伴随历史永远存在和发展的一门学科.

中国医疗机构工作人员流感疫苗预防接种指南

为了加强中国医疗机构工作人员流感疫苗的接种,中华预防医学会医院感染控制分会联合中国临床实践指南联盟制定了《中国医疗机构工作人员流感疫苗预防接种指南》。本指南结合国内外研究进展和专家意见,主要关注了7个临床相关问题,并根据牛津循证医学中心2011版证据质量评估表对研究进行证据评级,最终形成推荐意见。指南强调了医疗机构工作人员接种流感疫苗的重要性,降低自身流感患病率可有效减少医院传播风险。本指南建议:如无禁忌证,医疗机构工作人员均应积极接种流感疫苗。推荐对感染传播风险极高的工作人员、高危人群和孕妇优先接种流感疫苗。另外,指南还提供了疫苗的选择、接种时间及接种频次的建议。鉴于目前我国医疗机构工作人员流感疫苗接种率偏低且地区差异明显,本指南建议进一步加强关于流感疫苗接种的健康教育,根据各个省市区具体情况,采取“多元化”方法,积极开展有组织的接种活动。

慢性咳嗽患儿呼出气一氧化氮与特应性体质及血清总免疫球蛋白E水平的相关性研究

目的研究慢性咳嗽患儿呼出气一氧化氮(fractional exhaled nitric oxide,FeNO)与特应性体质及血清总免疫球蛋白E(TIgE)水平的相关性。方法对91例慢性咳嗽的患儿进行FeNO、血TIgE的检测及变应原皮肤点剌试验并进行分组对比。结果特应性体质组FeNO值为(29.74±14.24)ppb,TIgE为(483.95±384.57)IU/ml,非特应性体质组FeNO值为(13.82±7.91)ppb,TIgE为(154.09±143.42)IU/ml,差异均有统计学意义(均P<0.05)。血清TIgE增高患儿FeNO值为(29.15±15.30)ppb,血清IgE正常患儿FeNO值为(16.22±9.75)ppb,差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析发现FeNO水平与过敏原数目不存在相关(P=0.278)。结论特应性体质可使慢性咳嗽患儿FeNO水平明显升高,而FeNO与皮肤过敏原阳性数目无明显相关性,在诊断哮喘时应注意特应性体质的存在。