灵芝固态发酵中药渣产漆酶及其对偶氮染料的脱色

为提高灵芝(Ganoderma resinaceum)固态发酵产漆酶能力,实现中药渣资源再利用,以中药渣和麦麸为发酵的主要基质,在单因素试验的基础上,以漆酶酶活为考察指标,采用Plackett-Burman(PB)试验和正交试验设计优化固态发酵产漆酶条件,且探究所产漆酶对偶氮染料的脱色能力。结果表明:以质量分数12%的接种量将灵芝种子液接种到中药渣(粒径0.4 mm)与麦麸比例为6∶4、初始含水量质量分数60%、蔗糖质量分数2%、酵母粉质量分数0.6%、Mg^(2+)浓度3 mmol/L、初始pH5.5的固态发酵培养基中,发酵14 d后,漆酶酶活达到(56.13±1.20)U/g。以2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(2,2’-Azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic Acid)Ammonium Salt,ABTS)为介体,漆酶粗酶液与亚甲基蓝、酸性橙7、氨基黑10B进行脱色处理10 h后,其脱色率分别可达46.7%、84.6%和61.1%。

嗜热菌β-葡萄糖苷酶A基因的克隆表达及转化大豆异黄酮糖苷

对嗜热厌氧乙醇菌（Thermoanaerobacter ethanolicus）JW200基因组DNA中β-葡萄糖苷酶A基因（Te-BglA）进行PCR扩增，构建重组质粒pET-20b-Te-BglA，并对纯化的重组酶Te-BglA的酶学性质和动力学参数进行研究。结果表明，基因Te-BglA在Escherichiacoli细胞中成功表达，获得重组酶Te-BglA，该酶的最适温度和pH值分别为80℃和7．0。以对硝基苯酚-β-葡萄糖苷（pNPG）为底物时，Km值为（0．78±0．02）mmol／L，Kcat/Km值为（6．86±0．16）×10^4／（mol·s）；以天然底物水杨苷为底物时，Km值为（5．18±0．10）mmol／L，Kcat／Km值为（2．04±0．02）×10^4L／（mol·s），两者比较可知，重组酶Te-BglA表现出对pNPG更好的亲和力和更高的催化效率常数。该酶在80℃保温1h后相对于冰浴中（未保温）的酶活仍有70．1％的残留，在pH4．5～8．0区间仍保持较高的pH稳定性。酶解大豆粉的结果表明，重组酶Te-BglA在80℃作用3h后，大豆黄素和染料木素的产量分别达到35．9mg／g和59．1mg／g。

多功能融合酶基因Linker的优化及表达

在融合酶阿拉伯/木糖苷酶-木聚糖酶(Xar-xynA)之间插入不同组成和长度的多肽Linker,避免催化结构域相互之间的干扰,改善融合酶的催化效率。5个含不同长度及Ala/Gly比例连接肽Linker的融合突变体在大肠杆菌重组表达、纯化,并对融合酶的酶学性质、动力学参数和酶解作用进行研究。结果表明,融合酶Xar-L1/L2/L3-xynA和融合酶Xar-xynA有着相似的最适温度和最适pH值。其中融合酶Xar-L1-xynA在65~80℃和pH值6.6~8.2有更强的阿拉伯/木糖苷酶热稳定性和pH值稳定性,将融合酶Xar-L1-xynA在65℃保温60 min其阿拉伯/木糖苷酶活性有着明显的激活现象。并获得连接Xar和XynA的最优Linker:L1和L4,麦麸和玉米芯木聚糖产物酶解试验的结果表明,融合酶Xar-L1-xynA和Xar-L4-xynA比其他的融合酶有着更高的催化效率。

前胡醇提物对杨树桑黄液体发酵生产黄酮的研究

以杨树桑黄为菌种,采用前胡醇提物发酵培养基生产黄酮。在单因素试验的基础上,以黄酮产量为考察指标,采用中心组合设计(CCD)试验优化培养基配方。结果表明:最佳碳源为玉米粉,最佳氮源为麦芽浸粉;最佳培养基配方为玉米粉28.6 g/L、麦芽浸粉10 g/L、MgSO_(4)·7H_(2)O 1 g/L、KH_(2)P_(O)42 g/L、维生素B150 mg/L、pH 6.0;在发酵开始4 d后,添加质量浓度为24 g/L前胡醇提物到杨树桑黄发酵液中,获得黄酮产量为(3.12±0.05)g/L,是优化前的2.41倍。

极耐热双功能酶的表达纯化及性质研究

将含海栖热袍菌（Thermoga maritima）β-木糖苷酶（Xyl）基因的重组质粒p ET-28a-xyl导入大肠杆菌BL21-Codon Plus（DE3）-RIL中,经诱导实现高效表达,经热处理和Ni2＋亲和层析纯化达到电泳均一,并对纯化的重组酶Xyl的酶学性质进行研究。结果表明,重组Xyl同时具有木糖苷酶和阿拉伯糖酶活性,即为双功能酶。以对硝基苯酚-ɑ-阿拉伯呋喃糖苷（p NPAF）作为底物,重组酶Xyl的最适作用温度和最适p H分别为80～90℃和5.8,90℃的半衰期为1.0 h,在pH 7.0～7.8区间重组酶保持较高的稳定性。金属离子Mn2＋对重组Xyl的双活性有促进作用,而Cu2＋和SDS对酶的抑制作用最明显。重组Xyl能将低聚木糖中的木二糖和木三糖彻底分解为木糖。

代料栽培蛹虫草营养液的优化

为提高蛹虫草子实体的产量,通过单因素试验和正交试验优化添加营养液,最终确定以大米为主料的代料栽培蛹虫草的营养液配方:玉米粉200 g/L,酵母膏8 g/L,Mg SO4 1.5 g/L,KH2PO4 2.5 g/L。添加此营养液,蛹虫草瓶产量(干)5.26 g,比对照增加了1.83倍。

浅谈如何加强高校的师德建设

当前社会变革转型时期频发的高校"师德失范"事件,昭示着当前高校师德建设存在着诸多问题和新矛盾,而加强师德建设已成为一项刻不容缓的任务。分析了当前高校师德建设的现状及原因,并探讨了师德建设的内容及有效措施。

短小芽孢杆菌阿魏酸酯酶的分离纯化及性质研究

通过硫酸铵沉淀、离子交换层析和疏水层析,对短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)发酵液中的阿魏酸酯酶进行分离纯化,并测定其部分酶学性质。结果表明,阿魏酸酯酶的纯化倍数为5.06,回收率达到14.8%。该酶的相对分子质量约为28.6 ku;最适反应温度为50℃,最适pH为5.8,在40~45℃和pH 5.8~8.2都能保持很高的稳定性。K^+、Co^(2+)、Ca^(2+)和DTT对酶活有明显的促进作用,而Cu^(2+)、乙醇和苯甲基磺酰氟严重抑制了其酶活。以阿魏酸甲酯为底物,测得Km为0.25 mmol/L,Vmax为6.27 U/(min·mg)。

重组酶Xar的表达纯化及性质研究

为获得高效的半纤维素类饲料酶制剂,将含嗜热厌氧乙醇菌α-阿拉伯糖苷酶/木糖苷酶(Xar)基因的重组质粒p ET-20b-xar导入大肠杆菌DH10B中,经IPTG诱导进行高效表达,将表达的重组酶进行热处理和Ni^(2+)亲和层析纯化,并对纯化的重组酶Xar的性质进行研究。结果表明,以对硝基苯酚-α-阿拉伯呋喃糖苷(p NPAF)为底物,重组酶Xar的最适反应温度和最适p H值分别是75~80℃和6.0,米氏常数(Km)、最大反应速度(Vmax)分别为2.42 mmol/L、20.7μmol/(min·mg);以对硝基苯酚-β-木糖苷(p NPX)为底物,重组酶Xar的最适反应温度和最适p H值分别为93℃和5.8~6.2,Km、Vmax值分别为0.60 mmol/L、43.8μmol/(min·mg)。将重组酶Xar置于80℃保温1 h,木糖苷酶的相对活性仍为56.4%,在p H值4.2~8.2条件下仍保持较高的稳定性。当木糖浓度达到400 mmol/L时,木糖苷酶的相对活性仍有97.9%。Mn^(2+)对重组酶Xar有明显的激活作用,而Cu^(2+)和Zn^(2+)对其有明显的抑制作用。可见,重组酶Xar具有良好的热稳定性。

嗜热菌β-葡萄糖苷酶A水解大豆异黄酮的研究

该研究将含嗜热乙醇菌β-葡萄糖苷酶A(Te-BglA)基因的重组质粒pET-20b-Te-BglA导入大肠杆菌JM109(DE3)中,经诱导表达和Ni2+亲和层析纯化,将其用于酶解大豆异黄酮,以染料木素的产量为检测指标,通过正交试验优化Te-BglA水解大豆异黄酮的条件。优化结果显示:最佳的水解条件为加酶量70U,温度80℃,水解时间60min,pH值7.4,在此条件下水解100g大豆粉可得到染料木素58.1mg。

黄金水道之“道”可道——珠西经济带呼唤航道升级

一直以来,珠江航道盘根错节的管理都让人如坠烟海,航道功能定位不清、使用关系难以协调、建设维护投入不足、安全隐患难以解决,这些问题都成为珠西经济带发展的“硬伤”。如何让黄金水道真正“流金淌银”,航道建设必须先行,即为“道”可道。

水上交通安全开启“智慧时代”——广东智慧海事建设向全国推广

近年来，广东海事局自主研发了广东智慧海事监管服务平台，并以此为载体全面建设智慧海事，推动水上交通安全监管模式从事前管理向事中、事后管理转变，从人工“签证十巡航”向“智能化监管十精确执法服务”转变。

翟墨:艺术家的航海人生

2014年12月16日下午，翟墨领航2015重走海上丝绸之路召开全球发布会。 据悉，活动为响应习近平主席提出的关于“加快推进丝绸之路经济带和21世纪海上丝绸之路建设”的宏伟战略，展现中国“亲诚惠容”的外交政策和民族胸怀。

解读:智慧海事建设与“顶层设计”——专访广州海事局技术装备处郑宏辉

海事信息化一直是海事部门在海事发展建设中不遗余力推进的重点方向，其总体目标是发挥科技信息化的引领作用，建立全面感知、广泛互联、深度融合、智能应用、安全可靠和机制完善的信氨化体系，真正实现“智慧海事”，从而提高海事服务质量、监管效能、管理效益。就目前而言，信息化建设的进程如何？面临着哪些问题？这些问题又该如何解决？广州海事局技术装备处郑宏辉对此作了个人分析。

水运行业的税费观察

十八届三中全会11月15日公布的《中共中央关于全面深化改革若干重大问题的决定》传递出财税改革的新信号。根据决定，要深化税收制度改革，完善地方税体系，逐步提高直接税比重。将推进增值税改革，调整消费税，逐步建立综合与分类相结合的个人所得税制，加快房地产税立法并适时推进改革，加快资源税改革，推进环境保护费改税。

转型与跨越——专访佛山海事局局长蔡伟

记者手记： 蔡伟，2006年调任佛山海事局局长。2007年即开始谋划建设CCTV视频系统（工业闭路电视监控系统），随后的6年问，不断丰满和完善此系统，并将其与AIS系统（船舶自动识别系统）、VHF系统（语音甚高频系统）和联动执法相结合，构建起佛山海事内河现代化的监管模式。

强能增效,锻造南海测绘尖兵

探索未知路，海上耕田人，在我国最深、最广的南海海区，活跃着一支数量不多但作风硬朗的海测队伍：他们顶骄阳，走岸线，选点定向量测大海；他们过险滩、测航道，获取数据描绘蓝图。他们就是广州海事测绘中心的测绘尖兵。

亿吨门外的诱惑

跻身亿吨大港，无疑成为中国港口身份的象征。对于已经身处其中的港口来说，他们谋划的是上市或多元化的经营思路。而对于那些尚徘徊在亿吨之外的港口来说，挤进去成为他们头等重要的目标。为此，他们积极谋划各种入门的条件。

“先锋”是怎样炼成的?——中山海事局港口海事处服务港珠澳大桥纪实

2013至2015年间,港口海事处因承担着港珠澳大桥七成多的大型构件护航任务,而备受关注。与此同时,艰巨的护航任务也锻造出一个海事＂先锋＂群体。就五精海事处的建设而言,港口海事处无疑是成功的。2013年12月,笔者随同港口海事处处长施建伟护航港珠澳大桥桥梁工程CB04标预制墩身的运输,从早上4点起床,到中午12点完成护航。

守望沙角

历史在每个人眼里,都会呈现出不同的模样。30年,对于沙角海事来说,并不久远。然而对于身处其中的人来说,转眼即是一生的职业生涯。沙角海事处综合办公室科员张芬玲,是沙角海事处建站以来,并坚守至今的为数不多的“元老”之一。笔者企图从她个体的角度还原沙角海事的历史,尽管可能带有强烈的个人色彩,但至少这是她真实的记忆。女性与生俱来的细腻、柔韧,或许会给这段历史带来不一样的色彩。